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绝经后女性线粒体功能及雌激素对其影响
目的 探讨绝经前、后健康女性线粒体功能变化及雌激素抗衰老的线粒体机制.方法 2008年3月至9月,选取绝经前、后健康女性共计41例,按是否绝经将其分为未绝经组(n=15)和绝经组(n=26) (研究遵循程序符合中山大学附属第三医院负责人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,且分组征得受试者知情同意).比较两组血小板线粒体相对膜电位差(mitochondrial membrane potential,ΔΨm)及三磷酸腺苷(ATP).并将绝经组血小板线粒体标本分为2份,其中一份血小板线粒体用苯甲酸雌二醇(estrogen benzoate,EB)孵育1 h(绝经+雌激素组),比较孵育前、后线粒体膜电位差及三磷酸腺苷水平变化.结果 未绝经组和绝经组线粒体相对膜电位差分别为1.59±0.29和1.30±0.17;三磷酸腺苷水平分别为(3.38±0.67)μg/mL和(1.60±0.97)μg/mL,两组比较,差异有显著意义(P<0.05).绝经组肘静脉血标本经苯甲酸雌二醇孵育1 h后(绝经+雌激素组),线粒体相对膜电位差及三磷酸腺苷水平显著增加,与绝经组孵育前比较,差异有显著意义(P<0.05).结论 女性绝经后线粒体功能减退,绝经后加速衰老的机制可能与雌激素撤退导致线粒体功能障碍有关,雌激素可通过保护线粒体功能从而发挥抗衰老作用.
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细胞色素C与细胞凋亡的研究进展
凋亡是机体清除衰老细胞、受损细胞、感染细胞以维持机体自身稳定性的有效途径.近年来线粒体在细胞凋亡过程中的中心调控作用已逐渐受到人们的关注和认可.细胞凋亡时,线粒体的结构和功能发生重大变化,包括呼吸链电子传递的中断、能量合成受阻、线粒体膜电位下降,并释放细胞色素C(Cyt C)、AIF、Smac/DIABLO、Omi/HtrA2等促凋亡因子入胞浆后激活Caspase凋亡蛋白酶[1],导致细胞死亡.其中Cyt C是线粒体释放的重要的促凋亡因子之一,人们对Cyt C的认识也从其对能量代谢的调控进展为其在凋亡过程中的重要作用.因而有关细胞色素C的促凋亡活性调节分子机制和释放机制的研究已成为当前研究的热点.本综述将对此进行讨论.
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呫吨酮并吡啶衍生物XP-15抗人胃癌MGC-803细胞作用及其机制研究
目的 研究呫吨酮并吡啶衍生物9-(2-吗啡啉乙酰胺基)-7H-吡啶并(4,3-c)呫吨-7-酮(XP-15)抗人胃癌MGC-803细胞的作用及其可能的机制.方法 实验包括5个组,分别为空白对照组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组、10 μmol/LXP-15组、50 μmol/L XP-15组和100μmol/L XP-15组.通过MTT法、细胞形态学和克隆实验观察XP-15对MGC-803细胞增殖的影响;应用Hoechest33258和PI双染法观察给药前后MGC-803细胞凋亡情况;用荧光分光光度计检测XP-15对细胞内钙Ca2+i及线粒体膜电位的影响;用RT-PCR检测Bad和金属硫蛋白1A (metallothionein 1A,MT-1A)mRNA的表达,比较给药前后的变化.结果 XP-15能明显抑制MGC-803细胞增殖,x2=19.40,P＜0.01;对MGC-803细胞克隆的抑制作用,呈剂量和时间依赖性,x2=16.58,P＜0.01.XP-15作用MGC-803细胞24 h后,100 μmol/LXP-15引起MGC-803细胞凋亡率为25.1％,明显高于空白对照组的9.4％,x2=29.76,P＜0.01.XP-15作用后,MGC-803细胞的Ca2+ i(x2=165.81,P＜0.01)和线粒体膜电位(x2=830.77,P＜0.01)降低,Bad和MT-1A mRNA表达增加明显.结论 XP-15能诱导MGC-803细胞凋亡,其机制可能是通过降低MGC-803细胞Ca2+i和线粒体膜电位以及上调MT-1A表达来实现的.
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姜黄素损伤线粒体诱导食管癌Ec-109细胞凋亡的研究
目的:探讨姜黄素损伤线粒体诱导食管癌Ec-109细胞凋亡的作用机制.方法:80μmol/mL姜黄素作用于食管癌Ec-109细胞不同时间后,流式细胞仪检测细胞亚二倍体凋亡峰变化及线粒体膜电位变化;蛋白质印迹法检测细胞色素C释放及Caspase-9表达.结果:姜黄素呈时间依赖性诱导食管癌Ec-109细胞凋亡,12、24和48 h细胞亚二倍体凋亡峰分别为(15.89±2.12)%、(26.80±1.87)%和(36.97±1.80)%,对照组为(3.23±0.24)%,总体比较差异有统计学意义,F=6.75,P＜0.01,各组间比较差异均有统计学意义,P＜0.01.姜黄素作用3、6和12 h后线粒体膜电位分别为84.78%、67.03%和63.16%,对照组为97.17%,差异有统计学意义,F=5.12,P＜0.05,各组间比较,6 h组与12 h组差异无统计学意义,P=0.062,余各组间有差别;6 h出现细胞色素C表达,12 h表达高;12 h检测到Caspase-9表达,24 h表达高.结论:姜黄素呈时间依赖性诱导食管癌细胞凋亡是通过损伤细胞线粒体、使之释放出细胞色素C以及激活Caspase-9实现的.
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槲皮素诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的研究
目的:观察槲皮素(quercetin)体外对肝癌SMMC-7721细胞的生长抑制和诱导凋亡作用,并探讨线粒体在诱导凋亡机制中的作用.方法:以10、30、60和100 μmol/L槲皮素作用于体外培养的SMMC-7721细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,Annexi-V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡情况}吖啶橙(acridine or-ange,AO)染色法观察细胞凋亡时形态变化;JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)变化.结果:槲皮素体外能抑静肝癌SMMC-7721细胞的生长(P<0.01),诱导细胞发生凋亡,并呈现量效和时效关系.10、30、60和100 μmol/L槲皮素作用72 h引起的细胞抑制率(F=343.71,P<0.01)和凋亡率(F=234.17,P<0.01)明显高于时照组.槲皮素作用48 h后,AO染色图片可见细胞膜呈泡状膨出和凋亡小体等.凋亡过程中绒粒体膜电位下降.结论:槲皮素体外能抑制肝癌SMMC-7721细胞生长,诱导细胞凋亡发生,线粒体膜电位下降在细胞凋亡过程中可能起到重要作用.
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岩舒注射液诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡及其机制
目的:探讨岩舒注射液(复方苦参注射液)对体外培养人胃癌细胞株SGC-7901的生长抑制和诱导凋亡作用.方法:采用MTT法检测岩舒注射液对SGC-7901细胞的生长抑制作用;Annexin V-FITC+PI双参双数检测细胞凋亡;流式细胞仪测定经不同浓度岩舒注射液处理后SGC-7901细胞周期、Fas、 Bcl-2蛋白表达及其线粒体膜电位.结果:岩舒注射液对SGC-7901细胞生长有抑制作用,并呈剂量-效应关系,P＜0.01.其48 h IC50值为7/200原液稀释浓度;SGC-7901细胞经岩舒注射液处理后可发生凋亡;岩舒注射液使细胞周期阻滞于G0/G1期(P＜0.01),但对于Fas、Bcl-2蛋白表达无影响;可降低线粒体膜电位(P＜0.01).结论:岩舒注射液对人胃癌SGC-7901细胞有生长抑制和诱导凋亡作用,其诱导凋亡机制可能与细胞周期阻滞、抑制肿瘤细胞增殖、线粒体膜电位降低有关.
关键词： 岩舒注射液 细胞凋亡 人胃癌细胞SGC-7901 线粒体膜电位 -
新型多胺缀合物NNAMB诱导K562细胞凋亡及其机制
目的 探讨新型多胺缀合物NNAMB诱导K562细胞凋亡及其分子机制.方法 采用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法、台盼监拒染法检测细胞活力;Hoechst33258染色观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞周期变化、凋亡率、线粒体膜电位的变化;Western blot检测caspase-3、caspase-8、caspase-9和cytochrome c的表达.结果 NNAMB抑制K562细胞的生长,并呈现剂量及时间依赖性.随着NNAMB浓度的增加和作用时间的延跃,Sub-G1期细胞明显增加,线粒体膜电位下降.经NNAMB处理后的K562细胞中,可见到明显的凋亡细胞.蛋白印迹检测表明,NNAMB可诱导caspase-3、easpase-9的活化及线粒体cytochrome c释放到胞浆中,但caspase-8的表达无明显变化.结论 NNAMB能显著抑制K562细胞增殖,并可通过内源性线粒体途径诱导细胞凋亡.
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大剂量高压氧超早期治疗对局部脑梗死大鼠细胞凋亡的影响
目的观察大剂量高压氧（hyperbaric oxygenation，HBO）超早期治疗对永久性大脑中动脉阻塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）大鼠细胞凋亡的影响。
方法制作SD大鼠永久性MCAO模型，随机分为对照组（n=36）和HBO组（n=36），HBO组大鼠于模型制备成功后3 h予单次9 h HBO治疗，压力0.2 MPa。于模型成功后3 h、13 h、72 h，行大鼠Garcia神经功能评分，于13 h、72 h分别将大鼠脑组织进行2，3，5苯四氮唑（tetrazolium chloride，TTC）染色测定梗死容积百分比，应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling，TUNEL）检测细胞凋亡，流式细胞仪检测线粒体膜电位。
结果①两组大鼠在MCAO 13 h时（P均=0.007）和72 h时（P均＜0.001）均较同组MCAO 3 h时神经功能明显改善，但各时间点两组间神经功能无显著差异。②13h时，两组大鼠脑梗死容积比无显著差异；72 h时，对照组大鼠脑梗死容积比较13 h时增大（P=0.02），而HBO组无显著变化，HBO组较对照组脑梗死容积比小（P=0.02）。③HBO组及对照组在13 h、72 h均可见凋亡细胞，13 h时HBO组凋亡细胞数少于对照组（P=0.04）。④大鼠MCAO后线粒体膜电位降低，HBO组在13 h、72 h的线粒体膜电位均高于对照组，差异有显著性（P均＜0.001）。
结论大剂量HBO超早期治疗可缩小大鼠脑梗死容积，抑制线粒体膜电位降低，进而减少细胞凋亡可能是高压氧治疗脑梗死的机制之一。 -
Aβ1-42引起神经胶质瘤细胞U251中蛋白聚集体形成活性氧含量和线粒体膜电位增高
阿尔茨海默病 (AD)主要病理特征之一是大脑内老年斑 (SP) 中大量的β-淀粉样蛋白 (Aβ) 沉积,在SP的形成过程中Aβ1-42发挥启动蛋白聚集体形成的重要作用. 而Aβ1-42是否能够激活细胞的氧化应激反应或导致线粒体膜电位的改变目前尚未清楚.因此,我们于2003年8月至2004年3月对Aβ1-42对细胞内线粒体膜电位等的影响进行了探讨,报道如下.
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加味补中益气汤对少弱精子症小鼠精液质量及线粒体功能的影响
目的:本实验通过观察加味补中益气汤对雷公藤多苷诱导少弱精子症小鼠的精液质量、线粒体膜电位和线粒体超微结构的影响,探讨加味补中益气汤治疗少弱精子症的作用机制.方法:以雷公藤多苷制备少弱精子症小鼠模型,随机分为正常组、模型组、对照组、加味补中益气汤低剂量组、加味补中益气汤高剂量组,每组12只,应用伟力精子测试仪检测小鼠精液质量,应用JC-1荧光染色流式细胞技术测定小鼠精子线粒体膜电位正常的精子百分率(JC-1+％),应用日立HT7700型透射电镜观察附睾精子超微结构.结果:对照组、中药组的A级、A+B级精子的百分比与模型组相比有统计学意义(P＜0.05);对照组与中药低剂量组相比有统计学意义(P＜0.05);中药高剂量组与对照组相比无统计学意义(P＞0.05).对照组、中药组的精子浓度、总数与模型组相比具有统计学意义(P＜0.05);对照组、中药低剂量组、中药高剂量组相互之间无统计学意义(P＞0.05).模型组小鼠精予JC-1+％较正常组显著下降(P＜0.05);中药高剂量组与中药低剂量组和对照组相比有显著性差异(P＜0.05);中药低剂量组与对照组相比有显著性差异(P＜0.05).正常组小鼠精子的尾部中段横切面可见完整的线粒体鞘结构.模型组整个精子线粒体肿胀明显、纤维明显疏松、轴丝断裂.药物干预后各组精子线粒体鞘结构较完整,肿胀较前显著减轻,纤维、轴丝结构较整齐、完整.结论:加味补中益气汤可以显著改善睾丸精子的发生及成熟,其可能的机制是通过调节小鼠精子线粒体功能(改善线粒体膜电位及超微结构)从而改善睾丸精子发生达到提高精子质量的目的.
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当归提取液对培养的成年人视网膜神经细胞活性的影响
目的 研究当归提取液对体外培养的成年人视网膜神经细胞活性的影响.设计 实验研究.研究对象 成年人视网膜神经细胞.方法 体外培养成年人视网膜神经细胞,加入倍比稀释浓度(1.25、2.50、5.00、10.00、20.00、40.00、80.00g/L)的当归提取液各50μl,培养至24h和72 h时,以MTT法检测细胞存活和生长情况;共聚焦显微镜测定细胞线粒体膜电位荧光强度值变化,记录培养液未加入当归提取液以及两次加入当归提取液(两次加药相隔94秒)后细胞线粒体膜电位荧光强度的变化,比较首次加药、再次加药及未加药间细胞荧光强度峰值.主要指标 细胞存活和生长情况,细胞线粒体膜电位峰值.结果 成年人视网膜神经细胞培养至24h及72 h时MTT法检测显示,80.00g/L当归提取液对成年人视网膜神经细胞保护作用分别相当于对照组的256％和261％.线粒体膜电位检测荧光强度的变化显示,首次加入当归提取液后荧光强度峰值(26.02±7.62)较加药前(4.95±0.02)增加了437％(P＜0.001);再次加入当归提取液后荧光强度峰值(54.17±14.15)较加药前(4.95±0.02)增加了997％(P＜0.001).表明当归提取液能够显著升高成年人视网膜神经细胞的膜电位并使其兴奋性呈波动性变化.结论 当归提取液对成年人视网膜神经细胞有一定的保护作用,有望成为一种新的防治视网膜疾病的辅助治疗药物.
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茶多酚对高糖条件下大鼠晶状体上皮细胞死亡率及线粒体膜电位的影响
目的 探讨茶多酚对高糖条件下培养的大鼠晶状体上皮细胞死亡率(CDR)及线粒体膜电位(MMP)的影响,阐明糖尿病性白内障的发生机制及茶多酚干预的疗效及机制.设计实验研究.研究对象体外培养的大鼠晶状体上皮细胞.方法 体外培养大鼠品状体上皮细胞,培养基中葡萄糖浓度分别为5、30 mmol/L(L1组和L2组),另在30 mmol/L葡萄糖浓度培养基中加入0.1μM和0.3μM的茶多酚进行干预(L3组和L4组).流式细胞仪检测各条件下大鼠品状体上皮细胞MMP和CDR的变化.主要指标大鼠晶状体上皮细胞CDR及MMP.结果 L1、L2、L3、L4组大鼠晶状体上皮细胞CDR分别为(0.68±0.32)%、(13.50±4.48)%、(0.64±0.48)%、(0.50±0.30)%,L1与L2组比较、L2与L3组比较差异均有统计学意义(P=0.04,P=0.04),L3与L4组比较差异无统计学意义(P=0.99).L1、L2、L3、L4组大鼠晶状体上皮细胞MMP分别为95.53±4.61、37.38±3.56、110.02±8.04、102.63±9.48,L1与L2组比较、L2与L3组比较差异均有统计学意义(P=0.01,P=0.01),L3与L4组比较差异无统计学意义(P=1.00).结论 高糖条件下培养的大鼠晶状体上皮细胞线粒体膜电位降低、细胞死亡率明显升高.茶多酚具有稳定线粒体膜电位的作用,可延缓细胞凋亡,降低细胞死亡率.(眼科,2009,18:104-107)
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五子衍宗汤对Leber遗传性视神经病变患者线粒体膜电位的影响
目的 观察中药五子衍宗汤对Leber遗传性视神经病变(LHON)患者线柱体膜电位的影响.方法 将符合要求的30例LHON患者分为治疗组和对照组,治疗组口服五子衍宗汤及辅酶Q10片,对照组口服辅酶010片.疗程90天.观察治疗前后患者外周血淋巴细胞线粒体膜电位的变化.结果 治疗组线粒体膜电位改善.对照组线粒体膜电位未见改善.两组组间比较治疗组线粒体膜电位变化明显.结论 五子衍宗汤能提高LHON患者外周血淋巴细胞线粒体膜电位.
关键词： 五子衍宗汤 Leber遗传性视神经病变 线粒体膜电位 -
地尔硫(艹卓)对缺氧所致血管内皮细胞线粒体膜电位变化的保护作用
目的 观察地尔硫(艹卓)对人大血管内皮细胞缺氧损伤时线粒体膜电位的影响.方法 将培养的血管内皮细胞分为对照组、单纯缺氧组和加入地尔硫卓后再缺氧组,应用激光共聚焦显微镜扫描,并测定标记的血管内皮细胞每秒钟线粒体膜电位值,观察缺氧前后人大动脉血管内皮细胞线粒体膜电位变化.结果 与对照组相比,单纯缺氧组的线粒体膜电位水平显著降低(P＜0.01);加入地尔硫(艹卓)后再进行缺氧组与单纯缺氧组相比,内皮细胞线粒体膜电位水平有显著升高(P＜0.01),与对照组相比内皮细胞线粒体膜电位水平变化不明显(P＞0.05).结论 缺氧引起血管内皮细胞线粒体膜电位降低;地尔硫(艹卓)可抑制缺氧损伤所致的线粒体膜电位的降低,从而具有稳定线粒体膜电位、保护血管内皮细胞的作用.
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青蒿琥酯对肝癌细胞生长的抑制作用及其机制
目的 探讨青蒿琥酯(ART)对肝癌细胞生长的抑制作用及其机制.方法 以不同浓度青蒿琥酯作用肝癌SMMC-7721细胞24h,采用MTT法检测细胞生长抑制率(IC50)值.根据IC50值选取3个青蒿琥酯浓度(30、60、120μg/ml)进行后续实验.以不同浓度青蒿琥酯(0、30、60、120μg/ml)作用SMMC-7721细胞24h,0μg/ml青蒿琥酯以生理盐水代替青蒿琥酯作为对照组,分别命名为对照组、30μg/ml ART组、60μg/ml ART组、120μg/ml ART组.倒置显微镜观察细胞形态;流式细胞术检测各组细胞周期、细胞凋亡、细胞线粒体膜电位及Bcl-2和Bax蛋白表达水平.结果 MTT结果显示,青蒿琥酯对肝癌SMMC-7721细胞有生长抑制作用,且呈剂量依赖性,IC50=60.27±1.51μg/ml.倒置显微镜下观察,青蒿琥酯作用24h后,SMMC-7721细胞中呈现不同程度的死亡细胞,且随着青蒿琥酯浓度增加,死亡破碎细胞也增加.30、60、120μg/ml ART组细胞凋亡率(分别为4.44％±0.32％、6.54％±0.84％、12.92％±1.22％)与对照组(2.15％±0.10％)相比明显增高(P<0.01).30、60、120μg/ml ART组细胞周期G0/1期细胞数(分别为74.91％±0.69％、77.14％±1.39％、78.62％±0.55％)与对照组(70.60％±0.60％)相比明显增高(P<0.01),而30、60、120μg/ml ART组细胞增殖指数(PI)(分别为25.09％±0.69％、22.86％±1.39％、21.38％±0.55％)与对照组(29.40％±0.60％)相比明显降低(P<0.01).30、60、120μg/ml ART组细胞线粒体膜电位(分别为244.36±3.27、229.51±4.74、173.17±6.93)与对照组(277.82±5.68)相比明显降低(P<0.01).30、60、120μg/ml ART组细胞中Bcl-2蛋白表达(分别为220.86±7.76、195.64±9.23、148.32±8.19)与对照组(256.86±7.78)相比明显降低(P<0.01),而Bax蛋白表达(分别为214.22±2.01、231.54±6.16、260.96±11.38)与对照组(186.21±8.82)相比明显增高(P<0.01).结论 青蒿琥酯可抑制肝癌SMMC-7721细胞生长,其作用机制与诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞有关.
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游泳训练后大鼠骨骼肌细胞自由基代谢、线粒体膜电位变化与细胞凋亡的关系
目的:研究游泳训练前后大鼠骨骼肌自由基代谢、线粒体膜电位变化与细胞凋亡的关系,寻找评定运动性疲劳与恢复的可行性指标.方法:50只雄性SD大鼠(100±5)g,随机分为对照组(G1)、训练1天组(G2)、训练6天组(G3)、训练12天组(G4)、训练18天组(G5).用流式细胞仪检测肌细胞线粒体膜电位、DNA倍体分析,MDA测定采用硫代巴比妥酸比色法,SOD测定使用放免法,JEM-1200EX电镜及脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡.结果:游泳训练后各组骨骼肌细胞线粒体膜电位均发生改变,G3组低.运动后G3、G5组的DNA出现凋亡峰.TUNEL染色显示,游泳训练后大鼠骨骼肌呈棕黄色的凋亡细胞明显增加,G3组比例高.各训练组之间SOD活性变化差异显著,G3、G4组MDA数量显著升高.电镜观察G3组肌细胞溶酶体增多,部分线粒体嵴消失,但膜完整,形似空泡,枯否细胞活跃.G5组肌细胞的超微结构似G3组,细胞完整.结论:游泳训练可诱发细胞凋亡,不同运动负荷对线粒体膜电位、MDA、SOD的影响各异,运动引起线粒体膜电位下降的同时可导致细胞凋亡.线粒体膜电位、SOD/MDA比值变化可能是诱导细胞凋亡的关键因素之一.
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游泳训练后大鼠肝细胞SOD、MDA、线粒体膜电位变化与细胞凋亡的关系
目的:通过对游泳训练前后大鼠肝细胞SOD、MDA、线粒体膜电位的测定及DNA倍体分析,综合观察不同负荷阈所致的肝细胞凋亡,探讨不同负荷阈与肝细胞凋亡的关系.方法:50只雄性Sprague-Dauley大鼠(100g±5g),随机分为对照组(G1)、1天训练组(G2)、6天训练组(G3)、12天训练组(G4)和18天训练组(G5).训练方案为每天游泳30分钟,休息40分钟后再游泳20分钟.取材当天训练后休息40分钟取材.用流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测肝细胞线粒体膜电位、DNA倍体分析.JEM-1200EX电镜及末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡.结果:随着游泳训练时间的延长,肝细胞线粒体膜电位的变化为升高、恢复、再升高.运动后各组DNA均出现亚"G1"峰,即凋亡峰.6天训练组凋亡细胞比例高,可见凋亡小体.肝细胞SOD活性和MDA含量显著升高.结论:运动引起线粒体膜电位、DNA倍体、SOD、MDA发生改变,提示这些变化可能诱导细胞凋亡.
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长期耐力运动对大鼠肝细胞自由基代谢、线粒体膜电位及细胞凋亡的影响
目的:探讨长期游泳耐力训练大鼠肝细胞凋亡的变化与机制,为进一步研究运动引发的细胞凋亡理论和体育实践指导提供实验依据.方法:采用SD雄性大鼠28只,适应性喂养1周后,随机分为8周对照组、8周运动组、12周对照组和12周运动组.运动组大鼠于每日上午8～9时进行无负重游泳运动,每周5次.运动负荷为第1周每次游泳30min,第2周60min,第3周90min,保持此运动量一直到第8周或12周结束.检测大鼠肝细胞自由基代谢、线粒体膜电位和细胞凋亡变化.结果:与8周对照组相比,8周运动组肝细胞凋亡率显著升高(P<0.01),线粒体膜电位降低,但无显著性差异,SOD/MDA值显著下降(P<0.01).与12周对照组相比,12周运动组肝细胞凋亡率显著升高(P<0.05),线粒体膜电位显著升高(P<0.01),SOD/MDA值显著性下降(P<0.05).结论:长期耐力运动可引起大鼠肝细胞凋亡,随着运动时间的延长,机体出现适应.
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P糖蛋白抑制X射线诱导凋亡及对线粒体膜电位的影响
目的观察P糖蛋白(P-gp)对X射线诱导凋亡和线粒体膜电位(△Ψm)的影响.方法运用流式细胞仪检测X射线照射后不同时间点细胞凋亡率和△Ψm的动态变化.结果P-gp功能抑制组细胞在X射线照射后6、12、24 h细胞凋亡率分别为25.53%±2.85%,30.43%±2.21%和39.03%±2.60%;对照组分别是16.13%±1.16%,21.73%±1.31%和27.53%±2.55%.抑制组显著高于对照组(P＜0.01).在X射线照射后6、12、24 h P-gp抑制组和对照组细胞△Ψp平均荧光强度(MIF)均较照射前降低,但P-gp抑制组各时间点△Ψm MIF值较对照组细胞下降更显著(P＜0.01).结论P糖蛋白对X射线诱导凋亡具有显著抑制效应,其机理可能和其稳定的△Ψm有关.
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电离辐射对肺腺癌细胞A549线粒体的影响
目的 研究电离辐射对肺腺癌细胞A549线粒体的影响.方法 0、0.5、3和8 Gy60Co γ射线照射A549细胞后,利用JC-1探针检测照射后肺腺癌细胞A549线粒体膜电位的变化；使用ATP试剂盒检测辐射对A549细胞ATP生成的影响；利用实时定量PCR方法检测线粒体拷贝数.结果 在照射后24 h,各剂量组A549细胞膜电位出现明显改变(F=243.44,P＜0.05),与0 Gy照射组相比,0.5和3 Gy照射的A549细胞线粒体膜电位显著升高(t=-10.12、-5.59,P＜0.05),而8 Gy照射的线粒体膜电位显著降低(t=15.22,P＜0.05),照后48 h各照射组线粒体膜电位基本恢复正常(F=10.36,P＜0.05)；照射后24 h ATP水平与膜电位变化趋势一致(F=97.08,P＜0.05),其中0.5和3 Gy A549细胞中ATP水平升高(t=1.66、7.27,P ＜0.05),8 Gy照射组降低(t=-8.24,P＜0.05)；照射后48 h,ATP水平也发生变化(F =39.49,P＜0.05),0.5和3 Gy照射后A549细胞中ATP水平显著高于0 Gy组(=4.60、8.53,P＜0.05).照射后24 h线粒体拷贝数显著增加,其中0.5 Gy mtDNA拷贝数增加至对照组的12倍(t=0.02,P＜0.05),3和8 Gy组mtDNA拷贝数分别增加至对照组的7和10倍(=9.68、15.10,P＜0.05).结论 大剂量电离辐射会导致A549细胞线粒体膜电位降低,从而影响ATP的生成,中等剂量以下的照射会导致A549细胞线粒体膜电位代偿性增高,从而使ATP的生成增多,8 Gy以内的电离辐射可使mtDNA拷贝数代偿性升高.
