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2,5-己二酮染毒大鼠神经电生理参数时效性变化
2,5-己二酮(2,5-HD)是正己烷在体内代谢终产物,也是介导慢性正己烷中毒的神经毒物,可引起感觉-运动障碍型多发性周围神经病[1].临床病例分析表明,神经电生理检查是诊断该病的重要辅助手段,患者示感觉、运动动作电位波幅下降,运动传导速度减慢和远端潜伏期延长,且电生理异常可早于临床症状[1-3];动物实验显示,染毒终点大鼠神经电生理改变与人类一致[4],但对各项电生理指标时效性变化、发生改变的顺序及指标敏感性研究,尚未见报道.本研究采用电生理学方法测定并分析大鼠坐骨-腓神经干复合动作电位(CAP)波幅、潜伏期、阈强度、大刺激强度和神经传导速度(NCV)等5项电生理参数,以比较各项指标随染毒时程发生变化的顺序及发展趋势,为进一步探讨2,5-HD周围神经病变发生机制提供依据.
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2,5-己二酮对大鼠大脑皮层细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响
目的 初步探讨大鼠大脑皮层细胞凋亡在2,5-己二酮(HD)致大鼠神经退行性病变中的作用.方法 60只Wistar雄性大鼠,经腹腔染毒,剂量分别为100和300 mg/(kg·d),连续8周(每周5d).处死一半动物并分离、冻存大脑组织.另一半动物停止染毒、自然恢复8周后取材.采用TUNEL方法检测大鼠大脑皮层细胞凋亡指数(AI),采用免疫组化方法检测大鼠大脑皮层细胞Bcl-2和Bax的相对含量.结果 染毒8周后,100和300 mg/kg剂量组动物AI分别为22.25％ (P ＜0.05)和25.12％ (P ＜0.05),与对照组7.94％比较,阳性细胞数量明显增加.恢复8周后100和300 mg/kg剂量组动物AI分别为18.45％ (P ＜0.05)和17.20％ (P ＜0.05),与对照组7.48％比较,仍存在显著性差异,但300 mg/kg剂量组动物AI较染毒8周时有所减小;100和300 mg/kg剂量组动物在HD染毒8周和8周+恢复8周时,Bcl-2含量分别相当于对照组的89.2％、78.4％和80.9％、132.9％;Bax含量分别相当于对照组的126.3％、135.6％和74.6％、80.9％.结论 HD致大鼠退行性病变过程中可能伴有大脑皮层细胞凋亡的发生.
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2,5-己二酮对大鼠坐骨神经骨架蛋白的影响
目的 探讨2,5-己二酮(HD)对大鼠坐骨神经中神经丝、微丝、微管等骨架蛋白的影响.方法 Wistar雄性大鼠,经腹腔染毒,剂量分别为100和300 mg/(kg·bw),连续8周(每周5d).处死一半动物并分离、冻存坐骨神经.另一半动物停止染毒、自然恢复8周后取材.采用免疫组化方法检测大鼠坐骨神经中高分子量神经丝(NF-H)、中分子量神经丝(NF-M)、低分子量神经丝(NF-L)、β-肌动蛋白(β-actin)和β-管蛋白(β-tubulin)的相对含量.结果 剂量组NF-H、NF-M、NF-L相对含量在染毒8周时均降低,下降至对照组的81％ ～92％,且呈现剂量-反应关系;染毒8周又自然恢复8周时相对含量较染毒8周时无明显变化.β-actin的相对含量与对照组相比无明显变化.β-tubulin的相对含量在染毒8周时无明显变化,染毒8周又自然恢复8周时300 mg/(kg·bw)剂量组明显降低.结论 HD导致大鼠坐骨神经中骨架蛋白的改变自然恢复8周后无明显变化.
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2,5-己二酮对大鼠神经丝mRNA水平的影响
目的 探讨2,5-己二酮(HD)对神经组织神经丝(NF)mRNA水平的影响.方法 Wistar雄性大鼠27只,分为3组(1个对照组,2个染毒组),每组9只,经腹腔染毒,剂量分别为200和400 mg/(kg·d),连续8周.逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测坐骨神经、脊髓、大脑组织中高分子量NF(NF-H)、中分子量NF(NF-M)和低分子量NF(NF-L)mRNA水平.结果 200和400 mg/kg剂量染毒后,坐骨神经NF-L mRNA水平分别为对照组的126%(P＜0.05)和152%(P＜0.01),NF-M mRNA未检测到,NF-H mRNA未发生明显变化;在脊髓、大脑组织中,NF-L mRNA下降为对照组的34%～54%(P＜0.01),NF-M mRNA未发生明显变化,400 mg/kg剂量组中NF-H mRNA下降为对照组的85%(P＜0.05).结论 HD染毒导致大鼠神经组织中NF亚单位mRNA水平的变化.
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2,5-HD对大鼠DRG神经元神经丝蛋白表达的影响
目的 比较2,5-己二酮(2,5-HD)和3,3'-亚氨基二丙腈(3,3'-IDPN)对大鼠DRG神经元神经丝蛋白(NF-M)的损伤作用.方法 用出生后2 d的大鼠背根神经节(DRG)神经元,在培养皿中加不同浓度的2,5-HD和3,3'-IDPN进行培养,用荧光染料测定细胞毒性,计算细胞死亡率.用蛋白免疫荧光方法测定NF-M,计算DRG神经元细胞体的神经丝表达.结果 DRG神经元24 h接触2,5-HD和3,3'-IDPN的LD50约为32和102 mmol/L.DRG细胞体内的NF-M蛋白含量在接触2,5-HD(0、4、8和16 mmo/L浓度)24和48 h后结果显示,各个剂量组均有明显降低(P＜0.05.P＜0.01);而在接触3,3'-IDPN 24 h后,各个剂量组之间没有发生明显改变,但在接触48 h后,仅有64,128 mmol/L组与对照相比,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).在DRG神经元具有相同死亡率时,2,5-HD和3,3'-IDPN 24 h后对NF-M蛋白表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论 2,5-HD与3,3'-IDPN对NF-M的损伤不同.2,5-HD减少NF-M蛋白表达要早于细胞死亡.NF-M对2,5-HD比对3,3'-IDPN敏感.
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活细胞成像技术研究2,5-己二酮对中分子量神经丝运输的影响
目的 用活细胞成像技术研究2,5-己二酮对中分子量神经丝蛋白(NF-M)在体外培养的背根神经节神经元轴突中的运输的影响.方法 转染pPA-GFP-NFM质粒的背根神经节神经元体外培养,给予2,5-己二酮作用24 h后,荧光显微镜下定量观察GFP-NFM的转运量.结果 给药4、8和16 mmol/L 2,5-HD组,NF-M在轴突中被转运的量分别为28.5±11.6％(P＜0.05)、22.6±9.2％(P＜0.01)和18.5 ±8.6％(P＜0.01),而空白对照组中NF-M被转运的量为35.6±11.0％.结论 2,5-己二酮降低了NF-M的轴浆运输速率,这可能是2,5-己二酮引起中毒性周围神经病的致病机制之一.
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2,5-己二酮中毒大鼠坐骨神经中PKA、PKC和CDK5含量的变化
目的 探讨蛋白激酶A(PKA),蛋白激酶C(PKC)和细胞周期依赖性蛋白激酶5(CDK5)在2,5-己二酮(HD)中毒性周围神经病发病过程中的作用.方法 雄性Wistar大鼠200、400mg/kg HD腹腔注射染毒,每周5次,连续8周,建立HD中毒性神经病模型.利用SDS-PAGE和Western Blotting方法检测坐骨神经胞浆和膜组分中PKA、PKC、p35前体、p35、p25和CDK5的相对含量.结果 PKA、PKC、p35前体、p25和CDK5含量在200和400mg/kg染毒组大鼠坐骨神经胞浆蛋白组分中均呈明显升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);PKC、p35前体和p35在胞膜蛋白组分中变化趋势与胞浆蛋白中相似,也明显升高,并且与对照组相比差异亦有统计学意义(P<0.05),但PKA、CDK5在坐骨神经胞膜蛋白组分中未能检出.结论 坐骨神经中PKA、PKC和CDK5含量明显升高,提示相关蛋白激酶含量的升高可能是HD致中毒性周围神经病的发病机制之一.
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2,5-己二酮对大鼠感觉神经功能的影响
正己烷作为溶剂广泛用于丙烯聚合溶剂、食用油脂抽提溶剂、橡胶和涂料的溶剂,以及颜料的稀释剂等.虽然正己烷急性毒性分类为低毒类,但因其具有高挥发性和高脂溶性,且有神经系统毒性作用,应视为高危害性毒物[1].
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2,5-己二酮对大鼠运动及感觉神经元神经生长因子表达的影响
目的研究正己烷的代谢产物2,5-己二酮对大鼠神经系统运动、感觉神经元内源性神经生长因子(NGF)表达的影响.方法采用原代培养的大鼠背根神经节(DRG)感觉神经元和培养的大鼠脊髓前角运动神经元瘤细胞系VSC4.1细胞,用相差显微镜观察细胞形态,同时用免疫组化方法分析不同浓度2,5-HD(2.5、5.0、10.0、20.0mol/L)染毒24小时后DRG、VSC4.1细胞内NGF含量的变化.结果与对照组相比,2,5-己二酮染毒剂量为5.0、10.0、20.0mmol/L时,皆可使DRG细胞及VSC4.1细胞NGF表达量显著下降(P<0.05);各剂量组间两两比较发现随着染毒剂量增高,两类细胞NGF表达水平的下降有愈为明显的趋势.结论2,5-己二酮可降低大鼠DRG感觉神经元和脊髓前角运动神经元(VSC4.1细胞)、内源性NGF的表达水平,并进一步抑制了两类细胞的生长与存活.
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2,5-己二酮不同作用时间对大鼠坐骨神经P0蛋白及血清P0蛋白抗体水平的影响
目的 探讨正己烷代谢产物2,5-己二酮不同作用时间对大鼠坐骨神经髓鞘结构蛋白P0蛋白及外周血中P0蛋白抗体水平的影响.方法 选用400mg/kg 2,5一己二酮每日经口灌胃染毒Wistar大鼠,观察大鼠的一般状况改变.分别于第0、1、2、3、4周取材,采用免疫组化技术观察不同染毒时间大鼠坐骨神经横断面P0蛋白表达水平,并采用酶联免疫吸附试验检测不同染毒时间,大鼠外周血中P0蛋白抗体的水平.结果 随着染毒时间的延长,大鼠逐渐出现明显的中毒症状.P0蛋白在坐骨神经横断面呈不均匀分布,髓鞘较轴索明显;未染毒大鼠坐骨神经横断面P0蛋白呈较高水平表达,随着染毒时间的延长,坐骨神经横断面P0蛋白表达水平有逐渐降低的趋势.染毒O、1、2、3和4周大鼠外周血中P0蛋白抗体阳性率分别为33.3%、26.7%、46.7%、46.7%和84.6%.外周血中P0蛋白抗体的阳性率随染毒时间延长呈现明显增加的趋势(X2=11.007,P<0.05).结论 正己烷代谢产物2,5-己二酮能够破坏大鼠周围神经髓鞘,降低坐骨神经中P0蛋白的水平,提高外周血中P0蛋白抗体的水平.
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神经生长因子对2,5-己二酮致运动神经元线粒体功能损伤的影响
目的 探讨神经生长因子(NGF)对2,5-己二酮所致运动神经元细胞线粒体功能损伤的影响.方法 用10mmol/L和20mmol/L 2,5-己二酮给运动神经元VSC4.1细胞处理12h后,检测VSC4.1细胞活性,NGF 的蛋白表达以及线粒体膜电位的变化;20mmol/L 2,5-己二酮与VSC4.1细胞作用12h后,去除2,5-己二酮加入不同浓度的NGF,检测细胞活性和线粒体膜电位的变化.结果 10mmol/L和20mmol/L 2,5-己二酮与运动运动神经元VSC4.1细胞共同培养12h后,细胞活性分别下降了17%和23%;VSCA.1细胞内NGF的表达分别下降了33.5%和34%;线粒体膜电位由39.36分别下降到29.57和23.80.VSC4.1细胞与2,5-己二酮作用12h后用50ng/ml和100ng/ml NGF处理,细胞的活性增加了6.38%和23.40%;细胞线粒体膜电位也由26.03增加到30.18和31.50(P＜0.05).结论 NGF寸以通过改善线粒体膜电位来修复2,5-己二酮导致的运动神经元线粒体功能损伤.
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2,5-己二酮抑制大鼠卵巢颗粒细胞干细胞因子的表达
目的 研究2,5-己二酮对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡及干细胞因子(SCF)表达的影响.方法 21日龄清洁级雌性SD大鼠10只,提取卵巢颗粒细胞混合后,均匀接种到六孔板培养,设立1个对照组和3个实验组,培养24 h后分别加入浓度为0、20、40、60 mmol/L的2,5-己二酮染毒24 h,Hoechst 33258荧光染色计算细胞凋亡率,实时荧光定量PCR检测SCF、Bax、Bcl-2基因mRNA相对表达量.结果 各染毒剂量组卵巢颗粒细胞凋亡率增高,差异有统计学意义(F=221.23,P＜0.05).SCF基因mRNA的相对表达量在40、60 mmol/L剂量组呈下降趋势,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).Bcl-2基因mRNA的相对表达量随染毒剂量增加呈下降趋势,各剂量组与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).Bax基因mRNA的表达量和Bax/Bcl-2比值随着染毒剂量增加呈上升趋势,各剂量组与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论 2,5-己二酮染毒可致卵巢颗粒细胞凋亡率增高,抑制SCF基因表达,SCF/c-Kit信号通路可能参与此过程.
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2,5-己二酮对大鼠神经组织微管含量的影响
目的初步探讨2,5-己二酮的神经毒性是否与微管含量有关.方法Wistar雄性大鼠,2,5-己二酮200和400mg·kg-1,ip,连续8周(每周5 d),取大脑、脊髓、坐骨神经组织匀浆,制备各组织上清和沉淀,采用SDS-PAGE和Western印迹方法检测α-管蛋白、β-管蛋白的相对含量.结果2,5-己二酮200和 400 mg·kg-1,ip,后大脑沉淀和上清中的管蛋白含量相当于对照组的87%～114%,没有显著性变化.脊髓沉淀中管蛋白的含量为对照组的88%～105%,200 mg*kg-1组上清中α-管蛋白、β-管蛋白的含量相当于对照组的59%(P<0.05) 和47%(P<0.01),400 mg·kg-1组为126%(P<0.05)和156%(P<0.01);坐骨神经沉淀中的含量相当于对照组的88%～109%,上清中的含量均明显降低(P<0.01),相当于对照组的22%～70%.结论2,5-己二酮导致大鼠脊髓和坐骨神经中管蛋白含量的变化,其含量改变与2,5-己二酮的外周神经毒性有关.
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神经生长因子对2,5-己二酮中毒大鼠周围神经损伤的治疗作用
目的观察鼠源性神经生长因子(mNGF)对2,5-己二酮中毒大鼠周围神经病的治疗效果.方法采用2,5-己二酮450 mg·kg-1·d-1 ig染毒,通过对姿势、步态、前后肢肌力的体征评分、坐骨神经运动神经传导速度(MNCV)测定和神经病理检查,证实制成2,5-己二酮中毒大鼠周围神经病模型,而后将相同周围神经体征评分的中毒大鼠26只随机分为mNGF治疗组与染毒未治组进行疗效比较.结果染毒组大鼠于染毒25 d体征评分显示,中度与重度周围神经损伤者约占总数的92%;坐骨神经MNCV比对照组明显减慢;神经病理检查发现,胫神经部分神经纤维轴索变性.经mNGF 30 μg·kg-1·d-1 im治疗21 d后,治疗组大鼠的姿势、步态与前后肢肌力的恢复情况显著优于染毒未治组.结论 mNGF能显著加速2,5-己二酮中毒性周围神经病的恢复,为临床应用mNGF治疗正己烷中毒性周围神经病提供了动物实验依据.
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2,5-己二酮对大鼠坐骨神经雪旺细胞神经生长因子及其p75神经营养素受体表达的影响
目的 研究正己烷代谢产物2,5-己二酮(2,5-HD)对雪旺细胞神经生长因子(NGF)及其p75神经营养素受体(p75NTR)表达水平的影响.方法 取新生Wistar大鼠坐骨神经进行雪旺细胞原代培养,采用差速贴壁法和Thy-1.1抗体进行细胞纯化.采用免疫荧光法观察2,5-HD不同染毒浓度和染毒时间雪旺细胞NGF及其p75NTR表达水平的变化,图像分析软件Image-Pro Plus进行定量分析.结果 2,5-HD 5～40 mmol·L-1染毒24 h可以促进雪旺细胞NGF及其p75NTR的表达,呈浓度-效应关系;2,5-HD 10.0 mmol·L-1染毒1～48 h,NGF及其p75NTR表达水平呈先增高后降低的趋势.结论 2,5-HD可以促进雪旺细胞NGF及其p75NTR的表达,这可能是机体的一种自我保护机制,为使用NGF治疗正己烷中毒性周围神经病提供了依据.
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2,5-己二酮对大鼠脊髓组织蛋白激酶含量的影响
目的 探讨蛋白激酶A(PKA)、蛋白激酶C(PKC)和细胞周期依赖性蛋白激酶5(CDK5)对2,5-己二酮(HD)中毒性周围神经病神经丝(NF)变化的作用.方法 将30只体重为200～240g的SPF级雄性Wistar大鼠随机分为3组(1个对照组、2个染毒组),每组10只.经腹腔染毒HD,剂量分别为200和400 mg/kg,每周染毒5 d,每日 1次,连续8周,建立HD中毒性神经病模型.对照组给予相同体积的生理盐水.利用SDS-PAGE和Western Blotting方法检测脊髓胞浆蛋白和膜蛋白组分中PKA、PKC、p35前体和CDK5的相对含量.结果 在脊髓胞浆蛋白组分中,与对照组比较,PKA和PKC含量在400 mg/kg染毒组大鼠分别升高了46.1%和23.0%(P<0.01),而在200 mg/kg染毒组均无明显改变(P>0.05);p35前体和CDK5在200 mg/kg染毒组分别升高了56.8%(P<0.01)和78.2%(P<0.01),而在400 mg/kg染毒组,仅CDK5升高了21.9%(P<0.01),p35前体含量无明显改变.在脊髓膜蛋白组分中,PKA和CDK5含量在200、400 mg/kg染毒组大鼠分别升高了19.3%(P<0.01),25.5%(P<0.01)和26.3%(P<0.01),12.7%(P<0.01);PKC含量仅在400 mg/kg染毒组升高了13.9%(P<0.01),而在200mg/kg染毒组无明显改变(P>0.05);染毒组p35前体与对照组比较,变化不明显(P>0.05).结论 HD使脊髓组织中PKA、PKC和CDK5含量明显升高,提示相关蛋白激酶含量的升高可能是HD中毒性周围神经病的发病机制之一.
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大蒜油拮抗2,5-己二酮对大鼠神经组织的氧化损伤的效果
目的 探讨大蒜油对2,5-己二酮(2,5-hexanedione,2,5-HD)导致的大鼠神经组织氧化损伤的拮抗作用和对周围运动神经毒性的影响.方法 Wistar雄性大鼠40只,随机分为正常对照组、模型组、人蒜油低、高剂量组,每组10只.模型组及大蒜油低、高剂量组分别给予2,5-HD 300ms/ks腹腔注射,正常对照组给予生理盐水,5次/周,持续6周.大蒜油低、高剂量组提前1周分别给予40和80mg/kg大蒜油灌胃,持续至实验结束.测定后肢撑力指数和平衡指数等神经行为学指标,实验结束取脑、脊髓和坐骨神经分别测定丙二醛(MDA)、还原型谷胱廿肽(CSH)含量、总抗氧化能力(T-AOC)和抑制羟自由基能力.结果 与第0周比较,后肢撑力指数第4周模型组升高44%,大蒜油低剂量组升高50%,大蒜油高剂量组升高49%,但3组间差异无统计学意义(P>0.05);第4周模型组平衡指数降低30%,大蒜油低剂量组降低45%,大蒜油高剂量组降低68%,与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.01).大蒜油低、高剂基组大鼠在第4周即出现运动异常,较模型组人鼠提前1周;各组步态评分,模型组,大蒜油低、高剂量组均明显高于对照组,且大蒜油高剂量组高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05).在大脑、脊髓和坐骨神经中,与正常对照组相比,模型组人鼠MDA含量升高,抑制羟自由基能力降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,大蒜油低、高剂量组在各神经组织中MDA含量均明显降低,抑制羟自由基能力明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 大蒜油可拮抗2,5-HD所致的大鼠神经组织氧化损伤,但并末改善2,5-HD导致的周围运动神经损伤,提示氧化-抗氧化损伤不是2,5-HD中毒性神经病的主要机制.
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2,5-己二酮对大鼠神经组织中低分子量神经丝降解的影响
目的 研究2,5-己二酮(HD)对大鼠神经组织中低分子量神经丝(NF-L)降解的影响,探讨正己烷中毒性神经病发生的可能机制.方法 雄性Wistar大鼠50只随机分为1、2、3、4周染毒组和对照组,每组10只.经腹腔注射HD(400 mg/kg)染毒动物,剂量为,建立正己烷中毒性神经病模型.电子显微镜观察大鼠坐骨神经的超微结构变化,步态评分评价大鼠周围神经病症状的进展,免疫印迹法(Westem blot)检测坐骨神经和脊髓组织中NF-L降解率的变化.结果 HD染毒2周后,大鼠逐渐出现肌力降低、步态异常等表现,至染毒4周结束时大鼠呈现轻中度瘫痪,电子显微镜观察显示坐骨神经出现退行性病变.与对照组相比较,2、3、4周染毒组大鼠坐骨神经上清和沉淀组分中NF-L降解率均呈进行性下降,其中上清NF-L降解率分别下降25.8％、70.4％和69.7％,沉淀中NF-L降解率分别下降14.7％、64.6％和67.3％,差异均有统计学意义(P＜0.01).在脊髓组织中,与对照组相比较,1周染毒组脊髓上清中NF-I,降解率下降33.87％,4周染毒组脊髓上清中NF-L降解率升高16.2％,1、2周染毒组脊髓沉淀中NF-L降解率分别下降46.3％和13.0％,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 HD染毒显著抑制了坐骨神经中NF-L的降解,这可能与正己烷中毒性神经病轴突中NF变性堆积有关.
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2,5-己二酮对小鼠视网膜损伤的实验研究
目的 研究2,5-己二酮(2,5-HD)对小鼠视网膜组织形态学的影响及对视网膜组织的脂质过氧化作用,揭示正己烷对视网膜损伤的发病机制.方法 48只昆明种小鼠随机分为空白对照组、阴性对照组和2,5-HD染毒组.空白对照组12只,不做任何处理；阴性对照组12只,腹腔注射生理盐水；2,5-HD染毒组24只(分为2、4和8周染毒组),腹腔注射质量分数为2.5％的2,5-H-HD溶液,剂量为400 mg/kg,每日给药1次.光学显微镜下观察2,5-HD对视网膜组织的病理形态学影响；并且测定视网膜组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量.结果 空白对照及阴性对照组小鼠视网膜结构正常.2,5-HD染毒8周组光感受器内外节分界不清,排列疏松紊乱；外丛状层呈疏松网状结构,染色不均；神经节细胞层可见胞核深染固缩坏死.随着2,5-HD染毒时间的延长,SOD活力逐渐降低,MDA含量增加,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 2,5-HD可造成小鼠视网膜组织损伤,脂质过氧化作用是致视网膜损伤的机制之一.
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小鼠2.5 s神经生长因子对2,5-己二酮诱导的PC12细胞损伤的保护作用
目的建立神经生长因子(NGF)对2,5-己二酮(HD)诱导的PC12细胞凋亡保护作用的模型,并探讨其作用机制.方法以PC12细胞为神经元的细胞模型,将HD和不同浓度的NGF加入培养的PC12细胞中,四甲基偶氮唑盐检测细胞活性,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测p53蛋白表达,比较各组间的差异.结果随NGF浓度增加,细胞存活率升高,差异有统计学意义(P＜0.01);DNA断裂减少;细胞凋亡率减小(P＜0.01);p53表达量下降(P＜0.05).结论NGF对PC12细胞可能具有直接的神经营养作用,且可保护PC12细胞免于2,5-HD诱导的损伤以及具有抗凋亡作用.
