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胃癌患者术后多项免疫分子表达对预后的影响
目的 总结手术切除Ⅰ-Ⅲ期胃癌的临床特点,探讨胃癌术后常规检测分子表皮生长因子受体1 (HER1)、HER2、P53、血管内皮生长因子(VEGF)、拓扑异构酶Ⅱα (TOPⅡα)、Ki67、P糖蛋白(P170)的表达及对预后的影响.方法 回顾性分析41例Ⅰ-Ⅲ期胃癌手术病例,综合临床、病理特征及术后7项常规分子标记物的免疫组织化学指标,对患者无疾病生存时间(DFS)采用SPSS 17.0软件包进行单因素及多因素分析.结果 全部病例术后随访时间为36个月,中位随访期18个月,1年总生存率为95.12％,中位DFS为17个月,1年DFS生存率为70.59％.术后患者HER1、HER2、P53、P170、Ki67、VEGF和TOPⅡα均有阳性表达,HER2、P53、VEGF和TOPⅡα高表达DFS降低(P＜0.05).结论 HER2、P53、VEGF和TOPⅡα阳性表达DFS降低.
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弥漫性大B细胞淋巴瘤患者FOXP1、PIM1与P-gp的表达及相关性研究
目的 研究弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者FOXP1、PIM1与P-gp的表达水平及相关性.方法 选取对照组(18例反应性淋巴结增生),初治组(40例DLBCL初治患者)和复发组(14例DLBCL复发患者),S-P法检测FOXP1、PIM1及P-gp表达量.结果 FOXP1、PIM1与P-gp表达量组间比较均有显著差异(P＜0.05),在初治组及复发组FOXP1、PIM1与P-gp表达均呈正相关(FOXP1与P-gp:初治组r=0.370,复发组r=0.602,P＜0.05;PIM1与P-gp:初治组r=0.402,复发组r=0.648,P＜0.05),FOXP1与PIM1之间表达无相关性(初治组r=0.261,复发组r=0.482,P＞0.05).结论 FOXP1、PIM1与P-gp的表达促进了DLBCL疾病发生、发展,FOXP1、PIM1高表达与产生多药耐药有关.
关键词： 弥漫性大B细胞淋巴瘤 FOXP1 PIM1 P糖蛋白 -
苯妥英钠耐药性颞叶内侧癫痫大鼠模型的构建
目的 验证锂-匹罗卡品化学诱导及抗癫痫药物(AEDs)筛选构建的苯妥英钠耐药性颞叶内侧癫痫大鼠模型脑中AEDs浓度及多药转运蛋白表达.方法 实验选取雌性6～8周SD大鼠30只,体重160～ 180g(广东省实验动物研究所),采用锂-匹罗卡品化学诱导大鼠发生慢性颞叶内侧癫痫,视频脑电图(VEEG)监测苯妥英钠筛选期治疗效果,将颞叶内侧癫痫大鼠分成耐药性及不耐药性模型.采用活体微透析技术验证耐药性及不耐药性模型鼠脑中AEDs的浓度差异,免疫组织化学方法 检测两组模型鼠脑中p糖蛋白的表达.结果 有16只大鼠成功构建为慢性颞叶内侧癫痫模型,筛选出耐药模型大鼠6只(6/16).苯妥英钠耐药性模型大鼠脑/血浆的时间药物浓度曲线的曲线下面积比值显著低于不耐药性模型大鼠(0.15±0.03 w.0.28±0.05,P＜0.05).苯妥英钠耐药性模型鼠较不耐药性模型鼠海马各区P糖蛋白表达明显增高(P＜0.05).结论 苯妥英钠耐药性颞叶内侧癫痫大鼠脑中AEDs浓度低,可能与脑中P糖蛋白过表达有关.
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青蒿琥酯对硼替佐米耐药骨髓瘤细胞株的耐药逆转作用及机制
目的:探讨青蒿琥酯对硼替佐米耐药骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞株的增殖抑制作用,并探讨其逆转骨髓瘤细胞耐药的作用机制.方法:采用硼替佐米浓度梯度递增法,以人MM细胞株NCI-H929为亲本,建立硼替佐米耐药的NCI-H929细胞株NCI-H929BR.采用噻唑蓝(MTT)比色法检测青蒿琥酯对NCI-H929BR的增殖抑制及对硼替佐米的耐药逆转作用;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测核转录因子-κB p65(nuclear factor-κB p65,NF-κB p65)蛋白,磷酸化核转录因子-κB p65(phospho-nuclear factor-κB p65,NF-κB p-p65)蛋白,P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp),B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)蛋白以及Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)的表达变化.结果:采用浓度梯度递增法成功建立了硼替佐米耐药的NCI-H929细胞株NCI-H929BR,其耐药倍数为20.2倍.青蒿琥酯对NCI-H929BR有明显的增殖抑制作用,抑制效应呈浓度依赖性;硼替佐米(50 nmol·L-1)单药对NCI-H929BR无明显增殖抑制作用,青蒿琥酯(12.5 mg·L-1)单药的抑制率为(23.53 ±2.21)％ (P ＜0.05),两药联合的抑制率为(60.71±3.43)％(P＜0.01);青蒿琥酯处理后,NCI-H929BR的凋亡率上升,NF-κB p65,NF-κB p-p65,P-gp,Bcl-2表达下降,Bax表达上升,呈浓度依赖性.结论:青蒿琥酯可抑制NCI-H929BR的增殖,促进细胞凋亡,逆转其对硼替佐米的耐药性,下调NF-κB p65,p-p65,P-gp以及Bcl-2的表达,上调Bax的表达可能为其逆转肿瘤细胞耐药的作用机制.
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小檗胺逆转MCF7/ADR细胞耐药性及其机制探讨
目的探讨钙调素拮抗剂小檗胺(BBM)逆转多药耐药的可能性及其机制. 方法乳腺癌细胞MCF7及其耐阿霉素(ADR)MCF7/ADR细胞与ADR及不同浓度BBM共培养,经四唑盐(MTT)比色法计算半数抑制浓度(IC50)、耐药倍数和增敏倍数;流式细胞仪检测细胞内ADR相对含量和P糖蛋白(P-gp)表达水平;半定量RT-PCR检测mdr1基因mRNA表达. 结果 ADR对MCF7和MCF7/ADR的IC50分别为(0.98±0.06)μmol/L和(101.20±5.72)μmol/L;MCF7/ADR对ADR的耐药倍数为103.MCF7/ADR细胞5μmol/L、10μmol/L和20μmol/LBBM时对ADR呈剂量依赖性增敏作用,增敏倍数分别为2.76、5.88和28.26倍(均P值＜0.01).用10μmol/或20μmol/LBBM处理MCF7/ADR细胞2?h,细胞内的ADR相对含量增加2.49和2.81倍(P＜0.01);处理72h使P-gp表达分别下降10.09%和62.82%(均P值＜0.01),且mdr1基因mRNA相对表达值也呈下调趋势. 结论 BBM提高耐药细胞MCF7/ADR胞内的ADR浓度,下调mdr1基因及P-gp的表达,使其对ADR的敏感性显著增高.
关键词： 小檗胺 阿霉素 MCF7/ADR细胞系 P糖蛋白 MDR1基因 -
汉防己甲素联合柔红霉素对K562/A02细胞株P21蛋白和P糖蛋白表达的影响
本研究旨在探讨汉防己甲素(TET)对人慢性髓系白血痛(CML)急性红白血病细胞株K562/A02多药耐药的逆转作用,及其逆转耐药与细胞周期依赖性激酶抑制因子(p21)、P糖蛋白(P-gP)及其基因的关系,为TET的临床应用提供新的理论基础.K562/A02细胞实验分组为:①单用柔红霉素(DNR)对照组;②DNR+TET0.5 mg/L组;③DNR+TET1.0 mg/L组;④DNR+TET 2.0 mg/L组.采用Western blot法检测实验各组K562/A02细胞P21的表达.采用流式细胞仪(FCM)检测实验各组细胞P-gP的表达,采用半定量PCR(RT-PCR)测定细胞MDRI基因mRNA表达水平.结果表明:K562/A02细胞中P21蛋白的表达随着TET浓度的增加而增强,P-gP蛋白的表达随着TET浓度的增加而减低.K562细胞中mdr1基因几乎无表达,K562/A02细胞中mdr1基因高表达,随着TET浓度的增加K562/A02细胞mdr1基因表达不断降低.结论:TET强对K562/A02耐药具有逆转作用且呈浓度依赖性,其逆转耐药可能与其上调P21蛋白的表达、下调mdr1及P-gP的表达有关.
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多西他赛诱导HL-60/ADR细胞凋亡及对P-gp、BCL-2、BAX蛋白表达的影响
本研究观察多西他赛对白血病耐药细胞株HL-60/ADR诱导凋亡的作用并探讨其对P-gP、BCL-2、BAX蛋白表达的影响,为临床解决白血病耐药问题提供新的思路和理论依据.采用光学显微镜、透射电子显微镜观察细胞形态学改变,Annexin V FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡比率,MTT法检测细胞增殖抑制率,免疫细胞化学染色及计算机图文分析系统检测P-gP、BCL-2、BAX蛋白的表达水平.结果表明:HL-60/ADR细胞高表达P-gp,各浓度组之间P-gP的表达量没有差别.多西他赛对HL-60/ADR细胞生长有明显的抑制作用,并具有浓度和时间依赖性(r=0.853,r=0.989).多西他赛可以诱导HL-60/ADR细胞凋亡,凋亡率没有随浓度变化的趋势.多西他赛作用HL-60/ADR细胞使BCL-2蛋白表达下降,BAX蛋白表达上升.结论:多西他赛可以诱导HL-60/ADR细胞凋亡,使细胞BCL-2蛋白表达下降,BAX蛋白表达上升.
关键词： HL-60/ADR细胞 多西他赛 P糖蛋白 Bcl-2 Bax -
化疗后残存乳腺癌组织乳腺癌耐药蛋白和P-糖蛋白的表达及其与上皮间质转化的相关性
目的 探讨化疗后残存乳腺癌组织乳腺癌耐药蛋白(BCRP/ABCG2)、P-糖蛋白表达及其与上皮间质转化(EMT)的相关性.方法 收集乳腺癌标本76例,免疫组织化学EnVision法检测化疗后残存乳腺癌组织ABCG2、P-糖蛋白的表达及EMT相关标志物E-cadherin及波形蛋白的表达.将乳腺癌MCF7细胞分为空白对照组、阳性对照(TGF-β1诱导)组和联合用药组,联合应用多西紫杉醇和表柔比星处理MCF7细胞获得药物筛选残存细胞(DSC);免疫荧光检测DSC细胞中E-cadherin和波形蛋白的表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别检测DSC细胞中ABCG2、P-糖蛋白、E-cadherin、波形蛋白的mRNA及其蛋白表达.结果 与化疗前乳腺癌组织比较,化疗后残存乳腺癌组织中高表达ABCG2和P-糖蛋白,并与波形蛋白表达呈显著正相关(r1=0.97,P1=0.000;r2=0.83,P2 =0.001);而与E-cadherin蛋白表达呈显著负相关(r3=-0.55,P3 =0.010;r4=-0.43,P4 =0.020).免疫荧光结果亦显示DSC中高表达波形蛋白,而低表达E-cadherin蛋白.RT-PCR显示DSC中高表达ABCG2及P-糖蛋白mRNA,且与波形蛋白的mRNA表达呈显著正相关(r1=0.99,r2=0.96,P＜0.05);与E-cadherin mRNA表达呈显著负相关(r3=-0.99,r4=-0.98,P＜0.05);Western blot结果显示DSC中高表达ABCG2及P-糖蛋白,且与波形蛋白表达呈显著正相关(r1=0.98,r2=0.89,P＜0.05);与E-cadherin蛋白表达呈负相关(r3=-0.47,r4=-0.33,P＜0.05).结论 化疗后残存乳腺癌组织ABCG2及P-糖蛋白与EMT相关标志物表达之间存在显著相关性,经历EMT可能是导致乳腺癌多药耐药的重要原因之一.
关键词： 乳腺肿瘤 多药耐药相关蛋白质类 P糖蛋白 -
难治性癫痫患者脑组织中相关耐药蛋白表达情况的比较研究
目的 探讨P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白和穹隆主蛋白3种蛋白在难治性癫痫相关病变脑组织中的分布、表达部位及其在难治性癫痫发生过程中所发挥的作用.方法 取18例难治性癫痫患者(包括局灶性皮质发育不良5例、结节性硬化3例、神经节细胞胶质瘤5例、胚胎发育不良性神经上皮瘤5例)致痫灶手术切除脑组织标本,利用针对上述3种蛋白的抗体进行免疫组织化学EnVision法染色.结果 P-糖蛋白主要表达于病灶区域的毛细血管内皮细胞内,多药耐药相关蛋白的表达部位则主要为病灶区域内的神经元成分,而穹隆主蛋白在病变脑组织中的高度表达主要集中于毛细血管内皮细胞和气球细胞,另有部分神经元成分呈弱阳性表达.此外,P-糖蛋白和穹隆主蛋白在肿瘤性病变病灶区域毛细血管内皮细胞中的表达强于非肿瘤性病变,而在神经节细胞胶质瘤和胚胎发育不良性神经上皮瘤的肿瘤性胶质细胞中,多药耐药相关蛋白和穹隆主蛋白的表达情况也不尽相同.结论 P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白和穹隆主蛋白均参与了难治性癫痫的发生过程,其表达部位不同,作用机制各异.
关键词： 癫痫 P糖蛋白 多药耐药相关蛋白质类 免疫组织化学 -
p38丝裂原活化蛋白激酶通路介导的早期生长反应基因-1活性与乳腺癌细胞表柔比星耐药性的关系
目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路介导的早期生长反应基因(EGR)-1活性与乳腺癌细胞表柔比星耐药的关系.方法 SB203580(15 μmol/L)干预后,激光共聚焦显微镜观察;流式细胞术、四甲基偶氮唑蓝(MTT)、凝胶电泳迁移率法(EMSA)、RT-PCR及Western blot分别检测耐药MCF-7/Adr及亲本MCF-7细胞内磷酸化p38MAPK蛋白表达、细胞凋亡及细胞内表柔比星浓度、EGR-1蛋白活性改变、细胞对表柔比星敏感性;EGR-1 mRNA、P糖蛋白、磷酸化p53及p38蛋白表达.结果 p38MAPK通路激活的MCF-7/Adr细胞经SB203580(15 μmol/L)干预24和48 h后,(1)MCF-7/Adr细胞(早+晚期)凋亡率分别由(0.54±0.17)%和(0.81±0.16)%提高为(25.36±1.17)%和(38.21±1.25)%,P<0.05,并呈一定时间依赖性;(2)MCF-7/Adr细胞的平均荧光强度分别为(32.45±2.36)及(41.66±3.12),均高于空白对照组及DMSO组MCF-7/Adr细胞的(14.17±1.45)及(16.28±0.63),P<0.01;MCF-7/Adr细胞对表柔比星药物的耐受性显著降低;(3)增加了MCF-7/Adr细胞的EGR-1活性,IC50分别为(21.53±2.17)和(8.77±1.02),低于空白对照组(40.74±2.56);伴随p38MAPK通路活性抑制和EGR-1 mRNA表达增加,磷酸化p53蛋白表达显著上调,而P糖蛋白显著下调.结论 p38MAPK通路与乳腺癌表柔比星耐药密切相关,可能与p38MAPK通路介导的EGR-1表达相关,EGR-1激活抑制了其下游耐药基因转录,从而使表柔比星耐药得以逆转.
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乳腺癌99Tcm-MIBI显像与Pgp、PCNA、GST-π的关系
目的探讨99Tcm-MIBI乳腺显像与P糖蛋白(Pgp)、增殖细胞核抗原(PCNA)、胎盘型谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π) 的关系.方法 39例乳腺癌患者手术前行99Tcm-MIBI乳腺显像,术后标本病理检查并测定Pgp、PCNA、GST-π水平,分析三者与肿瘤/正常组织(T/B)摄取比值和滞留分数(RI)的关系.结果 Pgp阳性组RI明显低于Pgp阴性组,PCNA、GST-π与T/B摄取比值和RI无明显关系.结论计算99Tcm-MIBI乳腺显像RI可以评估乳腺癌细胞的Pgp水平,进而估测其多药耐药性.
关键词： 乳腺肿瘤 核素显像 P糖蛋白 增殖细胞核抗原 谷胱甘肽-S-转移酶 -
多药转运蛋白与线粒体在难治性癫痫发病中作用的研究进展
难治性癫痫的耐药性研究已取得了一定的进展。近年发现，多药转运蛋白和线粒体的异常与难治性癫痫的发生存在密切的联系。文中介绍两种主要多药转运蛋白（P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白）和线粒体的结构、功能以及线粒体基因的有关改变，并对其近年在难治性癫痫耐药中作用的研究进展作一综述。
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糖尿病状态下影响血脑屏障上P-糖蛋白表达的因素
糖尿病是一组以慢性血葡萄糖（简称血糖）水平增高为特征的代谢性疾病，是由于胰岛素分泌和（或）作用缺陷引起。P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）作为血脑屏障（blood brain barrier，BBB）上的药物的外排泵，可以调节许多药物的吸收、分布和排泄过程。糖尿病所引起的体内环境的变化，会导致BBB中的P-gp功能和表达发生改变，从而影响中枢神经系统药物的药理毒理效应，甚至导致并发神经系统疾病。因此弄清糖尿病状态下影响BBB上P-gp 表达的因素，对于疾病的治疗及临床合理用药尤为重要。本文总结了糖尿病状态下BBB上P-gp改变的现象以及影响BBB上P-gp改变的因素的新研究进展。
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树突状细胞/细胞因子诱导的杀伤细胞人体内逆转肺癌多药耐药的临床研究
目的：探讨树突状细胞/细胞因子诱导的杀伤细胞（DC/CIK）是否具有人体内逆转肺癌多药耐药（MDR）的作用。方法30例晚期非小细胞肺癌患者接受2个疗程DC/CIK细胞输注。输注前和完成2个疗程细胞输注后，流式细胞术测定 P-糖蛋白（P-gp）和多药耐药相关蛋白（MRP）阳性细胞百分率以及平均荧光强度。结果30例晚期非小细胞肺癌患者全部检测出P-gp和MRP阳性细胞。DC/CIK细胞输注前， P-gp 阳性细胞百分率为（38.67±8.76）%，平均荧光强度2.18±0.34；MRP 阳性细胞百分率为（1.14±0.49）%，平均荧光强度为2.14±0.437。DC/CIK细胞输注后，P-gp阳性细胞百分率为（34.96±6.9）%，平均荧光强度2.07±0.42；MRP阳性细胞百分率为（1.0±0.53）%，平均荧光强度为2.05±0.42。2个周期DC/CIK细胞输注前后，P-gp阳性细胞百分率的差异有统计学意义（t＝5.02，P＜0.001），平均荧光强度的差异有统计学意义（t＝2.18，P＜0.05）；MRP阳性细胞百分率的差异有统计学意义（t＝2.35，P＜0.05），其平均荧光强度的差异有统计学意义（t＝2.16，P＜0.05）。结论 DC/CIK细胞可以在人体内逆转肺癌MDR。
关键词： 树突细胞 杀伤细胞 肺肿瘤 P糖蛋白 多药耐药相关蛋白质类 -
hTERT在人胰腺癌组织中的表达及其与COX-2、P-gp、Bcl-2蛋白表达和临床病理特征的关系
目的 研究端粒酶逆转录酶(hTERT)、环氧合酶-2(COX-2)、P-糖蛋白(P-gp)和Bcl-2蛋白在胰腺癌组织中的表达及其相互关系,以及hTERT与胰腺癌的病理特征的关系.方法 选择胰腺癌38例,慢性胰腺炎25例,正常胰腺组织20例.以SABC法检测 hTERT、COX-2、P-gp和Bcl-2的表达.按手术记录描述肿瘤的病理特征.结果 在38例胰腺癌组织中hTERT、P-gp、COX-2、Bcl-2阳性表达率分别为81.58%、52.63%、76.32%、57.90%,评分分别为(6.04±1.08)分、(4.50±1.75)分、(5.96±1.60)分、(5.61±1.08)分,而正常胰腺组织和慢性胰腺炎组织的hTERT与 Bcl-2阳性表达率和评分均为0,在慢性胰腺炎P-gp、COX-2阳性率分别为20.00%、24.00%,评分分别为(1.21±0.86)分、(3.59±1.42)分,在正常胰腺组织阳性率分别为15.00%、0,评分分别为(0.90±0.58)分、0分.胰腺癌组与其他组各项阳性表达率和评分比较差异均有统计学意义(P＜0.05).在胰腺癌组织中,hTERT表达与P-gp(rp =0.365,P＜0.05)、COX-2(rp =0.534,P＜0.001)、Bcl-2(rp =0.557,P＜0.001)表达和临床分期(rp =0.333,P＜0.05)呈显著正相关.结论 hTERT、P-gp、COX-2和Bcl-2蛋白在胰腺癌组织中均有较高表达,hTERT表达与P-gp、COX-2、Bcl-2表达和胰腺癌的临床分期均有显著的正相关性.
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ABCB1和ABCC2及SLCO1B1基因多态性与大剂量甲氨蝶呤化疗毒性作用的相关性
目的 探讨三磷酸腺苷结合盒转运体B1(ABCB1)、三磷酸腺苷结合盒转运体C2(ABCC2)和溶质转运蛋白1B1(SLCO1B1)基因多态性与急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿大剂量甲氨蝶呤(MTX)化疗毒性作用的相关性.方法 病例对照研究.收集2005年9月至2011年12月南京医科大学附属南京儿童医院142例ALL患儿外周血,采用均相酶放大免疫分析法(EMIT)测定MTX血药浓度,采用聚合酶链反应-连接酶检测(PCR-LDR)技术对ABCB1 、ABCC2和SLCO1B1基因单核苷酸多态性(SNPs)进行基因分型.结果 MTX存在排泄延迟时,其毒性作用发生风险显著增加(OR =2.828,95％ CI:1.217～6.571,P ＜0.05),SLCO1 B1基因rs4149081和rs11045879位点存在强连锁不平衡(R2 =0.979,P＜0.05).多因素分析显示,SLCO1 B1基因rs4149081AA或rs11045879 CC基因型患儿MTX化疗后易出现排泄延迟(OR =4.41,95％CI:1.537 ～ 12.654,P＝0.042),且发生MTX毒性作用的风险显著高于其他基因型患儿(OR =4.118,95％CI:1.135 ～ 14.944,P＝0.022).未发现其他SNPs与MTX排泄延迟或毒性作用的相关性.结论 SLCO1B1基因rs4149081 AA或rs11045879 CC基因型可能是MTX毒性作用的危险因素.
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多药耐药基因与溃疡性结肠炎的研究进展
溃疡性结肠炎(UC) 的病因和发病机制尚不明确. 针对MDR1 基因敲除小鼠易发UC;MDR1 发生C3435T 基因变异在UC 患者的发生率显著高于正常人;C3435T 基因变异可导致P糖蛋白(P-gp) 表达下降;而在激素耐药的UC 患者其外周血淋巴细胞及肠黏膜上皮细胞P-gp 的表达量较药物敏感者及正常对照组高等现象,提出MDR1 基因多态性可能和UC 的发生、发展以及激素的治疗反应有关的假说,但也有不同的结论.
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外源性胰岛素通过P糖蛋白调节INS-1832/13细胞胰岛素分泌的研究
目的 观察外源性胰岛素对胰岛β细胞(INS-1 832/13)P糖蛋白(P-gp)表达及胰岛素分泌功能的影响. 方法 0.5 μmol/L外源性胰岛素孵育832/13细胞30 d,MTT检测细胞活性,定量RT-PCR、Western blot分别检测细胞P-gp mRNA和蛋白的表达水平,RIA测定高糖刺激下胰岛素分泌(GSIS)的变化. 结果 与对照组比较,0.5 μmol/L的胰岛素可以增加INS-1 832/13细胞活性[(102.00±12.99) vs (356.00±35.51),P<0.05],并能增加P-gp 转录水平[(107.50±17.08) vs (307.50±44.25)]及蛋白水平[(105.00±12.91) vs (192.50±35.94)]的表达(P<0.05),GSIS与P-gp表达水平呈正相关,但对基础胰岛素分泌没有影响. 结论 外源性胰岛素可以促进INS-1 832/13细胞分泌,机制可能与P-gp表达相关.
关键词： INS-1832/13细胞 P糖蛋白 胰岛素分泌 -
大鼠胰岛β细胞中mini-P糖蛋白的表达及其功能研究
目的 探讨大鼠胰岛β细胞中65kDa的mini-P糖蛋白存在的可能性及其在两相胰岛素分泌中的作用.方法 分别提取Wistar大鼠胰岛、胰腺及INS-1细胞中的总RNA,RT-PCR法检测多药耐药基因1(MDR1)的表达;萃取大鼠胰岛及INS-1细胞蛋白,用P糖蛋白特异性抗体C219行免疫印迹实验,检测P糖蛋白和mini-P糖蛋白的表达;体外胰岛刺激实验测定两相胰岛素分泌.结果 在提取的大鼠胰岛、胰腺及INS-1细胞中均扩增出了MDR1基因.在胰岛匀浆蛋白中探测到65kDa的mini-P糖蛋白,在INS-1细胞蛋白萃取液中探测到了160kDa的P糖蛋白.在体外胰岛刺激实验中,P糖蛋白拮抗剂环孢菌素A抑制了胰岛素第二时相分泌, 但第一时相分泌无明显变化.结论 在INS-1细胞中有P糖蛋白的表达,在大鼠胰岛中有mini-P糖蛋白的表达,与胰岛素的两相分泌相关.
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消化道肿瘤转移淋巴结中P糖蛋白和谷胱甘肽S转移酶π的表达与肿瘤化疗药物敏感性的关系
目的 探讨消化道肿瘤淋巴结转移灶中P糖蛋白(P-gp)和谷胱甘肽S转移酶π(GST-π)的表达与化疗药物敏感性的关系及其临床意义.方法 对54例胃癌和大肠癌新鲜肿瘤组织及转移淋巴结进行肿瘤细胞培养化疗药敏性实验,行原发灶和转移灶P-gP和GST-π免疫组化染色.结果 ①肿瘤原发灶和淋巴结转移灶中P-gp和GST-π表达一致率较低,分别为22%(k=-0.0133,P=0.8698)和50%(k=0.1137,P=0.1496);淋巴结转移灶中P-gP和GST-π表达强度均明显高于原发灶(Z=-3.0448,P=0.0023;Z=-2.1178,P=0.0034).②VCR、OPT、OXA、DDP、MTX对淋巴结转移灶肿瘤细胞抑制率明显低于原发灶(均P<0.05),仅VP-16对原发灶的抑制率明显低于转移灶(P=0.0406).③原发灶中P-gp表达程度与5-FU、VCR和PTX对肿瘤细胞抑制率呈负相关(r=-0.4142～-0.5712,均P<0.05),GST-π表达程度与5-FU、VCR、OPT和PTX的抑制率呈负相关(r=-0.3927～-0.4951,均P<0.05);转移灶中P-gP表达程度与VP-16、PTX和eADM对肿瘤细胞抑制率呈负相关(r=-0.3802～-0.4624,均P<0.05),GST-π表达程度与5-FU、VCR、DDP的抑制率呈负相关(r=-0.3996～-0.5345,均P<0.05).结论 消化道肿瘤淋巴结转移灶中P-gP和GST-π的表达以及对化疗药物的敏感性均存在与原发灶不同的异质性,淋巴结转移灶具有更强的耐药倾向.术后辅助化疗的靶目标应针对淋巴结转移灶.
