首页 > 文献资料
-
尿调节素与慢性肾脏疾病
一、尿调节素简介尿调节素或Tamm-Horsfall蛋白是一种分子量为95 kDa,由肾小管髓袢升支(TAL)与早期远曲小管的细胞专门合成的糖蛋白,共由640个氨基酸组成,其中包括48个半胱氨酸残基[1].7/8潜在的糖基化位点都被N.连接的复杂多触角聚糖占据,占1/3分子量[2].尿调节素在内质网中产生,然后被运送到顶端细胞膜作为GPI一连接分子,后通过蛋白酶水解切割释放到尿液中.
-
血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体抑制剂临床应用进展
直接经皮冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention,PCI)后仍有5%～50%的患者达不到佳再灌注,影响患者远期预后.血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体抑制剂(glycoprotein Ⅱb/Ⅲa receptor inhibitors,GPI)可以阻断血小板聚集的终共同通路,减少PCI后无复流的发生率.
-
新基因BQ135232生物信息学分析及免疫原性研究
目的 研究差异表达新基因的免疫原性,探索其在肿瘤免疫学治疗中的应用价值.方法 应用生物信息学方法,对新基因BQ135232进行分析,初步了解其基本性状;构建表达载体,转染真核细胞,并提取表达产物;表达产物冲击肿瘤患者DC,活化自体淋巴细胞,然后与自体肿瘤细胞共培养,观察杀伤效果.结果 新基因BQ135232位于第12号染色体上,其上有一个开放阅读框架(ORF),编码192个氨基酸肽链--BQ-ORF,BQ-ORF上有2处特异性抗原表位.成功构建表达载体pcDNA3-BQ-ORF-GPI,转染CHO/dhfr-细胞系.经G418,MTX筛选阳性克隆细胞株,提取表达蛋白产物.以提取表达蛋白产物冲击膀胱肿瘤患者体外培养DC,活化自体淋巴细胞,在与白体膀胱肿瘤细胞共培养体系中,可观察到肿瘤细胞变性、坏死.结论 新基因BQ135232表达蛋白具备一定的免疫原性,有可能成为肿瘤生物学治疗的一个新靶点.
-
血清TPA、NSE、CYFRA21-1和GPI联合检测对肺癌诊断价值的探讨
目的：探讨血清TPA、NSE、CYFRA21-1和GPI联合检测对肺癌的临床价值。方法：对112例原发性肺癌患者和76例肺良性疾病患者采用酶联免疫吸附法和化学比色法分别测定TPA、NSE、CYFRA21-1和GPI。结果：肺癌组TPA、NSE、CYFRA21-1和GPI水平及检测阳性率均明显高于良性肺病及正常对照组(P＜0.01)。鳞癌、腺癌和小细胞肺癌分别以CYFRA21-1和TPA、TPA和GPI、NSE和GPI升幅较为明显。1～4项标志物联合检测对肺癌检测的敏感性分别为94.64％、64.28％、41.07％和15.18％。结论：TPA、NSE、CYFRA21-1和GPI联合检测可明显提高肺癌的阳性检出率和检测特异性，对肺癌的早期诊断、疗效监测、预后判断有重要意义。
-
颈部肌张力异常患者接受双侧内苍白球脑深层电刺激治疗的长期预后
10位药物治疗效果不佳的重度颈部肌张力异常(CD)患者接受了双侧内苍白球(GPi)脑深层电刺激治疗(DBS),并随访31.9+/-20.9月.在后一次随访时,痉挛性斜颈量表(TWSTRS)严重性评分平均改善了54.8%,TWSTRS残疾评分平均改善了59.1%,TWSTRS疼痛评分平均改善了50.4%.双侧GPi DBS是CD患者长期有效的治疗治疗方法.
-
类风湿关节炎患者中GPI、抗CCP抗体与骨质破坏的分析探讨
目的:评估GPI、抗CCP抗体在RA患者中与骨质破坏的关系.方法:分析比较123例RA患者GPI、抗CCP抗体阳性率与骨质破坏的关系.结果:(1)四组病程总体呈增加趋势,其中Ⅳ期组病程明显长于其余三组(P＜0.05),Ⅲ期组与Ⅰ期组比较差异有统计学意义(P＜0.05)；Ⅳ期组受累关节数(22.23±5.90)明显高出Ⅰ(17.41+7.82)、Ⅱ期组(17.2 1±6.56)(P＜0.05)；(2)四组间抗CCP抗体阳性率无显著差异(P＞0.05)；GPI阳性率总体趋势为Ⅰ期组阳性率较高(76.47％),Ⅱ期组有下降趋势(41.67％),Ⅲ、Ⅳ期组再次上升,分别为69.77％、68.18％,Ⅱ期组与Ⅰ、Ⅲ期组比较有统计学差异,x2 及 P值分别为7.239/0.007、5.506/0.025;(3)从首次发病到规律治疗之间的时间差比较,Ⅳ期组明显长于其余三组(P＜0.05),Ⅲ期组与Ⅰ期组比较差异有统计学意义(P＜0.05)；从发病截止至本次研究所收集资料体现的时间之间,应用传统改善病情抗风湿药物(DMARDs)以及与生物制剂联合应用情况,四组间无明显差异(P＞0.05)；结论:GPI能早期预测RA骨质破坏风险；一旦RA诊断确立,就应该尽早规律治疗.
-
B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗安全性及抗肿瘤效应研究
目的:评估B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗用于C57BL/6小鼠的安全性及其诱导的抗肿瘤免疫效应.方法:应用免疫荧光、FCM检测瘤苗细胞ESAT-6-GPI的表达情况;以Western blot方法检测瘤苗细胞IL-21的表达情况;动物实验检测瘤苗体内应用的安全性;制备荷瘤鼠术后免疫模型,评价瘤苗免疫效果.结果:B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗细胞表面有靶抗原ESAT-6-GPI表达,并分泌IL-21.于C57BL/6小鼠皮下接种2×105个B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗细胞,60天内未见致瘤,但能够诱导小鼠产生有效的抗肿瘤免疫效应.结论:B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗致瘤性明显下降,低剂量应用具有安全性,能够诱导小鼠产生有效的抗肿瘤免疫效应.
-
IL-21 gpi和sGM-CSF共同修饰的瘤苗构建及其抗肿瘤效应
目的:构建膜锚定IL-21和分泌性GM-CSF(sGM-CSF)双表达瘤苗,并对其抗肿瘤效应及其机制作初步探讨.方法:用分子生物学方法构建双表达IL-21 gpi和sGM-CSF重组质粒,将鉴定过的重组质粒以脂质体转染B16F10细胞制成瘤苗,用流式细胞仪检测转染瘤苗IL-21 gpi和sGM-CSF的表达.以瘤苗治疗荷瘤鼠,经观察小鼠肿瘤体积、生存率来分析瘤苗的抗瘤性,并检测了瘤苗治疗鼠的细胞免疫活性.结果:正确构建了pRSC/IL-21 gpi-sGM-CSF重组质粒,转染细胞可很好地表达膜锚定IL-21和分泌性GM-CSF,制备的瘤苗能有效地发挥抗肿瘤效应,其机制与瘤苗治疗鼠的脾细胞增殖活性、NK细胞及CD8+细胞细胞毒活性增强有关.结论:成功构建了具有抗肿瘤活性的膜锚定IL-21和分泌性GM-CSF双表达瘤苗,为进一步抗肿瘤免疫治疗研究奠定了基础.
-
CD52抗原的研究进展及其抗体在临床中的应用
人类CD52属于一个未命名的短链GPI锚定糖蛋白家族,其基因定位于人类1号染色体(1p36.1),分子量为25～29KD.广泛分布于淋巴细胞、单核细胞等造血细胞上和雄性生殖系统中的某些细胞表面,在造血干/祖细胞表面没有表达.由于①其具有在淋巴细胞和很多造血系统恶性肿瘤细胞上的高密度分布;②其分子交联化可引起一系列信号传导,从而导致细胞因子分泌,细胞增殖、生长抑制及凋亡;③其分子在细胞表面排列整齐、密度大,与抗体结合后结合补体的能力受抗体亚类影响较小等特点,抗CD52单克隆抗体(CAMPATH-1系列)已经被广泛地用于临床治疗.CD52分子自身直接的生物学功能目前还知之甚少,被人们利用的大部分都与其GPI锚定蛋白的特性相关.除CAMPATH-1系列抗CD52单抗以外,HI186因识别表位不同,其在生物学功能和临床应用上的差别值得关注.
-
074 GPI锚的结构、功能及GPI锚定B7分子在肿瘤免疫治疗中的应用
GPI锚定蛋白是一种通过GPI结构锚定于细胞膜表面而不跨越其磷脂膜双层的蛋白.利用GPI结构能将目的蛋白B7(CD80)分子直接整合到肿瘤细胞表面,因为不需要自身合成B7,克服了传统基因转导法诸如基因转染效率低又耗时,以及转染后可能不表达等缺点,肿瘤细胞提供了共刺激信号激发免疫系统,诱导抗肿瘤免疫,在临床应用上有广阔的前景.
-
表达ESAT-6-gpi和IL-21的B16F10瘤苗的构建及其活性鉴定
为构建膜表达糖基化磷脂酰肌醇(GPI)锚定的结核杆菌早期分泌靶抗原6 kD(ESAT-6 )和分泌IL-21的B16F10瘤苗并鉴定其活性,利用重叠PCR法构建pIRES-ESAT-6-gpi/IL-21重组质粒,以脂质体转染重组质粒到B16F10细胞,G418筛选出阳性克隆,用RT-PCR、免疫荧光、FCM和Western blot检测瘤苗细胞靶抗原表达,用瘤苗细胞培养上清刺激小鼠CD8+ T细胞,检测瘤苗所分泌IL-21的生物学活性.结果表明,pIRES-ESAT-6-gpi/IL-21重组质粒DNA测序正确,B16F10-ESAT-6-gpi/IL-21瘤苗细胞目的基因ESAT-6表达于瘤苗细胞表面,增殖能力未受外源基因导入影响,分泌的IL-21具有生物学活性,为研究膜表达ESAT-6和分泌表达IL-21瘤苗的抗瘤效应奠定了基础.
-
米托蒽醌处理B16F10-ESAT-6-gpi/IL-21瘤苗特征及其诱导的抗肿瘤免疫反应初探
背景与目的:蒽环类药物处理可使肿瘤细胞免疫原性增加.本文旨在分析米托蒽醌(mitoxantrone,MIT)处理的B16F10-ESAT-6-gpi/IL-21瘤苗特征,初步探讨该瘤苗诱导的抗肿瘤免疫反应.方法:MIT处理B16F10-ESAT-6-gpi/IL-21瘤苗后,用吖啶橙/嗅化乙啶(AO/EB)染色法观察瘤苗细胞形态,流式细胞仪(FCM)检测其粒度及凋亡比例,荧光显微镜观察瘤苗凋亡后细胞膜表面结核杆菌早期分泌靶抗原6KD(ESAT-6)的表达情况,蛋白质印迹法(Western blot)检测瘤苗经MIT处理后IL-21的表达.瘤苗免疫小鼠后,FCM检测了补体依赖的细胞毒性(complement dependent cytotoxicity,CDC)及细胞毒T细胞(cytotoxicT lymphocyte,CTL)活性.结果:经MIT处理后,瘤苗停止分裂,细胞逐渐增大,数日内可保持生物活力,并表达IL-21.瘤苗细胞凋亡后,ESAT-6成点簇状分布于胞膜表面.MIT处理的瘤苗能诱导小鼠产生抗肿瘤免疫应答,免疫鼠血清和CD8+T细胞可分别通过CDC和CTL杀伤野生型B16F10细胞.结论:MIT处理的B16F10-ESAT-6-gpi/IL-21瘤苗失去增殖能力,但仍能表达IL-21且具有免疫原性,能诱导小鼠产生抗肿瘤免疫反应.
-
帕金森性震颤和与震颤相关的电活动
目的:对PD患者行STN和GPi切开术术中应用微电极记录技术采集神经元的电活动,术后分析其与震颤的关系和特点,为手术选择佳的毁损位置提供客观的电生理指标.方法:40个PD患者,其中21例PD患者接受了立体定向GPi切开术和19例PD患者接受立体定向STN切开术.病人要求清醒合作且处于“关”状态.术中应用微电极和肌电(EMG)记录技术,采集GPi和STN神经元和手术对侧肢体震颤的生物电活动.术后应用分析软件甄别单细胞及其电活动特点,分析其与震颤症状的关系,并进行相关性检验.结果:在21个针道共记录到184 GPi个神经元单位,其簇状放电的节律与肢体震颤的节律高度一致(4～6Hz),R2=0.78(P＜0.01).在20个针道共记录到161个STN神经元单位,其放电频率在42～88Hz之间.STN的簇状放电的节律与肢体震颤的节律一致(4～6Hz),R2=0.64(P＜0.01).毁损这些震颤细胞导致震颤症状的消失.结论:震颤型PD患者的GPi和STN存在与肢体震颤节律一致的震颤细胞,且震颤和震颤细胞有着内在的关系.对于指导手术毁损的部位和范围提供了可靠的依据.
-
Gpi、Vim联合同期毁损治疗帕金森病(附50例报告)
目的:探讨Gpi、Vim联合同期毁损治疗帕金森病安全性与可行性.方法:选择男性27例,女性23例.年龄47～74岁,平均51,5岁.病程2～10年,平均6,4年,术前开、关状态UPDRS评分,分别为34.9±17.3和51.2±17.5.采用CRW定向仪,应用Philips Gyroscan NT 1,0 tesla MR扫描,在轴位像直接确定Vim、Gpi解剖靶点,再测量距中线实际距离,读出靶点坐标数据.在冠状位先确定Vim、Gpi靶点,确定Gpi靶点距离视束2mm,再测量靶点至中线实际距离及深度.二者重建即为确定的Vim、Gpi手术靶点.靶点微电极记录一次.靶点射频毁损之前,行电刺激验证靶点.毁损温度80度、每次60秒,每间隔1mm毁损一次,毁损灶达4～6mm圆柱体.结果:术后1～2周开、关状态UPDRS评分,分别改善为14.2±27.1和16.2±25.5.随访2～18个月,震颤完全消失,肌僵硬及运动迟缓改善,肢体活动灵活,步态和身体姿势显著进步.无语言障碍及视野缺损、无死亡.结论:对Gpi、丘脑Vim核的毁损的先后次序、毁损范围、毁损的程度应该依据患者的症状而定.以肌僵硬为主要症状者,先毁损Gpi.如果仍有明显震颤,则增加Vim靶点.震颤较轻时,Vim靶点毁损范围应缩小3mm.以震颤为主要症状者,则先毁损Vim靶点,依据肌僵硬改善程度决定是否行Gpi毁损及毁损程度.采用Gpi、Vim靶点联合同期毁损并未增加手术危险性,相反,两个靶点作用互补,“开”“关”状态改善显著,震颤改善达百分之百,取得良好效果.＃
-
运动障碍病的神经电生理基础
目的:探讨运动障碍病的细胞学病理生理基础,提高手术治疗的有效率和安全性.方法:回顾过去3年的工作,1200例运动障碍病患者接受了微电极导向的立体定向神经外科手术.包括帕金森性病(PD)、原发性震颤(ET)、扭转痉挛和痉挛性斜颈等.手术的靶点包括苍白球腹后部(PVP),丘脑底核(STN)和丘脑腹外侧核(VL).术中应用微电极和肌电(EMG)记录技术,采集GPi,STN和VL神经元和肢体肌电活动.术后应用分析软件甄别单细胞及其电活动特点,分析其与临床症状的关系,并进行相关性检验.结果:PD性震颤:在GPi,STN、VL获得相关神经元簇放电频率是不一致,可指导临床.原发性震颤:在丘脑腹中间核(Vim)获取的放电频率,也有临床指导意义.扭转痉挛和痉挛性斜颈:扭转痉挛和痉挛性斜颈患者的神经元簇放电无明显规则可寻.结论:识别和确定GPi、STN和VL细胞电活动特点及其分布,对于指导立体定向手术的功能定位,提高运动障碍病手术治疗的疗效和降低手术并发症具有重要的意义.
-
4种血清标志物在类风湿关节炎的诊断、疾病活动度的判断及骨侵蚀的预测的应用价值
目的 研究葡萄糖6 磷酸异构酶( GPI)、类风湿因子( RF)、抗角蛋白抗体( AKA)、抗环瓜氨酸肽( CCP)抗体4种血清标志物在类风湿关节炎( RA)疾病的诊断、疾病活动度的判断及骨侵蚀的预测方面的应用价值. 方法 选取193例RA患者, 158 例非 RA 患者, 98 例健康体检者. 采用ELISA法定量检测GPI和抗CCP抗体浓度水平,免疫透射比浊法定量检测RF浓度水平,采用间接免疫荧光法定性检测AKA. 结果 血清GPI、RF、抗CCP抗体、AKA阳性率在RA组与非RA组及健康对照组比较差异均有统计学意义( P<0. 05);血清GPI、RF、抗CCP抗体浓度水平在RA组显著高于非RA组及健康对照组,差异有统计学意义( P<0. 05 ).血清GPI、RF浓度水平在RA活动组浓度显著高于非活动组,差异有统计学意义( P<0. 05 );血清抗CCP抗体浓度水平在RA活动组与非活动组比较差异无统计学意义. 血清GPI、RF浓度水平在RA骨侵蚀组与非骨侵蚀组比较差异无统计学意义;血清抗CCP抗体浓度水平在RA骨侵蚀组显著高于非骨侵蚀组,差异有统计学意义( P<0. 05 ). 血清AKA阳性率在RA活动组与非活动组比较,差异无统计学意义;在RA骨侵蚀组与非骨侵蚀组比较,差异有统计学意义( P<0. 05). 结论 血清 GPI、RF、抗 CCP 抗体、AKA 的水平对RA的诊断起到重要作用,血清GPI、RF浓度水平与RA患者疾病活动度有关,血清抗CCP抗体浓度水平可以预测RA患者骨侵蚀,RA患者血清AKA阳性可能与骨侵蚀有关.
-
三期神经梅毒——麻痹性痴呆1例
麻痹性痴呆(general paresis of insane, GPI)是梅毒螺旋体侵入中枢神经系统,破坏神经元而出现精神功能障碍,近年来神经梅毒病例有所增多,现将我院诊治1例报道如下.
-
B7-1、GPI及其拼接在肿瘤免疫治疗中的应用进展
在肿瘤免疫过程中, T细胞是一类能够识别及杀伤肿瘤细胞的细胞,其作用发挥的前提是抗原递呈细胞(APC)将抗原呈递给T细胞.这一过程需要两个信号参与,一是由TCR/CD3复合物同MHC Ⅱ类分子相互作用,提供免疫应答中肿瘤相关的特异信号;另一个是共刺激信号,是由共刺激分子与其受体相结合,介导T细胞有效活化,并调节T细胞增殖反应.
-
6-磷酸葡萄糖异构酶及抗CCP抗体等检测对类风湿关节炎的诊断价值
目的 评价抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、6-磷酸葡萄糖异构酶(GPI)、类风湿因子(RF)对类风湿关节炎(RA)的诊断价值. 方法 检测148例RA患者组、126例其他自身免疫性疾病患者组和110例正常对照组血清中RF(速率散射比浊法)、抗CCP抗体(ELISA法)和GPI(ELISA法),比较分析其检测结果一致性和对RA的诊断效率. 结果 RA患者组抗CCP抗体和GPI的平均浓度显著高于自身免疫病患者组和正常对照组(P＜0.05),抗CCP和GPI对RA诊断的特异性高于RF(P＜0.05).2种或3种指标联合检测对RA诊断的敏感性减低,但其特异性高于单项检测指标(P＜0.05). 结论 抗CCP抗体和抗GPI均是RA敏感而特异性血清学指标,两者与RF综合分析,有助于RA的早期诊断,并提高RA的诊断效率.
-
GPI-CD80融合蛋白的抗肿瘤作用研究
目的 研究GPI-CD80融合蛋白对肿瘤生长的抑制作用及其机制.方法 将纯化的GPI-CD80蛋白与HepG2细胞共培养后用丝裂霉素灭活,制成肿瘤疫苗.设单纯丝裂霉素灭活的HepG2细胞为对照疫苗.将两组疫苗与裸鼠脾淋巴细胞共培养,MTT法检测淋巴细胞增殖及细胞因子IL-2、IFN-γ量的变化;乳酸脱氢酶法检测CTL的活性变化;将两组疫苗接种于荷瘤裸鼠,测量裸鼠肿瘤体积的变化.结果 脾淋巴细胞经肿瘤疫苗刺激后,OD值、IL-2、IFN-γ的量和CTL的活性均高于对照疫苗组,差异有统计学意义;实验组荷瘤裸鼠平均肿瘤体积小于阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义.结论 GPI-CD80融合蛋白能够抑制荷瘤裸鼠瘤体的生长速度,其机制可能与诱导T淋巴细胞增生、刺激细胞因子IL-2、IFN-γ的分泌、增强CTL活性等有关.
