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表没食子儿茶素没食子酸酯对人宫颈癌细胞生长抑制作用及作用途径的探讨
目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人乳头瘤病毒(HPV)呈阳性表达的宫颈癌CaSki细胞与HeLa细胞的生长抑制作用及其作用途径.方法 在CaSki细胞与HeLa细胞的培养液中添加EGCG后,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测两种宫颈癌细胞的生长曲线;4',6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)荧光标记法观察细胞凋亡的形态学变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测病毒致癌基因E6(HPV E6)、雌激素受体α(Era)、雌激素受体B(Erβ)、芳香化酶等蛋白的表达水平.结果 MTT法显示,培养液内添加EGCG能明显抑制CaSki细胞与HeLa细胞的生长,并且呈浓度和时间依赖性;DAPI荧光标记法显示,25 μmol/L EGCG作用CaSki细胞和50μmol/L EGCG作用HeLa细胞24 h后均呈典型的细胞凋亡形态学改变;Western blot法显示,25μmol/L EGCG作用CaSki细胞和50μmoL/LEGCG作用HeLa细胞12、24、48 h后,HPV E6、Erα、芳香化酶的蛋白表达量逐渐减低,ERB的蛋白表达量增加,与对照组相比有统计学差异(P<0.05).结论 EGCG在体外能有效抑制人宫颈癌CaSki细胞与HeLa细胞的生长与增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调HPV E6、Erα、芳香化酶蛋白的表达量、上调Erβ的蛋白表达量有关.
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表没食子儿茶素没食子酸酯增强食管癌细胞对阿霉素化疗敏感性
目的：观察表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）体外增强阿霉素（ADM）对食管癌CaEs-17细胞化疗敏感性的作用，并探讨可能的作用机制。方法实验分为空白对照组、ADM组（培养液中ADM终浓度为0.3μmol/L），EGCG组（培养液中EGCG终浓度为20 mg/L）、联合组（培养液中EGCG终浓度为20 mg/L，ADM浓度为0.3μmol/L），各组作用24 h，CCK-8法和细胞克隆形成法检测细胞增殖抑制率和存活率，金氏公式评价二药的协同效果；流式细胞仪检测细胞凋亡率及周期分布；Transwell法检测细胞侵袭力；免疫印迹法检测Bax蛋白表达水平。结果 EGCG、ADM均可抑制CaEs-17细胞增殖、诱导细胞凋亡、降低细胞存活率和侵袭力；EGCG、ADM均可阻滞细胞于G0/G1期，并能上调Bax蛋白表达水平(P＜0.05)，二药联用上述作用效果更为显著(P＜0.01)。结论 EGCG能够增强ADM对食管癌CaEs-17细胞的化疗敏感性，这种作用部分是通过上调Bax蛋白实现的。
关键词： 食管肿瘤 表没食子儿茶素没食子酸酯 阿霉素 药物疗法 -
表没食子儿茶素没食子酸酯对高脂饮食大鼠脂肪组织中胰岛素信号传导通路的影响
目的：探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对高脂饮食大鼠脂肪组织中胰岛素信号传导机制的影响。方法将30只4周龄SPF级雄性SD大鼠随机分为正常饮食组（n=10）和高脂饮食组（n=20）。喂养16周，当两组大鼠体质量出现显著差异后（P<0.05），将高脂饮食组按随机区组原则分为高脂饮食组（n=10）和EGCG干预组（高脂饮食含0.32%EGCG，n=10）。干预16周后检测每组大鼠空腹血糖及胰岛素水平，并计算 HOMA-IR 指数；应用 Western blot 方法检测附睾周脂肪组织中胰岛素信号通路中关键分子p-IRS-1、PI3K、GLUT4蛋白的水平。结果（1）与高脂饮食组相比，EGCG干预组空腹胰岛素水平显著下降[EGCG干预组（13.83±0.79）mIU/L，高脂饮食组（31.71±3.61）mIU/L，P=0.004]；EGCG干预组HOMA-IR指数明显改善（EGCG 干预组3.36±0.31，高脂饮食组7.59±0.99，P=0.007）；正常饮食组、高脂饮食组和EGCG干预组大鼠空腹血糖水平无统计学差异。（2）Western blot结果显示，与高脂饮食组相比，EGCG干预组大鼠附睾脂肪组织中 p-IRS-1Ser307蛋白水平明显下降，约为高脂饮食组的62.19%（P=0.005）；PI3K及GLUT4水平明显升高，分别为高脂饮食组的2.35倍（P=0.000）和2.03倍（P=0.007）。结论 EGCG可能通过调控高脂饮食大鼠脂肪组织胰岛素信号传导通路中关键蛋白表达，改善胰岛素敏感性。
关键词： 脂肪组织 表没食子儿茶素没食子酸酯 高脂饮食 胰岛素抵抗 -
EGCG对肝纤维化大鼠TGF-β1和CTGF表达的影响
目的:研究表没食子儿茶素-3-没食子酸酯(EGCG)的抗肝纤维化作用及其机制.方法:运用腹腔注射CCl4构建大鼠肝纤维化模型,观察EGCG对大鼠肝纤维化的影响.运用HE染色、Massion三色染色检测肝纤维化的变化;生化检测血清丙氨酸转移酶(ALT)及天冬氨酸转移酶(AST);同时检测肝组织的羟脯氨酸、还原型谷胱甘肽(GSH)和硫代巴比妥酸反应底物(TBARS)含量.免疫组织化学法观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;分别运用RT-PCR和Western blot法检测转化生长因子β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)mRNA和蛋白质表达.结果:EGCG对CCl4诱导的大鼠肝纤维化程度具有显著的抑制作用.EGcG对肝细胞具有显著的保护作用,与纤维化模型组比较,EGCG干预组血清ALT、AST水平降低(138.4±45.8vs 234.6±63.2,96.4±20.5 vs 186.2±36.6,均P<0.05).EGCG显著抑制肝组织α-SMA的表达.EGCG通过抑制TBARS的形成和提高GSH含量,显著改善CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝脏的氧化状态.同时EGCG显著抑制肝组织TGF-β1及CTGF的mRNA和蛋白质的表达(均P<0.05).结论:EGCG能够显著抑制肝纤维化的进展,其机制与EGCG改善大鼠肝脏的氧化状态及抑制TGF-β1和CTGF的表达有关.
关键词： 表没食子儿茶素没食子酸酯 肝纤维化 转化生长因子β1 结缔组织生长因子 -
表没食子儿茶素没食子酸酯对缺氧诱导的肝细胞癌HepG2细胞HIF-1α及VEGF蛋白表达的影响
目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG)]对缺氧诱导的肝细胞癌HepG2细胞HIF-1α及VEGF表达的影响.方法:在缺氧条件体外培养肝细胞癌HepG2细胞16 h,并以不同浓度EGCG处理,即低剂量(10 μmol/L)、中剂量(50 μmol/L)、高剂量(100 μmol/L),制成细胞爬片以免疫组化SABC法检测HIF-1α及VEGF表达的变化,同时设常氧组及缺氧对照组进行比较.结果:常氧状态下HepG2细胞中HIF-1α几乎无表达,VEGF有少量表达.缺氧对照组经16h缺氧后HIF-1α表达明显上调,与常氧组相比有显著差异( t = 3.579,P<0.01);VEGF表达亦较常氧组明显上调,两者有明显差异( t =6.372,P<0.01).同浓度的EGCG对缺氧各组细胞HIF-1α及VEGF表达,与缺氧对照组相比均有不同明显抑制作用(HIF:F = 56.818,P<0.05;VEGF:F = 10.016,P<0.05),EGCG对HIF-1α及VEGF表达的抑制作用呈剂量依赖性,且相关分析显示,HIF-1α及VEGF蛋白表达同步化( r=0.617,P<0.05).结论:EGCG可从蛋白水平下调缺氧诱导的HepG2细胞HIF-1α及VEGF的表达水平,从而有可能抑制肿瘤血管新生.
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EGCG对乙酸诱导大鼠结肠炎的治疗作用及抗氧化机制
目的:在大鼠结肠炎的模型中,研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)的治疗作用及其抗氧化损伤作用的机制.方法:SD大鼠60只,随机分为正常对照组(n=10)、模型安慰剂组(n=20)、EGCG治疗组(n=15)、柳氮磺吡啶(SASP)治疗组(n=15).正常组常规饲养,模型安慰剂组、EGCG组、SASP组80 g/L乙酸造模后分别予以生理盐水2 mL/d、EGCG 50 mg/(kg·d)、SASP0.25 g/(kg·d)灌胃治疗7 d,观察大鼠活动状态,进食量,体质量,大便性状,大便出血情况,计算疾病活动指数(DAI),判断疗效.第8天处死大鼠并进行结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分,组织学评级,测定组织一氧化氮自由基(NO)、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)以及超氧化物歧化酶(SOD)含量.结果:与模型安慰剂组相比,EGCG显著改善DAI(1.1±0.9 vs 3.9±0.4,P＜0.01)、CMDI(1.5±0.9 vs 3.3±0.6,P＜0.05)和组织学评级(4.6±3.1 vs 9.3±2.8,P＜0.01).与SASP组相比,EGCG显著改善DAI(1.1±0.9 vs 3.0±1.2,P＜0.01)、CMDI(1.5±0.9 vs 2.3±0.9,P＜0.05)和组织学评级(4.6±3.1 vs 7.9±4.0,P＜0.05).与模型安慰剂组相比,EGCG组NO含量显著下降(9.1±5.6 μmol/g vs 15.4±5.0μmol/g,P＜0.05),MDA含量也显著下降(0.9±0.6 μmol/gvs 1.5±0.6 μmol/g,P＜0.05),SOD含量显著提高(3090.6±568.4 nkat/mg vs 1373.6±410.1 nkat/mg,P＜0.05).与SASP组相比,EGCG组SOD含量显著提高(3090.6±568.4 nkat/mg vs 1268.6±431.8 nkat/mg,P＜0.05).结论:EGCG可通过抑制氧化损伤减轻结肠炎症反应,且疗效优于传统药物SASP.
关键词： 表没食子儿茶素没食子酸酯 结肠炎 抗氧化 机制 -
EGCG对LoVo和SW480结肠癌细胞株的作用及对Notch1与Notch2基因表达的影响
目的:探讨绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对结肠癌细胞株LoVo细胞和SW480细胞增殖的抑制作用,研究其对Notch1与Notch2的基因表达的影响,方法:体外培养LoVo细胞和SW480细胞,采用不同浓度的EGCG(10、20、35 mg/L)对其进行干预,MTT法检测EGCG对LoVo细胞和SW480细胞增殖的抑制作用；用流式细胞仪检测EGCG对LoVo细胞和SW480细胞细胞凋亡和细胞周期的影响.实时荧光定量PCR检测EGCG干预后的LoVo细胞和SW480细胞的Notch1与Notch2基因的表达情况,结果:MTT法检测EGCG对LoVo细胞和SW480细胞增殖均具有抑制作用,且呈浓度依赖性,不具有时间依赖性.流式细胞仪检测EGCG能增强LoVo细胞和SW480细胞的凋亡率,且剂量与凋亡率呈正相关.EGCG能将SW480细胞和LoVo细胞周期阻滞在G0/G1期,阻碍其向S期转换,抑制其细胞增殖.实时荧光定量PCR检测EGCG能下调两株细胞Notch2的基因表达,而SW480细胞的Notch1基因表达有下调的趋势,LoVo细胞的Notch1基因表达有上调的趋势,但差异均无显著意义,结论:EGCG对体外培养的LoVo细胞和SW480细胞的增殖有明显抑制作用,且能诱导细胞凋亡和影响细胞周期,其作用机制可能与下调Notch2的基因表达及激活Notch信号转导途径有关,但是EGCG对Notch1基因表达的影响尚需要做进一步探讨.
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EGCG对人胃癌细胞株MKN 45中Bcl-2家族相关基因表达的影响
目的:探讨EGCG干预人胃癌细胞株MKN45后Bcl-2家族相关基因表达的变化情况.方法:运用半定量RT-PCR法和蛋白免疫印迹法分别检测EGCG干预人胃癌细胞株MKN 45后不同时间点上(0,12,24,36 h)抗凋亡相关基因Bcl-x1和Bcl-2及促凋亡相关基因Bax、Bid和Bad的mRNA和蛋白表达水平,并比较不同时间点的Bcl-2与Bax的比值.结果:促凋亡相关基因Bax、Bid和Bad的mRNA与蛋白表达水平随着EGCG作用于人胃癌细胞株MKN45的时间延长(0,12,24,36 h)逐渐升高(Bax蛋白:0.6292±0.08,0.6454±0.04,0.8069±0.09,0.8992±0.07,P＜0.05;Bid蛋白:1.1214±0.08,1.3697±0.07,1.610±0.09,2.0623±0.12,P＜0.05;Bad蛋白:0.4327±0.02,0.7531±0.01,1.2827±0.02,1.6388±0.09,P＜0.05),而抗凋亡相关基因Bcl-xl及Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平却逐渐降低(Bcl-xl蛋白:0.6444±0.01,0.6060±0.02,0.5647±0.04,0.5487±0.11,P＜0.05;Bcl-2蛋白:0.8112±0.04,0.6716±0.08,0.4664±0.03,0.3146±0.01,P＜0.05).Bcl-2/Bax比值也随着EGCG作用时间的延长逐渐变小(P＜0.05).结论:EGCG可改变Bcl-2家族不同成员的mRNA与蛋白表达水平,尤其是Bcl-2/Bax比值,这可能与EGCG来调控胃癌细胞凋亡有关.
关键词： 表没食子儿茶素没食子酸酯 细胞凋亡 胃癌 Bcl-2 -
EGCG和染料木黄酮在肿瘤细胞信号传导中的作用
表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin3-gallate,EGCG)和染料木黄酮是两种天然的食物组份,具有多种抗癌功效,其抑制肿瘤发生的途径一直备受关注.两者均可抑制特异的酪氨酸激酶(RTKs)及其相应的下游信号通路RAS/MAPK和PI3K/AKT途径,从而发挥其抗肿瘤作用.近年来,两者在临床研究方面也有较大的开展,但需相关的临床实验研究来确定其佳剂量、方案、毒性和临床效率,以便达到临床的优化治疗.
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EGCG对氟尿嘧啶抑制肝癌细胞生长的增强作用
目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是否具有增强5-氟尿嘧啶(5-FU)抑制肝癌BEL-7402细胞生长的作用,并探讨其中的机制.方法:应用MTT法观察肝癌细胞的生存率;Western blot进行蛋白分析:应用小RNA干扰(siRNA)法来沉默BEL-7402细胞中COX-2蛋白的表达;ELISA定量测定细胞培养上清液中前列腺素E2(PGE2)的含量.结果:与对照组(0.1%DMSO)相比,工作浓度为5、10、25、50 mmo1/L的EGCG显著抑制BEL-7402细胞的生长(P<0.05),分别下降至为76.55%±1.98%、52.88%±4.28%、18.54%±2.88%和7.95%±0.90%(q=0.86,1.31,1.33,1.17).当与10 mmol/L 5一FU联合用药时,细胞生存率下降更为显著,即浓度为5 mmo1/LEGCG与5-FU联合用药表现出两药相加作用:10、25、50 mmoI/L EGCG浓度为与5-FU联合用药表现出协同作用.进一步研究发现,EGCG下调BEL-7402细胞中COX-2蛋白表达,降低PGE2的释放,这一系列分子活动参与5-FU协同抗肝癌细胞生长作用.结论:EGCG具有协同增强5-FU抑制BEL-7402细胞生长作用.
关键词： 表没食子儿茶素没食子酸酯 5-氟尿嘧啶 肝肿瘤 -
EGCG对阿霉素诱导的胃癌细胞MKN28衰老的影响
目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG)]对阿霉素诱导的胃癌细胞MKN28衰老的影响.方法:Western blot检测EGCG对EZH2蛋白表达的影响；阿霉素诱导经EGCG处理的MKN28细胞衰老,衰老相关-β-半乳糖苷酶(senescence associated-β-galactosidase,SA-β-gal)染色检测各组细胞衰老情况,激光共聚焦显微镜检测各组细胞核中衰老相关异染色质灶(senescence-associated heterochromatic foci,SAHF)的形成；噻唑蓝比色法(MTT)和流式细胞术检测EGCG对MKN28细胞生长和周期的影响,并比较在阿霉素诱导下各组细胞的相应变化.结果:EGCG可明显抑制EZH2蛋白表达,经EGCG处理的MKN28细胞在阿霉素诱导下SA-β-gal染色阳性率和SAHF形成比例明显高于阿霉素组和EGCG组,分别为72.16％±4.03％、34.42％±7.06％、15.40％±1.70％和86.44％±4.33％、47.73％±3.03％、80.28％±1.24％;与空白对照组相比,经不同浓度EGCG处理的MKN28细胞其周期G0/G1比例以及生长抑制率会随浓度的增高而增大(P＜0.05),在阿霉素的诱导下此趋势更为明显.结论:EGCG可通过抑制EZH2表达来促进阿霉素对MKN28细胞的衰老诱导作用.
关键词： 表没食子儿茶素没食子酸酯 EZH2 细胞衰老 MKN28细胞 阿霉素 -
表没食子儿茶素没食子酸酯对人胰腺癌细胞株SW1990增殖的影响
目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人胰腺癌细胞株SW1990增殖及细胞凋亡、细胞周期的影响.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度EGCG(6.25、12.5、25、50、100μg/ml)对体外培养的SW1990细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测EGCG(25μg/ml)对SW1990细胞凋亡及不同浓度的EGCG(0、10、20、30、40、50 μg/ml)对SW1990细胞周期的影响.结果 不同浓度EGCG(0、25、50μg/ml)作用SW1990细胞24 h后,吸光度值(A492)分别为0.46±0.04、0.42±0.04、0.27±0.03,48 h后分别为0.48±0.02、0.31±0.03、0.16±0.02,72 h后分别为0.51±0.01、0.24±0.04、0.14±0.04,EGCG呈浓度及时间依赖性抑制SW1990的增殖(P＜0.01).25 μg/ml EGCG作用于SW1990细胞24、48、72 h后的细胞凋亡率分别为(8.33±1.15)%、(19.77±0.81)%、(29.17±0.75)%,而对照组相应的细胞凋亡率分别为(2.77±0.45)%、(3.20±0.26)%、(3.67±0.35)%,两组差异具有统计学意义(P＜0.01).0、20、50 μg/ml EGCG作用SW1990细胞24 h后,G0/G1期细胞分别占(57.59±0.97)%、(62.99±1.91)%、(68.87±1.88)%,随着EGCG浓度的增加,Go/G1期细胞比例明显增加,而S期和G2/M期细胞比例相应下降(P＜0.01).结论 EGCG能明显抑制SW1990细胞的增殖,其机制可能与其诱导SW1990细胞凋亡及调控细胞周期有关.
关键词： 胰腺肿瘤 表没食子儿茶素没食子酸酯 细胞凋亡 细胞周期 -
茶多酚EGCG通过SREBP2/LDLR通路调节HepG2细胞中的LDL摄取
目的 探索茶多酚EGCG对人肝癌细胞HepG2中LDL的摄取情况的影响及其可能的分子机制.方法 培养人肝癌细胞HepG2细胞,茶多酚EGCG刺激HepG2细胞,用Real-time PCR和western blot的方法分别检测LDLR的mRNA和蛋白水平表达以及核内蛋白SREBP2的表达情况.用DiI-LDL染色的方法检测LDL的摄取情况.另外,利用RNAi技术进一步检测SREBP2对LDLR的表达和LDL的摄取情况.结果 EGCG可增加LDLR的mRNA (P＜0.05)和蛋白水平(P＜0.01)的表达以及核内SREBP2(P＜0.01)的表达,可明显促进LDL的摄取.转染SREBP2的小干扰RNA后,可明显抑制EGCG引起的LDLR的表达(P＜0.0l)及LDL的摄取.结论 从细胞水平证明茶多酚EGCG可通过激活SREBP2/LDLR通路促进LDL的摄取.
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表没食子儿茶素没食子酸酯的研究进展
茶叶是世界上三大饮品之一,饮茶在我国已有数千年历史,经常饮用绿茶对人体健康有利已受到越来越多科学家的关注.自从1929年日本人首先从茶中提取分离出茶儿茶素(EGCG)以来,许多专家和学者对EGCG进行了研究,特别是近年来应用现代的科学技术,发现EGCG具有抗肿瘤、抗基因突变、抗菌消炎、抗动脉粥样硬化、抗氧化、降压、降糖等多种生物学功能.本文就其对人体和实验动物的生理与病理生理影响及机制的研究作一简要综述.
关键词： 表没食子儿茶素没食子酸酯 作用 机制 -
茶多酚EGCG对HepG2细胞脂质代谢基因和长链非编码RNA表达的影响
目的：通过生物芯片技术观察茶多酚表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对HepG2细胞脂质代谢相关基因和长链非编码RNA（lncRNAs）表达的影响并探讨后两者可能的作用关系。
方法：人HepG2细胞经EGCG（25μmol/L）处理24 h后，抽提RNA，并杂交至Human Transcriptome Array 2.0芯片进行mRNA和lncRNAs表达谱的分析。通过生物信息学进行靶基因预测建立两者的可能作用关系，并应用实时荧光定量多聚酶链反应（PCR ）技术对芯片结果验证。
结果：HepG2细胞经EGCG处理后表达差异的脂质代谢相关基因为27条，其中11条涉及胆固醇代谢。此外，芯片结果显示有285条lncRNAs表达上调或下调。靶基因预测发现多个脂代谢基因可能受lncRNAs顺式或反式调控，实时定量PCR验证与芯片结果一致。
结论：茶多酚EGCG可直接改善脂质代谢包括胆固醇的代谢，lncRNAs可能参与了对脂质代谢基因的表达调控。关键词： 表没食子儿茶素没食子酸酯 脂质代谢 长链非编码核糖核酸 生物芯片 -
表没食子儿茶素没食子酸酯对大鼠脊髓损伤后神经功能恢复的影响
目的:研究经蛛网膜下腔给予表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后神经功能恢复的影响及其作用机制.方法:成年雌性SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只,假手术组(A组)仅切除椎板；对照组(B组)SCI后,蛛网膜下腔注射同体积载体溶液；10mg/kgEGCG治疗组(C组)SCI后经蛛网膜下腔注射EGCG 10mg/kg;20mg/kg EGCG治疗组(D组)SCI后经蛛网膜下腔注射EGCG 20mg/kg.改良Allen法(40g·cm)制作T10节段SCI模型,L4水平蛛网膜下腔注射EGCG或载体溶液.术前、术后1d、术后3d及术后1、2、3、4周进行盲法BBB评分、斜板试验；术后4周时处死大鼠,病理学检查(Luxol fast blue染色)观察脊髓损伤部位残余髓鞘情况；免疫组化及Western blot法检测胶质细胞源性营养因子(GDNF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、Bcl-2和Bax的表达水平.结果:A组术前及术后各时间点BBB评分均为21分,斜板试验角度无明显变化;术后各时间点B、C组和D组BBB评分及斜板试验角度均小于A组(P＜0.05)；术后1d、3d时,B、C组和D组BBB评分以及斜板试验角度无统计学差异(P＞0.05)；术后1、2、3、4周时,C、D组的BBB评分及斜板试验角度均大于B组(P＜0.05),C组的BBB评分及斜板试验角度与D组比较均无统计学差异(P＞0.05).术后4周时,B、C、D组大鼠脊髓损伤部位的髓鞘残余面积均小于A组(P＜0.05),C、D组明显大于B组(P＜0.05),在损伤脊髓中心D组明显大于C组(P＜0.05).术后4周时免疫组化检查,B、C、D组的BDNF、GDNF、Bcl-2和Bax的阳性表达强于A组,C、D组的BDNF、GDNF和Bcl-2的阳性表达强于B组,Bax的阳性表达弱于B组.术后4周时Western blot法检测,B、C、D组的BDNF、GDNF、Bcl-2和Bax的表达高于A组(P＜0.05)；C、D组的BDNF和GDNF表达明显高于B组(P＜0.05),C组与D组无统计学差异(P＞0.05)；C、D组的Bcl-2表达明显高于B组(P＜0.05),C组与D组比较无统计学差异(P＞0.05)；C组和D组的Bax表达明显低于B组(P＜0.05),D组明显低于C组(P＜0.05).结论:EGCG可有效促进大鼠SCI后的神经功能恢复,其机理可能与髓鞘的丢失减少、神经营养因子BDNF和GDNF的表达上调及细胞凋亡被抑制等有关.
关键词： 脊髓损伤 表没食子儿茶素没食子酸酯 神经营养因子 凋亡 大鼠 -
表没食子儿茶素没食子酸酯诱导人肝癌细胞HepG2凋亡与TGF-β1-Smad通路激活有关
目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人肝癌细胞HepG2细胞周期和凋亡的影响及其机制.方法 四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测EGCG对HepG2细胞增殖的影响,流式细胞术检测EGCG对HepG2细胞周期的影响以及细胞凋亡情况,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和萤光素酶报告基因系统检测验证HepG2细胞中TGF-β1-Smad通路的完整性,实时聚合酶链反应(realtime PCR)检测EGCG对HepG2细胞中Smad2、Smad3、Smad4和Smad7 mRNA表达的影响.结果 高浓度EGCG干预时,HepG2细胞的增殖能力随着EGCG浓度和作用时间的增加而下降,呈明显的时效和量效关系,作用72 h,HepG2细胞的IC50为111.76 μmol/L.随EGCG剂量增大,HepG2细胞中G0/G1期细胞的比例逐渐增高,80、120和160 μmol/L EGCG处理组分别为44.9%、54.8%和91.3%;相反,S期细胞比例逐渐降低,80、120和160 μmol/L EGCG处理组依次为38.5%、29.2%和3.0%.随着EGCG剂量增大,HepG2细胞的早期凋亡增加,80、120和160 μmol/L EGCG处理组的早期凋亡率分别为1.82%、4.22%和6.83%;晚期凋亡也随之增加,80、120和160 μmol/L EGCG处理组的晚期凋亡率分别为7.92%、24.19%和27.92%.HepG2细胞中TGF-β1-Smad通路是完整的.EGCG对HepG2细胞中Smad2、Smad3和Smad4 mRNA的表达无明显影响,但下调Smad7 mRNA的表达.结论 EGCG能诱导人肝癌细胞HepG2的凋亡,其机制可能涉及TGF-β1-Smad通路的激活.
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EGCG通过NGF/TrkA通路影响APP/PS1小鼠脑内Aβ沉积的研究
目的 探讨绿茶的有效多酚成分表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对淀粉样前体蛋白/早老素基因(APP/PS1)转基因小鼠脑内β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积及其对海马内神经生长因子(NGF)相关神经生长因子受体(TrkA)信号通路的影响.方法 采用免疫组化及Western blot法分别检测小鼠海马Aβ1-40、淀粉样前体蛋白(APP)的蛋白表达水平,Western blot检测小鼠海马NGF及神经生长因子前体(proNGF)的表达水平及其共同受体TrkA下游细胞外信号调节激酶(ERK)通路相关蛋白的表达水平.结果 免疫组化结果显示,模型组小鼠海马内Aβ1-40和APP表达(42.35±8.25、143.63±24.30)较对照组(13.04±4.36、19.89±4.93)均显著增加(均P＜0.05),治疗组(19.72±6.55、38.07±18.19)较模型组明显降低(均P＜0.05).Western blot结果显示,与对照组(均为100)比较,模型组小鼠海马内Aβ1-40、APP的相对表达量增加(分别为363.39±45.77、499.51±65.75,均P＜0.01),与模型组比较,治疗组Aβ1-40、APP相对表达量显著降低(分别为179.77±18.17、160.42±44.55,均P＜0.01).与对照组(均为100)比较,模型组NGF(16.39±4.03)、pro-NGF(25.92±5.37)、NGF/pro-NGF(63.64±10.68)、p-TrkA(7.92±2.13)、p c-raf(7.37±2.66)、p-ERK1/2(13.53±4.44)及p-CREB(3.95±1.56)的相对表达量降低(均P＜0.05);与模型组比较,治疗组NGF(80.78±12.18)、pro-NGF(48.63±3.83)、NGF/pro-NGF(165.84±19.02)、p-TrkA(72.33±6.21)、p-c-raf(88.12±5.33)、p-ERK1/2(60.21±10.34)及p-CREB(25.31±8.48)的相对表达量明显增加(均P＜0.05).治疗组与对照组上述指标比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 EGCG主要通过上调NGF/proNGF比例,增加NGF的相对表达,继而激活其下游特异性TrkA通路,显著增加TrkA、c-raf、ERK1/2及其下游效应蛋白CREB的磷酸化水平,从而抑制Aβ1-40和APP的表达,改善学习记忆障碍,发挥神经保护作用.
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表没食子儿茶素没食子酸酯对蛛网膜下腔出血后线粒体功能保护的机制研究
目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对蛛网膜下腔出血(SAH)后线粒体功能的保护作用及其机制.方法 利用PC12细胞,采用氧合血红蛋白(OxyHb)建立体外SAH模型,观察EGCG对SAH后线粒体的保护作用.噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;Furo-3 AM检测线粒体Ca2+浓度([Ca2+]m)变化;JC-1及DCFH-DA分别检测细胞内线粒体膜电位(Δψm)和活性氧(ROS)的变化;TUNEL法检测细胞凋亡.结果 与对照组相比,OxyHb诱导PC12细胞增殖,但却出现线粒体[Ca 2+]m超载、线粒体膜电位去极化、细胞内ROS含量增多等现象,终导致细胞凋亡.而EGCG治疗后细胞活力较SAH组相比显著降低且与EGCG浓度呈正相关,50μmol/L EGCG治疗组与SAH组差异具有统计学意义(P<0.01).50μmol/L EGCG显著抑制SAH后的[Ca2+]m超载,由SAH后的3.30±0.04降至3.05±0.03(P<0.01).此时线粒体膜电位和ROS荧光强度均降至正常水平,与SAH组比较差异具有统计学意义(P<0.01).伴随线粒体功能的恢复,EGCG治疗组凋亡细胞也明显减少.结论 SAH后EGCG可能通过降低[Ca2+]m超载和细胞内ROS水平、维持线粒体膜的稳定性,进而抑制神经细胞凋亡而发挥神经保护功能.
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绿茶在皮肤美容中的应用研究进展
绿茶中含有大量的天然活性物质,其中表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)具有多种重要的生理活性与药理作用,对防晒、抗氧化、抗衰老、防癌、抗癌、杀茵、消炎等均有特殊效果.绿茶的药效和美容功能受到了广泛地关注.文章对近十年来国内外对绿茶的药理作用的研究及其在美容方面的应用进展作一综述.
关键词： 绿茶提取物 表没食子儿茶素没食子酸酯 药理作用 皮肤美容
