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血浆纤维蛋白原的免疫比浊法
纤维蛋白原(Fbog)的测定越来越被临床重视,因纤维蛋白原的高低与多种疾病有关,成为重要的检测项目,但目前测定纤维蛋白原的方法都不甚理想.我们用山东3V集团公司生产的免疫比浊法纤维蛋白原试剂盒较为满意,该法操作简单、迅速、敏感性高、特异性强、不受高浓度甘油三酯、球蛋白、抗坏血酸等干扰,上机手工均可,易于推广应用.现介绍如下.1 原理将纤维蛋白原作为抗质免疫动物,制成单克隆抗体,该抗体与人血浆中的纤维蛋白原在液相中相遇,立即形成抗原——抗体复合物,形成一定浊度.该浊度的高低在一定量抗体存在时与抗原的含量成正比,测定标准及标本的吸光度,即可求出其含量.
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人尿中硫氰酸盐的快速测定方法
目的 建立一种快速测定人尿中硫氰酸盐的方法.方法 采用三氯化铁分光光度法,准确吸取5.00 ml样液于10 ml带塞比色管中,然后加入0.2ml三氯化铁溶液,加塞摇匀放置10 min后,用1 cm比色杯,纯水调零,在波长465 nm处测定吸光度.结果 对3份不同试样按本方法的试验操作条件,6d内重复测定6次,3份不同试样的平均值((x))分别为1.23、8.60、12.60;标准偏差(s)分别为0.02、0.03、0.04;变异系数(CV)分别为1.63%、0.35%、0.32%;在3份不同试样中分别加入不同量的硫氰酸盐标准溶液,分别测定,3份不同试样的回收率分别为92.2%、92.7%、94.3%.结论 用该方法测定人尿中硫氰酸盐的含量,其精密度试验和回收率试验结果令人满意.
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浅谈分光光度法常规分析中几种影响因素
在日常工作中,影响分析测定的因素一个是分光光茺计本身仪器校正的客观影响,如对波长的校正,吸光度的校正,杂散光的校正,比色皿的校正等,这项工作一般由计量部门鉴定.
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邻近线背景扣除在火焰原子吸收中的应用
火焰原子吸收分光光度法测定金属中的铅已广泛得到应用,但对无背景校正装置的仪器,在测定高盐食品如酱油中铅含量时干扰很大无法测定,本文采用邻近线背景扣除火焰原子吸收法,从待测元素的吸光度减去非吸收线测得的吸光度,其总值之差就是原子吸收部分,达到扣除背景吸收的目的,不需要换光源,只要改变波长即可,方法简便,在一定范围内干扰小,测定结果较满意.
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甲基紫褪色分光光度法测定腌制食品中亚硝酸盐
有些蔬菜、水果中含有一定量的硝酸盐或亚硝酸盐,尤其是不新鲜或腐烂、腌制的蔬菜、水果中含量较高.大量的亚硝酸盐可引起中毒,不足中毒剂量的亚硝酸盐,在一定条件下可形成具有致癌作用的亚硝胺类化合物.因此,亚硝酸盐含量的检测在食品卫生中具有重要意义.常用的亚硝酸根检测方法有比色法和示波极谱法[1-3].本文研究了利用亚硝酸根对甲基紫的褪色作用,建立了腌制食品中亚硝酸盐的测定方法.甲基紫对570nm波长的光有较强吸收,在酸性介质中,由于亚硝酸根对甲基紫分子中的仲胺位氢发生了取代而使吸光度减少,其减少值△A与亚硝酸根浓度呈线性关系.籍此,可对亚硝酸盐进行测定.
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N波长分光光度法测定N组分的研究
N波长分光光度法测定N组分是一种计算测定法,通过N波长分光光度法求得的被测组分在吸收峰处的吸光度与单波长法测同量纯组分的吸光度一致.可以消除其他任何有吸收组分在吸收峰处的影响.由于选择测定波长简单、灵活,计算简便、迅速,开拓了分光光度法同时测定混合组分的应用范围.经实验验证和合成样品的实际测定,结果满意.现介绍如下:
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火焰原子吸收法直接测定水中镉
通常情况下,生活饮用水及水源水中镉含量较低,需经过络合-萃取.用MIBK萃取分离出待测元素镉,然后导入火焰原子化器.待测元素的基态原子吸收来自同种元素空心阴极灯发出的特征谱线(Cd-228.8nm),其吸光度与待测元素的浓度成正比[1].若含量较高,一般在0.05~2.0mg/L的范围内可直接在火焰原子化器中进行测量[2].
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721型分光光度法测定棉籽油中游离棉酚
目前棉酚测定中,国标(一)法为紫外分光光度法,仪器用紫外分光光度计.由于吸收波长为378nm,此波长介于紫外光区与可见光区交界处,721型分光光度计的工作范围在360~800nm,本文用721型分光光度计在378nm波长处测定棉酚的吸光度,取得了理想的效果.现介绍如下.1 实验方法1.1 原理:样品中游离棉酚经用丙酮提取后,在378nm有大吸收,其吸收值与棉酚量在一定范围内成正比,与标准系列比较定量.
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硼酸-碘化钾紫外分光光度法测定饮用纯净水中残留臭氧
用紫外分光光度法测定饮用纯净水中残留臭氧:水样中的臭氧经净化后的空气吹出,用硼酸-碘化钾作为吸收液,臭氧氧化KI生成单质I2,在352nm紫外波长处吸光度-浓度存在良好线性关系.用KIO3与过量KI在酸性条件下立即反应,产生的单质I2作为相当剂量的臭氧标准液.结果臭氧浓度在0~30.0μg/25.0ml范围内,标准曲线回归方程为:Y=0.0227X-3.30×10-3,相关系数r=0.9999.对18.9L桶装饮用纯净水样品中残留臭氧进行了测定,本法具有快速、准确、操作简便等优点.
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卫生理化检验中空白值扣除的探讨
在卫生理化检验中,无论是食品检验、水质检验还是职业卫生检验,每一种监测检验方法都有详细的监测检验步骤,但在后计算结果扣除样品空白时,有的书上并不很详细,只是说"同时做空白试验"或者说"减去空白值"之类的话,对容量法来说,都采用样品消耗体积减去空白对照消耗体积来进行计算,这并不会引起争议,但对分光光度法来说,扣除空白值却有两种方法,而这两种方法结果却又不尽相同.
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标准加标回收实验方案探讨
吸光光度法中,若溶液对光吸收服从比尔定律,则溶液的浓度与吸光度成线性关系.但在实际工作中,标准曲线并非完全直线,尤其当浓度较低或较高时,直线常发生弯曲,即出现对比尔定律的偏离[1].为了解标准偏离曲线程度,减少样品测量误差,特提出一种标准加标回收实验方案.
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癫痫与心肌缺血精神分裂症患者缺血修饰性清蛋白水平对比研究
目的 了解癫痫患者血清缺血修饰性清蛋白水平,为揭示癫痫病患者近期发作状况及并发症的发生机制提供依据.方法 利用人血清清蛋白结合钴间接测定血清缺血修饰性清蛋白,建立自动化检测方法,对28例原发性癫痫病患者、41例急性心肌缺血患者、21例精神分裂症患者及112名健康志愿者进行血清缺血修饰性清蛋白水平检测分析.结果 本研究批内和批间变异系数分别为0.85%和6.70%,诊断的阳性率和特异性可达87.80%和92.50%.对照组游离钴显色率及吸光度与心肌缺血组和癫痫组比较差异有极显著性(P<0.01),与精神分裂症组比较差异无显著性(P>0.05);心肌缺血组与癫痫病组和精神分裂症组比较差异有极显著性差异(P<0.01);癫痫病组与精神分裂症组比较差异有极显著性(P<0.01).结论 血清清蛋白结合钴间接测定血清缺血修饰性清蛋白不仅是评价急性心肌缺血非常有价值的生化指标,对癫痫病患者近期发作情况及并发症的早期监测和预防具有重要意义.
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正常人黄斑区视网膜神经纤维层OCT光学特征与年龄的关系
背景 Cirrus光学相干断层扫描(OCT)测量视网膜神经纤维层(RNFL)已广泛用于眼科临床,基于OCT的光学特征,其在某些眼科疾病的检测中可以弥补空间测量的不足,但目前相关研究较少. 目的 观察正常人RNFL的OCT光学特征,研究其与年龄的关系. 方法 纳入2011年6月至2012年6月在上海市北医院体检的健康者406人,年龄40 ~ 83岁,平均58.6岁,均纳入一侧眼统计.采用Cirrus OCT的5线扫描模式测量黄斑区RNFL,使用图像处理软件分析RNFL的光学特征,包括吸光度(A)值和吸光系数,比较不同年龄层次不同性别间的测量结果,对RNFL的A值和吸光系数与受试者年龄的关系进行分析. 结果 共纳入353名受试者,受试者RNFL厚度、A值和吸光系数的平均值分别为(35.1±4.4) μm、121.6±5.3和2.06±0.25.RNFL厚度、A值与受试者年龄均呈线性负相关(r=-0.487、-0.571,均P<0.01),回归方程分别为Y=-0.17 X+45.23、Y=-0.24 X+135.82,而RNFL吸光系数则与受试者年龄呈正相关(rs=0.368,P<0.01),一元回归方程为Y=0.01 X+1.63.受检眼RNFL厚度和RNFL A值与OCT信号强度间均呈微弱正相关(rs=0.128,P=0.016;rs=0.284,P<0.01),而RNFL吸光系数与OCT信号强度间无明显相关关系(rs=-0.053,P=0.319).结论 正常人RNFL的OCT光学特征参数受年龄的影响,在研究RNFL的光学特征变化时,应考虑年龄因素.
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分光光度法测定苯甘孢霉素
苯甘孢霉素(头孢氨苄C16H17N2O4S@H2O)是一种广谱抗生素药品,目前在临床上的应用较为广泛.药典测定其含量的方法是采用间接碘量法[1],本文采用以对苯醌为显色剂的光光度法对苯甘孢霉素含量进行了测定.苯甘孢霉素分子中的β-内酰胺环在酸性条件下易水解断裂,生成水解产物中与H+结合后的氨基、羧基等不易发生配位反应,只有苯基可以作为给电子体与对苯醌形成π-π配合物.通过在特定波长下测定配合物的吸光度,得知苯甘孢霉素的含量.
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影响TRIzol提取RNA质量的因素分析
目的 使用TRIzol法提取RNA,分析在不同种类、不同浓度试剂残留时RNA的吸光度及曲线变化,以阐明影响RNA纯度的因素.方法 使用TRIzol试剂提取杜氏盐藻中RNA,经酚、氯仿、异戊醇抽提,醋酸钠和乙醇沉淀、纯化后制成标准品,与不同浓度的酚、TRIzol、氯仿、乙醇、牛血清白蛋白(BSA)等量混匀后制成待测定溶液,使用NanoDrop 2000测定其在230、260、280 nm处的吸光度,计算比值并观察其吸收曲线.结果 在不同浓度的酚和TRIzol及0.5 g·L-1BSA残留时,RNA的吸光度比值与吸收曲线均有较明显的变化;高浓度的氯仿残留时其吸光度与吸收曲线的变化较低浓度的变化明显;高浓度的乙醇残留对RNA溶液的吸光度及曲线影响较小,而低浓度的残留反而有较大影响.结论 根据RNA溶液的吸光度比值及曲线共同分析可快速准确判断影响RNA质量的残留试剂.
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延长不同实验步骤温育时间对 HBsAg 酶免结果的影响
目的:探讨延长不同实验步骤温育时间对乙肝表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)酶联免疫吸附实验(enzyme -linked immunosorbent assay,ELISA)结果的影响,从而保证检测结果的准确性和精确性。方法在其他实验参数不变的条件下,通过延长加酶前、加酶后、显色等步骤的温育时间,分别对强阳性、中阳性、弱阳性、阴性标本进行检测,所得数据采用 SPSS 17.0软件进行相关分析。结果①延长加酶前温育时间对强阳性和弱阳性标本的影响差异具有统计学意义,强阳性标本吸光度明显下降,弱阳性标本明显加强,并与延长的时间密切相关。②延长加酶后温育时间对各标本吸光度(阴性除外)影响显著。③延长显色时间对实验结果影响并不明显。④延长各反应步骤温育时间对 HB-sAg 阴性标本吸光度影响均无统计学意义。结论选择正确的步骤适当延长温育时间可提高 ELISA 实验结果的准确性和弱阳性标本的检出率。
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ICP-AES法测定食品中铝含量
人体摄入铝后大部分会在体内蓄积,与多种蛋白质、酶等人体重要成分结合,影响体内多种生化反应.目前食品中测铝的方法主要有分光光度法,石墨炉原子吸收法,ICP-AES,ICP-MS等方法[1-3].用于日常检测工作的方法一般首选国标GB/T5009.182-2003[4],分光光度法因操作繁琐,空白值高,灵敏度低,显色反应选择性差,实验条件中对pH值要求高,样品制备液中残留高氯酸对吸光度的影响较为明显[5-6].石墨炉原子吸收法对石墨管的要求比较高.
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对生活饮用水检验规范中铬(Ⅵ)测定方法的探讨
现行饮用水中六价铬的测定方法为二苯碳酰二肼分光光度法(GB 5750-85)[1].在实际操作中,当用不含Cr6+的长江水(过滤)、东湖水及蒸馏水为本底分别作相同的工作曲线进行比较时,发现以长江水和东湖水所作的工作曲线里,低浓度管的吸光度均比蒸馏水做的工作曲线的吸光度低,甚至为零.当改变原实验方法中加入试剂的顺序之后(即先加二苯碳酰二肼,后加1+7硫酸溶液),这一现象随之消失.现将实验现象报告如下.
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7种常用中药注射剂与0.9%氯化钠配伍的稳定性研究
目的 观察7种常用中药注射剂与0.9%氯化钠注射液配伍的稳定性,以指导临床药物护理.方法 分别检测红花黄色素、复方苦参注射液、黄芪注射液、康艾注射液、艾迪注射液、注射用灯盏花素、注射用丹参与0.9%氯化钠配伍后0~4 h的颜色、澄明度、微粒数、pH值及吸光度.结果 4h内溶液澄明,未见沉淀生成及变色,pH值在正常范围内略有变化,不溶性微粒未发生大幅度改变,吸光度在正常值范围内.结论 7种常用中药注射剂与0.9%氯化钠配伍后溶液在4h内基本稳定,其中1~2 h配伍使用为稳定.建议中药注射剂配伍静置一段时间后输注,以提高输液安全性.
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吸光度判定乳糜血在4040生化分析仪初筛中的应用
目的:建立可操作性的乳糜血判定标准,在初筛时避免不合格血液的采集,更加合理利用血液,减少乳糜血的报废.方法:选择已申请报废的乳糜血浆330例,用目测法区分为轻、中、重度乳糜,应用4040半自动生化仪通过试剂空白值与样本检测值在吸光度上表现出的差异即乳糜指数CB值来判定乳糜程度;观察CB值超过当日标准空白值≤0.4以下为轻中度乳糜,询问饮食情况可以采集;CB值超过当日标准空白值>0.4以上为重度乳糜,不予采集.结果:通过设定乳糜指数即CB值使乳糜报废率得到有效控制,2014年上下半年乳糜报废率依次为2.26%和1.51%,呈下降趋势.结论:通过加强献血前征询,为初筛检验岗位判定乳糜血提供统一的标准依据,有效避免了人为主观判定乳糜程度的差异,减少乳糜血的报废,合理缓解血源.