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胃癌组织中miR-218和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、xIAP、SurvivinmRNA的表达观察
目的 观察胃癌组织中微小RNA-218(miR-218)和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、xIAP、Survivin mRNA的表达变化,并探讨其意义.方法 胃癌患者80例,手术过程中留取癌组织及癌旁组织,采用实时定量PCR法对胃癌组织及癌旁组织中的miR-218和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、xIAP、Survivin mRNA进行检测,分析其相关性.以胃癌组织中miR-218相对表达强度的平均值为界,将胃癌患者分为miR-218高表达组与miR-218低表达组,对比分析其临床病理参数及预后.结果 胃癌组织中miR-218及Bcl-2、Bax、xIAP、Survivin mRNA的相对表达强度分别为0.3077±0.1181、0.8177±0.2726、0.2481±0.1108、0.5995±0.2613、0.8209±0.3426,癌旁组织中分别为0.5659±0.2260、0.2774±0.1167、0.4444±0.2019、0.2987±0.1478、0.2470±0.1122,两种组织各指标相比,P均<0.01.胃癌组织中miR-218与Bcl-2 mRNA的表达呈负相关(r=-0.341,P<0.01),miR-218与Bax mRNA的表达呈正相关(r=0.522,P<0.01),Bcl-2 mRNA与Bax mRNA的表达呈负相关(r=-0.439,P<0.01),Bcl-2 mRNA与Survivin mRNA的表达呈正相关(r=0.235,P<0.01).80例胃癌患者中,胃癌组织中miR-218高表达组42例、低表达组38例;miR-218高表达组中TNM分期Ⅰ期+Ⅱ期21例、Ⅲ期+Ⅳ期21例,miR-218低表达组中Ⅰ期+Ⅱ期9例、Ⅲ期+Ⅳ期29例,两组相比,P<0.05;miR-218高表达组中淋巴结转移者29例,miR-218低表达组中淋巴结转移者34例,两组相比,P<0.05;胃癌组织中miR-218高表达组、低表达组的5年生存率分别为66.67％、28.95％,两组相比,χ2=9.789,P<0.01.结论 胃癌组织中miR-218呈低表达;miR-218可能通过参与凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Survivin基因表达的相互调节而参与肿瘤细胞凋亡过程;胃癌组织中miR-218低表达预示肿瘤处于较高临床分期、淋巴结转移可能性较大,患者预后较差.
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猴头多糖对小鼠皮下移植肉瘤的抑制作用及机制探讨
目的：观察猴头多糖对小鼠皮下移植肉瘤的抑制作用，并从细胞凋亡角度探讨其作用机制。方法将50只小鼠腋下皮下注射S180肉瘤细胞，制作肿瘤移植模型。造模成功后随机分为低剂量组、中剂量组、高剂量组、模型组、环磷酰胺组各10只，低剂量组、中剂量组、高剂量组分别予猴头多糖25、50、100 mg／kg灌胃，1次／d，共干预10 d；模型组予生理盐水0．2 mL／d灌胃，连续10 d；环磷酰胺组予环磷酰胺40 mg／kg腹腔注射，1次／d，共干预5 d。于第10天处死各组小鼠，计算抑瘤率，TUNEL法检测凋亡细胞，免疫组化法检测Caspase-3蛋白。结果低剂量组、中剂量组、高剂量组、环磷酰胺组抑瘤率分别为36．36％、57．57％、43．93％、74．24％，环磷酰胺组抑瘤率明显高于其余各组，中剂量组抑瘤率高于低剂量组、高剂量组，P均＜0．05；凋亡细胞数及Caspase-3蛋白表达为环磷酰胺组＞中剂量组＞高剂量组＞低剂量组＞模型组，P均＜0．05。结论猴头多糖可抑制小鼠皮下移植肉瘤的生长，以50 mg／kg剂量作用佳；该作用与其增加Caspase-3蛋白表达、促进肿瘤细胞凋亡有关。
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克仑特罗对COPD大鼠膈肌细胞凋亡影响的实验研究
目的 探讨克仑特罗对慢性阻塞性肺疾病(COPD) 模型大鼠膈肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白Fas表达的影响.方法 将雄性SPF级Wistar大鼠随机分为A、B、C三组,各组再分为造模前、造模2周、造模4周三个亚组.A组正常喂养;B、C组用气管注入脂多糖(LPS)加烟熏法造模;C组在造模基础上给予克仑特罗干预.用磷酸脱氧尿嘧啶缺口末端标记及免疫组化法检测各组膈肌细胞凋亡率及Fas表达率.结果 4周后,经肺HE切片证明B、C组造模成功.随时间推移,A组各亚组间细胞凋亡阳性率及Fas表达率无统计学差异,B、C组造模2周、4周亚组显著高于同期A组 (P均＜0.01),B、C组各亚组间无统计学差异;C组造模2周、4周亚组细胞凋亡阳性率显著低于同期B组(P＜0.05).结论 烟雾、LPS在COPD形成过程中参与膈肌细胞凋亡调控,克仑特罗可能通过抑制氧化应激反应和下调Fas表达减少膈肌细胞凋亡,对COPD所致的膈肌疲劳有一定治疗作用.
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miRNA-21对脂多糖诱导大鼠心肌细胞增殖的影响及其机制探讨
目的 观察微小RNA-21(miRNA-21)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠心肌细胞增殖的影响,并探讨其可能机制.方法 取大鼠心肌细胞H9C2,用LPS 10 μg/mL处理0、6、12 h,RT-PCR法检测细胞miRNA-21表达.将对数生长期的H9C2细胞随机分为4组,A组不处理,B组用LPS 10 μg/mL处理12 h;C、D组分别转染对照质粒(NC-miRNA片段)、miRNA-21抑制质粒(miRNA-21 antagomiR),培养48 h后再用LPS 10 μg/mL处理12 h.采用CCK-8法检测各组H9C2细胞增殖的OD值,Western blot法检测H9C2细胞中Bax、Bcl-2蛋白,分光光度法检测H9C2细胞中Caspase-3活性.结果 LPS处理0、6、12 h时,H9C2细胞miRNA-21相对表达量分别为1.05 ±0.03、12.95±0.08、19.62±0.12;与0h时比较,6、12 h时H9C2细胞miRNA-21相对表达量升高(P均＜0.01).A、B、C、D组H9C2细胞增殖的OD值分别为1.08±0.03、0.71 ±0.03、0.70±0.01、0.85±0.02,A组＞D组＞B、C组,P均＜0.01.与A组比较,B、C、D组H9C2细胞中Bax相对表达量增加、Bcl-2相对表达量降低(P均＜0.01);与B、C组比较,D组H9C2细胞中Bax相对表达量减少、Bcl-2相对表达量增加(P均＜0.01).B、C、D组H9C2细胞Caspase-3活性分别为1.13 ±0.08、1.10±0.14、0.57±0.06,D组H9C2细胞Caspase-3活性低于B、C组,P均＜0.01.结论 LPS可致心肌细胞损害过程miRNA-21表达增加,抑制miRNA-21表达可减轻LPS对心肌细胞增殖的抑制作用;其机制为抑制miRNA-21表达可下调Bax蛋白、上调Bcl-2蛋白表达,抑制Caspase-3活性,从而减轻细胞凋亡.
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程序性细胞死亡因子4过表达对胃癌细胞BGC823凋亡及凋亡调控蛋白的影响
目的 通过稳定转染程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4,PDCD4)基因至胃癌细胞BGC823中,观察过表达PDCD4对BGC823凋亡的作用及对凋亡相关调控蛋白Akt/p-Akt、FLIP、caspase-8及cleaved-caspase-8的影响.方法 构建针对人PDCD4的真核表达载体并转染至BGC823细胞,Annexin V-FITC/PI联合流式细胞仪检测细胞凋亡,Western Blot检测蛋白的表达.结果成功构建PDCD4真核表达载体并转染至BGC823中,获得稳定过表达PDCD4的细胞模型,过表达PDCD4的BGC823细胞凋亡率(10.82%±1.29%)较未转染组(5.06%±0.83%)明显升高(P<0.05).转染PDCD4后,Akt/p-Akt表达(0.25±0.04/0.06±0.01)较未转染组(0.65±0.09/0.18±0.02)明显降低(P<0.01),FLIP蛋白在转染组中的表达(0.12±0.01)较未转染组中的表达(0.48±0.06)明显降低(P<0.01),而转染组caspase.8(0.36±0.07)及cleaved-caspase-8(0.24±0.05)较未转染组caspase-8(0.18±0.04)及cleaved-caspase-8(0.11±0.02)明显升高(P<0.05).结论 PDCD4过表达可促进胃癌细胞BGC823的凋亡,并且抑制Akt和FLIP的表达,从而促进caspase-8的活性.
关键词： 程序性细胞死亡因子4 凋亡 胃癌 凋亡相关蛋白 -
凋亡相关蛋白在激素性幼兔股骨头缺血坏死动物模型中的表达及意义
目的 观察各凋亡相关蛋白在激素性幼兔股骨头缺血坏死动物模型股骨头组织中的表达情况,探讨该模型中调控凋亡的主要通路.方法 选用2月龄的新西兰大白兔,制作糖皮质激素性幼兔股骨头缺血坏死模型及对照组模型,根据是否发病将激素注射组分为未发病组和发病组.取股骨头软骨及软骨下骨组织用免疫组织化学法检测凋亡通路中凋亡相关蛋白天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Caspase-8、人结合凋亡蛋白酶活化因子-1(apaf-1)、钙蛋白酶-1(calpain-1)的表达情况.分别测定在单位视野中Caspase-3、Caspase-8、apaf-1、calpain-1的积分光密度(IOD)值.结果 1.Caspase-3的IOD值分别为发病组25 142.72 ±21 528.48,未发病组2 069.63±1 096.96,对照组301.80±99.66.Caspase-8的IOD值分别为发病组24 942.63±18 942.99,未发病组2016.31±1 518.70,对照组236.85±97.94.Apaf-1的IOD值分别为发病组8 514.23±6 384.20,未发病组1 118.49±1 360.59,对照组95.13±38.05.Calpain-1的IOD值分别为发病组9 636.71 ±9 123.81,未发病组1 881.10±3 277.86,对照组126.71±47.35.Caspase-3在发病组和未发病组、对照组间差异有统计学意义(H=11.470、23.996,p＜0.01);Caspase-8在发病组和对照组间差异有统计学意义(H=22.178,P＜0.01);apaf-1在发病组和对照组间差异有统计学意义(H=22.808,P＜0.01);calpain-1在发病组和对照组间差异有统计学意义(H=13.553,P ＜0.01).2.线性回归分析:Caspase-8能够显著的预测Caspase-3,且回归方程回归效应显著,回归方程能够解释40.3％的变异,而apaf-1和calpain-1对Caspase-3的回归效应不显著.结论 凋亡受体通路可能在股骨头缺血坏死的凋亡过程中发挥主要调控作用.
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乌司他丁对糖尿病大鼠局灶性脑缺血的脑保护作用
目的 探讨乌司他丁对糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法 (1)应用高剂量腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制作实验型2型糖尿病大鼠模型.(2)非糖尿病大鼠(n=30)和糖尿病大鼠(n=60)均制作大脑中动脉脑缺血模型.制模后局部大脑中动脉缺血30 min后,再给予乌司他丁及24 h再灌注.其中30只糖尿病大鼠在MCAO 成功30 min后,立即给予乌司他丁(100 mg/kg,腹腔).PCR检测凋亡诱导因子(AIF)评估细胞凋亡,免疫组化方法检测细胞色素C.结果 乌司他丁治疗后糖尿病大鼠的凋亡相关蛋白和细胞色素C较无药物治疗的明显减低(P＜0.05 ).糖尿病合并MCAO大鼠的凋亡相关蛋白和细胞色素C较单纯的MCAO大鼠明显增加(P＜0.05 ).结论 乌司他丁可能通过减少凋亡诱导因子、细胞色素C而改善糖尿病大鼠的脑缺血再灌注损伤.
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TCDD对大鼠睾丸间质细胞凋亡相关蛋白表达及ROS含量的影响
目的:探讨2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(TCDD)对大鼠睾丸间质细胞凋亡相关蛋白表达及ROS含量的影响.方法:用不同剂量TCDD(0、1、5、10、50 nmol/L)处理大鼠睾丸间质细胞24 h后,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,利用荧光探针DCFH-DA检测细胞ROS含量,Annexin V-FITC/PI染色联合激光共聚焦显微镜观察细胞凋亡情况,采用Western blot法检测细胞中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达水平.结果:随着TCDD剂量的增加,细胞增殖抑制率和ROS含量逐渐升高(P<0.05),细胞中Bax、Caspase-3蛋白相对表达量逐渐增加,而Bcl-2蛋白相对表达量逐渐降低(P<0.05).结论:TCDD可诱导大鼠睾丸间质细胞凋亡.
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精元康胶囊对骨髓抑制小鼠骨髓有核细胞表达抗凋亡蛋白的影响
目的:研究精元康胶囊对骨髓抑制小鼠外周血、骨髓有核细胞数及骨髓有核细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响,探索精元康胶囊恢复骨髓造血功能的机制,为临床用药提供实验依据.方法:观察精元康胶囊对外周血白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板、骨髓有核细胞数的影响;用免疫组化SABC法检测小鼠骨髓有核细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达.结果:精元康胶囊具有显著提高外周血白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板及骨髓有核细胞数.同时精元康胶囊在上调Bcl-2蛋白表达的同时,下调Bax蛋白表达,使Bcl-2/Bax比值增大,防止骨髓造血细胞凋亡.结论:精元康胶囊具有抗骨髓细胞凋亡作用,这可能是在骨髓抑制状态下,精元康胶囊促进骨髓细胞增殖和骨髓造血功能恢复的机制之一.
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病毒性心肌炎患儿外周血中微小RNA-98的表达及其对凋亡相关蛋白/凋亡相关蛋白配体表达的影响
目的 探讨病毒性心肌炎(VM)患儿外周血中微小RNA-98 (miR-98)的水平及其对凋亡相关蛋白(Fas)/凋亡相关蛋白配体(FasL)表达的影响.方法 选择2015年9月至2017年7月郑州大学附属儿童医院收治的VM患儿62例作为VM组,根据左心室射血分数(LVEF)及心肌肌钙蛋白(cTnI)水平将VM组患儿分为轻度组(n=38)和重度组(n=24),另选择56例健康儿童作为对照组.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定3组受试者外周血中miR-98、Fas、FasL mRNA表达水平,Western blot检测Fas、FasL蛋白表达水平.体外培养人心肌细胞(HCM)、H9C2心肌细胞至占培养皿底面积80％时,将细胞分为空白组(不做任何处理)、阴性转染组(无意义序列转染至细胞内)和miR-98转染组(miR-98 siRNA转染至细胞内).采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐法检测3组细胞培养12、24、48、72 h时细胞增殖情况;平板细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成情况;流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果 VM组患儿外周血中miR-98相对表达量低于对照组(P＜0.05),Fas、FasL mRNA相对表达量高于对照组(P＜0.05),重度组患儿外周血中miR-98相对表达量低于轻度组,Fas、FasL mRNA相对表达量高于轻度组(P＜0.05).VM组患儿外周血中Fas、FasL蛋白相对表达量高于对照组(P＜0.05),重度组患儿外周血中Fas、FasL蛋白相对表达量高于轻度组(P＜0.05).VM组患儿外周血中miR-98与Fas、FasL呈显著负相关(r=-516、-463,P＜0.05).miR-98转染组HCM、H9C2心肌细胞抑制率在各时间点均高于空白组和阴性转染组(P＜0.05).miR-98转染组HCM、H9C2心肌细胞克隆数量和miR-98相对表达量低于空白组和阴性转染组(P＜0.05),HCM、H9C2细胞凋亡率及HCM、H9C2心肌细胞中Fas、FasL蛋白相对表达量高于空白组和阴性转染组(P＜0.05).结论 miR-98在VM患儿外周血中表达水平下降,其可能是通过调节Fas/FasL基因在心肌细胞中的表达来参与心肌细胞损伤和凋亡.
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齐墩果酸对阿尔茨海默病模型大鼠海马区ADAM10、sAPPα及凋亡相关蛋白bax和bcl-2表达的影响
目的 观察齐墩果酸对阿尔茨海默病模型大鼠海马区α分泌酶(ADAM10)、可溶性淀粉样前体蛋白(sAPPα),以及凋亡相关蛋白bax、bal-2表达的影响,初步探讨齐墩果酸治疗AD可能性作用机制.方法 将30只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组和齐墩果酸组.除假手术组外其他两组采用右侧侧脑室注射聚集态β-淀粉样蛋白片段25-35(Aβ25-35)片段,造模成功后齐墩果酸组按照20mg·kg-1予以齐墩果酸灌胃,假手术组和模型组予同体积蒸馏水灌胃,灌胃1次/d,连续4周.采用Western bolt检测大鼠海马区ADAM10、sAPPα、bax、bcl-2蛋白的表达.结果 与假手术组相比,模型组海马区ADAM10、sAPPα、bcl-2蛋白表达显著下降,差异具有统计学意义(P ＜0.05);bax表达量显著升高,差异具有统计学意义(P＜0.05);与模型组相比,齐墩果酸组大鼠海马区ADAM10、sAPPα、bcl-2蛋白表达显著增加,差异具有统计学意义(P ＜0.05);bax表达显著下降,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 补肾中药女贞子有效成分齐墩果酸可通过促进AD模型大鼠海马区ADAM10、sAPPα、bcl-2蛋白的表达,抑制bax蛋白的表达进而达到神经保护的作用.
关键词： 阿尔茨海默病 齐墩果酸 α分泌酶 可溶性淀粉样前体蛋白 凋亡相关蛋白 -
地黄饮子对快速老化小鼠SAMP8海马神经元凋亡相关蛋白影响的研究
目的 观察地黄饮子对快速老化小鼠SAMP8海马神经元凋亡相关蛋白的影响,探讨地黄饮子治疗AD的作用机制.方法 以快速老化小鼠SAMP8为研究对象,依据“补肾益髓,化痰行瘀,开窍醒神”的原则,给予地黄饮子灌胃,1次/d,连续灌胃28 d.采用免疫组化法观察地黄饮予对快速老化小鼠SAMP8小鼠海马组织凋亡相关蛋白bax、bcl -2及cyt- c的影响.结果 与模型组比较,地黄饮子可降低快速老化小鼠bax、cyt -c的表达,提高bcl -2的表达.结论 地黄饮子可改善SAMP8小鼠海马神经元的细胞凋亡情况.
关键词： 地黄饮子 快速老化小鼠SAMP8 凋亡相关蛋白 -
胃癌凋亡相关蛋白Survivin、B淋巴细胞/白血病-2、bax表达与肿瘤细胞体外化疗药敏性的关系
目的 探讨胃癌凋亡相关蛋白表达与体外化疗药敏性的关系. 方法 对64例胃癌标本进行Survivin、R淋巴细胞/白血病-2(bcl-2)、bax免疫组织化学染色,并以噻唑蓝(MTT)比色法检测体外化疗药物敏感性.结果 肿瘤Survivin、bcl-2、bax阳性表达率分别为90.6％、75.0％、68.8％；Survivin与bax、bcl-2与bax 间表达强度均呈负相关(r=-0.45044、-0.414 03,P＜0.01).在耐药因子表达程度与药物对肿瘤细胞抑制率的关系中,Survivin强表达时,表阿霉素(eADM)、顺铂(DDP)对肿瘤细胞的抑制率明显降低(P＜0.05),但奥沙利铂(L-OHP)对肿瘤细胞的抑制率明显增加(P＜0.05)；bcl-2强表达时,5-氟尿嘧啶(5-Fu)、紫杉醇(PTX)、eADM对肿瘤细胞的抑制率明显低于弱表达组(P＜0.05)；bax强表达组中,5-Fu、eADM、L-OHP和甲氨喋呤(MTX)对肿瘤细胞的抑制率明显高于弱表达组(P＜0.05).结论 胃癌凋亡相关蛋白表达与部分化疗药物敏感性有关.
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肝细胞凋亡在多囊肝病发病中的临床意义
本研究旨在观察肝细胞凋亡及细胞凋亡相关蛋白在多囊肝病(PCLD)发病机制中的作用及其临床意义.
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聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子对大鼠腹腔内异种移植猪肝细胞bcl-2、bax、Fas和p53表达的影响
我们采用免疫组织化学方法观察聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖(PLA-O-CMC)纳米粒子对腹腔内异种移植猪肝细胞凋亡相关蛋白bcl-2、pax、Fas和p53表达的影响.
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局灶性脑缺血预处理后凋亡相关蛋白表达的动态研究
一次短暂的脑缺血能够激发脑组织对再次严重缺血产生保护性耐受,这次短暂的缺血被称为脑缺血预处理[1].我们通过采用开颅方法直接阻断大鼠大脑中动脉(MCA)模型,检测局灶性脑缺血预处理后凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及胱天蛋白酶(Caspase)-3p20表达的动态改变及它们对神经细胞凋亡的影响.
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阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征上气道开大肌凋亡现象研究
目的:观察阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者腭帆张肌中Bax、Bcl-2的表达水平,探讨OSAHS患者上气道开大肌肌纤维是否存在凋亡现象.方法:选取30例OSAHS患者作为实验组,10例已排除OSAHS的慢性扁桃体炎患者作为对照组.采用免疫组织化学Elivison二步法和计算机图像分析系统检测两组腭帆张肌中Bax、Bcl-2的表达水平并进行对比分析.结果:①实验组Bax的表达水平和Bax/Bcl-2的比值明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);②Bax的表达水平与呼吸紊乱指数呈正相关(r=0.697,P<0.01).结论:OSAHS患者上气道开大肌存在凋亡现象,且病情越重凋亡的程度也越严重.
关键词： 睡眠呼吸暂停低通气综合征 阻塞性 凋亡相关蛋白 凋亡 -
玉郎伞水提物对心肌缺血再灌注损伤心肌组织ATP酶和凋亡蛋白的影响
目的:研究玉郎伞水提物(WYLS)对大鼠离体心脏缺血再灌注(I/R)损伤心肌组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和凋亡蛋白的影响.方法:采用Langendorff离体心脏灌流法,停灌30 min再灌30 min建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型.观察WYLS对心肌组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性的影响、心肌组织病理学变化、凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响.结果:与I/R组比较,WYLS高剂量组Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶的活性明显增加(P＜0.05或P＜0.01),心肌受损程度明显减轻(P＜0.05).同时,WYLS高剂量组心肌Bax蛋白表达明显降低(P＜0.01),Bcl-2蛋白表达无明显影响(P＞0.05),但Bcl2/Bax的比率明显增加(P＜0.05).结论:WYLS能减轻大鼠心肌I/R损伤,作用机制可能与减轻钙超载、抑制某些凋亡相关蛋白表达有关.
关键词： 玉郎伞 心肌缺血再灌注 Na+-K+-ATP酶 Ca2+-ATP酶 凋亡相关蛋白 -
干扰素-λ2对急性病毒性心肌炎小鼠凋亡相关蛋白的研究
目的 干扰素-λ(IFN-λ)广泛存在于人体各组织中,目前研究发现其具有抗病毒、抗肿瘤等作用.但其是否能用于治疗病毒性心肌炎尚缺乏相关报道.探讨IFN-λ2:在病毒性心肌炎(VMC)早期的作用,为IFN-λ2是否能应用于临床治疗或预防VMC提供实验室依据.方法 采用腹腔注射柯萨奇B3(CVB3)病毒的方法制造病毒性心肌炎小鼠模型.实验分3组:空白对照组、病毒组、IFN-λ2治疗组.空白对照组给予腹腔注射等量的PBS培养液,记为第0天;IFN-λ2治疗组从第1天开始,连续5 d每天经背部皮肤不同点给予小鼠IFN-λ2400 ng(0.1 mL),空白对照组和病毒组则每天以同样方法给予等量生理盐水.死亡小鼠从组中剔除.9 d后处死所有存活小鼠.检测各组小鼠心脏的病理改变.采用免疫组织化学技术检测各组小鼠心脏组织中凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax的表达.结果 ①病毒组心肌病理评分要高于空白对照组及IFN-λ2治疗组.②免疫组化结果显示正常心肌组织有少量Bcl-2及Bax的表达,病毒组较空白对照组Bcl-2表达减少、Bax表达明显增加(P<0.01);IFN-λ2治疗组较病毒组Bcl-2表达增加、Bax表达减少(P<0.01).结论 INF-λ2能减轻柯萨奇病毒所致心肌炎小鼠的心肌病理改变,能抑制小鼠心肌细胞凋亡,对VMC小鼠的心肌细胞具有保护作用.
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PHⅡ-7作用于慢性粒细胞白血病细胞k562的机制研究
目的： PHⅡ-7是以靛玉红为模板合成的一种抗肿瘤药物，并有显著逆转耐药作用。实验室前期研究发现在人慢性粒细胞白血病k562细胞中，PHⅡ-7可与烯醇化酶ENO1相结合。本研究旨在探究PHⅡ-7通过ENO1对k562细胞体外抑癌作用机制。方法构建ENO1表达稳定干扰细胞株k562-shENO1和对照细胞株k562-shCON。通过MTT法检测PHⅡ-7对k562-shCON和k562-shENO1细胞株的生长抑制作用；通过细胞计数法检测k562-shCON和k562-shENO1细胞株生长差异；采用流式细胞仪测定细胞凋亡水平。采用逆转录PCR，实时荧光定量PCR和免疫印迹技术检测相关基因表达水平。结果通过real-time-PCR和免疫印迹实验验证k562-shCON和k562-shENO1干扰细胞株成功建立。k562-shENO1和k562-shCON细胞株体外生长无显著差异，PHⅡ-7对k562-shENO1和k562-shCON细胞株IC50无显著性差异。PHⅡ-7可诱导k562-shENO1和k562-shCON细胞株凋亡，并可激活caspase3、caspase9和PARP等凋亡相关蛋白。与k562-shCON相比较，k562-shENO1细胞对高浓度PHⅡ-7诱导凋亡作用更敏感。结论烯醇化酶ENO1与PHⅡ-7在人慢性粒白血病k562细胞中作用密切相关，干扰ENO1表达能在一定程度上增强PHⅡ-7的抑癌作用。
