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2,5-己二酮对大鼠运动及感觉神经元神经生长因子表达的影响
目的研究正己烷的代谢产物2,5-己二酮对大鼠神经系统运动、感觉神经元内源性神经生长因子(NGF)表达的影响.方法采用原代培养的大鼠背根神经节(DRG)感觉神经元和培养的大鼠脊髓前角运动神经元瘤细胞系VSC4.1细胞,用相差显微镜观察细胞形态,同时用免疫组化方法分析不同浓度2,5-HD(2.5、5.0、10.0、20.0mol/L)染毒24小时后DRG、VSC4.1细胞内NGF含量的变化.结果与对照组相比,2,5-己二酮染毒剂量为5.0、10.0、20.0mmol/L时,皆可使DRG细胞及VSC4.1细胞NGF表达量显著下降(P<0.05);各剂量组间两两比较发现随着染毒剂量增高,两类细胞NGF表达水平的下降有愈为明显的趋势.结论2,5-己二酮可降低大鼠DRG感觉神经元和脊髓前角运动神经元(VSC4.1细胞)、内源性NGF的表达水平,并进一步抑制了两类细胞的生长与存活.
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肌萎灵注射液治疗运动神经元病临床观察
运动神经元病是脑和脊髓运动神经元的变性疾病,包括进行性脊肌萎缩症、肌萎缩侧索硬化症、进行性延髓麻痹、原发性侧索硬化症等.多年来,我们从奇经论治,采用"扶元起痿,养荣生肌"治疗方法,运用肌萎灵注射液配合肌萎灵胶囊对本病进行治疗,取得了较好的临床疗效.现就2001年2月-2003年1月852例住院患者的治疗结果,报道如下.
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体外培养大鼠脊髓运动神经元的存活率及形态观察
观察体外培养的大鼠脊髓运动神经元(SMN)的存活率、形态学特征及生长规律.对今后进一步研究脊髓损伤、运动神经元病有一定的指导意义.
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胚胎大鼠脊髓运动神经元的体外培养及鉴定
本实验建立了体外胚胎大鼠脊髓运动神经元的分离培养,并进行鉴定.取孕15dSD大鼠胚胎的脊髓腹侧组织,用胰蛋白酶和胶原酶消化分离成单细胞悬液,进行原代细胞培养,应用神经元特异性的烯醇化酶(NSE)抗体和抗神经微丝抗体-SMI32单克隆抗体对培养细胞进行鉴定,同时行尼氏染色.结果分离培养的细胞鉴定为脊髓运动神经元(SMN),SMN在体外适宜的条件下可存活4周左右,可作为神经科学研究的一种手段.
关键词: 脊髓运动神经元 体外培养 神经元特异性烯醇化酶 SMI32 -
环孢素对大鼠坐骨神经损伤后脊髓运动神经元的保护作用
目的:通过观察应用环孢素对大鼠坐骨神经切断后脊髓前角运动神经元GAP-43mRNA的表达,研究环孢素对脊髓前角运动神经元的影响。方法:60只大鼠随机分为实验组和对照组,实验组进行环孢素干预,在3、7、14、21、28天,5个不同的时相点各从实验组和对照组中随机抽取6只大鼠,取下脊髓T12-L1节段,脊髓前角GAP-43mRNA的表达用荧光定量RT-PCR检测。结果:对照组GAP-43mRNA第3日呈低表达,第7天表达量增加,第14天表达量达到高峰,第21天表达量下降,第28天表达量接近第3天水平。实验组第3、7和14天表达量与对照组相似,第21和28天表达量较对照组有所提高,经统计学处理,第3、7和14天实验组与对照组比较,差异无显著性(P>0.05),第21天和28天实验组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:应用环孢素对坐骨神经损伤后脊髓运动神经元有一定的保护作用,可延缓神经元的退变。
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神经生长因子及其受体与周围神经损伤
神经生长因子(Nerve Growth Factor,NGF)是一种对神经细胞起重要调节作用的蛋白质.实验证明NGF主要维持交感和感觉神经元等的存活、分化与成熟,然而许多实验证明NGF通过与相应受体结合对脊髓运动神经元具有抑制凋亡等重要生物学作用,显示出其在神经系统中的重要性.
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家族性肌萎缩性侧索硬化的分子遗传学研究
肌萎缩性侧索硬化(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是一种选择性侵犯大脑皮质、脑干、脊髓运动神经元及锥体束的神经变性疾病,是运动神经元病的典型代表;多于40~50岁起病,临床主要表现为肌无力、肌萎缩、肌束颤动和锥体束征等,一般于发病后3~5年因呼吸肌受累而死亡.
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中国肌萎缩侧索硬化诊断和治疗指南
运动神经元病是一种病因未明、主要累及大脑皮质、脑干和脊髓运动神经元的神经系统变性疾病,包括肌萎缩侧索硬化(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)、进行性肌萎缩、进行性延髓麻痹和原发性侧索硬化4种临床类型.ALS是运动神经元病中常见的类型,一般中老年发病多见,以进行性加重的骨骼肌无力、萎缩、肌束颤动、延髓麻痹和锥体束征为主要临床表现,生存期通常3~5年.ALS的早期临床表现多样,缺乏特异的生物学确诊指标.详细的病史、细致的体检和规范的神经电生理检查对于早期诊断具有关键性的作用,影像学等其他辅助检查在鉴别诊断中具有一定价值.临床诊断过程中,确定上、下运动神经元受累范围是诊断的关键步骤,根据患者所出现症状、体征的解剖部位,通常将受累范围分为脑干、颈段、胸段和腰骶段4个区域.
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对肌萎缩侧索硬化发病机制的新认识
肌萎缩侧索硬化(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)为一种累及皮质、皮质脊髓束、脑干、脊髓运动神经元的神经变性病,临床表现为四肢及躯干肌肉萎缩,导致运动功能严重障碍甚至呼吸肌麻痹,患者多于3~5年内死亡.据统计其发病率为(1.5~2.5)/10万,5%~10%为家族性ALS(fALS),其余90%以上为散发ALS(sALS).
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胫骨前肌疲劳时比目鱼肌诱发肌电图H波的变化及其机制探讨
为了解主动肌疲劳时拮抗肌脊髓运动神经元兴奋性变化的规律,本研究采用踝关节背屈运动形式,对胫骨前肌(主动肌)疲劳状态下的比目鱼肌(拮抗肌)诱发肌电图H波成分进行了观察.并以压迫阻断胫骨前肌Ⅰa类神经纤维传导的方法,对比目鱼肌H波变化机制进行了分析探讨.结果发现:(1)胫骨前肌疲劳后,比目鱼肌H波明显受到抑制,与安静时比较呈非常显著性差异;(2)胫骨前肌Ⅰa类神经纤维传导被阻断后,比目鱼肌H波的抑制现象没有解除.表明,胫骨前肌疲劳时比目鱼肌H波被抑制的原因,可能是由于主动肌内的代谢产物激活了Ⅲ·Ⅳ类神经纤维的感受器,Ⅲ·Ⅳ类神经纤维的传入冲动增加,使Ⅰa抑制性中间神经元被激活,导致拮抗肌脊髓运动神经元的兴奋性受到了抑制.
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肌疲劳对主动肌及其拮抗肌脊髓运动神经元兴奋性的影响
目的:探讨肌疲劳发生过程中主动肌及其拮抗肌脊髓运动神经元兴奋性的变化规律.方法:以10名健康男子为研究对象,采用50%随意性大肌肉收缩的踝关节等长收缩形式,观察踝关节跖屈和背屈运动前后比目鱼肌诱发肌电图H波和M波的变化.结果:(1)跖屈运动引起比目鱼肌疲劳后,H/Mmax(大H波与大M波振幅比值)下降至运动前的63.07±16.57%(P< 0.01),且运动终止后较长时间仍未恢复到运动前水平.(2)背屈运动引起胫骨前肌疲劳后,其拮抗肌比目鱼肌H/Mmax下降至运动前的85.33±10.25%(P<0.01),而后逐渐恢复至运动前水平.(3)背屈运动引起胫骨前肌疲劳后,其拮抗肌比目鱼肌H波阈值与安静时比较明显升高.结论:肌疲劳时,不但主动肌脊髓运动神经元兴奋性受到抑制,拮抗肌脊髓运动神经元兴奋性也受到类似影响.
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针刺对痉挛性偏瘫患者脊髓运动神经元兴奋性的影响
目的:探讨针刺对脑卒中后痉挛性偏瘫患者的脊髓运动神经元兴奋性的影响.方法:以11例脑中风后遗症并伴有单侧上肢痉挛性偏瘫患者为实验对象,分别采用针刺偏瘫肢体痉挛侧和非痉挛侧的方法,以诱发肌电图作为判定脊髓运动神经元兴奋性变化的客观指标.结果:分别针刺痉挛侧和非痉挛侧后,患侧上肢H/Mmax均明显降低,与对照组比较呈非常显著性差异,且针刺非痉挛侧后患侧H/Mmax降低幅度大于针刺痉挛侧.结论:针刺非痉挛侧肢体的穴位,对脑中风后遗症患者脊髓运动神经元异常活动的抑制效果明显好于针刺痉挛侧肢体的穴位,其机制可能是通过交互抑制的反射活动,对脊髓α运动神经元兴奋性产生了调整作用.
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增强原代培养鼠胚脊髓运动神经元活力的中药筛选
[目的]探讨单味中药对脊髓运动神经元活力的影响.[方法]以鼠胚脊髓运动神经元原代培养的实验模型,实验组分别加入单味中药提取物,用MTT法观察其对细胞活力的影响.[结果]葛根、当归、白术、黄芪、山药、红花、牛膝、天门冬、知母、香附、枳实、陈皮、厚朴均可增强培养鼠胚脊运动神经元活力.对脊髓运动神经元有保护作用.[结论]上述中药提取物对周围神经损伤的修复可能有促进作用.
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针刺对痉挛性偏瘫患者脊髓运动神经元兴奋性影响的实验研究
以诱发肌电图成分H波与M波的振幅比值(H/Mmax)为指标,对针刺前后的痉挛性偏瘫患者脊髓运动神经元兴奋性变化进行分析.结果:针刺时H/Mmax比值明显降低,而且针刺非痉挛侧穴位时下降幅度明显大于针刺痉挛侧穴位时的变化.因此,针刺非痉挛侧穴位时产生信息沿着Ⅰa类传入纤维,兴奋了脊髓内Ⅰa抑制性中间神经元,后者对痉挛侧肌群的脊髓α运动神经元活动性产生了抑制作用,使痉挛侧肌群的α-γ环路活动性降低、肌紧张度下降,从而有利于缓解肌痉挛状态.
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神经营养因子与周围神经再生
人们对神经营养因子在促进周围神经元的存活,维持周围神经元的数目方面的作用进行了大量研究.神经损伤后,给予外源性神经营养因子,能够产生与靶器官源性的神经营养因子相似的作用.周围神经再生过程中,神经营养因子NGF、NT-3和BDNF对背根节初级感觉神经元和脊髓运动神经元的存活及其表型的表达具有明确的选择性作用.其他神经营养因子,如CNTF、GDNF、LIF、GGF等,对神经元细胞也具有不同作用.本文将就神经营养因子对治疗周围神经损伤及周围神经疾病的潜在作用作一综述.
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生长底物对培养胚胎大鼠脊髓运动神经元的作用
目的:为了研究几种生长底物对培养的胚胎大鼠脊髓运动神经元生长特性的作用.方法:采用胚胎大鼠脊髓腹侧组织进行分离培养,建立脊髓运动神经元原代分散细胞培养,并应用免疫组织化学染色进行鉴定;选取生长底物如多聚赖氨酸(PLL)、Ⅰ型胶原、层粘连蛋白(LN)、PLL和LN联合等进行包被,观察脊髓运动神经元的生长特性.结果:PLL用0.01 mol/L硼酸溶解,细胞生长良好;PLL和LN联合包被时,脊髓运动神经元存活率高,细胞分散良好.结论:PLL和LN联合包被培养脊髓运动神经元,是研究胞体和突起较理想的方法.
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张力平衡针法对痉挛性偏瘫患者脊髓运动神经元兴奋性的影响
脑卒中患者肢体肌肉痉挛常导致运动功能障碍,是阻碍其肢体功能恢复、回归社会的主要原因之一.因此解除痉挛,尽快帮助患者度过痉挛期成为中风康复研究的重点.近年来,笔者采用张力平衡针法治疗中风偏瘫痉挛状态,取得了较满意的疗效,本研究通过对比分析张力平衡针法对脑卒中后痉挛状态患者肌电图H/Mmax的变化,初步探讨张力平衡针法对调控脊髓运动神经元活性、抑制肌紧张和肢体痉挛作用的深层机制.
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联合应用神经生长因子和神经节苷脂1对坐骨神经损伤大鼠脊髓神经元的保护作用
目的:了解联合应用神经生长因子(NGF)和神经节苷脂1(GM1)对大鼠周围神经损伤后脊髓神经元的保护作用.方法: 选用SD大鼠,分为生理盐水(NS)组、NGF组、GM1组和NGF+GM1组,将大鼠坐骨神经造成5mm缺损,术中硅胶管内局部加药、术后大鼠损伤侧小腿肌注药物.术后定期光、电镜观察L 4~ L6脊髓前角神经元结构变化,测定损伤远段和近段神经传导速度.结果:脊髓运动神经元数目以及神经传导速度4周时,NGF组和GM1组均多于或快于NS组,NGF+GM1组则多于或快于NS组、NGF组和GM1组, 8周时NGF+GM1组、NGF组、GM1组组间无显著性差异但均多于或快于NS组.结论: NGF+GM1对周围神经损伤后脊髓运动神经元退变的保护作用与单用NGF或GM1相比, 能更早期地发挥作用, 并且效果优于单用NGF或GM1.
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不同生长底物对体外培养脊髓运动神经元的影响
神经元作为一种高度分化的细胞,在体外难以存活和生长, 因此在体外培养时,需在容器表面包被一层类似细胞外基质的生长底物.
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神经生长因子对周围神经运动纤维再生的影响
神经生长因子(nerve growth factor,NGF)是一种对交感和感觉神经元生长、发育、分化、存活和功能特性的表达,具有重要调剂作用的神经营养因子.它在神经再生的基础及临床研究中有重要的理论意义和实用价值.虽然,近年来已有研究提示大鼠胚胎脊髓运动神经元有NGF受体的mRNA表达[1],成熟的躯体运动神经元亦具有NGF受体的表达潜能.但迄今为止,尚乏直接依据证实躯体运动神经元对NGF具有应答能力.究竟NGF对周围神经的运动纤维的再生是否有促进作用?为此,我们对这一课题进行了尝试性的探索.