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化学合成小干扰RNA对PC12细胞N gR表达的影响

肖钢明;秦晓庆;周晓光

摘要: 目的: Nogo及Nogo-66受体(NgR)对抑制中枢神经系统再生有重要的作用。本文主要观察化学合成NgR特异性小干扰RNA(siRNA)对具有神经元分化潜能的克隆细胞系PC12细胞 NgR mRNA 和蛋白表达的影响。方法培养大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞 PC12细胞,神经生长因子(NGF)诱导使其分化为类神经细胞,化学合成一段针对大鼠NgR基因编码区的siRNA,用阳离子脂质体使之转染类神经细胞,转染后48 h,采用实时荧光定量PCR检测mRNA水平;并采用蛋白免疫印迹检测NgR蛋白表达的变化,检测干扰的效果。结果荧光定量PCR结果显示:转染后48 h NgR mRNA水平明显下降,差异具有显著性(P<0.05);同时蛋白免疫印迹结果显示,NgR蛋白表达水平与对照组比较也降低,差异同样具有显著性(P<0.05)。结论化学合成NgR特异性siRNA可以实现大鼠神经细胞内源性NgR基因沉默。

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