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非小细胞肺癌患者血清IL-17和IL-21水平变化及临床意义
目的 测定非小细胞肺癌(NSCLC)患者术前术后血清中IL-17、IL-21水平变化,探讨IL-17、IL-21水平在NSCLC诊断及预后中的临床意义.方法 采用酶联免疫分析法测定54名NSCLC患者术前以及术后血清IL-17、IL-21水平,随机选择30名健康志愿者作为正常对照组,检测其血清IL-17、IL-21水平并与之进行对比.结果 与正常对照组比较,NSCLC患者术前血清IL-17、IL-21水平差异具有统计学意义(P<0.01),术后差异无统计学意义(P>0.05).NSCLC患者术后与术前比较,血清IL-17水平明显降低(P<0.05),血清IL-21水平明显升高(P<0.05).晚期NSCLC患者血清IL-17水平高于早期NSCLC患者(P<0.05),而IL-21水平则低于早期NSCLC患者(P<0.05).结论 NSCLC患者血清中IL-17、IL-21水平变化与手术、NSCLC病程相关,监测IL-17、IL-21水平对NSCLC的治疗和预后有一定的指导意义.
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HBV感染中Th17/Treg平衡调节及其相关细胞因子的表达
目的 通过对乙型肝炎肝硬化、慢性乙型肝炎和健康人血清中Treg和Th17细胞及其相关因子IL-17、IL-21和IL-10的检测,结合血清ALT、TBA水平、HBV-DNA载量及HBeAg定量检测,观察各细胞因子之间的相关性,进一步探讨3种细胞因子在HBV感染患者体内的平衡关系. 方法 实验共分为4组:乙型肝炎肝硬化组(LC,38例),轻中型慢性乙型肝炎组(CHBLM,35例),重型慢性乙型肝炎组(CSHB,36例)和健康对照组(HC,40例).采用流式细胞术(FCM)检测各组外周血Treg和Th17表达率.采用酶联免疫法(ELISA)检测血清中IL-17 、IL-21和IL-10含量；RTPCR方法检测患者HBV-DNA载量；电化学发光法检测HBeAg含量；全自动生化分析仪检测ALT和TBA.对得到的数据进行相关性检测. 结果 1)3组HBV感染患者血清Treg和Th17细胞及IL-21和IL-10水平均显著高于健康对照组(P＜0.05)；2)IL-10与HBV-DNA载量呈正相关(r=0.727,P＜0.05),IL-21、IL-17与ALT和TBA相关(P＜0.01)；3) HBV感染患者Treg/Th17、IL10/IL-17、IL-10/IL-21值与健康对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论 1)Treg、Th17细胞及IL-17、IL-21和IL-10在HBV感染者不同病程过表达；2)IL-10与HBV载量呈正相关,IL-17、IL-21与HBV载量无相关性；3)IL-17、IL-21与反映肝细胞损害的生化指标ALT与TBA呈正相关；4)IL-17与IL-21在CSHB患者和LC患者呈正相关；5)不同病程HBV感染患者存在Treg/Th17、IL-10/IL-17、IL-10/IL-21失衡.
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GITRL联合IL-21基因真核表达载体的构建及体外研究
本研究构建人糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体配体(GITRL)联合白介素-21(IL-21)基因真核表达载体,为探讨目的基因对慢性髓系白血病(CML)来源树突状细胞(DC)的影响.应用脂质体介导法将重组真核表达载体转染至纯化的DC,而此纯化的DC来源于经伊马替尼治疗有效或无效的慢性期CML患者或健康志愿者.应用ELISA法检测转染后DC细胞因子的浓度变化.将转染后的DC与纯化的自体NK混合培养使之成为DC-CIK.以DC-CIK细胞为效应细胞,应用乳酸脱氢酶释放法观察其对靶细胞的杀伤率.结果表明:所获目的基因经测序 与GenBank比对序列一致,PCR及限制性核酸内切酶检测显示,真核表达载体质粒经限制性酶切鉴定片段大小正确,并均可转染至伊马替尼治疗有效、无效的慢性期CML患者及健康志愿者来源的DC细胞.成功转染相应载体后的DC分别表现出IL-2和IFN-γ分泌量增加;细胞毒活性试验表明,转染后的DC可增加自体NK细胞对K562细胞的杀伤活性.结论:DC能够通过转染IL-21和GITRL基因的方式获得自我活化、上调自身细胞因子分泌的能力,为酪氨酸激酶抑制剂治疗无效的CML患者的免疫治疗奠定了理论依据和实验基础.
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多发性骨髓瘤患者外周血Th17细胞功能研究
本研究探讨Th17细胞及其分泌的细胞因子IL-17、IL-21在多发性骨髓瘤(MM)发生发展中所起的作用.将55例MM患者分为未缓解组(A组,30例)和缓解组(B组,25例),健康自愿者作为对照组(C组,30例).采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血单个核细胞(PBMNC)刺激培养上清液中IL-17、IL-21和IL-6的水平,并用流式细胞术分析PBMNC中Th17细胞的比例.结果表明,A组IL-6、IL-17及IL-21的水平与Th17细胞比例均明显高于B组和C组,差异有统计学意义(P＜0.05)；B组与C组相比,IL-6、IL-17及IL-21的水平与Th17比例差异均无统计学意义(P＞0.05)；未缓解组MM患者IL-17与IL-6的水平呈正相关(r=0.782,P＜0.05),IL-21与IL-6的水平呈正相关(r =0.778,P＜0.05).结论:Th17细胞可能作为启动因素参与了MM患者的免疫发病过程,并促进病情的进展.
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生酮饮食对难治性癫痫患儿滤泡辅助性T细胞及B细胞的影响
目的：探讨生酮饮食（ KD ）导致低丙种球蛋白血症的可能机制。方法难治性癫痫（ IP）患儿36例，正常同龄对照17例，分别于KD治疗前后直接取血备检。流式细胞术检测外周血滤泡辅助性T细胞（ Tfh）、各阶段B细胞比例，ELISA检测外周血IL-21浓度，实时荧光定量PCR检测外周血CD4＋T细胞雷帕霉素靶蛋白（ mTOR ）、Blimp-1、Bcl-6和IL-21 mRNA表达及测定CD19细胞mTOR mRNA表达。结果（1）IP患儿Tfh细胞数量在KD治疗后明显下降（P＜0．05），IP患儿治疗前Tfh细胞比例与正常对照组无明显差异（P＞0．05）。（2）IP患儿KD治疗后Tfh细胞转录因子Bcl-6表达显著下降（P＜0．05），抑制因子Blimp-1表达增高（P＜0．05）。（3）KD治疗后IP患儿IL-21血浓度呈下降趋势，CD4＋T细胞IL-21 mRNA表达显著下降（P＜0．05）。（4）KD治疗前后CD27－IgD＋B细胞无显著差异（P＞0．05），CD27＋IgD＋B细胞和CD27－IgD－B细胞呈下降趋势，CD27＋IgD－B细胞和CD27＋IgD－CD38highB细胞治疗后明显下降（P＜0．05），Tfh细胞比例与CD27＋IgD－转化后记忆B细胞和CD27＋IgD－CD38high浆细胞数量呈正相关（r分别为0．644和0．609，P＜0．05）。（5）IP患儿KD治疗后CD4＋T细胞mTOR mRNA表达显著下降（P＜0．05），mTOR表达与Tfh比例呈正相关（r＝0．691，P＜0．05），mTOR表达与CD27＋IgD－转化后记忆B细胞和CD27＋IgD－CD38high浆细胞数量呈正相关（r分别为0．715和0．650，P＜0．05）。结论 KD可通过抑制CD4＋T细胞及B细胞mTOR表达下调Tfh细胞数量及功能，抑制B细胞分化，这可能是少数患儿长期KD治疗导致低丙种球蛋白血症的原因之一。
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儿童持续性免疫性血小板减少性紫癜患儿滤泡辅助性T细胞改变初探
目的：探讨滤泡辅助性T细胞（ T follicular helper ， Tfh）在儿童持续性免疫性血小板减少性紫癜（ persistent immune thrombocytopenic purpura ， pITP ）免疫发病机制中的可能作用。方法pITP患儿20例，采用流式细胞术检测外周血循环CD4＋CXCR5＋ICOShigh PD-1high T （ cTfh）细胞比例及CD19＋B细胞ICOSL（inducible co-stimulator ligand）的表达，采用实时荧光定量PCR（real-time PCR）检测Bcl-6、c-Maf、IL-21 mRNA及CD19＋B细胞ICOSL mRNA表达，酶联免疫吸附试验检测血浆IL-2、IL-6、IL-21浓度。结果（1）pITP患儿cTfh细胞比例明显高于正常对照组[（17．45±9．04）％ vs （7．57±2．57）％， P＜0．05]，地塞米松（DEX）治疗7 d后cTfh细胞比例明显低于治疗前[（5．93±1．64）％vs （17．45±9．04）％，P＜0．05]；（2）Tfh细胞转录调节因子Bcl-6及c-Maf表达较正常对照组明显增高（P＜0．05）；（3）pITP患儿CD19＋B细胞ICOSL蛋白和基因表达明显增高（P＜0．05），DEX治疗后CD19＋B细胞ICOSL表达与治疗前相比无明显改变（P＞0．05）；（4）Tfh细胞相关细胞因子IL-21血浓度和基因表达水平明显高于正常对照组（P＜0．05），DEX 治疗后仍显著高于对照组（P＜0．05），IL-2及IL-6血浆浓度治疗前后与正常对照组相比无明显改变（P＞0．05）。结论 ICOSL和IL-21表达异常所致Tfh细胞过度活化可能与pITP患儿免疫发病机制有关；B细胞持续高表达ICOSL和IL-21持续高水平可能是导致pITP患儿病情反复发作的原因之一。
关键词： 滤泡辅助性T细胞 BCL-6 ICOSL IL-21 免疫性血小板减少性紫癜 -
急性期川崎病患儿滤泡辅助性T细胞改变观察
目的 探讨滤泡辅助性T细胞(Tfh细胞)在儿童川崎病(Kawasaki disease,KD)中的数量变化及其可能机制.方法 急性期川崎病患儿20例,采用流式细胞术检测外周血CD4+CXCR5+ICOS+T细胞(Tfh)的比例,采用real-time PCR检测转录调节因子Bcl-6、Blimp-1 mRNA表达,酶联免疫吸附试验检测血浆中IL-4和IL-21浓度；20例同龄健康儿童作为对照组.结果 (1)急性期KD患儿Tfh细胞比例明显高于正常对照组[(2.6±0.6)％vs(1.8±0.7)％,P＜0.05]；(2)Tfh细胞转录因子Bcl-6 mRNA表达较正常对照组明显增高(P＜0.05),其拮抗因子Blimp-1 mRNA表达降低(P＜0.05)；(3)血浆IL-21和IL-4蛋白浓度明显高于正常对照组(P＜0.05).结论 Tfh细胞过度活化可能参与了KD免疫发病机制,Bcl-6/Blimp-1表达失衡,IL-4和IL-21细胞因子微环境改变可能与Tfh细胞异常活化有关.
关键词： 滤泡辅助性T细胞 Bcl-6/Blimp-1 IL-21 川崎病 -
探讨卵巢早衰患者血清IL-21与抗米勒管激素水平变化及其意义
目的:观察卵巢早衰(prematrue ovarian failure,POF)患者血清白细胞介素-21(1L-21)与抗米勒管激素(anti-müllerian hor-mone,AMH)的水平变化,并探讨其在卵巢早衰中的意义.方法:选取35例POF患者作为观察组,另选同期30例健康女性作为对照组,采用放射免疫法检测两组研究对象血清中IL-21水平,采用酶联免疫法(ELISA)检测血清中AMH水平.结果:观察组患者血清促卵泡激素(FSH)和IL-21水平显著高于对照组(P＜0.05),促黄体素(LH)、雌二醇(E2)、睾酮(T)、AMH和平均卵巢体积(MOV)水平均显著低于对照组(P＜0.05),基础窦状卵泡数(AFC)显著低于对照组(P＜0.05).IL-21与FSH和LH呈正相关,与AMH、E2、T和MOV呈负相关.结论:IL-21和AMH可以作为初步筛查POF患者的指标,卵泡间质纤维化可能与自身免疫反应有关.
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滤泡辅助性T细胞与自身免疫性皮肤病的研究进展
滤泡辅助性T细胞（T follicular helper cells，Tfh）是新近发现的CD4＋T细胞亚群中独立的一类细胞，其主要功能是辅助 B 淋巴细胞产生高亲和力抗体，完成体液免疫应答的过程。Tfh 标志性表达趋化因子受体5、可诱导共刺激分子、IL-21、B细胞淋巴瘤分子-6等分子。上述分子异常表达，可导致自身免疫性疾病的发生。现将近几年来有关 Tfh 细胞的研究进展及其在自身免疫性皮肤病发病机制中的作用综述如下。
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IL-21对CTL细胞抗daudi细胞作用及机制的研究
目的：通过特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）与IL-21共同作用daudi细胞，观察CTL与IL-21对daudi细胞的作用机制。方法培养肿瘤特异性CTL细胞，体外培养daudi细胞，设置对照组和实验组共6组细胞，CTL细胞与IL-21联合作用淋巴瘤细胞。MTT法检测细胞抑制率，检测细胞培养上清中IFN-γ的含量，检测CTL细胞的毒性作用，RT-PCR检测daudi细胞中Caspase-3 mRNA的表达。结果各组均能抑制daudi细胞的生长，对照组培养上清中IFN-γ含量（401.32±3.54）pg/ml， CTL细胞杀伤率（82.34±2.7）%，Caspase-3 mRNA相对表达量（3.37±0.04）均明显高于对照组（P＜0.05）。结论 IL-21是通过增强CTL细胞杀伤作用，上调Caspase-3蛋白表达，从而抑制daudi细胞增殖。
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糖皮质激素治疗对重症肌无力患者Tfh细胞亚群的作用
目的 观察糖皮质激素治疗前后对重症肌无力患者Tfh细胞亚群的调控和影响.方法 选取2015年8月~2016年9月于本院由糖皮质激素治疗显著的患者30例以及健康对照组20例,采用流式细胞术的方法检测对比健康对照组,同一患者治疗前后外周血中CD4+T细胞CXCR5,IC-S以及转录因子Bcl-6的表达,ELISA的方法比较治疗前后血清中细胞因子IL-21的表达水平.结果 ①与健康对照组相比,新发MG患者Tfh细胞显著升高,而糖皮质激素治疗后显著降低;②新发MG患者相较于健康对照组,IC-S与Bcl-6表达显著上调,而糖皮质激素治疗后可以显著降低IC-S的表达水平;③新发MG患者血清中IL-21水平显著增加,糖皮质激素治疗后IL-21的水平较治疗前显著下降.结论 ①Tfh细胞的失衡可能参与重症肌无力的发病过程,其比例与MG的疗效相关.②糖皮质激素可能通过影响Tfh细胞IL-21的表达抑制自身抗体的产生治疗重症肌无力.
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骨关节炎患者血浆IL-18、IL-21的水平变化及其意义探讨
目的 探讨骨关节炎患者血浆中IL-18、IL-21的水平变化及其与疾病的关系.方法 通过检测26例骨关节炎患者与27例健康成人血浆中IL-18、IL-21水平的差异,探讨其与骨关节炎的关系.结果 26例骨关节炎患者血浆中IL-18和IL-21水平均高于27例健康成人,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 IL-18、IL-21水平在骨关节炎患者中明显增高,可能与疾病的发生有一定联系.
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IL-21对Jurkat细胞增殖及WAVE-1表达的影响
目的 探讨白介素-21(IL-21)对Jurkat细胞增殖的抑制作用及WASP家族Verprolin同源蛋白-1(WAVE-1)在急性白血病(AL)发病中可能的作用及意义.方法 以不同浓度IL-21处理Jurkat细胞;通过MTT(噻唑兰比色法)检测观察IL-21对Jurkat细胞生长的影响;流式细胞仪观察24 h后IL-21对细胞凋亡的影响;采用RT-PCR检测WAVE-1的表达.结果 IL-21能明显抑制Jurkat细胞增殖,抑制作用呈剂量时间依赖效应(P<0.05);IL-21作用24 h后,细胞凋亡随药物浓度增高而增加(P<0.05);WAVE-1 mRNA表达水平随IL-21处理浓度的增高而降低(P<0.05).结论 IL-21可以抑制人急性白血病细胞的生长和诱导其凋亡,其机制可能与降低WAVE-1的表达有关.
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牛奶蛋白过敏婴儿外周血中Th17细胞及IL-17、IL-21的研究
目的:探索Th17细胞及IL-17、IL-21在牛奶蛋白过敏(CMA)婴儿发病机制中的作用.方法:采集病例组治疗前后和健康对照组各25例患者的空腹外周静脉血,用流式细胞仪技术测定Th17细胞在CD4+T细胞中的占比,用ELISA法检测上清IL-17、IL-21水平,比较两组的各项指标.结果:病例组治疗前Th17细胞占比(8.97±2.81)%,治疗后(3.72±2.52)%,对照组(1.92±1.38)%,比较差异均有统计学意义(P<0.05).IL-17在对照组、病例组治疗前、病例组治疗后分别为(3.05±1.61)、(25.58±7.89)、(13.07±9.63)ng/mL,IL-21在对照组、病例组治疗前、病例组治疗后分别为(1.88±1.62)、(13.43±4.3)、(9.13±4.67)ng/mL,比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论:Th17细胞、IL-17和IL-21可能为CMA的研究及治疗提供了靶向依据.
关键词： 牛奶蛋白过敏(CMA) Th17细胞 IL-17 IL-21 -
溃疡性结肠炎患者体内新型IL因子表达研究
目的 探讨溃疡性结肠炎(UC)患者体内新型IL因子表达.方法 选取2014年1月~2016年12月收治的溃疡性结肠炎患者50例作为观察组,另选择我院同期健康体检者50例作为对照组,测定两组体内外周血清中白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-21(IL-21)、白细胞介素-22(IL-22)、白细胞介素-23(IL-23)等主要炎性因子含量及不同程度的UC患者体内IL因子的表达,并进行统计学分析.结果 观察组患者血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子均明显高于健康对照组,且差异有统计学意义(P<0.05);重度UC患者血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子均明显高于轻中度UC患者,且差异有统计学意义(P<0.05);50例溃疡性结肠炎治疗后外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等炎性因子表达水平明显低于治疗前,且差异有统计学意义(P<0.05).结论 UC患者外周血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平明显升高,与疾病活动度密切相关,可预测UC发展或评估治疗效果.
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结肠癌细胞转染IL-21基因抑瘤效应的实验研究
目的:初步探讨转染IL-21的结肠癌细胞抑制肿瘤生长的效应.方法:以逆转录病毒为载体将IL-21基因导入结肠癌细胞,筛选建立高表达细胞株,测定其生物学性状指标和抑制肿瘤生长的效果.结果:与原株相比,所建立的Colon26/IL-21细胞株可高质量的表达IL-21,在体内可刺激分泌大量的IFNγ,致使结肠肿瘤明显回缩.结论:IL-21是一种高效的抗肿瘤细胞因子,有望成为结肠癌基因治疗的的候选基因.
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胸腺瘤合并重症肌无力患者Th17细胞检测及其临床意义
目的:研究胸腺瘤合并重症肌无力患者Th17细胞检测及其临床意义.方法:选取2015年10月至2017年10月天津医科大学总医院收治的78例胸腺瘤患者及15例正常对照患者,流式细胞术检测患者术前Th17细胞比例,检测外周血IL-17、IL-21及AchR-Ab水平,分析Th17及相应细胞因子的相关性,预测胸腺瘤合并重症肌无力的独立危险因素.结果:MG组Th17为(10.33±1.28)%, Con组为(7.33±0.58)%、Tm组为(7.67±2.18)%,后两组与MG组相比,差异具有统计学意义(P<0.001);MG组患者IL-17为(18.05±7.23) pg/mL、IL-21为(180.67±16.17)pg/mL、AchR-Ab为(37.29±7.48)pmol/L,Con组IL-17为(7.45±3.46)pg/mL、IL-21为(84.33±5.13)pg/mL、AchR-Ab为(15.23±3.32)pmol/L,Tm组IL-17为(8.22±1.67)pg/mL、IL-21为(93.00±7.21)pg/mL、AchR-Ab为(16.87±4.89)pmol/L,后两组与MG组相比,上述指标差异均具有统计学意义(P<0.001);MG组患者Th17含量与IL-17(r=0.830,P<0.001)、IL-21(r=0.734, P<0.001)、AchR-Ab(r=0.809,P<0.001)呈正相关;IL-17、IL-21与AchR-Ab是预测胸腺瘤合并MG的独立危险因素(P<0.001).结论:Th17细胞参与了胸腺瘤合并MG的疾病发生发展过程,其通过分泌IL-21促进自身细胞增殖,并通过分泌IL-17对MG进行调控.
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慢性哮喘患者肺组织 IL-21和转录激活因子3的表达
目的：研究慢性哮喘患者肺组织中 IL-21和转录激活因子3(p-STAT3)表达水平。方法选择30只小鼠随机分为实验组和对照组,实验组进行哮喘干预,检测 IL-21和 p-STAT3的表达水平。实验组小鼠分别在第1、14天皮下注射0.15 ml 卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)混合试剂,在第20天将小鼠放置于实验箱中,用雾化的方法将 OVA 混合试剂喷向实验箱中,2次/d,每次20 min,观察小鼠出现的症状,对照组则在第1、14天皮下注射0.15 ml 无菌氯化钠注射液,其余处置同实验组小鼠。结果实验组小鼠的炎性细胞总数为(18.80±1.82)×105/L,嗜酸粒细胞数为(1.02±0.22)×105/L,单核细胞为(1.56±0.24)×105/L。与对照组比较,差异有统计学意义(t =2.449、2.656、2.361,P 值均<0.05)。实验组小鼠的 IL-21表达水平为(65.45±5.56)ng/L,IL-2表达水平为(55.48±12.11)ng/L,p-STAT3表达水平为(76.86±9.46)ng/L,与对照组比较,差异有统计学意义(t =13.057、12.694、3.982,P 值均<0.05)。结论慢性哮喘小鼠肺组织 IL-21和p-STAT3表达水平明显增加。
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槐杞黄颗粒辅助治疗PNS患儿血清IL-21及IFN-γ的变化
目的:观察原发性肾病综合征(PNS)患儿采用槐杞黄颗粒辅助治疗前后血清白细胞介素-21(IL-21)及干扰素-γ(IFN-γ)的动态变化.方法:2010年6月31日～2011年12月31日收治于中国医科大学附属盛京医院小儿肾脏风湿科的PNS患儿50例,随机分为两组:泼尼松联合槐杞黄颗粒治疗组24例(A组),单纯泼尼松治疗组26例(B组).观察治疗前和治疗1个月、3个月后外周血中IL-21及IFN-γ的变化.选取健康体检儿童15名为健康对照组(C组).采用酶联免疫吸附法测定血清中IL-21及IFN-γ的浓度.结果:(1)A、B组IL-21均显著高于C组(P＜0.05),治疗1个月后两组IL-21均显著下降,组间差异无统计学意义,至3个月后A组显著降低,并低于B组(P＜0.05),仍未达C组水平.(2)A、B组IFN-γ均低于C组(P＜0.05),治疗1个月后两组IFN-γ显著升高,组间差异无统计学意义,至3个月后A组显著升高,并高于B组(P＜0.05),接近C组水平.结论:PNS患儿治疗前IL-21的升高和IFN-γ的降低可能参与PNS的发病,槐杞黄辅助治疗可以下调肾病患儿IL-21的表达,上调IFN-γ的表达,纠正Th1/Th2失衡,从而发挥免疫调节作用.
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矽肺患者血清中IL-17和IL-21的检测和意义
为探讨IL-17和IL-21在尘肺病发生、发展中表达水平的变化及其意义,采用双抗体夹心法,测定24例观察对象、146例矽肺患者(其中壹期48例、贰期60例、叁期38例)和60例健康对照者血清中IL-17、IL-21的表达水平.结果显示,对照组、观察组和矽肺病例组血清中IL-17和11-21的含量比较,差异均有统计学意义(P＜0.01),随着矽肺期别的增高,血清中IL-17和IL-21含量也随之增高；两变量相关分析显示,IL-17和IL-21呈正相关关系.提示,血清中IL-17和IL-21表达水平与尘肺病的发生、发展密切相关.
