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接触射线职业人群染色体畸变及微核率分析
为了加强对射线工作者的健康防护,为辐射损伤诊断和治疗提供科学依据,我们对盘锦市内从事不同射线人群进行外周血淋巴细胞染色体畸变率及微核率分析.现报告如下.
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淋巴细胞染色体异常及微核形成在乙型肝炎病毒中的意义
为了探讨乙肝病毒与遗传物质损害的情况,我们对乙肝病毒感染者外周血淋巴细胞染色体异常和微核的形成进行了观察,现报告如下.
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E花环法测定转移因子活性的研究
人类外周血淋巴细胞和猪脾TF细胞的表面具有绵羊红细胞(SRBC)受体,简称为E受体,使TF细胞可与SRBC形成玫瑰花结.这是成熟TF细胞的特征之一.细胞经45℃加热1h或用胰酶处理可脱去E受体.转移因子可以促进脱E受体的TF细胞重新合成E受体.因此可用脱E受体的E花环实验来测定转移因子的活性.使用该法测定时,我们发现转移因子浓度与结花率具有相关性[1].结果报告如下.
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外周血淋巴细胞染色体标本制备的质量控制
为提高染色体畸变的检出率和阅片效率,应严格按照操作规程进行实验操作,搞好质量控制,以确保染色体标本片的制备质量.
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乙型肝炎病毒载量与Fas、FasL表达强度的关系
慢性乙型肝炎的发病机制以往认为与机体的细胞免疫有关,新的研究表明与Fas/FasL介导的凋亡关系亦密切.机体可以通过凋亡方式清除感染、变异及衰老细胞而维持自身生理状态.Fas/FasL被认为是介导细胞凋亡的一对跨膜蛋白, FasL被称为死亡因子,Fas 是它的受体, Fas与FasL结合时可引起表达Fas细胞凋亡.本实验旨在研究慢性乙型肝炎患者乙型肝炎病毒复制水平与肝组织及外周血淋巴细胞上Fas、FasL的表达的关系,进一步探讨Fas、FasL介导的凋亡与慢性乙型肝炎发病机制的关系.
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盘锦市医疗放射职业人群染色体畸变的调查分析
辐射对人体的造血系统有较强的损伤,染色体畸变是经典的特异性的指标,为了加强射线工作者的健康防护,为辐射损伤诊断和治疗提供科学依据,我们对市内从事医疗放射的职业人群进行了外周血淋巴细胞的染色体畸变率的调查与分析.
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加味黄芪补气汤促进肿瘤患者外周血淋巴细胞增殖及活化的研究
目的:研究加味黄芪补气汤对肿瘤患者外周血淋巴细胞的促增殖及活化作用.方法:以黄芪和苦参为主药,辅以适量人参、黄精及甘草,制备加味黄芪补气汤.分离5位肿瘤患者的外周血淋巴细胞,分别将补气汤、黄芪甲苷、氧化苦参碱作用于淋巴细胞.细胞计数法检测各组淋巴细胞增殖情况;ELISA法检测各组细胞培养上清中IL-2含量;ELISPOT法检测各组细胞分泌IFN-y的情况.结果:加味黄芪补气汤浓度为2.5、5.0 μg/mL(原药冻干物)时能够促进肿瘤患者外周血淋巴细胞增殖,其中浓度为2.5 μg/mL时效果好,与对照组相比具有统计学意义(P<0.01);黄芪甲苷浓度为2.0、4.0 μg/mL时能够促进肿瘤患者外周血淋巴细胞的增殖,其中4.0 μg/mL时效果好(P<0.01);氧化苦参碱各浓度对肿瘤患者外周血淋巴细胞的增殖基本无影响(P>0.05);IL-2分泌水平检测显示,加味黄芪补气汤、黄芪甲苷、氧化苦参碱浓度分别为2.5、4.0、8.0 μg/mL时,较组内其他浓度效果较好,与对照组相比均有统计学意义(P <0.05);IFN-γ的ELISPOT实验结果显示,加味黄芪补气汤、黄芪甲苷、氧化苦参碱浓度分别为2.5、4.0、8.0 μg/mL时,阳性细胞计数多,与对照组相比均有统计学意义(P<0.05).结论:加味黄芪补气汤在一定浓度范围内能够促进肿瘤患者外周血淋巴细胞增殖与活化,其中黄芪的有效成分黄芪甲苷参与淋巴细胞的增殖与活化过程,而苦参的有效成分氧化苦参碱可能只参与活化淋巴细胞的作用.
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自身免疫性肝炎大鼠模型外周血淋巴细胞体外培养与褪黑素的影响
目的:观察褪黑素对体外培养淋巴细胞增殖及促进细胞因子分泌的作用.方法:实验于2004-10/2006-10在解放军第一二三医院南京军区肝病中心实验室完成.①实验材料:Wistar大鼠,雄性,3月龄,体质量(230±20)g,购自上海斯莱克实验动物有限责任公司.褪黑素:美国Sigma公司产品.②实验方法:采用弗氏完全佐剂加肝细胞特异性脂蛋白法建立自身免疫性肝炎大鼠模型.分别抽取正常大鼠及模型大鼠的外周血,实验室常规培养,并将其分为3组:褪黑素组培养基中加褪黑素使终浓度为2 mg/L;促肝细胞生长素组培养基中加促肝细胞生长素使终浓度为2 mg/L;空白对照组培养基中不加任何细胞分裂刺激剂.③实验评估:培养48 h后,对外周血淋巴细胞进行常规计数并采用液体闪烁计数仪记录1 min计数结果值.用于观察褪黑素与促肝细胞生长素促进外周血淋巴细胞增殖的效果.并检测培养上清液中的各细胞因子浓度,用于观察褪黑素与促肝细胞生长素促进外周血淋巴细胞分泌细胞因子的作用.结果:①褪黑素对正常大鼠外周血淋巴细胞有促进增殖作用,细胞数与1 min计数值较空白对照组明显升高(P<0.05),促肝细胞生长素无促进外周血淋巴细胞增殖作用.②褪黑素对模型大鼠外周血淋巴细胞有促进增殖作用,细胞数与1 min计数值较空白对照组明显升高(P<0.05),促肝细胞生长素无促进外周血淋巴细胞增殖作用.③在褪黑素作用下,正常大鼠Th1细胞因子IL-2和IFN-γ水平明显高于空白对照组和促肝细胞生长素组(P<0.01),Th2细胞因子IL-6明显升高(P<0.05),IL-4水平与空白对照组比较,差异不显著(P>0.05),促肝细胞生长素组Th1和Th2细胞因子与空白对照组无明显差异(P>0.05).④在褪黑素作用下,模型大鼠Th1细胞因子IL-2和IFN-y水平较空白对照和促肝细胞生长素组明显升高(P<0.05),Th2细胞因子IL-4和IL-6水平与空白对照和促肝细胞生长素组无明显差异(P>0.05).结论:褪黑素对自身免疫性肝炎大鼠外周血淋巴细胞有较强的刺激分裂作用.
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原发性肾病外周血淋巴细胞糖皮质激素膜受体表达与糖皮质激素对其凋亡的影响
目的探讨原发性肾病(PNS)外周血淋巴细胞(PBLs)糖皮质激素膜受体(mGR)表达及其与糖皮质激素(GC)对淋巴细胞凋亡影响的关系.方法 2002年1月至2003年8月徐州医学院附属医院对18例PNS分为微小病变组(MCNS)和非微小病变组(NMCNS),另10例正常儿童为对照组.分别以碘化丙啶染色法、流式细胞术及间接免疫荧光染色法分析PBLs凋亡率和mGR阳性细胞百分率,并观察临床GC治疗后尿蛋白转阴天数.结果 MCNS组PBLs的mGR表达高于NMCNS组及正常组,P<0.05;MCNS患儿空白组PBLs凋亡率低于NMCNS,而其地塞米松组则高于NMCNS,P<0.05;NMCNS与正常对照儿童空白及Dex组间无明显差异.MCNS组PBLs的mGR表达与10-7mol/L Dex诱导其凋亡率呈正相关,而与临床GC治疗后尿蛋白转阴天数呈负相关.结论两组PNS患儿mGR表达不同,GC对PBLs凋亡的影响亦不相同,MCNS组mGR表达增高及凋亡下调,而GC可诱导其凋亡上调.mGR可能参与了GC诱导PBLs凋亡的作用机制,且mGR表达的高低在某种程度上可能反映了患儿对GC敏感性的高低.
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小儿扩张型心肌病与线粒体DNA突变关系探讨
近年来线粒体DNA(mtDNA)突变与心肌病的关系引起研究者的重视,本文研究了扩张型心肌病(DCM)患儿外周血淋巴细胞mtDNA突变,以探讨其在DCM发病中的作用.
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免疫学与儿科临床第四讲T细胞亚群的临床意义
经过胸腺上皮细胞及其分泌的胸腺素诱导成熟的T淋巴细胞,在其表面表达CD3分子.T淋巴细胞在外周血淋巴细胞中约占80%左右,因此CD+3细胞也相应为80%.由于技术原因,检测的T淋巴细胞常达不到外周血淋巴细胞的总数.采用单克隆抗体(moAb)玫瑰花结实验的阳性率低,为50%~60%;moAb荧光显微镜法可达到65%左右,流式细胞计数仪的敏感性高,可达到70%左右.T淋巴细胞因其CD3分子以外的其它表面标记物,以及生物学功能不同,而分为许多亚群,各具不同的临床意义.本文简述T淋巴细胞亚群及其在临床中的价值.
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色素相关抗原和交感性眼炎关系的实验研究
目的:探讨黑素相关抗原与交感性眼炎的关系.方法:从牛虹膜睫状体中提取黑素相关抗原,用MTT法测定交感性眼炎患者外周血中淋巴细胞对黑素相关抗原的特异性免疫反应,并与眼球穿通伤患者和正常人进行比较.结果:交感性眼炎患者外周血中淋巴细胞经BMAA刺激后,OD值明显高于正常对照组和眼球穿通伤组(P<0.01).同时发现交感性眼炎患者的色素膜损伤程度不影响患者外周血淋巴细胞在BMAA刺激后的OD值(P>0.05),但不同类型的交感性眼炎其外周血淋巴细胞对BMAA刺激的反应则有明显的差异,全葡萄膜炎明显高于前或后葡萄膜炎(P<0.005).结论:黑素相关抗原与交感性眼炎的发生可能有关;不同类型的交感性眼炎患者其外周血淋巴细胞对BMAA刺激的反应不同.
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头颈部恶性肿瘤患者放疗前外周血淋巴细胞核内γ-H2AX焦点数与放疗后急性放射性损伤程度相关性研究
目的 探讨头颈部恶性肿瘤患者放疗前外周血淋巴细胞核内γ-H2AX焦点数与放疗后急性放射性黏膜和皮肤反应程度的相关性.方法 选择2010年12月至2012年3月湖北三峡职业技术学院附属医院收治的34例头颈部恶性肿瘤初诊患者,采集其外周血进行1Gy的6MV-X线照射,通过细胞免疫荧光技术检测淋巴细胞核内γ-H2AX焦点数;同时追踪观察所有患者放疗后出现急性放射性黏膜和皮肤反应的情况,探寻其与外周血淋巴细胞核内γ-H2AX焦点数之间的相关性.结果 34例患者中,出现急性放射性黏膜反应Ⅰ级6例(占17.65%),Ⅱ级19例(占55.88%),Ⅲ级8例(占23.53%),Ⅳ级1例(占2.94%);出现急性放射性皮肤损伤Ⅰ级9例(占26.47%),Ⅱ级12例(占35.29%),Ⅲ级13例(占38.24%).急性放射性黏膜和皮肤反应程度与患者外周血淋巴细胞核内γ-H2AX焦点数的水平均呈正相关(r=0.815,P< 0.05;r=0.888,P<0.05).结论 头颈部恶性肿瘤患者放疗前检测外周血淋巴细胞核内γ-H2AX焦点数的水平可作为预测放疗后急性放射性黏膜和皮肤反应发生风险大小及严重程度的客观生物学指标.
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高血压病患者外周血淋巴细胞凋亡的检测及其价值
目的探讨高血压病患者外周血淋巴细胞凋亡的检测方法及其临床价值.方法采用TUNEL原位细胞凋亡检测技术对30例高血压病患者及30例正常健康对照人群外周血淋巴细胞进行检测.结果两组中外周血淋巴细胞均有凋亡发生,但高血压病组外周血淋巴细胞凋亡例数明显高于正常对照组(P<0.05),且淋巴细胞凋亡阳性率也高(P<0.05).结论高血压病患者外周血淋巴细胞凋亡可能与高血压病的发生、发展及进程有关.
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环境污染对基因的影响
1职业性接触环境化学品对基因的影响职业性暴露于多环芳烃可引起外周血淋巴细胞基因毒作用.外周血淋巴细胞姐妹染色体交换率升高,微核率升高,染色体和DNA损伤[1].职业性暴露于环境中的多环芳烃在非吸烟者的分子病理中起作用.煤焦炉工人、化肥厂暴露于乙烯氧化物的工人有DNA和蛋白质或染色体损伤.职业性暴露于煤产物的男性p53基因第298号密码突变频率相当高,鳞状癌和大细胞癌发病率很高[2].职业性暴露于芳香胺致癌物者膀胱癌发病率也升高.从事固体废物处理的工人尿中和白细胞中DNA氧化产物8-羟基脱氧鸟苷8-OH-dG升高[3].而膀胱癌危险性的增加与致癌物代谢酶N-乙酰基转移酶2(NAT2)的基因型有关[4,5].农药生产厂的工人由于长期暴露于某些农药,其染色体会受到损伤,从而导致有些疾病的易感性和患癌症的危险性增高.有些工种的工人由于职业性接触化学品,呼吸系统疾病及过敏性疾病发病率显著增高,这种增高与相应基因的过度表达呈正相关,说明这些化学品可以通过影响基因而导致疾病发生.
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500例遗传咨询者细胞染色体分析
我们自1986年开展遗传咨询门诊,至1996年底对500例有流产史、智力低下等遗传咨询者,做了外周血淋巴细胞染色体检查.现将结果报告如下.
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复发性流产免疫治疗后自身抗体的检测
用丈夫或第三者外周血淋巴细胞皮下注射,激发产生封闭抗体,是目前治疗复发性流产的有效方法之一,它可使流产患者再次妊娠成功率提高到80%~90%[1,2].
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妊娠晚期母体外周血与胎儿脐血淋巴细胞凋亡的对比研究
目的:比较妊娠晚期母体外周血与胎儿脐血间淋巴细胞凋亡及其调控基因的表达,探讨妊娠期母体与胎儿在免疫功能方面的差异.方法:采用流式细胞技术分析ICP及正常妊娠妇女外周血及脐血间淋巴细胞凋亡率;以免疫细胞化学染色技术检测两组孕妇外周血及脐血间淋巴细胞上Fas、FasL、Bcl-2的蛋白表达.结果:正常妊娠组脐血淋巴细胞凋亡率显著高于外周血(P<0.05),脐血淋巴细胞上Fas、FasL的表达显著低于母体外周血淋巴细胞(P<0.05),而Bcl-2在两者间无显著性差异;ICP组脐血淋巴细胞凋亡率亦明显高于外周血(P<0.05),脐血淋巴细胞上Fas、Bcl-2的表达显著低于母体外周血淋巴细胞(P<0.05),FasL在两者间无显著性差异.结论:妊娠晚期外周血与脐血间淋巴细胞的凋亡及其调控基因的表达存在差异,而这种差异可能在维持妊娠期免疫耐受的稳定性及移植物抗宿主的排斥反应方面有重要的作用.
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乳腺癌患者外周血淋巴细胞热休克蛋白70表达水平及其意义
目的:探讨乳腺癌患者外周血淋巴细胞中热休克蛋白70 (HSP70)表达水平及其临床意义.方法:用Western blot方法检测45例乳腺癌患者、43例乳腺良性病变患者及43例正常对照组外周血淋巴细胞中HSP70的表达水平.结果:乳腺癌组、乳腺良性病变组外周血淋巴细胞中HSP70表达水平均高于正常对照组,差异有统计学意义(t=2.173,P<0.05);HSP70表达水平在肿瘤直径>2 cm组高于≤2 cm组,差异有统计学意义(t=-2.781,P<0.01);HSP70与乳腺癌患者年龄、组织学分级、临床分期、是否有淋巴结转移及月经状况无关.结论:术前外周血淋巴细胞中HSP70的检测有一定意义,其表达水平有可能成为判断预后的参考指标.
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非小细胞肺癌患者放疗前后机体免疫功能变化的研究
目的:报道30例非小细胞肺癌(NSCLC)患者放疗前后免疫功能的变化.方法:采用双抗体夹心法和比浊法检测血清中sIL-2R、免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)含量;用单克隆抗体和流式细胞仪技术检测外周血中T细胞亚群、B细胞、NK细胞百分数;与健康人做对照.结果:放疗前sIL-2R显著增高(P<0.01),IgG及IgM亦增高(P<0.05),B细胞百分数低下(P<0.01),CD3+细胞降低(P<0.01),CD4+/CD8+比值降低(P<0.05);放疗后sIL-2R含量显著下降(P<0.01),IgG亦降低(P<0.05),B细胞百分数下降(P<0.05),CD3+细胞进一步下降(P<0.05),CD4+/CD8+比值亦降低(P<0.05);IgM和NK细胞放疗前后无变化.临床Ⅳ期者比Ⅱ、Ⅲ期者CD4+/CD8+比值更低(P<0.01).结论:放射治疗会使宿主机体免疫功能降低.