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人免疫缺陷病毒感染/获得性免疫缺陷综合征相关Burkitt淋巴瘤二例
例1女,52岁,已婚.因"胸闷、呼吸困难伴右颈多发淋巴结肿大1个月余"于2010年11月入院.患者2年前因扁桃体肿大行扁桃体摘除术,本次入院半年前人免疫缺陷病毒(H IV)检测阳性,3个月后经X线胸片及痰液病原学检查诊断为肺孢子虫肺炎而确诊为艾滋病患者.体检:右侧颈部见一大小约8 cm×5 cm×4 cm的质略硬包块,边界欠清,活动欠佳,心肺腹部未见明显异常.血常规:白细胞4.4×109/L,红细胞3.5×1012/L,淋巴细胞0.25.血清学检查抗HIV阳性,外周血及骨髓检查无异常.术中见右颈深部多发淋巴结肿大粘连,压迫气管,致气管移位,随行部分肿块切除.病理检查:送检灰红肿大淋巴结,大小5 cm×3 c×3 cm,包膜完整,切面灰白灰红、散在出血,质地细腻鱼肉状.镜F观察:淋巴结结构被破坏,肿瘤由单形一致中等大小的瘤细胞所构成,弥漫性浸润,瘤细胞排列紧密,核圆形,核膜较厚,染色质较粗,核内可见2~4个小核仁,易见核分裂象,可见满天星现象.免疫组织化学:瘤细胞呈CD20、PAX-5、CD10、bcl-6阳性,bcl-2、MUM-1、CD5、CD21、CD99、末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)、CK-P阴性,Ki-67阳性指数95%;原位杂交:EBER阳性;FISH检测示:myc基因易位,即t(8;14)(q24;q32).
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以髓系白血病为首发的母细胞性浆细胞样树突细胞肿瘤一例
患者男,22岁。因血便伴牙龈出血一周,于2014年10月22日来院就诊。患者有长期油墨接触史。体检:牙龈红肿,胸骨中下段轻压痛,肝脾肋下2 cm可及,双下肢可见多个淤血性皮疹,大径1.5 cm。血常规检查:白细胞11.1×109/L,中性粒细胞24%,血小板8×109/L,嗜酸性粒细胞6%,中性幼粒白细胞6%,异常细胞30%,中性杆状核粒细胞8%,血红蛋白152 g/L,乳酸脱氢酶1649 U/L。腹部超声检查示肝脾肿大。骨髓病理活检示,骨髓增生极度活跃,可见一类幼稚细胞广泛增生,呈灶性及片状分布,细胞中等偏大,核形不规则,染色质较细致,胞质丰富,约占骨髓有核细胞的80%(图1)。免疫组织化学标记示髓过氧化物酶( MPO,图2)、CD117阳性,CD4、CD56部分阳性,TCL-1少量阳性、CD99个别阳性、CD123阴性,诊断为急性髓系白血病。患者接受了化疗,第1、2疗程分别以Hyper CVAD方案A和B[ A方案:环磷酰胺1.2 g第1天、1.1 g第2~3天,长春地辛4 mg第4天、第11天,多柔比星97 mg第4天,地塞米松40 mg 第1~4天,第11~14天;B 方案:甲氨蝶呤2 g第1天,阿糖胞苷10 g(第1~2天)]化疗,2个疗程后患者血常规白细胞4.03×109/L,骨髓涂片示骨髓缓解。患者出院后1个月腹壁出现数十个暗红色约黄豆大小皮下结节,活动度差。双侧腹股沟可扪及肿大淋巴结,大径约2 cm。肺动脉CT检查示前上纵隔内见软组织肿块影,大层面约3.8 cm ×2.4 cm,边界清晰,密度尚均匀,增强后强化不明显。血常规示白细胞20.7×109/L。患者先后进行了皮肤和纵隔肿块穿刺病理活检。皮肤活检病理示,表皮无明显病变,真皮浅层可见无细胞带,主要病变在真皮,血管周围,毛囊、汗腺周围,可见致密淋巴样细胞浸润,细胞核大深染或空泡状,部分可见核仁,核型不规则,染色质细致,呈弥漫性分布或形成模糊结节状结构(图3)。免疫组织化学示淋巴样细胞呈 CD4、CD56、CD123(图4)、CD38、CD33、CD117、CD43、人类白细胞抗原(HLA)-DR阳性,MPO部分阳性,末端脱氧核苷酸转移酶( TdT )、CD20、CD3、CD30阴性, Ki-67阳性指数约70%。纵隔肿块穿刺活检示,可见淋巴样细胞弥漫性浸润,细胞类圆形、不规则形,核大、核形不规则,异型性明显,其间可见较多细胞核碎片或小灶性坏死(图5)。免疫组织化学标记示:淋巴样细胞呈 CD4、CD56、HLA-DR、CD38阳性,MPO大部分阳性,CD123、TdT、CD3、CD20阴性, Ki-67阳性指数60%。骨髓活检形态学与第一次活检相似,骨髓液免疫球蛋白和TCR基因重排未发现单克隆性基因重排。随即给予IMEAP(异环磷酰胺2.8 g,第1~5天;美司钠2.7 g,第1~5天;依托泊甙110 mg,第1~5天;阿糖胞苷3.8 g ×1/12 h,第1~2天;甲泼尼龙琥珀酸钠500 mg,第1~5天)方案化疗,并进行纵隔肿块放射治疗。
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异源二聚体硫酸化糖蛋白在白血病细胞中的表达及作用机制的研究
异源二聚体硫酸化糖蛋白(clusterin)广泛存在于人体组织细胞胞浆中,在很多器官组织中都有表达.研究表明它是一种具有细胞保护作用的蛋白质,并在前列腺癌中发现它有抗细胞凋亡作用[1,2].本研究首先应用地塞米松稳定诱导白血病CEM细胞凋亡,采用末端脱氧核苷酸转移酶(TDT)介导的脱氧核苷酸原位末端标记法(TUNEL)和流式细胞技术检测clusteri n在白血病中的抗凋亡作用.
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细胞凋亡和PCNA表达与肝细胞癌分化状态关系的研究
无论在何阶段,肿瘤的生长速度由细胞增殖和丢失的比值所决定.本文利用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的d-UTP缺口末端标记技术(TUNEL)和增殖细胞核抗原(PCNA)SP免疫组化方法对肝细胞癌(HCC)组织中细胞凋亡和细胞增殖现象进行研究,以探讨二者与HCC临床病理特征的关系.
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急性淋巴细胞性白血病骨髓移植后胰腺复发1例报告及文献回顾
1 临床资料患者,男性,37岁,因进行性乏力、周身酸痛不适伴发热1月余,于2006年8月1日在首都医科大学附属北京友谊医院行血分片检查及骨髓细胞学检查,诊断为急性前驱淋巴母细胞白血病.免疫组织化学检查:末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)阳性,分化簇20(CD20)阳性,PAX-5阳性,分化簇7(CD7)阴性,髓过氧化物酶(MPO)阴性.
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TdT在儿童期B-ALL中的表达特点
目的分析末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)在儿童B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)中的表达特点,并探讨TdT在B-ALL微小残留(MRD)检测中的意义.方法用TdT/CD10/CD34/CD19四色荧光抗体组合对初发时的白血病细胞进行检测,以3例正常骨髓标本作为对照,分析TdT在B ALL中的表达特点.同时,以能够使白血病细胞在TdT/CD10双参数点图上出现的位置完全不同于TdT+CD19+的正常骨髓细胞分布的位置,作为TdT/CD10/CD34/CD19组合有效并可用于MRD监测的标准.以该组合对病人诱导治疗结束后以及持续治疗过程中的骨髓标本进行监测.结果在70例B-ALL中,TdT阳性为63例(90.0%).其中, Common B-ALL中的TdT阳性例数比例,及TdT阳性表达率都显著高于其它各期;其它各期之间无显著差异.虽然大部分病例的TdT与CD34都呈现较高的阳性表达率,但TdT与CD34阳性表达率之间并无明显的相关性. Pro B-ALL、Pre B-ALL和Common B-ALL之间,平均TdT MFI无显著差异,但三者中除了前两者的平均TdT MFI都显著低于正常骨髓中的TdT+CD19+细胞外,Common B-ALL的平均TdT MFI与正常细胞无显著差异.所有B ALL总的平均TdT MFI显著低于正常细胞.应用TdT/CD10/CD34/CD19抗体组合可在65.7%的B ALL病例中进行MRD检测,其有效频率高于其它用于MRD检测的抗体组合.结论由于B-ALL的平均TdT MFI显著低于TdT+CD19+的正常骨髓单个核细胞,可以利用B-ALL的这一特点以TdT/CD10/CD34/CD19抗体组合进行MRD检测,且此抗体组合的有效频率在现有的MRD检测抗体组合中高.
关键词: 末端脱氧核苷酸转移酶 B ALL 微小残留病 平均荧光强度 -
累及皮肤的套细胞淋巴瘤一例
患者男,53岁,躯干四肢紫红色结节、斑块半月,眶周肿胀4d.体检:全身多处浅表淋巴结肿大,脾肿大.血钙3.12 mmol/L,LDH 853 U/L,血免疫固定电泳示单克隆免疫球蛋白IgM阳性(K链型),正电子发射断层显像/X线计算机体层成像检查示全身多处淋巴结肿大,咽后壁肿块,脾脏大.颈部皮肤结节组织病理检查示皮下脂肪组织内大量异形淋巴样细胞弥漫浸润,体积中等偏大,核圆形,核仁较明显,核分裂易见.免疫组化标记示异形细胞L26、CD79a、Bcl-2、细胞周期蛋白D1均阳性,多发性骨髓瘤原癌基因1部分阳性,Ki-67阳性率>80%,CD5、CD21、CD23、CD38、CD3、CD10、Bcl-6、CD45RO、末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)、髓过氧化物酶(MPO)、CD30、间变性淋巴瘤激酶(ALK)、CD117、CD34均阴性.荧光原位杂交检测示t( 11;14)CCND1/IGH融合基因阳性.诊断:伴皮肤和眶周受累的套细胞淋巴瘤(母细胞变异型)合并高钙血症.治疗:给予利妥昔单抗注射液联合环磷酰胺、长春新碱、多柔比星、地塞米松,交替以大剂量甲氨蝶呤及阿糖胞苷静脉注射,第3天血钙降至正常,第6天病情得到迅速控制,皮损及眶周肿胀明显消退,但随访治疗1个月后,患者终死于严重肺部感染.
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TUNEL技术方法的探讨
探讨末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口标记技术(TUNEL)的染色方法,以期提高特异性与敏感性。采用以去势(经手术切除睾丸)后天数不同的大白鼠前列腺,用TUNEL法染色,观察不同时期的细胞凋亡水平,对经典的TUNEL法进行改良,将染色结果与TUNEL经典法和HE染色法进行对比。结果表明:采用改良法后,阳性细胞明显增加,而且着色深,凋亡指数明显增高(P<0.01) 。
关键词: TUNEL技术 凋亡 去势 末端脱氧核苷酸转移酶 凋亡指数 -
蛋白酶K浓度对原位末端标记技术检测病毒性肝炎肝细胞凋亡的影响
病毒性肝炎时凋亡的肝细胞可采用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的末端标记技术(TdT- mediated dUTP nick end labeling, TUNEL )进行原位显示,随着这一检测技术的广泛应用,逐渐发现操作过程中一些因素对实验结果的可靠性有较大的影响,我们以不同蛋白酶K浓度对TUNEL检测结果的影响进行了探讨。