三氧化二砷对小鼠小脑氧化还原相关酶基因表达谱的影响

目的 应用基因芯片技术观察三氧化二砷(As2O3)对小鼠小脑组织氧化还原相关酶基因表达谱的影响.方法 昆明种小鼠30只随机分为3组,即生理盐水对照组、低剂量组(1 mg/L As2O3染毒组)和高剂量组(4 mg/L As2O3)染毒组),连续染毒60 d,断头法处死小鼠,利用基因芯片技术检测基因表达谱的变化.结果 基因芯片筛选结果显示,与对照组比较,染砷组中差异表达2倍及以上的基因有18条,其中表达上调的基因有12条,表达下调的基因有6条.高剂量组与低剂量组及对照组比较,表达上调的基因有Ndufa4、Ndufa6、Gpx3、Adil、Rrm2b,表达下调的基因有Spr、Hsd17b11、Ogfod1、Ndufab1.与对照组比较,染砷组中Cyp51、Phgdh、Dhrs4、Prdx4、Aldh1a、1810063805Rik、Glrx表达上调,Prdx2、1110020P15 Rik表达下调.结论 As2O3对小鼠小脑的氧化还原相关酶基因表达谱具有明显的影响,提示这些小脑氧化还原相关酶基因很可能是砷的神经毒作用的靶点.

浅谈华法林的临床研究

1 作用机制华法林通过抑制肝脏还氧化还原酶,使无活性的氧化型(还氧化物型)维生素K(VK)无法还原为有活性的还原型(氢醌型)VK,阻止VK的循环应用,干扰VK依赖性凝血因子Ⅱ.Ⅶ.Ⅸ.Ⅹ的羧化,使这些凝血因子无法活化,而达到抗凝的目的.

GSTM1、GYP2E1和NQO1基因多态性与儿童白血病发病风险的初步研究

儿童白血病发病率近年呈上升趋势,其病因仍不清楚.研究表明毒物代谢酶谷胱甘肽硫转移酶(GSTM1)、细胞色素P4502E1(CYP2E1)和还原型辅酶Ⅰ醌类氧化还原酶(NQO1)的基因多态与多种肿瘤的发生有关,本研究针对GSTM1、CYP2E1和NQO1毒物代谢酶基因多态与儿童白血病发病风险进行了初步研究.

人参茎生长发育过程中4种氧化还原酶活力比较

目的:对人参茎生长发育过程中苹果酸脱氢酶(MDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH),α-磷酸甘油脱氢酶(α-GPD)4种氧化还原酶的活力进行比较.方法:分别于展叶期、开花期、结果期、果熟期、枯萎期采取人参茎样品.采用中性缓冲液提取粗酶液,应用分光光度法测有定MDH、LDH、G6PDH、α-GPD的活力.结果:在人参茎生长发育过程中MDH和LDH在各个时期都出现活力高峰,G6PDH和α-GPD活力在展叶期出现整个生长季的峰值.结论:人参茎中的MDH、LDH、G6PDH、α-GPD的活力可以为人参长势优劣评估指标.

不同生长年限西洋参不同部位的氧化还原酶活力比较研究

目的:以长白山区的3、4、5年生西洋参为研究对象,比较西洋参不同部位中4种氧化还原酶的活力.方法:采用pH=7.4的磷酸缓冲溶液从西洋参叶、主根、须根和芦头中提取出氧化还原酶的粗酶液.应用紫外分光光度法分别测定西洋参中过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、多酚氧化酶(PPO)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活力.结果:相同部位的5年生西洋参中氧化还原酶的活力明显高于3、4年生西洋参;4年生西洋参中氧化还原酶的活力略高于3年生西洋参,相同年限的不同部位的西洋参叶中氧化还原酶的活力大,芦头中酶的活力小.结论:不同生长年限的西洋参中氧化还原酶的活力差距显著,相同年限中氧化还原酶的活力大小顺序分别为西洋参叶、须根、主根、芦头.

艰难梭菌新型氧化还原酶Fnr的异源表达与纯化

目的 了解艰难梭菌新型氧化还原酶Fnr的性质和催化功能. 方法 通过PCR扩增艰难梭菌的fnr基因片段,利用限制性内切酶NheⅠ、XhoⅠ对PCR产物进行双酶切,酶切片段插入经相同酶切处理的pET28b(+)质粒中,构建pET28b(+)-fnr重组表达载体,测序验证正确后转化至E.coli C41 (DE3)感受态细胞中,用IPTG诱导表达目的蛋白,Ni-NTA柱亲和层析纯化后进行纯度及酶活性测定. 结果 成功构建了pET28b(+)-fnr重组表达载体,转化E.coli C41 (DE3)高效表达重组蛋白Fnr.柱层析纯化后进行SDS-PAGE分析,该蛋白由两个大小分别约为51×103和33×103的亚基组成,具有NAD+依赖的NADPH还原TTC的活性.其酶所展现的性质一致,表明它们具有相同的生化功能. 结论 成功表达和纯化了艰难梭菌Fnr重组蛋白,该蛋白具有与其他专性厌氧菌对应的氧化还原酶活性,为其生理功能奠定研究了基础.

小鼠造血各系细胞中氧化还原酶差异表达的研究

造血细胞来源于造血干细胞(HSC),而HSC分化呈明显等级关系.细胞中活性氧簇(ROS)对HSC维持至关重要,细胞内过多ROS会造成HSC衰老.细胞主要通过氧化还原酶以及抗氧化物调节胞内ROS水平达到稳态,从而避免过多的ROS对细胞损伤.细胞内的氧化还原酶有多种,包括过氧化氢酶(catalase)、锰-超氧化物歧化酶(MnSOD)、谷胱苷肽过氧化物酶(GPX1)、NQO1[ NAD(P)H dehydrogenenasequinone 1]和硫氧还蛋白还原酶(TXNRD1),其在呈等级分化的各类血细胞中的活性及其在这些细胞中参与ROS水平的调节作用还不清楚.本研究应用流式细胞分选技术,分选出小鼠造血各系细胞,用半定量实时PCR法检测氧化还原酶基因(Catalase、MnSOD、GPX1、Txrnd1和Nqo1)在造血各系细胞中的表达,进而筛选出参与HSC中ROS调控的重要的氧化还原酶.结果表明,以长期HSC( LT-HSC)作为参照,T细胞中catalase基因表达是LT-HSC的0.14倍,显著减低(P＜0.05).CLP和髓系细胞中MnSOD基因的表达分别是LT-HSC的0.56和0.47倍,显著减低(P＜0.05).ST-HSC、GMP和髓系细胞中GPX1基因表达分别为LT-HSC的1.79、2.96和2.07倍,显著增加(P＜0.05)；MEP、T淋巴细胞和B淋巴细胞中GPX1基因表达分别为LT-HSC的0.58、0.10和0.6倍,显著减低(P＜0.05).ST-HSC、MPP、CMP、GMP和髓系细胞中Txrnd1的表达分别为LT-HSC的3.36、3.18、4.19、6.39和4.27,显著增加(P＜0.05)；T淋巴细胞和B淋巴细胞中Txrnd1的表达分别为LT-HSC的0.016和0.56倍,显著减低(P＜0.05).ST-HSC、MPP、CMP、GMP、CLP和B淋巴细胞中Nqo1的表达为LT-HSC的0.30、0.17、0.25、0.10、0.04和0.01倍,显著减低(P＜0.05).结论:氧化还原酶在造血各系细胞的表达差异较大,提示在不同细胞中发挥主要作用的氧化还原酶种类不同.更为重要的是,Nqo1在LT-HSC中表达明显高于其他各系,提示其可能通过调控Nqo1的表达调节HSC功能.

WWOX表达调控、功能及作用机制的研究进展

1996年，M.Aldaz 实验室在研究乳腺原位癌时发现近70%的原位癌于16q23.2～16q24.1区域发生杂合性缺失[1]。2000年Bednarek等首次成功克隆出此区域的基因，并将其命名为WWOX （WW domain-containing oxidoreductase，含WW结构域的氧化还原酶），又名FOR（fragile site FRA16D oxidoreductase，脆性位点FRA16D 氧化还原酶）[2]。该基因跨越1.11 Mb，包含9个外显子及8个内含子。由于剪切形式的不同可形成7种不同的异构体，常见的异构体形式是全长WWOX，其大小约1.2 kb，编码414个氨基酸形成的蛋白质，蛋白分子量为46.6 kD。

老年糖尿病患者自由基与微血管并发症关系的探讨

目的探讨老年糖尿病患者自由基和抗氧化能力的变化及其与微血管并发症的关系. 方法测定65例老年糖尿病患者和65例健康老年对照者血浆或红细胞中脂质过氧化物(LPO)、超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、维生素C(VC)、维生素E(VE)、β-胡萝卜素(β-CAR)、谷胱甘肽(GSH),同时测定患者的空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹和餐后2 h C肽、血脂、尿微量白蛋白排泄率、肌电图. 结果老年糖尿病患者LPO(42.97±6.99)nmol/g高于健康老年组(31.59±7.44)nmol/g,SOD(1 712.44±157.04)U/L、CAT(217.01±29.36)μg/g、GSH-PX(21.01±3.38)×10-10U/RBC、VC(40.98±10.51)μmol/L、VE(16.44±2.45)μmol/L、β-CAR(1.19±0.23)μmol/L、GSH(0.98±0.16)nmol/L低于健康老年组[分别为(1 928.38±143.44)U/L、(264.40±63.55)μg/g、(25.16±6.41)×10-10U/RBC、(52.23±10.51)μmol/L、(23.04±5.38)μmol/L、(1.63±0.40)μmol/L、(1.25±0.20)nmol/L],合并糖尿病微血管并发症者变化更加明显,LPO和年龄呈正相关(r=0.310,P＜0.05),SOD、CAT、GSH-PX、VC、β-CAR和年龄(r=0.310～0.315,均为P＜0.001)及HbA1c(r=0.265～0.498,均为P＜0.05)呈负相关. 结论老年糖尿病患者存在LPO的增加和抗氧化能力的减弱,这种改变可能与老年糖尿病微血管并发症的发生与发展有关.

糖尿病患者应用葵花油预防皮肤感染的效果与机制研究

目的：研究糖尿病患者应用葵花油预防皮肤感染的效果及相关机制，为临床治疗提供参考。方法对医院2011年4月－2014年4月诊治的120例糖尿病患者进行分析，随机分为两组：对照组、葵花油组，每组各60例，对照组患者不使用任何油剂，葵花油组患者皮肤表面涂抹葵花油，评估两组患者皮肤状态、病原菌分布以及血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）、还原性谷胱甘肽（GSHpx）水平变化，针对患者皮肤干燥程度进行评分，采用世界卫生组织细菌耐药性监测网提供的WHONE5．5软件和SPSS20．0软件对数据进行统计分析。结果糖尿病患者应用葵花油第14天后皮肤评分明显降低，且应用葵花油第56天与第28天的效果明显好于第14天，而对照组患者皮肤评分无明显变化；糖尿病患者应用葵花油后病原菌的分布无明显变化，但是病原菌总数明显降低；糖尿病患者皮肤应用葵花油后血清中脂质过氧化物MDA水平明显降低，而SOD、CAT和GSHpx水平明显升高，与对照组患者比较，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论葵花油能有效改善糖尿病患者皮肤状态，抑制皮肤表面病原菌数量，其通过改善患者血清内氧化还原酶类发挥作用。

运动性组织损伤的线粒体机制

细胞能量代谢的重要过程三羧酸循环和氧化磷酸化均在线粒体中进行,因此线粒体常被比作细胞的动力工厂.但在提供能量的同时线粒体亦会生成活性氧(ROS)等副产品,特别是伴随着运动应激,线粒体处于高NADH、高氧状态,其电子传递链上的氧化还原酶也处于高还原状态,引起ROS生成大幅增加,ATP生成减少,线粒体内钙离子超载,膜电位降低,线粒体膜的通透性、液态性发生改变,细胞终以凋亡的形式死亡,导致组织损伤.现已证明运动诱发的细胞凋亡性组织损伤广泛地存在于骨骼肌、心肌、肝脏、肾脏等器官中,由于这些器官大都是由终末分化细胞构成的,故一定程度的细胞凋亡可能会使组织器官遭受严重的损伤并导致永久性的功能障碍.如何避免或减轻运动性组织损伤已成为运动医学领域的一项重要研究内容,本文即就此方面内容做一综述.

超氧化物歧化酶与缺血性脑疾患

1 超氧化物歧化酶的分类与功能1938年,一种蓝色含铜的蛋白质首次从牛的红细胞中被分离,1967年, Maccord和F ridovich将其命名为超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD).SOD是一类含不同金属离子的氧化还原酶,广泛存在于生物界.

GRIM-19与STAT3蛋白作用及相关机制研究进展

线粒体在细胞生理当中起非常重要的作用,为主要供能器官,其在能量生成、应激、ROS生成方面起到了非常重要的作用,同时也在细胞凋亡方面扮演了重要角色.其中,线粒体NADH complex Ⅰ是电子传递链第1步,随着NADH氧化成NAD+,伴随着质子穿越线粒体内膜,氧化还原辅助因子激活.研究显示,NADH:泛酮氧化还原酶(complex Ⅰ)共有45个亚单位,7个由线粒体DNA编码,其余由核编码基因编码,从胞质输送到线粒体.原核生物线粒体com-plex Ⅰ系统由13～14个亚基组成,这些亚基在真核生物中得到了保留,并且进化出氧化还原辅助因子[1].线粒体complex Ⅰ呈L型,其有2个臂,一个位于脂双层,另一个因含有更多亲水集团,突出于胞膜,且可以和胞膜分离,产生亚单位.其中GRIM-19是complex Ⅰ亚单位中的一员,是已知的氧化还原辅助因子[4].GRIM-19在细胞生长、凋亡以及维系线粒体复合物Ⅰ功能方面起到了非常重要的作用,并在近期得到了广泛研究.

华法林的临床应用

1 作用机制华法林的化学结构为3-(α-苯基丙酮)-4-羟基香豆素.华法林(coumadin)通过抑制肝脏环氧化还原酶,使无活性的氧化型(环氧化物型)维生素K(VK)无法还原为有活性的还原型(氢醌型)VK,阻止VK的循环应用,干扰VK依赖性凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ的羧化,使这些凝血因子无法活化,仅停留在前体阶段(有抗原,无活性),而达到抗凝的目的.

不同生长时期人参叶中多酚氧化酶等几种氧化还原酶活力变化研究

目的:研究人参生长季的不同时期叶中几种氧化还原酶的活性变化.方法:以五年生人参叶为供试材料,采用中性磷酸缓冲溶液提取粗酶液.应用紫外分光光度法分别测定过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、多酚氧化酶(PPO)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活力.结果:在人参生长季,叶中POD、CAT和APX活力变化相似,分别在展叶期、结果期和果后参根生长期出现活力高峰.PPO仅在展叶期和结果期出现活力峰值,且活力整体呈下降趋势.结论:人参叶中4种氧化还原酶的活力变化和叶片的生长、果实的形成及根的生长密切相关.

人参生长季根中几种氧化还原酶的活力变化研究

目的:研究人参根在生长季的不同时期几种氧化还原酶的活力变化.方法:以五年生人参根为供试材料,采用中性磷酸缓冲溶液提取粗酶液.应用紫外分光光度法分别测定过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、多酚氧化酶(PPO)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活力.结果:POD和PPO活力在果后参根生长期之前维持在较低水平,随后快速上升,并于果后参根生长期达到整个生长季的高值.CAT和APX分别在展叶期和果后参根生长期出现活力高峰.结论:人参根在展叶期和果后参根生长期活性氧代谢水平高.

乙醇脱氢酶在各类肝损伤中的变化

乙醇脱氢酶(Alcohol delydrogenase,简称ADH)的系统名为:乙醇:辅酶Ⅰ氧化还原酶(alcohol:NAD+oxidoreductase).ADH催化乙醇氧化生成的乙醛,可在体内进一步氧化成乙酸,并氧化成乙酰辅酶A,或经三羧酸循环彻底氧化供能,或作为某些物质(如脂酸,胆固醇等)的合成原料.体内ADH的分布有较高的器官特异性,除肝脏含量丰富外,其他组织如视网膜、胃、小肠黏膜及肾的ADH含量甚微,多数器官如心、胰、骨骼肌及红细胞等均不含此酶[1].肝内ADH主要位于细胞液(占80%-90%),少量位于微粒体(3%-12%)和线立体(4%-6%).这些活性的95%分布于肝小叶中心区.本人对我院住院的各类肝损害患者的血清ALT AST GGT ALP ADH进行检测,以探讨血清ADH与ALT AST GGT ALP活性的相关性及ADH各类肝实质损伤之间的关系.

乙醇脱氢酶在各类肝损伤中的变化

乙醇脱氢酶(Alcohol delydrogenase,简称ADH)的系统名为:乙醇:辅酶Ⅰ氧化还原酶(alcohol:NAD+oxidoreductase).ADH催化乙醇氧化生成的乙醛,可在体内进一步氧化成乙酸,并氧化成乙酰辅酶A,或经三羧酸循环彻底氧化供能,或作为某些物质(如脂酸,胆固醇等)的合成原料.体内ADH的分布有较高的器官特异性,除肝脏含量丰富外,其他组织如视网膜、胃、小肠黏膜及肾的ADH含量甚微,多数器官如心、胰、骨骼肌及红细胞等均不含此酶[1].

不同年生人参中8种酶活力的比较研究

目的 比较不同年生人参中4种氧化还原酶和4种水解酶的活力.方法 以4、5、6、7年生人参为供试材料,采用中性磷酸缓冲溶液提取粗酶液.应用紫外分光光度法分别测定过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、多酚氧化酶(PPO)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、淀粉酶(AMY)、酯酶(EST)、酸性磷酸酯酶(ACP)和碱性磷酸酯酶(ALP)的活力.结果 4年生人参中8种酶活力均小于5、6、7年生人参.POD、CAT和APX以5年生人参活力高；ALP、EST以6年生人参活力高；PPO、AMY、ACP以7年生人参活力高.结论 这8种酶的活力可作为不同年生人参的鉴定和评价依据.

106 病毒介导的锤头状R酶抑制贾第鞭毛虫丙酮酸-铁氧化还原蛋白氧化还原酶基因表达