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人参皂苷Rg3影响EA.hy926人血管内皮细胞侵袭、增殖及微管形成的实验研究
目的 探讨人参皂苷Rg3抗肿瘤血管新生的作用机制.方法 用不同浓度的人参皂苷Rg3作用于体外培养的EA.hy926人血管内皮细胞株,采用transwell小室法观察细胞的侵袭能力,MTT法观察细胞抑制率,tube formation法观察微管形成情况.结果人参皂苷Rg3可以剂量依赖性地抑制EA.hy926细胞的侵袭能力及微管形成能力,但对EA.hy926细胞的增殖没有明显的抑制作用.结论人参皂苷Rg3的抗肿瘤血管生成作用不是通过直接抑制内皮细胞的增殖,而是通过抑制内皮细胞形成微管样结构及其侵袭能力来实现的.
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血府逐瘀汤对人脐静脉内皮细胞一氧化氮适度刺激作用的研究
目的:探讨血府逐瘀汤对人脐静脉内皮细胞一氧化氮(Nitric oxide,NO)产生的影响。方法:以人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cell -12,HUVEC-12)为材料,采用不同血府逐瘀汤含药血清浓度和干预时间处理HUVEC-12,检测细胞培养上清液中NO浓度的变化。结果:与空白对照组对比,血府逐瘀汤可在一定干预时间段,适度诱导HUVEC-12胞外NO的产生( P<0.05)。结论:血府逐瘀汤可能通过适度刺激人内皮细胞NO产生,发挥促进血管新生作用,又避免增生过度的不良反应。
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等离子体处理的丝素蛋白作为人内皮细胞培养基质的研究
目的:探讨人血管内皮细胞在等离子体处理后的丝素蛋白膜表面的生长情况.方法:等离子体由气体射频放电产生,工作气体为SO2和NH3;材料表面元素进行XPS分析;用MTT法测定人脐静脉内皮细胞系HUVEC细胞生长;用间接免疫荧光法检测该细胞内Ⅷ凝血因子相关抗原的表达.结果:SO2和NH3等离子体处理后,丝素蛋白膜表面分别被磺酸化和氨基化,并均能促进HUVEC细胞生长,而且对细胞形态和产生Ⅷ凝血因子的功能没有明显的影响.结论:等离子体处理的丝素蛋白可以作为人内皮细胞的一种良好的培养基质.
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Annexin A2与乳腺癌关系的研究进展
Ammexin A2又名P36、P39、Annexin Ⅱ、Calpactin Ⅰ重链、Lipoeortin Ⅱ,是Annexin蛋白(磷脂结合蛋白)家族13个成员中的一员,存在于人内皮细胞、单核细胞、巨噬细胞、神经细胞和一些肿瘤细胞,在增生和转化的细胞中高表达,在终末分化的细胞中低表达,早在急性早幼粒细胞白血病中发现Annexin A2高表达.近年来,Annexin A2越来越多的生物学效应被揭示,Annexin A2与其他Annexins不同,具有与RNA结合的特性,与DNA合成、复制相关,在肿瘤的发生、浸润和转移中起作用[1-2].
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阿托伐他汀对氧化低密度脂蛋白诱导的人内皮细胞环氧化酶-2表达的影响
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血清中抗血管内皮细胞抗体在系统性硬化病和系统性红斑狼疮中的临床意义
系统性硬化病(syatemic sclerosis,SSc)和系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)的病因未明,但血管炎症的发生是其免疫病理机制之一.许多研究表明,白细胞、内皮细胞和细胞外基质的相互作用在免疫系统的功能中发挥主要作用.这些相互作用对于SSc和SLE的发生至关重要[1],抗内皮细胞的自身抗体也参与血管损伤[2].国外曾在一些自身免疫性血管炎的病人血清中检测到抗体外培养的人内皮细胞的抗体(抗内皮细胞抗体,AECA)[3,4].但国内有关AECA的临床意义报道甚少.本研究通过检测SSc和SLE病人血清中的AECA,以探讨其临床意义.
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血府逐瘀汤干预时间对人内皮细胞分泌VEGF影响的研究
目的:探讨血府逐瘀汤对人内皮细胞VEGF分泌的影响.方法:以人脐静脉内皮细胞HUVEC-12为研究材料,观察血府逐瘀汤含药血清浓度和干预时间的变化对细胞培养上清液中VEGF含量的影响.结果:2.5%血府逐瘀汤可促进HUVEC-12 VEGF的分泌,且这种刺激作用仅发生于一定的干预时间段(P<0.05).结论:血府逐瘀汤可能通过诱导人内皮细胞VEGF分泌短暂性的增加,从而既促进血管新生,又避免增生过度的副作用.
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CC类趋化因子受体2在人内皮细胞迁移中的作用
目的:探讨CC类趋化因子受体2(CCR2)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)迁移的作用。方法 RT-PCR和Western-blot检测单核细胞趋化蛋白-1(MCP1)对HUVECs CCR2蛋白表达的影响。 Transwell实验观察CCR2拮抗剂对HUVECs迁移的影响。结果在 HUVECs中 CCR2蛋白表达存在 MCP1浓度依赖方式, Transwell 实验显示 CCR2拮抗剂(RS504393)抑制细胞迁移(P<0.01)。结论 CCR2对人内皮细胞迁移有促进作用,其作用与MCP1结合相关。
关键词: 单核细胞趋化蛋白-1 CC 类趋化因子受体2 人内皮细胞 细胞迁移 -
006 绿色链球菌对人内皮细胞的侵入和致死作用
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熊果酸对肝星状细胞烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶的影响
近年来研究表明,肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)表达的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NADPH oxidase,NOX)在肝纤维化发病中起关键作用[1].NOX产生的活性氧(reactive oxygen species,ROS)介导了各种促肝纤维化因子在HSC内的信号转导,有望成为抗肝纤维化的新靶点[2].熊果酸(ursolic acid)是从中药植物(如丹参、女贞子等)中提取的单体成分,具有保护肝细胞的作用[3],但其抗肝纤维化作用研究甚少.申月明等[4]在体外研究发现熊果酸能抑制HSC增殖,诱导其凋亡;体内实验证实熊果酸有显著的抗肝纤维化作用[5],但熊果酸抗肝纤维化的作用靶点及机制尚不清楚.Steinkamp-fenske等[6] 报道熊果酸能下调人内皮细胞NOX4的表达并抑制ROS的产生.本实验旨在观察熊果酸对HSC中NOX的影响,以探索熊果酸抗肝纤维化的作用靶点及机制.
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人脐静脉内皮细胞表达CD137分子及其功能的初步研究
目的了解人脐静脉内皮细胞(HUVEC)CD137分子的表达情况,探讨其对内皮细胞功能的影响.方法胰蛋白酶法分离培养人脐静脉内皮细胞,用RT-PCR、定量荧光PCR和流式细胞仪技术,分别观测未刺激和用内毒素(LPS)刺激的内皮细胞CD137 mRNA与蛋白的表达情况.用anti-CD137单克隆抗体交联内皮细胞表面CD137,ELISA检测其上清液中IL-8的含量.结果①RT-PCR和实时荧光定量RT-PCR结果显示,未经刺激的人脐静脉内皮细胞表达少量CD137 mRNA,流式细胞仪检测证实其细胞表面表达少量CD137蛋白;当用LPS刺激内皮细胞培养24h后,mRNA和蛋白表达量均显著提高.②ELISA检测发现,anti-CD137单克隆抗体交联内皮细胞表面CD137分子后,和同型抗体对照组相比,其培养上清液中细胞因子IL-8的表达量明显提高,与LPS刺激内皮细胞上调IL-8表达的程度相当.结论人脐静脉内皮细胞组成性表达少量CD137分子,LPS可以显著上调其表达.交联内皮细胞表面CD137分子可提高其IL-8产生和分泌,提示其具有刺激内皮细胞活化的生物功能.
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妊高征患者血清对内皮细胞分泌NO与ET-1的影响
目的:探讨妊高征患者血清中是否存在引起内皮细胞功能改变的因素以及与妊高征发生的关系.方法:无菌收集妊高征及正常孕妇产前静脉血制备血清.传代培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),当其融合为单层时,分别加入收集的产前血清,置37℃,5%CO2培养箱中孵育24 h,收集培养液,采用Griess法和放免法测定NO及ET-1含量变化.结果:①中、重度妊高征组HUVEC培养液中NO量明显降低,而轻度妊高征与正常妊高征组无差异.②中、重度妊高征HU-VEC培养液中ET-1量明显增高,而轻度妊高征与正常妊高征组无差异.结论:中、重度妊高征患者产前血清可能含有某些因素,可引起血管内皮细胞功能改变,使NO、ET-1的分泌失衡,从而出现妊高征的系列表现.
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辛夷挥发油对内皮细胞与中性粒细胞黏附的抑制作用
目的:探讨辛夷挥发油对内皮细胞与中性粒细胞黏附的抑制作用.方法:利用TNF-α诱导活化的内皮细胞与人外周血中性粒细胞的体外黏附实验,观察辛夷挥发油对其黏附功能的影响.结果:体外培养的人脐静脉内皮细胞在TNF-α刺激后,与人外周血中性粒细胞发生黏附,计数法计算的黏附量为248.6±13.8;而辛夷挥发油处理后,黏附量明显降低,在0.5、1.0、2.0μl/ml浓度的黏附量分别为191.6±8.2,158.2±9.0,155.2±9.7(均P<0.05).结论:辛夷挥发油能抑制活化的人内皮细胞与中性粒细胞黏附,具有抗炎与抗黏附效应.
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碱性成纤维细胞生长因子促进人内皮细胞αv整合素及MMP-1表达的研究
创伤修复是体内多种因子和细胞参与的复杂过程,碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)可影响创伤修复的整个过程,深入了解其作用机制有重要意义.笔者通过研究经bFGF刺激后人脐静脉内皮细胞(HUVEC)αv整合素表达及基质金属蛋白酶-1(MMP-1)分泌的情况,从而分析bFGF促进内皮细胞迁移、血管新生的可能机制,为进一步研究bFGF促进创伤修复作用提供依据.