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蚁参蠲痹胶囊中桂皮醛的鉴别方法探讨
目的 对蚁参蠲痹胶囊中桂皮醛的鉴别方法 进行研究与改进,提高桂皮醛的鉴别灵敏度.方法 采用高效液相色谱法对蚁参蠲痹胶囊中桂皮醛进行鉴别,色谱柱为Agilent HC-C18(5 μm,250 mm×4.6 mm);流动相为乙腈-水(30∶70);流速1 mL/min;柱温25℃;检测波长为290 nm.结果改进后的方法 使样品中的桂皮醛得到很好的分离,检出效果好.结论 改进方法 结果更真实,检出效果更好,可作为替代方法.
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一种含挥发油包合物的前期提取工艺研究
目的 筛选佳的挥发油包合物前期处理工艺.方法 本研究以有机溶剂类型、有机溶剂的体积、提取时间为考察因素,以桂皮醛含量为评分指标,采用水蒸气蒸馏法提取包合物,通过L9(34)正交试验,确定佳提取工艺.色谱条件:程序升温:90～180℃;进样量:1μL,分流比为50∶1.结果 优选的佳工艺为选择溶剂正丁醇,体积为2 mL,提取2h.并且溶剂体积对本次实验有显著性影响.结论 优选的佳提取工艺通过验证科学可行,可广泛应用于包合物研究.
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桂皮醛影响K562细胞生长的机理研究
目的:探讨桂皮醛对慢性髓细胞白血病细胞株K562生长的影响及其机制.方法:以不同浓度的桂皮醛作用于体外培养的K562细胞,CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期、凋亡率和Caspase 3表达.结果:桂皮醛呈时间和剂量依赖性影响K562细胞增殖,使细胞周期受阻于G2/M期,并诱导K562细胞凋亡.K562细胞凋亡过程中,活化的Caspase 3表达明显增加.结论:桂皮醛使K562细胞周期受阻,并使Caspase-3活化诱导细胞凋亡,从而实现对K562细胞的生长抑制.
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四味清口含片的质量标准研究
目的：建立四味清口含片的质量控制标准。方法采用薄层色谱法(TLC)定性鉴别四味清口含片中的桂心、甘草、细辛、广陈皮，采用高效液相色谱法（HPLC）测定四味清口含片中桂皮醛的含量。色谱条件为Hypersil ODS（C18）色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），检测波长为290 nm，流动相为甲醇-φ=0.1%磷酸水溶液(35∶65，v/v)，流速为1.0mL/min，柱温为30℃，理论板数以桂皮醛峰计算不低于3000。结果 TLC法能分别检出四味清口含片中桂心（肉桂）、甘草、细辛、广陈皮，均具有良好的鉴别特征，阴性未见干扰；桂皮醛进样量在0.010～0.500μg 范围内与峰面积积分值线性关系良好，r=0.9999。在精密度试验、稳定性试验、重复性试验中峰面积的相对标准偏差（RSD）分别为1.03%、1.27%、1.23%。加样回收率为97.23%～101.54%，平均值为99.43%，RSD为0.99%（n=9）。结论本方法具有良好的专属性和重现性，加样回收率试验符合要求，能准确、稳定地对四味清口含片进行定性鉴别和定量测定，可用于该制剂的质量控制。
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桂皮醛对滑膜成纤维细胞增殖、凋亡及周期影响的实验研究
[目的]研究不同浓度的桂皮醛（CA）对滑膜成纤维细胞（FLS）的增殖、凋亡及细胞周期的影响，进而探讨CA对骨关节炎滑膜炎症的调控机制。[方法]不同浓度的CA分别作用于LPS诱导后的FLS，通过四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT）、流式细胞术（FCM）对其增殖、凋亡和周期进行测定。[结果]低浓度的CA可轻度促进FLS的生长，较高浓度CA则可显著降低FLS的存活率（P﹤0.05），呈浓度依赖性。LPS可减少FLS的凋亡率，缩短G1期、延长S期，可用来制备炎症模型。与对照组相比，CA高浓度组与低浓度组均能是Q2和Q4区细胞比率明显增加（P﹤0.05），延长G1期并缩短S期（P﹤0.05），诱导FLS凋亡及抑制FLS的增殖，尤其是CA高浓度组作用更加显著。[结论]不同浓度的CA对FLS的生长均有一定的抑制作用，其中CA高浓度组的抑制作用更强，这可能是CA抗炎作用的潜在机制。
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桂皮醛在大鼠肠中的体外代谢转化研究
目的 考察桂皮醛在大鼠离体小肠中的代谢转化特性及黄连对其代谢的影响.方法 RP-HPLC法测定桂皮醛及其代谢产物肉桂酸;考察不同浓度桂皮醛在大鼠离体小肠提取液、小肠组织匀浆液中的代谢动力学及黄连对其代谢的影响.结果 桂皮醛在各种大鼠离体小肠液中均可被迅速代谢,主要代谢产物为肉桂酸;小肠各提取液对桂皮醛的代谢速率存在差异;桂皮醛浓度越低,代谢速率越快;黄连对桂皮醛的大鼠小肠代谢存在明显抑制作用.结论 桂皮醛在大鼠小肠中可迅速被代谢,主要代谢产物为肉桂酸;黄连对桂皮醛代谢具有抑制作用.
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桂枝挥发油及桂皮醛抗流感病毒的机制研究
目的 考察桂枝挥发油及其主要成分桂皮醛体外对甲型流感病毒鼠肺适应株A/PR/8/34 (H1N1)的直接杀灭作用,探讨其抗流感病毒作用机制中Toll样受体7(TLR7)信号通路的作用.方法 以流感病毒感染的狗肾传代细胞(MDCK)为载体,测定桂枝挥发油及桂皮醛体外抑制流感病毒增殖的半数抑制浓度(IC50)和治疗指数(TI); ELISA法检测MDCK细胞干扰素-β (IFN-β)的分泌;RT-PCR法考察MDCK细胞中Toll样受体3(TLR3)、TLR7、肿瘤坏死因子受体相关因子3 (TRAF-3)、白介素-1受体相关激酶4(IRAK-4)、IFN-β基因的表达.结果 桂枝挥发油及桂皮醛对流感病毒有明显的直接杀灭作用,IC50分别为1.85×10-7、5.77×10-7 g/mL,TI分别为27.04、9.51.与病毒组比较,桂枝挥发油和桂皮醛0.25×10-5 g/mL显著升高感染甲型流感病毒的MDCK细胞上清液中IFN-β的量(P＜0.05),显著上调细胞中TLR7、IRAK-4、IFN-βmRNA表达水平(P＜0.05).结论 桂枝挥发油及桂皮醛对流感病毒H1N1的增殖有显著抑制作用,作用机制可能与其激活TLR7信号通路、活化IRAK-4、诱导IFN-β高表达有关.
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桂皮醛对小鼠成纤维细胞瘤NIH3T3细胞碱性成纤维细胞生长因子及转化生长因子β1表达的影响
目的 研究桂皮醛刺激小鼠成纤维细胞瘤NIH3T3细胞后碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白在不同时相点表达的规律,探讨桂皮醛促进成纤维细胞增殖及胶原合成的机制.方法 采用MTT法观察不同质量浓度桂皮醛对NIH3T3细胞增殖的影响;利用羟脯氨酸(Hyp)测试法测定细胞上清中胶原水平;利用免疫细胞化学技术检测桂皮醛对NIH3T3细胞bFGF、TGF-β1蛋白表达的影响.结果 桂皮醛作用NIH3T3细胞48 h后,细胞增殖速度和细胞上清中的胶原量均较对照组明显增加.桂皮醛刺激后,bFGF和TGF-β1蛋白表达增加,其中bFGF蛋白表达高峰在18 h,TGF-β1蛋白在刺激后12 h达到峰值.结论 桂皮醛可以上调内源性生长因子bFGF、TGF-β1蛋白的表达,这可能是桂皮醛体外促进NIH3T3细胞增殖及胶原合成,以及在创伤愈合、组织修复方面发挥作用的分子生物学机制.
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HPLC法测定桂枝中桂皮醛和桂皮酸的含量
桂枝为樟科常绿乔木肉桂Cinnamomum cassia Presl的嫩枝,含有的主要成分为桂皮醛、桂皮酸.<中华人民共和国药典>2000年版仅有TLC鉴别,笔者采用HPLC法测定了桂枝中桂皮醛和桂皮酸的含量,并测定了4个市场样品.结果表明该法简便、准确,重现性好,可有效地控制桂枝药材的质量.
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含挥发性成分中药牡丹皮和肉桂配方颗粒不同制备工艺的比较研究
目的研究不同工艺对中药牡丹皮和肉桂配方颗粒中挥发性成分量的影响.方法通过HPLC法测定不同制备工艺制得的牡丹皮配方颗粒中丹皮酚的量及肉桂配方颗粒中桂皮醛的量,对其工艺进行比较研究.结果常规工艺制得的配方颗粒中丹皮酚和桂皮醛的量明显低于先提取挥发油,药渣提取物干燥后,再将挥发油直接喷洒或环糊精包合后加入制得的配方颗粒.结论含挥发性成分中药牡丹皮和肉桂配方颗粒的佳工艺为先提取挥发性成分,剩余药渣进行煎煮,然后对挥发性成分进行包合,制粒时再将其加入.
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桂枝饮片标准汤剂质量标准研究
目的 制备桂枝饮片标准汤剂,并进行质量标准研究.方法 依照标准汤剂的制备要求,制备15批桂枝饮片标准汤剂,以肉桂酸作为定量检测指标,计算转移率与出膏率,并建立其HPLC指纹图谱分析方法.结果 通过对15批桂枝标准汤剂进行测定,肉桂酸转移率为56.93％～94.06％,出膏率为3.30％～9.40％;并用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012A)软件进行指纹图谱分析,标定了9个共有峰,确认4个,分别为原茶儿酸(1号峰)、香豆素(4号峰)、肉桂酸(6号峰)、桂皮醛(7号峰).对15批桂枝饮片标准汤剂分别进行了相似度评价,其相似度均高于0.95.结论 建立了桂枝饮片标准汤剂指纹图谱,该方法精密度、稳定性和重复性良好,具有一定的鉴别意义,可为桂枝配方颗粒的质量控制提供参考.
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UPLC-DAD法同时测定珍龙醒脑胶囊中的9种成分
目的 建立同时测定珍龙醒脑胶囊中没食子酸、肉桂酸、甘草苷、西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ、桂皮醛、丁香酚、甘草次酸、麝香酮等9种成分的UPLC-DAD方法.方法 采用RP-UPLC法,Agilent Zorbax C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8 μm),流动相为0.1％甲酸水溶液-乙腈,体积流量0.3 mL/min,梯度洗脱,柱温35℃,进样量为1μL.分别对待测物考察其提取溶剂、线性范围、精密度、重复性、稳定性、加样回收率等方法学内容.结果 9种指标成分没食子酸在0.2～20.0mg/L (r=0.999 0)、西红花苷Ⅰ在0.022～2.200 mg/L (r=0.999 3)、西红花苷Ⅱ在0.02～2.00 mg/L (r=0.999 6)、甘草苷在0.093～1.860 mg/L (r=0.999 4)、肉桂酸在0.020 4～2.040 0 mg/L (r=0.999 9)、桂皮醛在0.042～4.200 mg/L (r=0.999 9)、丁香酚在0.95～95.00 mg/L (r=0.999 9)、甘草次酸在0.012 9～1.290 0 mg/L (r=0.998 9)、麝香酮在0.073 8～7.380 0 mg/L(r=0.999 0)线性关系良好;精密度RSD≤1.02％;重复性良好,RSD≤1.13％;加样回收率在93.8％～112.1％,RSD≤1.28％.供试品溶液在室温条件下24 h内稳定.3批次供试品中没食予酸、西红花苷Ⅰ和Ⅱ、甘草苷、肉桂酸、桂皮醛、丁香酚、甘草次酸、麝香酮质量分数分别为0.422～0.448、0.093～0.105、0.096～0.112、0.026 8～0.028 5、0.142～0.153、0.140～0.158、1.519～1.547、0.007 55～0.008 04、0.117～0.121 mg/g.结论 本法快速、灵敏度高、准确度高、专属性好,为珍龙醒脑胶囊的质量控制提供依据.
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HPLC法测定痛经宝颗粒中阿魏酸、肉桂酸、桂皮醛、木香烃内酯和去氢木香内酯
目的 建立HPLC法同时测定痛经宝颗粒中阿魏酸、肉桂酸、桂皮醛、木香烃内酯和去氢木香内酯5个成分的方法.方法 采用Agilent Hc-C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-O.04%磷酸水为流动相,梯度洗脱,检测波长225 nm,体积流量1.0 mL/min.结果 5个成分均能达到良好分离,各成分平均回收率在98.20%～100.01%.结论 本方法 简便、准确、重复性好,可更好地用于痛经宝颗粒的质量控制,同时为研究痛经宝药效物质基础奠定了基础.
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HPLC法测定伤筋正骨酊中樟脑
伤筋正骨酊由当归、两面针、木香、桂枝、薄荷脑、樟脑和冰片等31味药材制备而得.具有消肿镇痛之功效,外用于跌打扭伤及骨折、脱臼等病症.<中华人民共和国卫生部药品标准>(试行)[WS-10899(ZD-0899)-2002]中,定量指标采用的是总挥发油,但该方法专属性不强.本品挥发油中,主要成分为薄荷脑、樟脑和冰片.该3种成分以及桂皮醛进行预试验,效果佳的是樟脑,故本实验选用樟脑作为该药的定量检测指标.进行HPLC测定.
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温经丸质量标准研究
目的 建立温经丸的质量标准.方法 采用薄层色谱法鉴别制剂中党参、吴茱萸、白术,制定处方附子中乌头碱的限量检查方法,采用高效液相色谱法测定处方肉桂中桂皮醛.结果 采用薄层色谱法均能检出党参、吴茱萸及吴茱萸碱、白术;桂皮醛0.139 2～0.696 0 μg线性关系良好,r=0.999 9,平均回收率为97.3%,RSD为0.91%.结论 建立的质量标准方法简便、准确,重现性好,可用于温经丸的质量控制.
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GC-MS法测定麻黄汤不同配伍对桂皮醛含量的影响
目的建立气相色谱-质谱法(GC-MS)测定麻黄汤中桂皮醛含量的方法,研究配伍对桂皮醛含量的影响.方法 GC-MS法测定桂皮醛的含量,并用MS鉴定其他色谱峰.采用L8(27)正交设计安排试验,统计软件基础研究及中药新药的研究开发.Tel:(020)61648265 E-mail:awag8486@sohu.com 罗佳波,通讯作者 Tel:(020)61648266 E-mail:ljb@fimmu.edu.cn(SPSS10.0)分析麻黄、杏仁、甘草及两两交互作用对桂皮醛含量的影响.pH计测定各组合的pH值.结果麻黄、杏仁对方中桂皮醛的含量影响差异具有显著性(P＜0.05),甘草及两两交互作用对其影响不显著(P＞0.05).各组合pH值变化不明显.结论麻黄、杏仁显著降低桂皮醛的含量,甘草及交互作用则对其含量的降低无统计学意义.
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基于一测多评法桂芍镇痫片中8种成分定量质量控制研究
目的 建立同时测定桂芍镇痫片中8种成分氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、肉桂酸、桂皮醛、柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的一测多评方法.方法 采用HPLC法,Thermo ODS C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量1.1 mL/min,柱温25℃.建立氧化芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷、肉桂酸、桂皮醛、柴胡皂苷a和柴胡皂苷d与内标芍药苷的相对校正因子,通过相对校正因子计算桂芍镇痫片中8种成分的含量,与外标法测定的结果进行对比分析,以验证一测多评法的合理性、可行性和重复性.结果 氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、肉桂酸、桂皮醛、柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的线性范围分别为2.63～65.75 μg/mL (r=0.999 7)、9.67～241.75 μg/mL(r=0.999 8)、13.59～339.75 μg/mL (r=0.999 5)、1.79～44.75 μg/mL (r=0.999 4)、2.45～61.25μg/mL (r=0.999 1)、7.98～199.50 μg/mL (r=0.999 7)、2.79～69.75 μg/mL (r=0.999 3)、2.51～62.75 μg/mL (r=0.999 5);平均加样回收率分别为98.64％、99.33％、100.02％、97.42％、96.95％、98.75％、98.21％、97.81％,RSD分别为0.89％、1.19％、1.00％、1.33％、1.51％、0.99％、1.43％、0.80％;氧化芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷、肉桂酸、桂皮醛、柴胡皂苷a和柴胡皂苷d与内标物芍药苷的相对校正因子分别为0.520 9、1.086 9、0.476 8、0.626 1、0.802 1、0.713 8、0.367 0;一测多评法的计算结果与外标法的实测值无显著性差异.结论 建立的一测多评法可作为一种简便准确的质量评价模式用于桂芍镇痫片中氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、肉桂酸、桂皮醛、柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的质量控制.
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肉桂及其混伪品的HSGC-MS的实验比较研究
目的比较肉桂及其混伪品的顶空气相指纹图谱,以此鉴别肉桂药材的真伪.方法采用顶空气相色谱-质谱(HSGC-MS)计算机联用技术,分别测定肉桂、桂皮、柴桂的指纹图谱并加以比较.结果肉桂的顶空气相指纹图谱与混伪品桂皮、柴桂有明显区别,其指纹特征峰位于10.60,15.60 min处,主要成分为桂皮醛.结论此方法能有效地鉴别肉桂及其混伪品,具有快速、准确、操作简单,不需对样品进行提取分离,可直接进行测定的特点.
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桂枝茯苓方的化学成分、药理作用及质量标志物(Q-marker)的预测分析
桂枝茯苓方为经典的活血化瘀方,具有改善血液流变性、调节内分泌、抗炎、抗肿瘤、镇痛等作用.古代用于治疗妇人妊娠下血、行经腹痛、产后恶露不尽等症.现代临床其常用于治疗妇科疾病,如子宫肌瘤、卵巢囊肿、痛经、子宫内膜异位症等.对桂枝茯苓方近年来的化学成分、药理作用、临床应用以及质量控制的研究进展进行综述,并在此基础上,基于中药质量标志物(Q-marker)的“五原则”对桂枝茯苓方的Q-marker进行预测分析,以期为桂枝茯苓方的质量控制研究提供参考.
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桂枝甘草汤中10种成分在不同煎煮时间的变化研究
目的：考察桂枝甘草汤中甘草酸、甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、苯甲酸钠、香豆素、桂皮醇、桂皮酸、桂皮醛10种成分在不同煎煮时间下的变化。方法采用 HPLC-DAD 多波长切换法同时测定不同煎煮时间（10、20、30、40、50、60、90 min）下桂枝甘草汤中10种成分。Hypersil Gold-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5μm）；流动相：乙腈–0.1%磷酸溶液，梯度洗脱；体积流量：0.8 mL/min；柱温：20℃；进样量：20μL；检测波长：230 nm（甘草苷、甘草素、苯甲酸钠）、254 nm（甘草酸，桂皮醇）、276 nm（香豆素、桂皮酸、桂皮醛）、370 nm（异甘草苷、异甘草素）。结果随着煎煮时间的延长，10种成分的总量在30 min处达到大值，且终趋向稳定；桂枝中各成分的变化大体上是先增加后减少，在30 min处达到大值；炙甘草中各成分量的变化除了在40 min处有减少外，基本呈现递增趋势。结论确定桂枝甘草汤的煎煮时间为30 min，为其临床应用提供了科学依据。
