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妊娠及新生儿期李斯特菌病
单核细胞增生李斯特菌（ L monocytogenes ）可以引起局灶性感染、败血症、脑膜炎、流产、死胎，甚至导致死亡，被称为李斯特菌病（ listeriosis ）。虽然李斯特菌病在人类并不多见［（0.1～10）／100万］，但被认为是严重的经食物感染性疾病。近年来，围生期李斯特菌感染开始被临床关注，因其不仅导致妊娠期感染、流产、胎死宫内，更导致新生儿死亡。
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外周血单个核细胞中和血浆中EB病毒核酸载量的对比分析
目的 探讨EBV DNA检测中标本的合理选择.方法 收集2017年1月至6月在北京友谊医院确诊为EB病毒感染的患者,共117例,其中传染性单核粒细胞增多症(IM)44例,EB病毒相关噬血细胞综合征(HLH)36例,移植后淋巴细胞增殖性异常(PTLD)37例,年龄在6个月至28岁.采用实时荧光定量PCR法,定量检测外周血PBMC中和血浆中EBV DNA载量(中位数,四分位数表示),不同标本类型间病毒载量比较采用非参数秩和检验(Mann-Whitney检验),相关性分析采用Spearman相关性分析.结果 IM和PTLD患者PBMC中EBV DNA载量分别为53600(7875,626500)拷贝/ml和114000(3396,590500)拷贝/ml,显著高于血浆中的载量4500(675,8600)拷贝/ml和0(0,0)拷贝/ml,M-W值分别为372.5和30.5,P均<0.001,差异有统计学意义,而HLH患者PBMC和血浆中EBV DNA载量分别为5100(1425,170000)拷贝/ml和13500(1303,152500)拷贝/ml,M-W值为646.5,P=0.991,差异无统计学差异.Spearman相关性分析显示IM和HLH患者中PBMC和血浆EBV DNA载量有较好的相关性,r值分别为0.548和0.400,P均<0.05,而PTLD患者中PBMC和血浆EBV DNA载量无相关性,r值为0.308,P>0.05.结论 对于EBV感染的诊断与监测,不同疾病推荐的标本类型有所差异,IM和HLH中EBV DNA定量检测推荐采用血浆或血清标本,而PTLD则推荐同时检测PBMC和血浆标本,临床上应根据疾病的种类合理选择标本类型.
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Blimp1 mRNA 在类风湿关节炎患者外周血单个核细胞的表达及 IL-21对其调节作用的研究
目的：研究IL-21、Blimp1 mRNA在类风湿关节炎（ RA）患者体内的表达及IL-21刺激后对体外培养RA患者外周血单个核细胞（ PBMCs ） Blimp1表达的影响，探讨IL-21、Blimp1参与RA发病的具体作用机制。方法病例对照研究。收集2012年10月至2013年3月郑州大学第一附属医院住院确诊的RA患者50例和同期健康体检者50名为对照组的外周静脉血，分离血浆及PBMC， ELISA检测血浆IL-21水平，同时检测患者临床指标DAS28和抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP ）抗体将其与患者IL-21水平进行相关性分析。实时荧光定量PCR （ qPCR ）检测患者PBMC Blimp1 mRNA表达量；分离RA患者PBMCs进行体外培养，经IL-21和CD40L刺激细胞72 h后，检测患者PBMC Blimp1 mRNA表达量，流式细胞术检测各组细胞CD20阳性B细胞和CD138阳性细胞所占比例。采用均值t检验、Wilcoxon秩和检验和方差分析等方法进行统计学分析。结果 RA 患者血清 IL-21水平（130.51±11.35）ng／L明显高于健康对照组（25.46±6.05）ng／L，t＝5.39，P＝0.007，且IL-21水平与RA患者DAS289（r＝0.658）和抗CCP抗体（r＝0.674）具有相关性（P分别为0.019、0.016）。 RA患者PBMCs Blimp1 mRNA表达水平（1.321±0.110）高于健康对照组（1.000±0.000），Z＝－2.48，P＜0.05。 IL-21及CD40L体外刺激后，IL-21组和CD40L＋IL-21组Blimp1 mRNA表达量分别为（1.084±0.029）、（1.157±0.028），高于对照组（1.000±0.000），P 分别为0.002、0.001，CD40L ＋IL-21组Blimp1mRNA表达水平高于IL-21组（t＝4.862，P＝0.02）；CD40L组、IL-21组及IL-21＋CD40L组较阴性对照组CD20阳性B细胞比例增加[2.42±0.35、2.63±0.33、6.35（4.85，6.57），F＝278.363， P＜0.001]，CD138阳性细胞所占比例也增加（0.474±0.110、0.668±0.120、0.955±0.170，F ＝49.01，P＜0.001），差异均具有统计学意义。结论 IL-21可促进RA患者外周单个核细胞Blimp1 mRNA的表达；IL-21和CD40L协同作用可能通过调节Blimp1 mRNA的表达促进B细胞的分化成熟进而参与RA的发病。（中华检验医学杂志，2015，38：552-556）
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原发性胆汁性肝硬化血浆microRNA 表达谱的初步分析
目的 探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者血浆微小RNA(miRNA)的表达及临床意义.方法 采用随机对照研究的方法,收集上海松江中心医院2010年12月至2013年1月就诊的19例PBC患者的血浆,同时收集了性别年龄与PBC患者相匹配的10名健康体检者和10例病毒性肝炎患者的血浆,从中选取3例PBC患者和3名健康体检者,应用芯片技术进行miRNA表达谱筛选.针对筛选出有表达差异的miRNA,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对收集的3组标本进行验证,统计学分析和绘制受试者工作曲线(ROC)评估差异miRNA的临床价值.结果 芯片结果显示PBC组与对照组共有16个差异表达miRNA.qRT-PCR验证发现,与正常组相比,PBC组miRNA-572和miRNA-575表达明显上调(P＜0.05),miRNA-92a-3p和miRNA-4516表达明显下调(P＜0.05).而与非PBC肝硬化组相比,PBC组miRNA-92a-3p和miRNA-4516表达下调(P＜0.05).miRNA-92a-3p在评价PBC组和健康对照组的曲线下面积(AUC)为0.92(0.86～ 1.00),当佳临界值为1.26,敏感度92％,特异度80％.miRNA-4516在评价PBC组和健康对照组的曲线下面积为0.89(0.75 ～1.00),当佳临界值为1.16,敏感度85％,特异度70％.miRNA-92a-3p和miRNA-4516在鉴别诊断PBC和非PBC肝硬化时曲线下面积分别为0.84 (0.68～0.99)和0.76(0.57 ～0.96).当miRNA-92a-3p取佳临界值为1.08,敏感度89％,特异度81％.当miRNA-4516取佳临界值为1.06,敏感度77％,特异度68％.结论 PBC患者血浆中特异表达的miRNA对PBC诊断及鉴别诊断的具有潜在临床应用价值.
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肺癌患者血清和单个核细胞9种miRNAs表达差异及其意义
目的 探讨肺癌患者血清/外周血单个核细胞(PBMC) microRNA (miRNAs)表达谱的变化及其意义.方法 本研究属于临床病例对照研究.建立基于实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测miRNA的方法,对其进行定量研究；2011年11月至2012年9月收集苏州大学附属第一医院住院及门诊肺癌患者61例,肺部良性疾病及健康对照各48例,各组间性别、年龄匹配,年龄为64(40 ～85)岁；采用RT-qPCR技术检测血清及配对PBMC中miR-20a、miR-21、miR-25、miR-29a、miR-31、miR-126、miR-129、miR-145、miR-205的表达水平,以U6为内参,用F=2-△Ct法计算.其中ACt=CtmiRNA-CtU6.F表示目标miRNA表达量相对于同一样本U6的变化倍数.采用SPSS 19.0软件进行统计分析,两组样本的比较采用成组设计的两样本￡检验,多组数据的比较采用单因素方差分析,若差异有统计学意义,多组数据两两间的比较采用S-N-K检验,两变量之间关系采用Pearson相关性分析,对各样本中U6的Ct值是否相等作Brown-Forsythe检验.结果 肺癌患者血清miR-20a(F=271.64,P＜0.01)、miR-21(F =2232.51,P ＜0.01)、miR-205(F =45.13,P ＜0.01)、miR-29a(F=19.98,P ＜0.01)、miR-25(F =313.19,P＜0.01)、miR-126(F =32.38,P＜0.01)与健康对照组、肺部良性疾病组之间差异有统计学意义,且其中miR-29a(健康对照组3.27 ±2.44,肺部良性疾病组3.19±0.32,肺癌组0.99 ±2.31)、miR-25(健康对照组3.88±0.62,肺部良性疾病组3.42 ±0.51,肺癌组1.79 ±0.37)、miR-126(健康对照组3.19±1.77,肺部良性疾病组2.67±1.55,肺癌组0.96±0.84)在肺部疾病恶性化发展中呈下调趋势；肺癌miR-31(比值=1.85,P＜0.01)与健康对照相比升高,miR-145(比值=-3.00,P＜0.05)则下降；不同分化程度的肺癌患者血清miR-31(F=5.22,P＜0.01)表达差异有统计学意义,中分化时期(1.40±0.39)表达高；当全身转移(特别是骨转移)时,miR-31(无转移1.16±0.40,有转移1.03±0.24,P＜0.05)表达下降.在与肺癌患者血清配对PBMC中,miR-126(F =690.58,P ＜0.01)、miR-129(F =26.66,P＜ 0.01)、miR-145(F=48.57,P＜0.01)、miR-205 (F=308.61,P＜0.01)、miR-25(F =218.57,P＜0.01)、miR-31(F =48.05,P＜0.01)与健康对照组、肺部良性疾病组之间差异有统计学意义,且其中miR-25(健康对照组6.54±0.63,肺部良性疾病组5.82±0.51,肺癌组3.97±0.55)、miR-31(健康对照组4.26±0.43,肺部良性疾病组4.08±0.37,肺癌组3.43±0.38)在肺部疾病恶性化发展中呈下调趋势；肺癌miR-20a(比值=1.39,P＜0.01)、miR-29a(比值=1.42,P＜0.01)与健康对照相比均升高；当全身转移时,miR-21(无转移5.11±0.24,有转移5.28±0.24,P＜0.05)表达上升；患者miR-31血清和PBMC中的表达水平呈负相关(r=-0.369,P＜0.05)；血清miR-29a(S=0.968,P＜0.01)、miR-25(S=0.906,P＜0.01)、miR-126(S=0.969,P＜0.01)的ROC曲线下面积有统计学意义.结论 miRNA可能参与了肺癌转移的多个步骤,包括局部浸润、渗出血管或在远处的初步生存和转移灶生长等,也可能影响肺癌的预后.miRNA的检测可为肺癌的进展机制提供一个新的研究线索.
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乙型肝炎病毒感染不同时期外周血单个核细胞微小RNA表达变化及其意义
目的 探讨微小RNA( microRNAs,miRNAs)在乙型肝炎病毒(HBV)感染不同时期表达谱的变化及其意义.方法 建立检测miRNA的RNA DNA嵌合探针液态芯片(xMAP)法,对其特异性、重复性、准确性进行评估；2010年10月至201 1年10月收集苏州大学附属第一医院住院和门诊急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、乙型肝炎后肝硬化及肝癌患者各40例,健康对照40名；采用xMAP液态芯片技术检测外周血单个核细胞(PBMC)中miR-191、-223、-222、-145、-21、-31、-126、-20a、-372的表达水平,以miR-103为内参,将(靶miRNA分子平均荧光强度-对应本底平均荧光强度)/(miR-103平均荧光强度-对应本底平均荧光强度)的比值作为有效数据分析各组miRNAs表达特征,采用SPSS 17.0统计软件,组间比较用单因素方差分析,若差异有统计学意义,用LSD-t法行组间两两比较.结果 xMAP液态芯片法检测miRNAs特异性为100％；重复性实验证实高值参比品的检测信号CV值均小于5％,低值参比品的检测信号CV值均小于10％；准确性实验证实9种miRNA的回收率为(100±5)％;miR-222(F=1.32,P＞0.05)、-191 (F=1.98,P＞0.05)、-145 (F=0.78,P＞0.05)、-21(F=0.64,P＞0.05)、-31(F=0.83,P＞0.05)、-372(F=1.75,P＞0.05)组间表达差异无统计学意义；miR-223组间表达差异有统计学意义(F=14.56,P＜0.05),在急性乙型肝炎组表达高(15.37±4.01),肝癌组表达低(6.91±3.18)；组间miR- 126表达差异有统计学意义(F=17.43,P ＜0.05),在健康对照组表达高(6.33±2.75),肝癌组表达低(2.38±1.07)；组间miR-20a表达差异有统计学意义(F=19.48,P ＜0.05),健康对照组表达低(0.33±0.18),肝癌组表达高(0.81±0.24).结论 xMAP液态芯片法检测miRNA特异性强、准确度高、重复性好,适合大通量临床检测；miRNA的检测可为HBV感染的慢性化进展机制提供一个新的研究线索.
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唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素1在冠状动脉粥样硬化性心脏病患者外周血单个核细胞的表达及临床意义
目的 观察唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素1(sialic acid-binding immunoglobulin-likelectin 1,Siglec-1,也称CD169)在冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)患者外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞上的表达水平,并探讨其与冠状动脉粥样硬化发生发展的关系.方法 流式细胞术检测57例CHD患者及38名健康对照者外周血CD14CD169双阳性细胞的表达率;生化常规测定所有入选者血脂水平;实时荧光相对定量逆转录(FQ-RT)-PCR方法检测入选对象外周血单个核细胞(PBMCs)中CD169 mRNA的含量.结果 流式细胞仪检测发现,CD169在健康对照组及CHD组淋巴细胞和中性粒细胞上均无表达;CHD组单核细胞CD14CD169双阳性率为(12.7±2.4)%,显著高于健康对照组[(1.0±0.3)%,t=23.2,P<0.01];CHD组CD169 mRNA的拷贝数显著高于健康对照组拷贝数(t=6.59,P<0.01),为健康对照组的3..倍;而CHD血脂正常组和血脂异常组的CD169阳性率[分别为(12.2±2.3)%和(13.4±2.5)%,t=1.87,P>0.05]和mRNA平均拷贝数(分别为健康对照组的3.64和2.79倍,t=0.98,P>0.05)差异均无统计学意义.结论 CD169组成性表达于特定组织巨噬细胞上,健康人外周血单核细胞上并不表达,单核巨噬细胞受到炎症刺激时,CD169表达迅速上调.CD169蛋白及mRNA含量在CHD患者外周血单核细胞上表达显著升高,CHD患者外周血单核细胞已发生巨噬细胞化,单核巨噬细胞介导的免疫炎症反应在CHD发生发展过程中起重要作用.
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原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞中趋化因子受体CXCR3 mRNA表达水平变化
目的 探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血单个核细胞(PBMC)中CXCR3mRNA表达及其与疾病发病机制、疾病活动性的关系.方法 采用逆转录实时荧光定量(FQ-RT)-PCR的方法,在Light Cycler Real time PCR检测仪上检测59例PBC患者(活动期29例、缓解期30例)、结缔组织病(CTD)患者20例(疾病对照组)、健康体检者29名(健康对照组)外周血PBMC中CXCR3 mRNA的表达水平和含量.以Act=Ct(待测基因)-Ct(内参基因)比较基因表达水平的变化.结果 活动期PBC患者CXCR3 mRNA表达水平(Act=5.41±2.69)明显高于缓解期PBC患者(Act=7.77±2.74,t=3.39,P＜0.01);活动期PBC患者CXCR3 mRNA表达水平(Act=5.41±2.69)明显高于正常对照组(Act=7.16±2.76,t=2.45,P＜0.01)和疾病对照组(Act:7.24±2.75,t=2.53,P＜0.01);缓解期PBC患者CXCR3 mRNA表达水平与正常人及疾病对照组的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PBC患者CXCR3 mRNA表达水平显著高于正常人、疾病对照组和疾病缓解期,提示CXCR3的表达与PBC的发生发展存在一定关联性.
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肝损伤患者外周血单个核细胞中白细胞介素-10 mRNA的表达水平及其临床意义
白细胞介素10(IL-10)是由Th2细胞活化的B细胞、单核-巨噬细胞、Kupffer细胞等产生的细胞因子,IL-10参与抑制细胞合成炎性因子、集落刺激因子(CSF)等主要负反馈调节机制,能广谱抑制单核-巨噬细胞炎性介质IL-1、IL-6、IL-8、TNFa的合成及表达 [1].为了解IL-10细胞因子在肝损伤患者中的表达水平,明确其在肝损伤发病机制中的作用,我们采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,对慢性肝炎患者、急性重型肝炎患者和原发性肝癌患者单个核细胞PBMC中的IL-10 mRNA的表达水平进行检测,并对肝损伤患者IL-10 mRNA的表达水平与血清胆红素浓度、内毒素血症和患者预后的关系进行探讨.
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实时荧光定量PCR测定人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因表达
目的 建立检测人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因表达含量的实时荧光定量逆转录(FQ-RT)-PCR法,探讨其在健康对照者、乙型病毒性肝炎肝硬化患者及原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达状况.方法 设计TRAIL基因的特异性引物和TaqMan-MGB探针,以β-actin基因为内参,RT-PCR扩增目的 片段.胶同收纯化目的 片段,构建克隆载体作为定模板,在ABI Prism7000型荧光定量分析仪上进行扩增,建立标准曲线;同时检测30名健康对照者、30例PBC患者及25例乙型病毒性肝炎肝硬化患者外周血PBMC中TRAIL基因的荧光强度和循环阈值,计算样本中TRAIL基因的起始拷贝数.结果 FQ-RT-PCR检测TRAIL mRNA的线性范围为103-106拷贝/ug RNA(r=-0.997);高浓度样本批内和批间变异系数(CV)分别为5.6%和6.3%.低浓度样本批内及批间CV分别为12.5%和14.6%.PBC患者TRAIL mRNA表达量为[(3.3±2.5)×105拷贝ug RNA],高于健康对照组[(0.5±0.2)×105拷贝/ug RNA],两组差异有统计学意义(t=5.994,P<0.01);乙型病毒性肝炎肝硬化患者TRAIL mRNA的表达[(2.1±0.9)×105拷贝/ug RNA]亦高于健康对照组,且差异有统计学意义(t=8.536,P<0.01),而两疾病组间差异无统计学意义(t=1.988,P>0.05).结论 成功建立检测TRAIL mRNA的FQ-RT-PCR法,并初步发现TRAIL mRNA在PBC及乙型病毒性肝炎肝硬化患者外周血PBMC中表达升高,这将对肝硬化肝损伤机制研究提供新的思路.
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实时荧光定量端粒重复扩增法检测大肠癌患者单个核细胞端粒酶基因表达
目的 研究大肠癌患者外周血单个核细胞(PBMC)端粒酶基因表达与临床病理的关系.方法 用实时荧光定量端粒重复扩增法(RTQ-TRAP)检测71例大肠癌和20例良性大肠疾病患者,以及25名健康人PBMC端粒酶基因表达,同时检测大肠癌患者血浆癌胚抗原(CEA)含量.结果 71例大肠癌患者中,50例端粒酶基因表达阳性,阳性率70.4%;20例良性大肠疾病表达阳性1例,阳性率为5.0%,大肠癌组与良性大肠疾病组和健康对照组的PBMC端粒酶基因表达差异有统计学意义(χ2=24.521,P<0.001).大肠癌患者在不同性别(χ2=0.114,P=0.736)、年龄(χ2=0.113,P=0.735)、肿瘤部位(χ2=1.523,P=0.677)、Dukes分期(χ2=2.282,P=0.320)间的端粒酶基因表达差异无统计学意义.71例大肠癌患者PBMC端粒酶基因表达阳性率与CEA阳性率(63.4%)比较,差异无统计学意义(χ2=2.286,P=0.125).结论 RTQ-TRAP是一种快速、准确、定量检测端粒酶基因表达的方法,大肠癌患者PBMC端粒酶活性是一项有效的辅助诊断大肠癌的分子标志.
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杂交法快速检测单核细胞增生李斯特菌
单核细胞增生李斯特菌(李氏菌)广泛存在于土壤、人和动物的粪便中,很容易污染食品,引起食物中毒,以致李氏菌病暴发.该菌用经典法检验周期长,需5～14 d才能出结果.我们建立了用PCR-Southern杂交技术快速检测食品中李氏菌的方法.该法简便快速、特异性好、灵敏度高,具有较高的实用和推广价值.一、材料与方法
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溃疡性结肠炎患者外周血单个核细胞中TREM-lmRNA 的表达水平
目的 通过比较髓系细胞触发受体-1(TREM-1)mRNA在活动期和缓解期溃疡性结肠炎(UC)患者以及健康体检者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达水平,探讨TREM-1与UC疾病活动性的关系.方法 依据结肠镜检和病理活检结果,将UC患者分为活动期和缓解期2组,采用实时荧光定量逆转录(FQ-RT)-PCR检测70例UC患者(活动期患者38例,缓解期患者32例)和20名健康体检者PBMC中TREM-1 mRNA的表达水平,采用相对定量ACt值比较基因表达水平的高低,并比较TREM-1 mRNA表达水平与ESR和C反应蛋白(CRP)的相关性.结果 UC活动期患者PBMC中TREM-1 mRNA的表达水平(4.19±1.86)显著高于uC缓解期患者(5.29±1.71,P=0.007)和健康体检者(5.19±1.04,P=0.032),而UC缓解期患者与健康对照组差异无统计学意义(P=0.892);TREM-1 mRNA表达的受试者操作特性曲线(ROC)下面积为0.763(P<0.001),表明TREM-1 mRNA表达水平对UC疾病活动性具有诊断价值;当△Ct值为4.63时,是判断UC活动性的佳临界点,其诊断的敏感度和特异度分别为73.7%和68.7%;UC活动期患者中TREM-1 mRNA的表达与ESR显著相关(r=0.582,P=0.03),而与血清中CRP水平不相关(r=0.447,P=0.055).结论 TREM-1mRNA的表达与UC的活动程度明显相关,TREM-1可能参与了UC的炎症进程.TREM-1 mRNA的表达水平可能与ESR相关,而与血清中CRP水平不相关.
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慢性疲劳综合征患者外周血单个核细胞中转化生长因子β1 mRNA及雌二醇受体β野生型mRNA的表达水平
目的 探讨慢性疲劳综合征(CFS)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA及雌二醇受体p野生型(ERβwt)mRNA表达及其与CFS的发病关系.方法 用实时荧光定量逆转录(FQ-RT)-PCR检测63例CFS患者、50例其他疾病患者(疾病对照组)、50名健康体检者(健康对照组)外周血PBMCs中TGF-β1 mRNA和ERβwt mRNA的表达水平和含量.以△Ct=Ct(待测基因)-Ct(内参基因)来比较基因表达水平的变化.结果 CFS患者TGF-β1 mRNA表达水平(△Ct=3.27±0.58)明显高于健康对照组(△Ct=4.37±1.00,t=7.02,P<0.01)和疾病对照组(△Ct=4.54±1.05,t=8.11,P<0.01).CFS患者ERβwt mRNA表达水平(△Ct=9.34±0.92)明显低于健康对照组(△Ct=7.10±0.48,t=15.47,P<0.01)与疾病对照组(△Ct=7.12±0.47,t=15.44,P<0.01);结论CFS患者TGF-β1 mRNA表达水平显著高于健康人和疾病对照组;CFS患者ERβwtmRNA表达水平显著低于健康人和疾病对照组,TGF-β1 mRNA和ERβwt mRNA的表达可能参与了CFS的发病过程.
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载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3GmRNA表达水平与HIV/AIDS患者疾病进展的相关性研究
目的 探讨河南省46例HIV/AIDS患者外周血单个核细胞载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3G(APOBEC3G)mRNA表达水平与艾滋病疾病进展的相关性.方法 采用实时定量PCR方法检测HIV感染不同疾病进展期患者外周血单个核细胞APOBEC3G mRNA表达水平;采用流式细胞仪进行CD4+T淋巴细胞的绝对和相对计数;采用全自动载量仪检测血浆HIV病毒载量.结果 河南省46例HIV/AIDS患者外周血单个核细胞APOBEC3G mRNA水平明显低于健康对照(t=4.887,P<0.01),缓慢进展组APOBEC3G mRNA水平显著高于HIV组和AIDS组(P<0.05).HIV/AIDS患者APOBEC3G mRNA表达水平与CD4+T淋巴细胞数呈正相关(R2=0.190,P=0.002),与病毒载量呈负相关(R2=0.094,P=0.038).结论河南省HIV/AIDS患者外周血单个核细胞APOBEC3G mRNA表达水平与HIV感染疾病进程密切相关,APOBEC3G高表达可能是延缓疾病进程的保护性因素之一.
关键词： HIV感染 获得性免疫缺陷综合征 白细胞 单核 -
成人传染性单核细胞增多症并发急性肾功能损害和血小板减少1例
1 病例报告患者,男,36岁.因发热、咽痛、腰部不适、全身肌肉酸痛6d,于2006年07月11日入院.病后患者体温38.5～39.8℃.无明显咳嗽、心悸、气促、腹痛、腹泻及尿频、尿急、尿痛等.
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结核病患者体内抗原特异性多功能辅助性T细胞1的检测及分析
目的 了解结核分枝杆菌特异性多功能辅助性T细胞1(Th1)在外周血和胸腔积液中表达的变化及其临床意义.方法 纳入对象包括结核病(TB)患者93例,其中普通肺结核患者66例,结核性胸膜炎患者27例;结核分枝杆菌潜伏感染者(LTBI)30例;健康对照(HD) 66例.首先分离外周血和胸腔积液中的单个核细胞,特异性结核分枝杆菌抗原刺激后,进行胞内细胞因子染色,根据CD4+T淋巴细胞细胞因子产生的不同,将其分为7个不同亚群,分别为白细胞介素(IL)-2+干扰素(IFN)-γ+肿瘤坏死因子(TNF)-α+、I12+ IFN-γ+、ID2+ TNF-α+、IFN-γ+ TNF-α+、IL-2+、TNF-α+、IFN-γ+细胞亚群.结果 以“(x)±s”表示,所有数据均使用GraphPad Prism 4.0统计软件进行分析,两组间比较采用配对t检验,多组间比较采用ANOVA方差分析,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 TB患者外周血特异性多功能Th1细胞(II2+ IFN-γ+INF-α+)表达水平为(0.107±0.278)％,明显高于LTBI(0.019±0.032)％和HD(0.008±0.016)％(F=5.675,P-0.004);IL-2+TNF-α+细胞在TB和LTBI分别为(0.049±0.123)％和(0.046±0.050)％,均高于HD(0.003±0.014)％(F=5.435,P=0.005);TB患者IFN-γ+TNF-α+、IL-2+IFN-γ+细胞表达水平分别为(0.136±0.256)％和(0.146±0.347)％,明显高于HD(0.052±0.082)％和(0.029±0.042)％(F=3.774,P=0.024;F=4.912,P=0.008).结核性胸膜炎患者胸腔积液中特异性多功能Th1、IL-2+ TNFα+、IFN-γ+ TNF-α+、IL-2+、IFNγ++应答水平分别为(0.719±0.996)％、(0.628±1.284)％、(0.704±0.829)％、(0.955±1.538)％、(1.188±1.924)％,均高于外周血单个核细胞(0.033±0.065)％、(0.095±0.174)％、(0.137±0.317)％、(0.285±0.434)％、(0.318±0.598)％(t=3.700,P=0.001;t=2.125,P=0.043;t=3.216,P=0.003;t=2.144,P=0.041;t=2.412,P=0.023).结论 结核分枝杆菌特异性多功能Th1细胞应答激活与结核分枝杆菌感染的发病密切相关,多功能Th1细胞在TB的保护性免疫反应中起一定作用.
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共刺激信号与支气管哮喘γδT细胞活化关系的研究
我们之前的研究表明[1,2],γδ T细胞在哮喘支气管肺泡灌洗液(BALF)中明显活化;γδ T细胞可能存在Th1/Th2模式,并表现为Th2样优势应答.为进一步阐明γδ T细胞活化的细胞和分子机制,我们探讨了单核/巨噬细胞(Mon/Mφ)与γδ T细胞间共刺激分子B7∶CD28/CTLA-4( )的改变.材料与方法 2～3月龄雄性Wistar大鼠20只,体重(200±50)g.随机分正常组和哮喘组,每组各10只.哮喘模型的建立、鉴定及标本的收集和处理按方法[1].
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特发性血小板减少性紫癜患者FcγRⅢ A-158V/F基因多态性研究
特发性血小板减少性紫癜(ITP)是一种自身免疫性疾病,主要由于患者体内的自身抗体(主要是IgG型)的Fab段与血小板特异抗原结合,抗体Fc段与Fcγ受体(FcγR)结合后,导致血小板被单核-巨噬系统大量吞噬,血小板数目减少,引起出血症状.因此,FcγR的功能是该疾病过程的中心.本研究欲分析FcγRⅢA-158V/F基因多态性与ITP的关系,以期从分子水平探索ITP发病的机制.
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播散性组织胞浆菌病九例临床及骨髓象分析
播散性组织胞浆菌病是由组织胞浆菌(Histoplasma capsulatum,HC)引起的深部真菌病,以侵犯单核巨噬系统为主.表现为肝、脾、淋巴结肿大,体重减轻,发热、贫血及白细胞减少等.易误诊为恶性组织细胞增生症、黑热病及结核病等,提高对本病的认识,避免误诊十分必要.
