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抗氧化性丝素蛋白水解产物的生产工艺及其改善过氧化氢所致HepG2细胞损伤机制
目的:抗氧化性丝素蛋白(SF)胰酶水解工艺的优化.研究水解物对过氧化氢(H2O2)造成人肝癌HepG2细胞损伤的改善作用,对其机制进行初步探讨.方法:以超氧自由基清除率为指标,设计正交试验考察丝素蛋白胰酶水解过程中反应时间、pH、温度、底物浓度、酶浓度对水解工艺的影响.测定水解产物的分子量分布及其对羟基自由基清除率和H2O2诱导的红细胞氧化溶血抑制率.用不同浓度H2O2处理细胞24 h,测定细胞活性,选择合适浓度的H2O2损伤细胞.然后再将细胞分为空白组(不加药物处理),H2O2损伤组,H2O2损伤+5 mmol·L-1N-乙酰半胱胺酸(NAC)治疗组,H2O2损伤+10,20,30,50 g·L-1 SF治疗组.观察细胞活性,丙二醛(MDA)含量,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性,过氧化氢酶(CAT)活性和总抗氧化能力(T-AOC)的变化.结果:佳水解工艺是酶浓度6％,反应时间160 min,底物质量浓度20 g·L-1,pH 8,温度38℃,此水解条件下所得水解液对超氧自由基清除率为72.73％,水解物分子量在10 kDa以下,对羟基自由基清除率和红细胞氧化溶血抑制率均提高.H2O2损伤细胞后细胞活性降低并且细胞中MDA含量增加(P＜0.05).与H2O2损伤组比较SF治疗组中细胞活性升高,MDA的含量也降低(P＜0.05).H2O2损伤细胞后,TNF-α含量上升,SOD,CAT的活性和T-AOC能力均下降(P＜0.05),SF治疗能降低TNF-α含量,提高SOD,CAT分泌量和增强T-AOC能力(P＜0.05).结论:抗氧化性丝素蛋白永解物对过氧化氢致HepG2细胞损伤有改善作用,机制是通过降低TNF-α含量,提高细胞活力和增加细胞中抗氧化酶活性.
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一种新的人工血管涂层及其实验研究
目的为克服目前使用的人工血管涂层材料性质普遍不稳定、不易提纯、交联用难且价格昂贵的缺陷,作者进行了人工血管丝素蛋白涂层的实验研究.材料和方法将丝素蛋白浸渍涂层涤纶人工血管内外壁并使用甲醛交联固定.通过血管壁渗水率、形态学以及力学性能等体外试验评价丝素蛋白涂层人工血管是否达到人工血管植入前标准.结果未涂层人工血管管壁渗水率通过丝素蛋白涂层降低了99%,达到植入时不漏血的目的.丝素蛋白涂层占重(117±22)mg/g显著低于较InterGardTM血管胶原涂层占重(302±23)mg/g(P＜0.05).结论丝素蛋白涂层人工血管可操控性好,渗水率低.同时在体外具备良好的生物降解性能.
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静电纺丝丝素蛋白水溶液制备无纺布
对不同条件下的丝素蛋白水溶液静电纺丝进行研究.在扫描电子显微镜(scanning electronic microscope,SEM)下观察了不同条件下制备出的丝素蛋白纤维的微观形貌,并用傅立叶变换红外光谱(Fourier transform infrared,FTIR)分析丝素蛋白在产物中的构象.结果 表明,丝素蛋白无纺布中的丝素蛋白以无规线团/silk Ⅰ为主,甲醇处理后,丝素蛋白无纺布中β折叠的含量明显增加.本研究为静电纺丝法制备丝素蛋白无纺布提供了新的途径,这种无纺布由于在制备过程中没有使用有机溶剂作静电纺丝溶剂,也没有共混其他聚合物,减少了溶剂残留并简化了制备过程,它将可被用于组织工程支架.
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含种子细胞的丝素组织工程神经移植物修复大鼠脊髓损伤
目的 探讨体外构建含种子细胞的蚕丝丝素组织工程神经移植物(TENGs)的方法,评价其对大鼠脊髓损伤修复的影响.方法 分离大鼠皮肤前体细胞并向施万细胞诱导分化,S-100免疫荧光染色鉴定.将皮肤前体细胞诱导分化的施万细胞(SKP-SCs)作为种子细胞,联合蚕丝丝素神经导管和纤维支架共培养.共培养7d后将蚕丝丝素TENGs置入大鼠背侧T8～T10半横断损伤的脊髓中,于术后不同时间点利用BBB评分观察行为学的变化,术后8周取材,切片,免疫荧光染色观察脊髓损伤修复情况以及种子细胞的存活情况.结果 相差显微镜下体外培养的SKP-SCs大部分细胞形态呈双极或3极,免疫荧光染色显示,SKP-SCs呈S-100阳性,将SKP-SCs与蚕丝丝素支架材料共培养,蚕丝丝素支架表面均匀贴附大量的细胞,生长状态良好.将该移植物移植入大鼠T8～T10半横断损伤脊髓处,术后BBB评分显示,从4周起至8周均优于对照组,且结果具有统计学差异;术后8周时取材切片仍能观察到大鼠体内有大量种子细胞存活.结论 含种子细胞的蚕丝丝素组织工程神经移植物对于修复大鼠脊髓损伤具有一定的促进作用.
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不同孔径丝素蛋白支架体内降解观察
近年来,丝素蛋白支架因其固有的低免疫原性、良好的生物相容性在组织工程研究中备受关注.通过观察不同孔径丝素蛋白支架在活体Sprague-Dawley(SD)大鼠体内不同时间点降解的形态学特点,了解材料的结构特性对丝素蛋白支架降解的影响.将3种不同孔径丝素蛋白支架:SF1(平均孔径(20±1.5)μm,平均孔隙率86.8％±0.2％)、SF2(平均孔径(100±8) μm,平均孔隙率92.4％ ±0.1％)、SF3(平均孔径(200±15)μm,平均孔隙率96.6％±0.1％)随机植入12只SD大鼠背部皮下,分别于术后6、12、18、24周随机取材,分别进行大体观察、组织切片HE染色和Masson染色.结果显示,不同孔径丝素蛋白支架在体内的降解速率不同:SF1 24周内未见明降解,SF2 24周内降解约40％,SF3至24周时基本崩解.植入早期丝素蛋白支架主要被炎性细胞及成纤维细胞浸润,后期主要为成纤维细胞,并可见胶原纤维包绕并生长入材料.孔径较大的丝素蛋白支架比孔径较小的降解速度快,可通过改变丝素蛋白支架的孔径有效干预丝素蛋白支架在生物体内的降解速率,以适应不同组织修复的需求.
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等离子体处理的丝素蛋白作为人内皮细胞培养基质的研究
目的:探讨人血管内皮细胞在等离子体处理后的丝素蛋白膜表面的生长情况.方法:等离子体由气体射频放电产生,工作气体为SO2和NH3;材料表面元素进行XPS分析;用MTT法测定人脐静脉内皮细胞系HUVEC细胞生长;用间接免疫荧光法检测该细胞内Ⅷ凝血因子相关抗原的表达.结果:SO2和NH3等离子体处理后,丝素蛋白膜表面分别被磺酸化和氨基化,并均能促进HUVEC细胞生长,而且对细胞形态和产生Ⅷ凝血因子的功能没有明显的影响.结论:等离子体处理的丝素蛋白可以作为人内皮细胞的一种良好的培养基质.
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丝素蛋白作为药物缓释载体的研究进展
药物缓释体系有利于提高药物疗效、降低毒副作用,可减轻病人多次用药的痛苦,对于提高临床用药水平具有重大意义[1],是近年来国际范围内研究的热门的领域之一.在药物缓释体系中,除药物本身外,药物载体也扮演着重要角色,合成高分子载体常常生物相容性不好,有时还含有痕量引发剂等毒性杂质,例如在聚乳酸的一般生产方法中使用了有机锡催化剂,会产生细胞毒性[2].
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纯镁超声微弧氧化-植酸-丝素复合处理种植体的体内降解特性
目的 为了实现纯镁种植体在体内的降解特性可调控,并赋予材料表面活性,将纯镁超声微弧氧化膜层进行植酸封孔后再进行丝素沉积,研究其可降解和骨生长关系.方法 纯镁MAO种植体为对照A组、纯镁MAO-植酸复合膜层种植体为实验B组、纯镁MAO-植酸-丝素蛋白复合膜层种植体为实验C组.将三种种植体植入兔下颌骨内,通过血尿镁离子测定检查、CBCT、SEM扫描电镜来观察不同种植体的降解特性和骨愈合情况.结果 血尿镁离子测定检查都在正常的范围,CBCT显示骨愈合情况C组＞B组＞A组,SEM电镜显示降解速率A组＞B组＞C组.3组的实验结果都具有统计学意义.结论 三组材料相比较,纯镁MAO-植酸-丝素蛋白复合处理的种植体减缓降解速率,有利于骨固定促进骨愈合佳.
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纯Mg超声微弧氧化表面载丝素蛋白涂层体内生物活性
目的 控制医用Mg在体内的降解速率,实现降解产物的吸收和提高种植体表面的活性.方法 纯Mg表面超声微弧氧化、碱处理、浸渍复合处理,研究表面丝素浸泡时间对多元膜层体内植入结合力和骨生长的影响.实验分为超声微弧氧化(UMAO)A组、超声微弧氧化-碱处理-硅烷-丝素浸0.5h的B组和浸1.5h的C组,扫描电镜观察涂层形貌,全数字化口腔CT(CBCT)检测植入后骨结合状态,苏木精伊红(HE)染色观察骨组织生长情况.结果 Mg超声微弧氧化经NaOH处理,硅烷偶联丝素蛋白多级组装,填充了涂层的孔隙,达到了封孔,起到了控制Mg体内降解速率的作用,随着浸渍丝素时间增加,骨结合和骨生长情况均为C组＞B组＞A组,体内降解的腐蚀产物得到吸收.结论 纯Mg表面通过超声微孤氧化-碱处理-硅烷偶联-丝素/1.5 h组装多元膜层具有促进骨结合和骨生长的能力.
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超声成像技术评估丝素蛋白体内降解及血管化的可行性
目的 评估超声成像技术动态检测大鼠腿部皮下及肌肉间丝素蛋白在体降解及血管化的可行性.方法 制备8％W/V的丝素蛋白溶液,采用超声波振荡制备丝素蛋白凝胶.将40只雄性Wistar大鼠随机分为皮下植入组(n=20)及肌肉植入组(n=20),取0.2 ml丝素蛋白凝胶分别植入大鼠腿部皮下或肌肉间(股直肌与半腱肌的肌间隙).于植入后的即刻及1、4、8、12、16、18周分别对丝素蛋白凝胶进行二维超声及CEUS,并测量丝素蛋白凝胶的径线值及声学强度;每次成像后,每组随机选取两只大鼠处死,将植入的丝素蛋白凝胶取出进行病理学检查.结果 二维超声测量显示12周后两组的凝胶开始变薄,12周时横径与植入后即刻的凝胶横径差异有统计学意义(P均＜0.05);16周时两组凝胶的横径、宽径和纵径与植入时比较差异有统计学意义(P均＜0.05).CEUS示1～8周凝胶内的声学强度呈现相对较低水平(＜5 dB),12周后凝胶内部逐渐有造影剂的灌注,16周时声学强度增强可达20 dB,18周时原植入凝胶的区域造影剂灌注与周围组织增强强度接近.结论 皮下及肌肉间隙内植入的丝素蛋白凝胶的降解速率基本一致,二维超声及CEUS可在体实时评估丝素蛋白凝胶的降解及血管化.
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不同直径丝素蛋白纳米纤维对嗅鞘细胞生长影响的研究
目的 探讨不同直径丝素蛋白纳米纤维(SFS)对嗅鞘细胞(OECs)生长及迁移的影响,为脊髓损伤(SCI)修复材料的选择提供实验基础和理论依据.方法 运用静电纺丝技术制备SFS,并通过扫描电镜观察.取SD大鼠嗅球新鲜分离的OECs,采用改良差速贴壁法纯化培养.将纯化后的OECs分别接种至以左旋多聚赖氨酸(对照组)和SFS(400 nm,1200 nm)(实验组)包被盖玻片的培养皿中进行复合培养.复合培养不同时间点行倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞形态、生长、分布及与材料黏附情况.NGFR p75及GFAP免疫荧光染色测定细胞表型,MTT法测定支架材料上OECs的增殖情况.结果 倒置相差显微镜示SFS上培养的OECs与对照组相比,细胞沿丝素纤维迁移,细胞突起方向走向较一致,形态特征无明显差异.扫描电镜观察显示SFS平均直径约为(395±3)nm、(1210±7)nm,纤维呈三维立体网状结构,分布均匀,OECs与材料结合紧密,且细胞突起方向与纤维走向较一致,形态与对照组无明显差异.培养4 d时,免疫荧光染色显示实验组NGFR p75/GFAP阳性,OECs在SFS材料上仍保留其特有的表现型.MTT检测显示:培养第4天时,对照组OECs的吸光度值较1200 nm直径的材料OECs的吸光度值有统计学差异(P<0.05),培养第7天时,对照组OECs的吸光度值较实验组吸光度值有统计学差异(P<0.05),而且OECs在400 nm SFS材料上的吸光度值比在1200 nm SFS材料上的吸光度值高,有统计学差异(P<0.05).400 nm SFS相比1200 nm SFS更能促进OECs的增殖.死活细胞染色试剂检测显示:在培养第4、7天时,实验组细胞形态较对照组正常,成活率较高,两组死亡细胞数比较无明显差异.流式细胞术检测结果显示:在培养第4天时,实验组OECs较对照组OECs的凋亡率无统计学差异(P>0.05).结论 不同直径SFS对OECs的生长与迁移均具有支持作用,SFS有望成为一种新型的组织工程支架材料结合OECs移植修复脊髓损伤.
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聚己内酯/丝素蛋白复合支架与人永生化尿路上皮细胞系共培养的实验研究
目的：探讨人永生化尿路上皮细胞系（immortalized human bladder urothelium cell line） SV-HUC-1在聚己内酯/丝素蛋白[Poly（ε-caprolactone）/silk fibroin，PCL/SF]支架中的生长情况，为进一步体内组织修复提供依据。方法制备疏松多孔的PCL/SF支架材料，SV-HUC-1传代扩增后，接种在PCL/SF上，体外培养7 d后取材，观察SV-HUC-1和PCL/SF的复合情况。结果 SV-HUC-1呈“多角形”、“铺路石”样，以克隆团形式生长。HE染色显示PCL/SF支架上的SV-HUC-1经过体外培养7 d后即可形成沿支架表面排列的复层上皮结构，部分SV-HUC-1渗透到PCL/SF的空隙内。扫描电镜显示细胞材料复合良好。结论 PCL/SF能支持SV-HUC-1良好的生长，该支架可以作为载体材料，用于组织工程膀胱修复的研究。
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丝素蛋白/壳聚糖生物支架复合骨髓间质干细胞修复老年兔软骨缺损
目的 探讨丝素蛋白(SF)/壳聚糖(CS)生物支架复合诱导后骨髓间质干细胞(BMSCs)修复老年兔膝关节软骨缺损的可行性. 方法 分离培养及诱导BMSCs,将成功诱导后的BMSCs接种在SF-CS生物支架上构成修复体.54只16～18月龄兔,随机分为支架修复体组、单纯支架组和对照组,每组18只.采用右膝关节制备软骨缺损模型并植入支架.术后4、8、12周取材进行大体观察,组织学染色和改良Wakitani法组织学评分. 结果 SF-CS支架为相通性好的多孔结构,孔径平均151.72 μm,孔隙率为(92.72±4.78)％,吸水膨胀率为(141.10±6.87)％.BMSCs诱导后在SF-CS支架上生长良好,增殖活跃.12周时,支架修复体组软骨缺损基本修复,Ⅱ型胶原明显的阳性反应,生物材料基本吸收；单纯支架组以纤维样组织修复为主,Ⅱ型胶原阳性反应弱,未见支架残留；空白对照组修复不良；改良Wakitani评分显示支架修复体组优于单纯支架组和对照组(P＜0.05).结论 SF-CS生物支架可以作为BMSCs载体修复老年兔膝关节软骨缺损.
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丝素蛋白复合物在骨缺损中的应用
由于创伤、肿瘤或先天发育不足等原因导致人体的骨组织缺损较常见.这将导致骨骼的外形和功能出现缺陷,从而不同程度地影响患者的生活质量,因此骨缺损的修复一直是骨外科临床中关注的焦点之一.其中对于较大范围的骨缺损,采用人工材料填充骨缺损的手术已成为目前研究的热点.它几乎可以避免自体骨及同种或异体骨移植的大多数问题.而对于人工材料的主要问题仍是探求理想的骨移植替代材料.丝素蛋白是一种天然高分子纤维蛋白,文献证明它不仅具有良好的生物相容性和降解性能,还有易加工修饰、降解产物无毒性和低免疫原性等特点,并且丝素蛋白 ( silk fibroin,SF ) 材料的机械强度也明显优于其它生物材料.因此,许多研究者将成骨种子细胞和丝素蛋白结合起来制备具有骨修复能力的丝素蛋白材料,材料中的丝素蛋白可为细胞生长、黏附和分化提供所需的空间及环境.丝素蛋白骨修复材料的研发已经成为骨组织工程研究的热点之一.
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静电纺丝素蛋白材料复合尿路上皮细胞修复尿道的实验研究
目的 评估拉伸处理后的静电纺丝素蛋白材料与尿路上皮细胞复合在尿道重建中的应用效果.方法 2012年1-9月,制备新型的经拉伸处理的静电纺丝素蛋白材料.使用扫描电镜检测和孔隙率检测方法评估丝素材料结构.使用9只比格犬作为实验动物,其中实验组6只、对照组3只.从实验组动物中获得、培养、扩增其尿路上皮细胞,并种植于材料上,培养1周,获得组织工程移植物,并经过HE染色剂扫描电镜检测.实验动物被剥离尿道黏膜3 cm×1 cm,实验组应用组织工程移植物进行修复,对照组未进行修复.术后1、2及6个月后,进行尿道造影及组织学检测.结果 扫描电镜及孔隙率检测显示经拉伸处理的静电纺丝素蛋白材料为三维多孔结构.尿路上皮细胞在丝素材料上生长良好,在材料表层多层生长,且细胞能渗透入材料内部.在动物实验中,实验组动物未表现排尿困难,尿道造影示尿道未见明显狭窄,组织学检测显示术后1个月1～2层上皮细胞覆盖修复部位,上皮细胞逐渐生长,在术后6个月形成典型的尿路上皮细胞结构.对照组动物出现排尿困难,尿道造影示尿道管腔狭窄,组织学检查显示上皮细胞生长缓慢,术后1个月未形成或仅见断续上皮层,并可见较严重的炎性反应,术后2个月形成2～3层细胞结构,术后6个月尚未形成完整的尿路上皮层.结论 拉伸处理后的静电纺丝素蛋白材料有良好的生物相容性.复合尿路上皮细胞的静电纺丝素蛋白材料或可成为潜在的尿道重建材料.
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丝素蛋白载体负载神经生长因子在周围神经损伤修复中应用的实验研究
目的 研究丝素蛋白载体负载神经生长因子(NGF)在动物体内修复周围神经缺损的效果.方法 将24只要SD大鼠随机分为4组:A组、B组、c组、D组,每组6只,其中A组以丝素蛋白载体承载NGF,B组行自体神经移植,c组应用生理盐水+NGF,D组使用空白对照.术后12周测量各组修复神经动作电位幅度和传导速度,行苏木精-伊红(HE)染色观察再生神经纤维,透射电镜观察再生神经轴突和髓鞘的超微结构.应用统计学方法分析相关实验资料.结果 12周后A组神经传导速度、动作电位幅度同C、D组相比差异有统计学意义(这P<0.05),同B组相比差异没有统计学意义(这P>0.05);HE染色可见A、B组再生神经纤维量较多、直径粗大,D组神经纤维数量相对较少,直径细小,C组神经纤维数量少,有大量无髓神经纤维生成;透射电镜观察A组、B组神经纤维髓鞘厚度较厚,轴突结构完整,D组神经纤维髓鞘厚度较薄,c组神经纤维髓鞘厚度细小,轴突结构不完整.结论 丝素蛋白生物相容性好,作为载体能够控释NGF,在修复周围神经缺损中发挥了良好作用.
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丝素真皮组织支架应用对创面愈合过程中微血管形成的影响
目的 动态观察丝素真皮多孔支架于大鼠皮肤缺损创面应用后的血管化过程.方法 以大鼠背部皮肤缺损为动物模型,将50只SD大鼠随机分为实验组和对照组,每组25只.实验组采用丝素多孔支架加自体薄皮复合移植的方法,修复真皮组织缺损创面,对照组以海绵加自体薄皮移植作为对照.分别于术后l周、2周、3周、4周和6周取材,HE染色观察创面组织学变化,免疫组化法分别检测标本中CD34和血管内皮生长因子(VEGF)的表达.结果 光镜下观察两种材料植入后,1周后可见对照组炎症反应明显,实验组肉芽组织化较快.随着材料肉芽组织化,植入材料逐渐降解,以对照组较为明显.在第6周,可见丝素支架内完全充满组织,细胞数量减少,胶原排列呈编织状,形成组织相对成熟.而对照组部分区域未完全充满组织,细胞数量较多,形成组织相对幼稚,胶原排列有时呈现集束状.免疫组化显示:在术后1～4周,两组创面组织中CD34和VEGF表达逐渐升高,实验组VEGF在第3周达到高峰(15.8±3.7)％,CD34在第4周达到高峰(8.4±2.0)％,对照组二者表达高峰滞后.实验组CD34表达在第2、3、4周均高于对照组,两组比较差异有统计学意义(t值分别为0.031、0.022、0.039,P＜0.05).实验组VEGF表达在第2、3、4周均高于对照组,两组比较差异有统计学意义(t值分别为0.023、0.033、0.041,P＜0.05).结论 丝素多孔真皮支架与自体薄皮复合移植后,早期可以促进VEGF和CD34表达,有利于组织血管化,后期促进组织成熟,加快组织重塑化过程.
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胰岛素基因转染的人脐带间充质干细胞与丝素蛋白支架构建组织工程脂肪的研究
目的 探讨携带重组人胰岛素基因慢病毒载体转染的人脐带间充质干细细( human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)与丝素蛋白支架在体外构建组织工程化脂肪(tissue engineering adipose)的可行性.方法 以适感染复数(MOI)为10重组慢病毒pLenti6.3-insulin-IRES-EGFP转染hUCMSCs组为实验组(A组),EGFP基因转染组为对照组(B组)；将两组细胞接种于丝素蛋白支架,观察细胞在支架上的生长及黏附情况；尔后行细胞-支架复合物成脂诱导.四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测重组慢病毒转染对hUCMSCs生长增殖的影响以及基因转染后的hUCMSCs在丝素蛋白支架上的活性.结果 细胞-支架复合物成脂诱导5～7 d后,见A组支架内脂肪样细胞数量明显多于B组,差异有显著统计学意义(P=0.007,P＜0.01)；逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测显示,A组hUCMSCs表达的成脂特异性基因PPARγ-2明显高于B组.MTT法检测结果显示,转染重组慢病毒的hUCMSCs与未转染组各时间点吸光度A值比较,差异均无统计学意义(P=0.056,P＞0.05).细胞组与细胞支架组A值比较,差异无统计学意义(P=0.066,P＞0.05).结论 转染胰岛素基因的hUCMSCs成脂分化能力明显提高,且能有效地与丝素蛋白支架在体外构建组织工程化脂肪.
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生物活性玻璃-丝素蛋白复合膜支持人牙髓干细胞增殖与分化初探
目的 探讨生物活性玻璃45S5-丝素蛋白(bioactive glass 45S5-silk fibroin, BG45S5-SF)复合膜对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cell,hDPSC)生长、增殖、分化的影响,为牙髓-牙本质复合体再生提供新思路和新方法.方法 制备纯丝素蛋白膜(蛋白膜组)、含不同质量浓度(1000和5000 mg/L)BG45S5-SF复合膜(复合膜A组和B组),以无材料膜的孔板为空白对照组.接触角仪测量蛋白膜组和复合膜组表面接触角(每组3个复孔).4组预孵24 h后接种hDPSC,培养第4、7、14、21天检测hDPSC增殖能力;扫描电镜和免疫荧光染色观察hDPSC黏附和生长;碱性磷酸酶活性评估hDPSC分化潜能;实时定量PCR检测hDPSC的成牙本质细胞向分化基因表达水平.结果 蛋白膜组、复合膜A组和B组表面接触角分别为89.51°±0.12°、70.32°±0.07°和71.31°±0.09°.hDPSC在丝素蛋白膜及BG45S5-SF复合膜上均黏附生长良好.复合膜A、B组第7、14、21天碱性磷酸酶活性及分化基因较空白对照组和蛋白膜组显著上调(P＜0.05).复合膜A组牙本质基质蛋白1、牙本质涎蛋白、碱性磷酸酶、骨钙蛋白mRNA表达第14天达峰值,复合膜B组第21天达峰值;复合膜A、B组骨涎蛋白mRNA表达均在第21天达峰值.结论 BG45S5-SF复合膜不仅能支持hDPSC黏附、生长与增殖,还能促进hDPSC的成牙本质细胞向分化,提示BG45S5-SF复合膜有促进牙髓-牙本质复合体再生的潜能.
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丝素蛋白在骨组织工程中的应用进展
丝素蛋白作为一种天然生物材料,具有良好的生物相容性、可控的生物降解性、渗透性、高抗拉强度和低免疫原性等特征,容易被加工成凝胶、薄膜、纳米纤维、纳米颗粒和支架等结构,在生物技术、材料科学、医学和药物学中具有广泛应用前景.本文综述近年来丝素蛋白在骨组织工程中的应用进展.
