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贝类水产中副溶血性弧菌菌型分布研究
目的 了解贝类水产中副溶血性弧菌(VP)的菌型构成及其特点.方法 按照GB/T 4789.7标准处理贝类标本,每份VP阳性标本挑取10个克隆,并对其进行血清分型,以PCR法检测tdh、trh、GS-PCR和f237噬菌体的携带情况,并据此对阳性标本中的VP进行菌型区分,分析各菌型在相应标本中的构成.结果 75份贝类水产中18份(24.0％)检出VP,5.6％携带trh阳性VP(O4∶ KUT),未检出tdh阳性菌株.18份VP阳性标本共获得180株VP克隆,共可分为42种菌型.检出3株O3∶K6和1株O1∶K33 GS-PCR阳性菌株,均为非流行株.不同标本中菌型数不完全相同,多可检出9种,平均每份VP阳性标本含6.1种菌型.检出47个(26.1％)克隆株携带f237的orf8完全缺失变种.结论 f237 orf8完全缺失变种噬菌体在贝类中具有广泛的分布.贝类中VP种群构成复杂,常携带多个菌型.临床常见菌型在贝类中不具优势,食品中VP的检测应充分考虑血清分型、基因分型的作用.
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慢性碘过量对Wistar大鼠下丘脑促甲状腺激素的影响
动物实验和流行病调查发现,碘摄入量与甲状腺疾病的关系,呈现U字型曲线,碘缺乏或过多均对健康造成不利影响,碘摄入量增加使成人甲状腺功能减退症和亚临床甲状腺功能减退症的发病率明显增加.前期的实验表明随着碘摄入量的增加大鼠血清TSH值增加,TSH产生和分泌主要受到下丘脑室旁核合成的TRH正向调节和甲状腺激素的负向调节.TH对TRH的分泌也有负向调节作用,慢性碘过量所引起的TSH升高的机制始终没有被阐明,随着碘摄入的增加下丘脑TRH是怎么变化的,是通过什么影响的,本文就这方面的新进展作以综述.
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上海地区副溶血性弧菌大流行菌株血清型及分子特征研究
目的 了解上海地区大流行副溶血性弧菌(VP)大流行菌株血清型分布及分子特征.方法 对2010-2012年分离自腹泻患者和食品中的VP菌株进行血清分型,以GS-PCR辨别大流行株,以PCR检测菌株的毒力基因tdh、trh和大流行株分子标识f237噬菌体orf8基因,以PFGE分型来分析菌株间的遗传关系.结果 1 136株VP可分为52个血清型(群),其中64.5％的菌株GS-PCR阳性,判定为大流行菌株,其血清型有11种,主要集中于O3∶ K6(76.8％)、O4∶ K68(9.4％)、O1∶K25(6.8％)、O1∶ K36(4.5％)4种血清型.相对于非流行菌株,O10∶K60、O3:K3、O1:K33三种血清型的菌株其PFGE图谱与已报道的大流行株更为接近,为新检测到的大流行血清型变种.大流行产毒株中仅能检测到tdh基因,未检测到trh基因,94.3％的大流行菌株携带噬菌体f237的oorf8基因,但有5.7％的大流行株orf8基因缺失.相同血清型的大流行菌株其PFGE图谱存在差异,且orf8基因的携带与否不能以PFGE进行区分.结论 上海地区VP大流行菌株血清型相对集中,且不断有新的血清型变种出现.从PFGE图谱的差异和orf8基因的携带与否上来看,大流行菌株仍在演变.
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北京市水产品污染与感染病例中副溶血性弧菌血清型和毒力基因型的比较研究
目的 对北京市夏季市售水产品污染与感染病例中副溶血性弧菌血清型和毒力基因型进行比较研究,为评估食品安全风险监测的目的与意义提供思路,为北京市水产品副溶血性弧菌污染与临床感染病例的关联性研究提供技术支持.方法 对采集的水产品样品和哨点医院腹泻患者粪便样本进行副溶血性弧菌的分离鉴定,采用血清玻片凝集法对分离出的副溶血性弧菌进行血清分型,PCR方法检测菌株的tlh、tdh、trh基因.结果 2014年7～9月共采集水产品样品164份,检出副溶血性弧菌80份,总污染率为48.78％;其中淡水产品污染率为38.78％(19/49),平均菌量浓度为66.63 MPN/g;海水产品污染率为53.04％ (61/115),平均菌量浓度为38.14 MPN/g.80株副溶血性弧菌分属于9个血清群,其中O2群28株,占35.00％,O1群11株,占13.75％,O5群10株,占12.50％.80株菌tlh基因均为阳性,只有1株菌携带tdh毒力基因,所有菌株trh毒力基因均为阴性.哨点医院腹泻病人粪便样本中分离鉴定副溶血性弧菌21株,血清型O3∶ K6占61.90％(13/21),O4:K8占28.57％ (6/21);毒力基因型tdh(+) /trh(-)占95.24％ (20/21),tdh(-)/trh(-)占4.76％(1/21).结论 来源于食品样品的副溶血性弧菌绝大部分不具备致病性,而导致消费者腹泻的副溶血性弧菌绝大部分携带致病性毒力基因,表明目前的食品安全风险监测结果不能作为评估副溶血弧菌导致的食源性疾病暴发和散发的依据.
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2014年上海市嘉定区副溶血性弧菌分子流行病学分析
目的 了解上海市嘉定区副溶血性弧菌腹泻患者和食品分离株的血清型、毒力基因和分子分型特征及其流行状况.方法 对2014年分离自腹泻患者和食品的菌株进行血清分型,以PCR检测菌株的毒力基因tdh和trh及大流行株分子标识GS-PCR和orf8基因,通过PFGE分型分析菌株间的遗传关系.结果 嘉定区副溶血性弧菌导致的腹泻病例主要集中在5～10月份,高峰出现在8月份,患者年龄分布呈双峰现象,女性感染者中检出弱产毒或不产毒菌株的比例高于男性.腹泻患者分离株中居前7位的血清型分别为O3:K6、O4:K9、O4:K8、O4:K68、O4:K12、O1:KUT、O3:KUT,产毒株占92.3％,流行株占61.9％,主要以O3:K6为主,orf8基因阴性流行株约占流行株的20.1％.323株副溶血性弧菌分为121个PFGE型,大流行株之间遗传距离更为接近,均处于同一聚类单元;非流行株构成复杂,形成以O4:K8、O4:K9、O4:K12、O3:K29(O3:KUT)为中心的4个聚类单元,且与大流行株距离较远,非流行株之间在PFGE条带上差异也较大.食品分离株均为非产毒株,未发现患者分离株和食品分离株具有相同的PFGE型,且未见形成明显的PFGE聚类单元.结论 副溶血性弧菌是嘉定区重要的腹泻病原,其感染控制应以大流行株和产毒株为主,食品监测应充分考虑副溶血性弧菌在病例中的分布情况.
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大鼠下丘脑微量注射TRH对心功能的作用及其机制
目的:探讨下丘脑促甲状腺激素释放激素(TRH)对心功能活动的调节作用及其作用机制.方法:在SD大鼠下丘脑促垂体区埋管,微量注射TRH或预先注射一氧化氮合酶抑制剂L-NAME及M型乙酰胆碱受体阻断剂阿托品,记录给药前后左心室内压峰值(LVSP)、心率(HR)、室内压瞬时上升速率峰值(dp/dtmax)和瞬时下降速率峰值(-dp/dtmax).结果:①与对照组相比,下丘脑促垂体区注射TRH可引起LVSP、HR、dp/dtax及-dp/dtmax显著升高(P＜0.05或P＜0.01).②单独注射L-NAME后只引起LVSP显著升高(P＜0.05或P＜0.01),L-NAME预处理可抑制TRH引起的正向调节效应.③单独注射阿托品引起LVSP及dp/dtmax的显著升高(P＜0.05),HR显著下降(P＜0.05),阿托品预处理减弱了TRH加快心率和提高-dp/dtmax的效应.结论:①下丘脑TRH对心脏有正性变时、变力作用.②下丘脑内源性NO能降低LVSP,但对HR、dp/dtmax及-dp/dtmax无明显影响,TRH的作用是经NO依赖通路的.③下丘脑内源性胆碱能递质对心脏有正性变时但负性变力的作用,下丘脑TRH调节心功能可能部分通过胆碱能M受体通路.
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创伤性腹膜后血肿62例治疗体会
目的:通过对创伤性腹膜后血肿诊治方法的探讨,避免术中遗漏,减少并发症.方法:对62例TRH病人选择性切开探查止血,引流及术中相应处理,强调中央TRH的探查重要性,结果:62例病人全部治愈出院,无1例内脏损伤遗漏.
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化学发光免疫分析法测定垂体泌乳素及其临床意义
垂体泌乳素(PRL)是由脑垂体前叶细胞分泌,由199个氨基酸残基组成的一种多肽链激素,相对分子质量为23 000.它受下丘脑催乳激素抑制激素(PIH)的调节,在人体内可能还存在其他一些刺激或抑制因子,如促甲状腺素释放激素(TRH)、雌激素与5-羟色胺等对其均有促进作用.
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副溶血性弧菌食物中毒及腹泻菌株Ⅲ型分泌系统的检测及分析
目的 了解副溶血性弧菌食物中毒和临床腹泻株Ⅲ型分泌系统的分布以及耐药特征.方法 对食物中毒和临床腹泻分离到的共21株副溶血性弧菌进行毒力基因tdh、trh、T3SS1、T3SS2α、T3SS2β和toxR检测,并用VITEK 2 compact全自动微生物鉴定系统进行了耐药性分析.结果 21株菌株中tdh +/trh-占90.48％(19/21),tdh-/trh+和tdh-/trh-分别占4.76％、4.76％,未检测到tdh +/trh+菌株.T3SS1广泛存在于所有菌株中.T3SS2α存在于tdh +/trh-菌株,T3SS2β存在于tdh-/trh+菌株.1株食物中毒菌株毒力基因携带情况为tdh-/trh-/T3 SS2d-/T3SS2B-.21株副溶血性弧菌对阿莫西林、头孢吡肟、抗菌素B、庆大霉素、环丙沙星和复方新诺明敏感,对氨苄西林完全耐药.结论 食物中毒和临床腹泻分离到的菌株大多携带tdh基因,T3SS2α与tdh相关,而T3SS2β则存在于trh+菌株.未携带tdh和trh基因的食物中毒分离株表明副溶血性弧菌不仅仅依赖TDH和TRH发挥毒力作用,其致病机制具有多样性和复杂性.
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2013-2015年杭州地区急性腹泻患者来源副溶血弧菌毒力基因及耐药性调查
目的 对2013-2015年杭州地区腹泻患者副溶血弧菌(Vibrio parahaemol yticus)毒力基因的携带和耐药进行调查研究.方法 可疑菌株用全自动细菌鉴定仪(VITEK2 Compact,生物梅里埃,法国)进行鉴定,用PCR方法检测其8种毒力基因,用纸片扩散法检测13种抗生素的敏感性.结果 120株副溶血弧菌中,tdh+或trh+的致病菌株占95.0％(114株),tdh-且trh-的非致病株占5.0％(6株).所有120株副溶血弧菌均含有T3SS1基因,T3SS2α基因主要存在于tdh+/trh的菌株中,T3SS2p存在于trh+的菌株中,2株tdh-的菌株首次检出T3SS2a基因.本研究中大流行菌株占64.2％(77株),非大流行菌株占35.8％(43株).多达65.8％的副溶血弧菌对氨苄西林耐药,而90.0％以上的副溶血弧菌对其他抗生素包括喹诺酮类、第三代头孢菌素类、氨基糖苷类、四环素类和磺胺类抗菌药物较敏感.结论 杭州地区腹泻来源的副溶血弧菌多为大流行菌株,对常见抗菌药物敏感性高,但耐药率有所上升,要加强监测并引起临床重视.
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2012年上海地区副溶血性弧菌血清分型和毒力基因携带状况研究
为了解2012年上海地区副溶血性弧菌人源株和食源株的优势血清型及其毒力基因携带状况，本研究收集了2012年从上海市15个区（县）腹泻患者和食品监测中分离的副溶血性弧菌株，进行血清分型，并采用聚合酶链反应（PCR）检测 tdh和trh基因。结果显示，854株副溶血性弧菌中，88．1％为血清可分型，89．8％为产毒株。O3∶K6、O4∶K8、O1∶K25、O4∶K68、O4∶K9、O1∶K36、O3∶K29为上海地区可分型人源株的优势血清型（93．8％），其中O3∶K6多，达56．2％。副溶血性弧菌全部分离株的月份分布显示出聚集趋势，7～8月为高峰期。O4∶K9和O1∶K36血清型菌株的月份分布与其他优势血清型菌株不同，未表现出明显聚集趋势。食源株无明显优势血清型，且与人源株分布不同。人源株产毒株构成（95．6％）高于食源株（5．5％）。人源株优势血清型产毒株构成（99．9％）高于非优势血清型（71．1％）。血清可分型人源株的 tdh携带率（97．5％）高于不可分型人源株（67．6％），血清可分型人源株的 trh携带率（0．8％）低于不可分型人源株（42．6％）。结果提示，副溶血性弧菌血清型分布与历史数据相比变化较大，血清型与毒力基因携带呈一定程度关联，且人源株与食源株在血清型和毒力基因携带上具有分离现象。因此，在副溶血性弧菌的监测与检测中应充分考虑血清分型和毒力基因的重要性。
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楔状核内TRH抗伤害感受机制的探讨
用玻璃微电极细胞外记录结合核团微量注射的方法,于延髓中缝大核(NRM)内记录痛兴奋神经元(PEN)的单位放电,探讨楔状核(NCF)内促甲状腺素释放激素(TRH)抗伤害感受作用的机制.结果表明:NCF内注射TRH能明显抑制PAG及NRM内PEN痛放电,NCF或PAG内预先注射纳洛酮(1 μg/0.5μL)能部分阻断NCF内TRH对NRM及PAG内PEN痛放电抑制效应.提示:TRH在NCF内的抗伤害感受作用可能与阿片受体有关.其机制有可能通过下行镇痛单突触或多突触通路实现.
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难治性抑郁症患者甲状腺激素水平动态分析
目前有研究发现,抑郁症患者下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)存在功能亢进,而下丘脑.垂体.甲状腺轴(HPT轴)功能低下,主要表现为血浆皮质醇浓度增高,促肾上腺皮质激素(ACTH)分泌增强以及促甲状腺释放激素(TRH)兴奋试验迟钝等[1],难治性抑郁症患者的HPA和HPT轴的损害更严重[2].
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甲状腺功能异常与高泌乳素血症
下丘脑-垂体-甲状腺轴和下丘脑-垂体-性腺轴是人体重要的内分泌系统.甲状腺与性腺同属垂体支配,促甲状腺激素释放激素(TRH)、促性腺激素释放激素(GnRH)、生长抑素(GHRIH)和催乳素释放因子(PRF)均来自下丘脑.GnRH促进LH和FSH的释放,GHRIH则抑制黄体酮(LH)、卵泡刺激素(FSH)、TSH和PRL的释放.TRH和PRF作用于垂体前叶后,分别分泌促甲状腺激素(TSH)和泌乳素(PRL).
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创伤性腹膜后血肿的外科治疗
创伤性腹膜后血肿(traumatic retroperitoneal hematoma,TRH)是外科腹部损伤常见急腹症之一,多伴有腹内脏器和血管损伤,病情危重、变化急骤,诊断困难、手术指征及手术方式不易把握,是严重创伤急救的一个难点[1].本院自1997～2006年收治创伤性腹膜后血肿39例,取得满意治疗效果.现分析如下.
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创伤性腹膜后血肿79例的诊治体会
创伤性腹膜后血肿(traumatic retroperitoneal hematoma,TRH)在临床上越发多见,本症是腹部严重损伤的并发症,多合并有腹腔脏器及大血管损伤,术前诊断困难, 处理十分复杂, 没有特异的症状和体征,往往与多发伤并存,早期诊断困难.尤其基层医院的外科医生对TRH的认识和重视程度不够, 而且随着检测设备的不断升级,对仪器设备的依赖性已经到了令人担忧的程度.因此, 为探讨TRH的临床特征与诊治经验,提高解决临床实际问题的能力显得尤为重要.本次研究诊治创伤性腹膜后血肿79例,效果较为满意.现报道如下.
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食品中副溶血性弧菌毒力基因的特征研究
目的 了解深圳市食品中副溶血性弧菌的毒力基因特征状况.方法 从2010年-2012年食品等外环境分离到420株副溶血性弧菌,用荧光PCR技术检测食品中分离的420株副溶血性弧菌耐热直接溶血素基因(tdh)、耐热直接溶血素相关溶血素基因(trh)和不耐热直接溶血素基因(tlh).结果 420株副溶血性弧菌中,检出基因trh阳性4株,阳性率为0.95％；基因tlh阳性420株,阳性率为100％;未检出基因tdh的菌株.结论 在食品外环境中深圳市尚未发现携带基因tdh副溶血性弧菌；携带基因trh副溶血性弧菌阳性率低；所有被检测副溶血弧菌均携带基因tlh；外环境中的副溶血性弧菌携带毒力基因差异较大.
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TRH对兔急性颅脑损伤后脑组织自由基反应的影响
目的: 探讨促甲状腺素释放激素(TRH)对急性实验性颅脑损伤后脑组织自由基反应的影响. 方法: 30只家兔随机分为A、B、C 3组.A组和B组采用自由落体直接打击法建立兔急性实验性颅脑损伤模型,C组不致伤.A、B 2组致伤后0.5 h 分别给予TRH或等量生理盐水至伤后4 h.检测脑组织SOD、LPO,采用干燥重量法测定脑含水量. 结果: 与B组比较,A组损伤后脑组织中SOD活性增加,LPO含量及脑组织含水量减少(P＜ 0.05);A组与B组致伤后5 min颅内压均较C组及伤前升高(P＜0.05),且随时间延长 ,颅内压递增,但A组给药后颅内压增高速度明显减慢(P＜0.05).结论: TRH能够显著减轻兔急性实验性颅脑损伤后脑组织自由基反应,减轻脑水肿.
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TRH对兔急性颅脑损伤后早期脑血流的影响
目的: 探讨TRH对急性颅脑损伤后早期脑血流的影响.方法: 采用自由落体打击法致伤家兔,致伤力800×80 g*cm.22只家兔随机分2组.TRH治疗组,n= 10,伤后0.5 h开始静脉注射TRH,此后每0.5 h注射1次,至伤后4 h.对照组n=1 2,按上述方法给予等量生理盐水.测量颅内压(ICP)、脑组织含水量,应用经颅多谱勒超声(T CD)测量舒张期末血流速度(Vd)和脉动指数(PI).结果: 伤后3 h,TRH治疗组Vd值显著增加,PI值降低(P＜0.01);给药后ICP递增速度明显减慢,伤后1.5 h,ICP 显著低于对照组(P＜0.01);脑组织含水量明显低于对照组(P＜0.01).结论: TRH能够显著增加颅脑损伤后的脑血流量,改善脑血流,降低ICP,减轻脑水肿.
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基于皮质酮肾阳虚大鼠血清T4、TRH及垂体TSH mRNA表达的不同针刺因素正交设计研究
目的 以皮质酮肾阳虚动物模型为研究对象,采用正交设计研究多个针刺参数,探索影响针刺效应的主次因素和针刺参数的佳组合.方法 采用L9(34)正交表对4个参数(穴位、捻针角度、频率、时间)3水平安排试验,运用计算机控制针刺手法仪进行干预,通过ELISA检测血清中T4、TRH的水平和RT-PCR检测垂体组织中TSH mRNA的表达来比较上述4因素的主次.结果 对针刺效应的影响由大到小依次为穴位、捻针角度、捻针频率、捻针时间,其中穴位是影响针刺效应的主要因素(P＜0.01);针刺捻针的角度、频率、时间都是影响针刺效应的次要因素(P均＞0.05).结论 针刺治疗肾阳虚大鼠的佳针刺参数为针刺肾俞穴,捻针角度为90°,频率为120次/min,捻针时间60 s.该研究中穴位选择对疗效的影响大,其次为捻针角度,再次是捻针频率,影响小的为捻针时间.
