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大肠杆菌O157胶体金免疫层析快速筛查方法的建立
目的建立一种大肠杆菌O157的胶体金免疫层析快速筛查方法.方法利用胶体金免疫层析技术,采用双抗体夹心法检测大肠杆菌O157,对该法进行敏感性、特异性和食品样品的适用性分析.结果该法能在15分钟内完成检测,检测不同的肠杆菌科细菌(非O157型大肠杆菌、沙门菌、志贺菌、变形杆菌、柠檬酸杆菌、肠杆菌、沙雷菌、耶尔森菌)、葡萄球菌、李斯特菌、气单胞菌、弧菌等共24种30株常见细菌,未发现有交叉反应,显示该法特异性良好.检测大肠杆菌O157的低检出浓度为1×105cfu/ml.方法适用于奶粉、面粉、淀粉、咖啡粉、饼干、蛋糕、果冻、燕窝和果汁等食品样品的检测.结论新建立的大肠杆菌O157胶体金免疫层析试验简便、快速,特异性和灵敏度较好,适用于现场样品的快速筛查.
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LAMP技术快速检测沙门氏菌方法的建立及其应用
目的 建立和评价一种适合国境口岸及基层检验部门使用的沙门氏菌快速检测方法,在2010年上海世博会保障期间开展应用研究.方法针对沙门氏菌agfA基因,运用环介导等温扩增技术(loop mediated isothermalamplification,LAMP),设计引物进行检测,在65℃恒温条件下、60 min特异性扩增,荧光显色观察结果.对建立的方法进行特异性、灵敏度试验及模拟样本灵敏度试验,与荧光定量PCR、胶体金方法进行比对.并对54株临床分离阳性样本加以验证.结果沙门氏菌属6种不同血清型菌株LAMP检测都呈阳性,其他4种肠道细菌均为阴性；LAMP法的灵敏度与RT-PCR方法接近,达103CFU/ml,是胶体金检测法的100～1 000倍；54株沙门氏菌临床分离样本实验符合率达到100％.结论LAMP技术能够在简易的实验条件下快速报告结果,检测成本较低、特异性高、灵敏度高,适合口岸从业人员及基层检验部门进行沙门氏菌的初步筛查工作.
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纸喷雾离子化质谱法快速筛查保健食品中违禁添加的磷酸二酯酶5抑制剂
目的 建立纸喷雾离子化质谱(PSI-MS)法快速检测保健食品中3种非法添加的磷酸二酯酶5(PDE5)抑制剂(西地那非、伐地那非和他达拉非)的方法.方法 利用PSI-MS法对样品中非法添加物进行初步定性鉴别,并通过内标法进行半定量分析.结果 24种包括胶囊、片剂、丸剂、粉末、酒剂、糖浆及口服液等剂型在内的待测市售保健品的PSI-MS检测结果与HPLC-UV检测结果基本一致.各目标物在一定范围内线性关系良好,相关系数r2均＞0.99,检出限均在1.0 mg/L以下,相对标准偏差为20％～24％.结论 本方法快速、准确、专属性强,适用于大批量复杂基质样品中PDE5抑制剂的快速筛查.
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QuEChERS法结合在线凝胶色谱-气相色谱/质谱法测定人体尿液中34种农药残留
目的 建立QuEChERS方法结合在线凝胶渗透色谱-气相色谱/质谱系统用于人尿中34种中高毒农药的快速筛查方法.方法 研究QuEChERS各因素如萃取剂、萃取剂用量、萃取次数和净化吸附剂种类对尿样提取净化效果的影响.采用选择离子监测模式,外标法测定人尿中34种农药含量.结果 34种农药在人尿中的检出限为0.05～3.2μg/kg,在0.05 μg/g添加水平的平均回收率为81.1％ ～ 108.8％,相对标准偏差(RSD)为2.7％ ～10.4％.结论 本法具有操作便捷、通用性强等特点,适用于人尿中34种农药残留的快速筛查与检测.
关键词： QuEChERS 凝胶色谱-气相色谱/质谱 尿液 农药残留 快速筛查 -
X-射线荧光光谱仪快速筛查大米中镉的含量
目的 建立X-射线荧光法测定大米中镉含量的分析方法.方法 样品经粉碎后,压片,直接置于仪器上测定25 min.结果 仪器方法检出限和定量限分别为0.035和0.094 mg/kg;准确度标准偏差为0.015 5,td=0.30,重复性x2=5.32,12 h内仪器稳定性x2=11.07,随机两台仪器测定结果的标准偏差为0.021 3.结论 X-射线荧光光谱仪检出限和定量限能够满足大米中镉的检测的标准要求,仪器准确度、重复性和稳定性符合快速测定要求,X-射线荧光法为大米中镉的快速筛查提出了新方法,同时为基层粮库稻米收购,食品原料验收和监管提供了技术支撑.
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献血者ALT街头快速筛查与实验室检测结果对比分析
目的 分析献血者接头ALT快速筛查影响因素,采取改进措施,降低血液ALT不合格报废率.方法 街头408名无偿献血者用半自动生化仪进行ALT快速检测,检测结果≤40 U,且体格检查和其它筛查项目合格后参加献血,留取标本送回实验室用全自动生化分析仪检测.采用配对t检验和(或)配对秩和检验比较两组数据.结果 408份街头ALT快速筛查结果合格(≤40 U)标本,经站内全自动生化分析仪检测,有3份标本>40 U.街头ALT半自动生化仪快速筛查结果平均值高于站内全自动生化分析仪ALT检测结果.365份标本(占89.50％)数据差异范围在±0～10 U,统计学比较有显著性差异.43份(占10.50％)数据差异范围>10 U,比较差异无统计学意义.结论 街头ALT快速筛查与站内实验室ALT全自动生化分析仪检测结果对比,两者之间存在差异.通过查找街头ALT检测影响因素,采取针对性的改进措施,提高街头ALT检测结果准确性.
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荧光PCR技术在从业人员伤寒痢疾快速筛查中的应用
目的：评价实时荧光PCR技术开展作为快速检测从业人员体检肠道致病菌(伤寒、痢疾)检测工作方法的适用性，以替代落后的细菌培养法检测手段的可行性é方法对一定时间从业人员体检的肛拭子，同时用PCR筛查法和传统培养法进行志贺菌和沙门菌对比检测，充分比较两者的检出率、灵敏度、特异性、工作效率、人力成本和耗材成本é结果 PCR筛查法阳性检出率1.6‰；传统培养法阳性检出率0.76‰；PCR筛查法的灵敏度和特异性分别为100%和99.97%，具有操作安全简便、结果客观性强、方法便于规范统一、质量控制措施可操作性强等特点é结论 PCR筛查法检测技术对健康体检人员的肠道致病菌进行快速筛查可以使检验的时间得以缩短，而且特异度强、灵敏度高，兼具时效性与客观性é更适合基层实验室规范统一地开展健康带菌检测工作é
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荧光PCR技术在从业人员伤寒痢疾快速筛查中的应用
目的 探讨荧光PCR技术在从业人员伤寒痢疾快速筛查中的应用效果.方法 2015年1月—2016年12月期间,该院与青州市疾控中心联合查体,对青州市从业人员进行伤寒痢疾筛查,以5900例的肛拭子粪便标本作为研究对象,对5900例从业人员的肛拭子粪便样本分别实施传统国标方法和荧光PCR技术进行筛查.将其中检出的阳性样本进行血清鉴定和生化鉴定.结果 培养确诊的沙门氏菌阳性率为0.85%,志贺氏菌阳性率为0.85%;荧光PCR技术检出的沙门氏菌阳性率为1.19%,志贺氏菌阳性率为10.17%;传统国标方法检出的沙门氏菌阳性率为0.34%,志贺氏菌阳性率为0.51%.荧光PCR技术检查的沙门氏菌阳性率和志贺氏菌阳性率与培养确诊的阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05);传统国标方法检出的沙门氏菌阳性率和志贺氏菌阳性率与培养确诊的阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05).荧光PCR沙门氏菌检测阳性5(A)、2(C),阴性0(B)、5893(D);培养确诊沙门氏菌检测阳性5(A)、0(B);阴性2(C)、5893(D).荧光PCR技术检查对沙门氏菌检测结果的灵敏度显著高于传统国标方法,差异有统计学意义(P<0.05).荧光PCR志贺氏菌检测阳性4(A)、2(C),阴性0(B)、5896(D);培养确诊志贺氏菌检测阳性4(A)、0(B);阴性2(C)、5896(D).荧光PCR技术检查对志贺氏菌检测结果的灵敏度显著高于传统国标方法,差异有统计学意义(P<0.05).结论 PCR筛查法检测技术对健康体检人员的肠道致病菌进行快速筛查可以使检验的时间得以缩短,而且特异度强、灵敏度高,兼具时效性与客观性,更适合基层实验室规范统一地开展健康带菌检测工作.
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荧光PCR技术在从业人员伤寒痢疾快速筛查中的应用
目的：将实时荧光PCR技术应用于食品及公共场所从业人员肛拭标本的沙门菌与志贺菌检测，对国家卫生标准WS/T454-2014《从业人员预防性健康检查沙门菌志贺菌检验方法》技术方案进行实验认证，评价这一新技术开展作为快速检测从业人员体检肠道致病菌（伤寒、痢疾）检测工作方法的适用性，以替代落后的细菌培养法检测手段的可行性。方法对一定时间从业人员体检的肛拭子，同时用PCR筛查法和传统培养法进行志贺菌和沙门菌对比检测，充分比较两者的检出率、灵敏度、特异性、工作效率、人力成本和耗材成本。结果 PCR筛查法阳性检出率1.6‰；传统培养法阳性检出率0.76‰；PCR筛查法的灵敏度和特异性分别为100%和99.97%，具有操作安全简便、结果客观性强、方法便于规范统一、质量控制措施可操作性强等特点。结论 PCR筛查法检测技术对健康体检人员的肠道致病菌进行快速筛查可以使检验的时间得以缩短，而且特异度强、灵敏度高，兼具时效性与客观性，进而防止发生食物中毒及肠道传染病传播。更适合基层实验室规范统一地开展健康带菌检测工作。
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适宜发展中国家与地区的宫颈癌快速筛查技术的研究及意义
中国医学科学院肿瘤医院为首的团队开发了适宜发展中国家与地区的宫颈癌快速筛查技术,即人乳头瘤病毒(HPV)DNA检测技术——careHPV检测技术.该检测技术是国际上首次研发成功的一种简单、快速、准确、安全并且成本较低的技术,并且首次以临床疾病结局为终点指标,验证了careHPV检测技术在人群中筛查宫颈癌的准确性,与目前采用的标准HPV检测方法和细胞学检测结果接近,高于醋酸染色肉眼观察法(VIA).careHPV检测技术的推广和应用将有助于促进我国并带动其他发展中国家的宫颈癌防治工作,加快缩短发展中国家与发达国家在宫颈癌防治方面的差距,对于全球降低宫颈癌发病率、死亡率具有重要意义.
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霍乱弧菌O1胶体金免疫层析快速检测法的建立
目的 建立一种快速、简易的检测霍乱弧菌O1群的胶体金免疫层析法(GICA).方法 利用胶体金免疫层析技术,采用双抗体夹心法检测霍乱弧菌O1群,对该法进行敏感性、特异性和稳定性分析.与细菌培养法对比检测208份临床标本.结果 该法能在10分钟内完成检测；该试纸条仅与霍乱弧菌O1群阳性样品发生特异性反应；检测霍乱弧菌O1群的低检出浓度为1×105cfu/mL；与细菌培养法对比检测208份临床标本,特异性和灵敏度均达100％.结论 新建立的霍乱弧菌O1群胶体金免疫层析试验简便、快速,特异性和灵敏度较好,适用于现场样品的快速筛查.
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实时荧光定量PCR技术在致病菌检测中的应用
目的 本文将实时荧光定量PCR (Real-time Q-PCR)法检查致病菌与细菌培养法作比较,探讨对指导临床诊断治疗的意义.方法 采用Real- time Q- PCR法和细菌培养法对100份标本进行6个微生物项目的检测,并比较两种方法的灵敏度、特异性和准确性.结果 Real-time Q-PCR法检测结果与细菌培养法,除完全符合的19例标本之外,另有8例用细菌培养法为阴性的标本,用Real- time Q- PCR法检测为阳性.结论 Real-time Q-PCR法较细菌培养法具有准确性好、灵敏度高、特异性强和检测快速等优点,是快速筛查致病菌的理想检测方法之一.
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实时荧光定量PCR在手足口病肠道病毒快速检测中的应用
目的 建立快速检测手足口病肠道病毒的实时荧光定量PCR法,并作出应用分析. 方法 采用卫生部<手足口病预防控制指南>(2008年版)推荐的RT-PCR法,对丽水市2008年4～5月间发生的172例临床诊断手足口病患者的324份标本进行人肠道病毒、柯萨奇病毒A组16型和肠道病毒EV71型特异性核酸的检测,同时采用实时荧光定量PCR法进行平行检测,比较两者的实验结果,分析实时荧光定量PCR方法的特异性和灵敏度. 结果 实时荧光定量PCR检测324份标本,肠道病毒通用核酸阳性70份,柯萨奇A16核酸阳性22份,肠道EV71病毒核酸阳性15份,与RT-PCR结果一致,符合率100%. 结论 实时荧光定量PCR法具有特异性强、灵敏度高等优点,是一种理想的手足口病肠道病毒的检测方法.
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超声快速筛查胎儿心脏技巧的探讨
目的 探讨超声快速筛查胎儿心脏的技巧,提高产前诊断效率.方法 回顾性分析50例经产前超声诊断的各种心脏畸形的胎儿的超声资料.对受检胎儿进行胃泡水平横切面、四腔心切面、五腔心切面、左室流出道切面、右室流出道切面、三血管平面、上、下腔静脉入右房切面、主动脉弓切面,只进行二维图像观察和彩色多普勒图像观察.结果 50例胎儿先天性心脏畸形中,13例经尸检证实,37例经其它医院或上级医院再次超声检查证实.经过以上所述切面,绝大多数先天性心脏结构畸形在胎儿期是可以发现的,并且在胎位不利于观察心脏结构时,可以选择相应替代切面进行观察,节约检查时间.结论 产前二维平面和彩色多普勒对诊断胎儿心脏结构畸形是有重要意义的,对于室间隔缺损的观察,应加强五腔心切面的使用,右室流出道的观察应延续观察至动脉导管,这对于确定大动脉的关系十分必要.
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经修饰CHROMagar不动杆菌显色培养联合MALDI-TOF-MS快速筛查肠道耐碳青霉烯鲍氏不动杆菌的研究
目的 探讨初步建立经修饰的CHROMagar不动杆菌显色培养联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)的方法用于快速筛查肠道耐碳青霉烯鲍氏不动杆菌(CRAB).方法 采集2017年4－6月入住医院ICU的319 名患者直肠拭子并接种至含 4 μg／ml美罗培南的 CHROMagar 不动杆菌显色培养基, MALDI-TOF-MS鉴定可疑菌株.快速筛查结果用 recA 基因测序分析及美罗培南MIC值进行验证.结果 快速筛查到18 1.8%(58／319)的患者肠道携带CRAB . recA 基因测序分析显示该58株菌全为鲍氏不动杆菌,且有57株对美罗培南耐药,符合率高达98 .28%(57／58).结论 经修饰的CHROMagar 不动杆菌显色培养联合MALDI-TOF-MS可快速筛查肠道耐碳青霉烯鲍氏不动杆菌,特异性高、稳定性好,对医院感染早期监测与积极防控具有重要的应用价值.
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江门市杜阮镇2648例已婚妇女梅毒筛查情况报告
目的 了解已婚妇女人群中梅毒的流行情况及有关的危险因素.方法 对江门市杜阮镇已婚妇女进行免费的现场梅毒快速检测,并利用问卷调查收集社会人口和行为学信息,采用Logistic回归进行分析.结果 共2 721人接受了问卷调查,其中2 648人(97.3％)接受了梅毒筛查.接受筛查的女性平均年龄为39.5岁,88.3％为当地居民.快速初筛检测共发现37例梅毒阳性(1.4％).多因素Logistic回归分析发现,已婚妇女中的外来人口感染梅毒的风险显著高于本地居民(OR=6.52,95％CI:2.73～15.56).结论 江门市杜阮镇调查人群普遍对梅毒了解较少,外来人口感染率显著高于本地居民,提示未来的防治工作要加强对普通人群的宣教和筛查,尤其要关注外来人口.
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无偿献血者献血前快速初筛及必要性分析
目的 对无偿献血者献血前快速初筛及必要性进行探讨分析.方法 选择2014年10月-2016年10月驻马店市中心医院中心血站的95 389份无偿献血者献血前初筛以及献血后的标本作为研究对象,在无偿献血者献血前,运用速率法对ALT进行检测,运用金标法对HBsAg进行检测,观察检测结果,确保检测合格后方可献血.结果 献血初筛者和筛查合格后献血者的HBsAg不合格数与ALT不合格数对比差异有统计学意义(P＜0.01);2014年无偿献血者的HBsAg不合格数比例与ALT不合格数均高于2015年与2016年(P＜0.05).结论 通过对无偿献血者献血前快速初筛,能够大大降低血液不合格率,有效预防交叉感染,并防止出现血液资源浪费的情况.
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TLC法快速筛查抗风湿中药制剂中非法添加6种糖皮质激素类化学药物
目的 建立快速筛查抗风湿类中药制剂中非法添加糖皮质激素类化学药物的TLC法.方法 样品用甲醇超声提取,采用硅胶GF254薄层板,甲醇预展1 cm,以乙酸乙酯-正己烷(11∶10)为展开剂,紫外254 nm检视,并以碱性四氮唑蓝试液为显色剂测定.结果 本方法可快速筛查出中药制剂中非法添加的6种糖皮质激素地塞米松、曲安奈德、醋酸泼尼松、醋酸氢化可的松、醋酸地塞米松、醋酸曲安奈德.结论 本方法可同时测定多种激素,低成本、操作简便、不需大型专业仪器,易在基层推广,可快速用于市场打假,并作为非法添加基层日常监督检验初筛方法.
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薄层色谱法快速筛查降脂、降压、止咳平喘类中药制剂中的29种添加化学药物
目的 建立快速筛查降脂、降压、止咳平喘类中药制剂中非法添加化学药物的薄层色谱法.方法 样品用甲醇超声提取,采用硅胶GF254薄层板,降脂类药物以正己烷-乙酸乙酯-乙醚-冰醋酸(10:8:2:1)为展开剂,紫外254nm检视,并以5%香草醛硫酸试液为显色荆测定;降压类药物以乙酸乙酯-甲醇-二乙胺(40:0.5:3)为展开剂,于紫外254、365 nm下检视;止咳平喘类药物以异丙醇-乙酸乙酯-氨水(15:25:1.5)为展开剂,于紫外254 nm下检视.结果 上述方法可快速筛查出中成药中可能非法添加的10种降脂药物烟酸、普伐他汀钠、瑞舒伐他汀钙、阿托伐他汀钙、氟伐他汀钠、苯扎贝特、辛伐他汀、洛伐他汀、非诺贝特、普罗布考;9种降压药物苯磺酸氨氯地平、盐酸特拉唑嗪、盐酸哌唑嗪、甲磺酸多沙唑嗪、硝苯地平、非洛地平、尼群地平、尼莫地平、拉西地平;10种止咳平喘药物茶碱、二羟丙茶碱、特布他林、羟乙基茶碱、盐酸二氧丙嗪、富马酸酮替芬、咖啡因、盐酸克仑特罗、多索茶碱、盐酸氨溴索等共29种化学药物.结论 本方法简便快速,可作为非法添加日常监督检验的有效方法.
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实验室快速筛查的思考与实践
目的 利用药品检测车运行资源,建立药品快速筛查第三种模式-实验室快速筛查.方法 针对药品标准检查项部分内容进行合理设计与改进,并积极实践.结果 达到了快速发现质量可疑药品的实效.结论 符合基层药品监督抽验实际.
