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用多糖间接血凝试验检测肠出血性大肠杆菌O157抗体的初步研究
目的:探讨多糖间接血凝(IHA)检测感染肠出血性大肠杆菌(EHEL)O157:H7患者血清中抗O157抗体的价值.方法:用酚-水法提取O157:H7脂多糖和醋酸水解法制备多糖抗原,致敏绵羊红细胞后以IHA检测各种肠道致病菌抗血清及健康人和非腹泻患者血清的抗体反应.结果:制备的多糖抗原糖含量为33%,不含核酸,蛋白质<0.3%,具有鲎试剂凝集活性.以O157多糖IHA检测O157单克隆抗体呈高效价凝集(1:1280),H7多克隆抗体呈低效价凝集(1:8);其它各种肠道致病菌抗血清的凝集效价均小于1:2;从30名健康人和30名非腹泻患儿的血清中未查出O157抗体;204名非腹泻成人患者中,有1人的凝集效价为1:8,其余的均小于1:2.吸收抑制试验表明凝集反应为特异性.结论:以多糖IHA检测抗O157抗体可试用于人群O157:H7感染的抗O157抗体流行率调查及肾溶血性尿毒综合征的免疫诊断.
关键词: 肠出血性大肠杆菌O157:H7 脂多糖 多糖抗原 间接血凝 -
流行性脑脊髓膜炎的预防与控制
流行性脑脊髓膜炎(流脑)是脑膜炎奈瑟菌(Nm)感染引起的急性传染病.Nm为需氧、革兰氏染色阴性双球菌,根据荚膜多糖抗原的不同,可分为13个血清群,致病的血清群主要为A、B、C群,Y、W135群的发病在一些国家有增加趋势.A、B、C、Y、W135、X群都可引起爆发,但以A群常见,且常引起大范围的流行,特别是在非洲流行带地区.
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结核分枝杆菌菌壁抗原提取法及免疫学研究
近来结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis M.Tb)菌壁多糖成分颇受重视,国外采用多种方法提取菌壁多糖抗原,开展有关结核分枝杆菌感染﹑免疫状态﹑抗结核治疗﹑结核疫苗的探索﹑分子免疫诊断等诸多方面的研究,无疑有助于结核病的诊治.
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加拿大批准使用C群脑膜炎球菌疫苗
2001年4月25日,加拿大卫生部生物与放射性药物局(BBR)批准Chiron公司销售一种预防C群脑膜炎奈瑟菌感染的疫苗MenjugateTm.Menjugate是一种结合菌苗,含有与一种蛋白载体结合的纯化的荚膜多糖抗原.
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1例注射23价肺炎球菌多糖疫苗过敏的抢救及护理
23价肺炎球菌多糖由23种血清型肺炎球菌多糖抗原组成,目前临床常用于2岁以上的易感人群.23价肺炎疫苗应用范围广,预防效果好,具有良好的安全性,接种后常见的不良反应一般为局部反应,如暂时性发红和疼痛等[1,2],过敏反应较为罕见[3],相关报道较少.2013年4月26日我社区预防接种门诊注射23价肺炎球菌多糖疫苗过程中发生过敏反应1例,表现为口唇发绀、胸闷、出虚汗,经过及时抢救及护理转危为安.现报道如下.
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检测肺癌患者黏多糖抗原的临床意义
肺癌在全世界范围内已经成为导致癌症死亡的第1位原因[1].世界卫生组织的有关资料显示:2000 年全球恶性肿瘤新发病1 000万例,死亡620 万例,其中肺癌新发病例123.9万例,占13.92%;死亡110万例,占17.74%[2].由于肺癌患者不能在早期及时诊断而使肺癌的病死率进一步上升.因此,肺癌的及时诊断具有极为重要的意义.POLY实验室的黏多糖抗原试剂对某一种硫酸黏多糖有特异性识别功能.如果患者血清中含有一定量的这种特异性肺癌抗原就会被检测出来,从而为肺癌的诊断提供了有效的检测手段.
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B型流感嗜血杆菌在小儿急性呼吸道感染中的检测
流感嗜血杆菌b型(Hib)是小儿细菌性脑膜炎、肺炎和败血症的主要致病菌。由于Hib分离条件苛刻和抗生素的滥用,使Hib分离率甚低[1]。为了解Hib在小儿急性呼吸道感染(ARI)中的感染情况,我们用PCR、RPHA对153例患儿进行HibDNA或荚膜多糖抗原检测报道如下。
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11价肺炎球菌疫苗与无细胞百日咳疫苗同时接种可降低其抗体应答
在肺炎球菌结合疫苗(PCV)中,通常将多糖抗原与常用于其他疫苗的蛋白载体相结合.11价肺炎球菌疫苗(PncD/T11)含7种与破伤风类毒素(TT)结合的多糖(1、4、5、7F、9V、19F和23F型多糖)及4种与白喉类毒素(DT)结合的多糖(3、6B、14和18C型多糖).
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流行性脑膜炎的细菌学与免疫学的诊断
流行性脑膜炎(流脑)的病原检出,菌群鉴定、药敏监测与免疫学的测定,对预防与诊治均具有重要的意义.我院儿科自1976年7月至1984年6月所收治的临床确诊为流脑的病例,细菌寻找与脑脊液(CSF)与血液中流脑A群多糖抗原与抗体的检测结果,进行分析研究,提供参考.
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人感染猪链球菌病
猪链球菌(Streptococcus suis)可感染猪等牲畜,也可感染人,是一种人畜共患病病原.依据荚膜多糖抗原的不同,猪链球菌可分为35个血清型(1~34和1/2),常见的致病血清型为2型.2005年6月下旬开始,四川资中等地出现人感染猪链球菌病疫情,为加深对此病的认识,现将国内外人感染猪链球菌病的有关研究综述如下.
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聚合酶链反应检测细菌性脑膜炎患儿脑脊液中b型流感嗜血杆菌
b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae b Hib)是引起婴幼儿细菌性脑膜炎的重要病原菌,其病死率,致残率均很高。由于Hib培养条件苛刻,需要特殊生长因子,加上较早投入抗生素,使培养阳性率甚低。为快速,准确诊断Hib脑膜炎,我们采用聚合酶链反应(PCR)对48份细菌性脑膜炎患儿脑脊液(CSF)做Hib DNA检测,同时用反向被动血凝(RPHA)法检测Hib荚膜多糖抗原做对照,现报道如下。
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猪血细胞表面多糖抗原α-Gal与人ABO血型抗原的比较
目的探讨猪血细胞表面多糖抗原α-Gal与人ABO血型抗原的相似性.方法人全血A、B、O、AB 4种血型的健康人的新鲜血,肝素抗凝,1 800 r/min离心,取白细胞富集层,利用confocal及流式细胞技术(FCM)检测猪及人ABO 4种血型血细胞与BSI-B4-FITC结合的情况.结果以A型血细胞为阴性对照,4种血型血小板、RBC、单个核细胞均为阴性,而粒细胞,B型有14%为(+),AB型约有8%为(+),O型约有2%为(+).结论 4种ABO血型抗原中B抗原与α-Gal的结构为相似.
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快速检测血清LAM-IgG对活动性肺结核的诊断价值
结核杆菌感染的诊断方法近年来有了很大进展,特别是血清学方法,因其经济、简便而倍受关注.但所用抗原的特异性关系到诊断方法符合率高、低的关键.脂阿拉伯甘露糖(LAM)作为分枝杆菌多糖抗原,具有较高的免疫原性,能刺激机体产生LAM的IgG抗体,临床上通过该抗体的检测,判断结核活动与否已取得良好的效果.
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电泳和免疫印迹分析副溶血弧菌和溶藻弧菌主要外膜蛋白和多糖抗原
目的考察副溶血弧菌和溶藻弧菌的主要外膜蛋白(MOMP)及其多糖抗原(PSA)在不同菌株间的结构特征及其免疫学特性,从而进一步揭示其共同的保护性抗原.方法一步超速离心法和蛋白酶K消化法分别制备10株副溶血弧菌和7株溶藻弧菌的MOMP和PSA,SDS-PAGE和免疫印迹分析其结构特点.结果两种细菌的MOMP和PSA的结构和形态菌株间差别明显,但也有MOMP一致的菌株,免疫印迹显示,全部的10株副溶血弧菌和5株溶藻弧菌都具有分子量约为36kD的主要外膜蛋白,他们能够被副溶血弧菌全菌抗血清所识别,是两种细菌共同的具有强免疫原性的主要抗原.PSA分析未见经典LPS的O侧链结构.多糖成份在菌株间的交叉反应有限,可能受弧菌自身表面抗原复杂性的影响,凝集反应结果与免疫印迹试验结果不完全一致.此外,副溶血弧菌与溶藻弧菌的PSA也会产生免疫学上的交叉反应.结论 36 kD的MOMP是广泛存在于副溶血弧菌和溶藻弧菌的高丰度蛋白;与主要外膜蛋白相比,多糖抗原在菌株间具有更大的异质性;副溶血弧菌和溶藻弧菌的MOMP可能比PSA更具研制疫苗潜力.
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耐氨苄青霉素流感嗜血杆菌的研究进展
流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae Hi)是一种只侵犯人类的革兰阴性杆菌,为苛养菌,营养要求高,在普通琼脂平板上不能生长,在巧克力琼脂平板上5~10%CO2的条件下生长良好,Hi是小儿呼吸道感染的常见病原体之一,可引起肺炎,脑膜炎,蜂窝织炎,关节炎,骨髓炎等疾病,严重影响着儿童的健康成长.Hi有两种主要抗原:荚膜多糖抗原和菌体抗原,前者具有型的特异性.根据荚膜多糖组成与抗原的不同,可将该菌分为a、b、c、d、e、f六个血清型,其中b型致病力强,发病率高,f型次之[2].生物型为Ⅰ~Ⅶ8个型.在美国随着Hib型疫苗的应用,其发病率明显下降,非b型发病率有上升趋势,在成人慢性阻塞性肺疾病患者及中耳炎患儿中非b型Hi株的检出率越来越高[2].我国有学者研究认为不同地区Hi血清型存在较大地区差异[3].我省小儿下呼吸道Hi感染率为12.5%,Hi居小儿下呼吸道感染致病菌的首位[4].
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IgG亚型检测与疾病的相关研究
IgG是血清中含量高的免疫球蛋白,占70%-75%,也是重要的抗感染分子,IgG根据其分子主链(γ链)抗原性差别及二硫键数目和位置的不同,可分为四个亚型,分别是IgG1,IgG2,IgG3和IgG4,它们在正常人体内含量分别为65%、23%、8%、4%左右.各种亚型都有各自特性和不同的功能,IgG作用大多通过IgG亚型来完成.IgG1是 IgG中重要的亚型,具有很强的激活补体和结合吞噬细胞的能力.IgG2在对多糖抗原的免疫、应答中占优势.IgG3在对蛋白质及多肽类抗原产生的免疫应答中常常表现出比IgG1更高的亲和力.IgG4可能是IgG各亚型中不活跃的成分,它主要参与过敏反应.本文现对IgG亚型检测与疾病的相关性研究进展作一综述.
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脑膜炎奈瑟菌的候选蛋白质疫苗
脑膜炎奈瑟菌是引起脑膜炎、菌血症等侵袭性疾病的重要病原菌,也可以无症状的鼻咽部带菌状态存在.分为13个血清群.但只有6个群(A,B,C,W-135,Y和X)与其致病性有关.目前应用的疫苗主要是荚膜多糖疫苗和多糖蛋白结合疫苗.两者本质上都属荚膜多糖抗原,覆盖的血清群有限,无法做到对B群脑膜炎奈瑟菌的预防,因此发展通用蛋白质疫苗势在必行.能作为候选疫苗的具有免疫原性的蛋白质需具备以下特点:在大多数菌株中都表达且结构保守;可诱生杀菌抗体或保护性抗体.现就有希望成为候选疫苗的蛋白质综述如下……
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利用血清杀菌试验对伤寒沙门菌 Vi多糖疫苗进行免疫评价
伤寒沙门菌Vi荚膜多糖抗原( VI-CPS)是对抗伤寒热的有效疫苗。因评估VI-CPS疫苗对伤寒热的保护功效没有可用的动物模型,所以血清杀菌试验( SBA)是评估其效力所推荐的“金标准”。利用已优化的Gotschlich 法从伤寒沙门菌 Ty6S ( CSBPI-B191)中提取VI-CPS。用纯化的VI-CPS(50μg),肌内注射3组兔子,每组5只,第2组在第15天再注射1剂50μgVI-CPS加强剂量,第3组在第15天和30天分别再注射2剂加强剂量。利用SBA对各组在第0、15、30和45天获得的血清进行了测试。1、2和3组在第15、30和45天时抗-VI-CPS的滴度分别为4、16和16;4、32和32;16、64和64。因此, VI-CPS被证明是一种有效的免疫原,甚至一个剂量的VI-CPS就可以对伤寒沙门菌诱导出高效的杀菌作用。虽然VI-CPS是一种可靠的疫苗,但有时其在纯化过程中的解聚可能会影响其效力,这可通过效力试验解决。因此,世界卫生组织建议的被动血凝试验并不能表明疫苗的效力,我们建议使用SBA来评估VI-CPS的杀菌能力。