现代免疫学杂志
Current Immunology 현대면역학
- 主管单位： 上海市教育委员会
- 主办单位： 上海市免疫学研究所,上海市免疫学会
- 影响因子： 0.40
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1001-2478
- 国内刊号： 31-1899/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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p38 MAPK的活化促进小鼠T细胞增殖
研究p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)在小鼠T细胞增殖中的作用.以活体染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯染色,通过流式细胞术分析p38 MAPK的特异性抑制剂SB203580和p38 MAPK的激活剂茴香霉素在不同剂量下对ConA刺激的T细胞增殖作用,并测定其增殖的相关指数;采用碘化丙锭染色分析SB203580和茴香霉素对ConA或佛波醇酯(PDB)加离子霉素(Ion)刺激的小鼠T细胞周期变化的影响.结果显示:0.5 μmol/L～15.0 μmol/L SB203580对ConA诱导的T细胞增殖有明显的抑制作用,呈剂量依赖关系(r =-0.97,P＜0.01);该浓度范围的SB203580能够呈明显剂量依赖性地阻止ConA或PDB加Ion诱导的T细胞进入S期或G2/M期(rS =-0.98, P＜0.01;rG2/M =-0.97, P＜0.01).茴香霉素浓度在0.01～0.5 ng/ml时能够增强ConA对T细胞的促增殖作用,并能够促进ConA诱导的T细胞进入G2/M期,促进PDB加Ion诱导的T细胞进入S期.以上提示p38信号通路的活化在促进小鼠T细胞增殖中可能起着重要作用.
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EGCG与Andro对胶原诱导的关节炎的联合治疗作用
采用Ⅱ型胶原诱导小鼠关节炎(collagen induced arthritis, CIA)模型,观察(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯 [(-)-epigallocatechin-3-gallate, EGCG]与穿心莲内酯(andrographolide,Andro)联合治疗作用并初步探讨其作用机制.研究发现EGCG和Andro联合用药能显著减轻疾病严重程度.体内、体外实验证实联合用药在基因水平及蛋白水平上协同抑制炎性细胞因子IFN-γ、TNF-α的产生;另外,EGCG和Andro联合用药也可明显降低血清中抗Ⅱ型胶原抗体含量.结果表明,EGCG和Andro联合治疗CIA具有明显的疗效,为研发治疗RA的药物提供一条思路.
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相关基因多态性片段的研究
研究中国人RHD基因相关结构区的特征.采用PCR-SSP技术对随机非血缘关系RhD阳性样本100例,RhD阴性样本228例和Del样本42例的RHD基因的Rhesus盒、启动子区、第4内含子、Ψ假基因、第9外显子1227G＞A突变点研究.结果:存在RHD基因序列的样本(RHD+/RHD+,RHD+/RHD-)可测出启动子区3个多态性位点,有第4外显子者均有第4内含子,所有样本都检查不到RHDΨ,34/42例Del样本可检测到1227G＞A突变点.中国人RHD基因相关结构区有丰富的遗传背景,其生物学意义和遗传学意义有待进一步探讨.
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CⅡTA锤头状核酶的克隆及其体外活性
通过CⅡTA核酶抑制HeLa细胞表面MHC Ⅱ类分子的表达.设计并合成针对人类CⅡTA的核酶Rz464,通过体外转录和切割实验鉴定其活性.将Rz464亚克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP(pRz464),并稳定转染HeLa细胞株,流式细胞术检测MHC Ⅱ类抗原表达,RT-PCR检测CⅡTA mRNA水平.结果表明,Rz464与CⅡTA靶序列体外切割产物电泳见预期切割条带.pRz464+HeLa细胞与对照组比较,HLA-DR、DP、DQ抗原诱导型表达分别降低了79.21%、90.31%及48.30%;同时CⅡTA的诱导型mRNA含量明显减少.Rz464通过切割CⅡTA mRNA,进而阻止了后者调控的MHC Ⅱ类分子的表达.
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幽门螺杆菌尿素酶B亚单位Th表位的免疫学特性研究
采用MHC限制性分析、ELISA方法、淋巴细胞增殖实验等方法研究幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B亚单位(UreB)的H-2d限制性Th表位U546-561、U229-244、U237-251的免疫学特性.发现抗I-Ed抗体能够抑制U546-561对CD4+ T淋巴细胞的刺激,抗I-Ad抗体能够抑制U229-244、U237-251对CD4+T淋巴细胞的刺激作用.U546-561、U229-244能刺激CD4+ T淋巴细胞分泌IL-4和IL-10,U237-251刺激CD4+T淋巴细胞分泌IFN-γ、IL-2,且U546-561、U229-244、U237-251三个表位肽免疫BALB/c小鼠能够引起针对各自免疫多肽和rUreB的CD4+T细胞应答.结果表明U546-561为I-Ed限制性Th2表位,U229-244为I-Ad限制性Th2表位、U237-251为I-Ad限制性Th1表位.三个表位之间具有协同刺激效应,可以用于Hp表位疫苗的研究.
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四聚体技术检测人外周血巨细胞病毒抗原特异性CTL
为深入了解抗病毒免疫机制,探索人在健康状态及巨细胞病毒(CMV)急性感染时抗原特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)数量的动态变化.以CMV抗原肽、HLA-A*0201重链和轻链制备CMV四聚体;分离并检测12名健康被检者外周血单个核细胞(PBMC)中CMV抗原特异CTL数量;PBMC体外培养建立CTL细胞系,于末次刺激的不同时相进行四聚体染色,流式细胞仪(FACS)检测抗原特异CTL数量.结果发现9名被检者PBMC中均检出抗原特异CTL;细胞系中CMV特异性CTL数量急剧增多,细胞系与PBMC相比,差异有显著的统计学意义(P＜0.001);研究结果提示,9名被检者感染过CMV,血液中存在少量免疫记忆性T细胞,当再次遭遇同一抗原后发生克隆扩增.
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MBL突变体在CHO细胞中表达及其产物分析
采用PCR技术,从质粒pMBLm54中获得含GGC54GAC点突变的甘露聚糖结合凝集素(MBL)基因,将其插入真核表达载体构建重组表达载体pcDNA4/HisMax C-MBLm54,DNA测序验证序列正确后将其电转染入CHO细胞.以Zeocin筛选并维持培养转染后CHO细胞,获得2株稳定高效表达目的蛋白的单克隆细胞株.采用Ni2+-NTA agarose层析柱纯化表达产物,获得54Asp突变MBL蛋白.SDS-PAGE和Western blot分析表明,54Asp突变MBL蛋白主要为相对分子质量为 60 000的成分,而重组野生型MBL蛋白则主要是相对分子质量为 200 000和＞200 000的分子.配体结合试验发现,天然MBL和重组野生型MBL能与甘露聚糖结合,而54Asp则否.结果表明,54Asp突变MBL蛋白不能形成正常的MBL结构单位和寡聚体,并进而影响其配体结合活性.
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一株抗双链DNA单克隆抗体的制备及其特性研究
制备抗双链DNA(dsDNA)单克隆抗体并对其生物学特性进行初步研究.以活化淋巴细胞的DNA为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体;用体内诱生法制备腹水,以间接酶链反应吸附试验(ELISA)法分析抗体的亚类、特异性和亲和力;用免疫荧光法检测抗体的荧光核型;用考马斯亮蓝法检测注入杂交瘤细胞的小鼠的尿蛋白含量.结果显示,成功获得了1株持续稳定分泌抗dsDNA单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为6C2;该细胞株所分泌的抗体亚类为小鼠IgG2a,能特异性结合dsDNA,亲和力常数为2.67×108 mol/L,免疫荧光核型为均质型;将6C2细胞注入正常BALB/c小鼠腹腔后,小鼠的尿蛋白含量较对照组明显增高.结果表明,抗dsDNA单克隆抗体6C2是致病性抗体,对于进一步研究抗dsDNA抗体的致病机制具有重要的价值.
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基于基因免疫制备抗人绒毛膜促性腺激素β亚基单克隆抗体及其特性研究
用真核表达人绒毛膜促性腺激素β亚基((human chorionic gonadotrophin β, hCGβ)的重组质TR421-hCGβ免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,ELISA法筛选阳性细胞株,经过多次的克隆化培养,终获得10株持续、稳定分泌抗hCGβ单克隆抗体的杂交瘤细胞株.随机抽取6H1杂交瘤细胞进行抗体的制备、纯化及免疫学特性的分析.间接ELISA法证明6H1单抗属于IgG2a亚类.Western blot 证明6H1单克隆抗体可以特异性结合hCGβ,间接免疫荧光和流式细胞仪等结果表明,6H1单克隆抗体能够不同程度的结合不同来源的肿瘤细胞膜上表达的hCGβ分子,为进一步研究其生物学功能奠定了物质基础.
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云南昆明白族、汉族、彝族儿童HLA-DQA1等位基因多态性分析
为了解昆明白族、汉族、彝族儿童HLA-DQA1等位基因多态性.采用PCR-SSP技术对昆明地区无血缘关系的3个民族儿童的HLA-DQA1等位基因进行分析.结果显示3个民族儿童HLA-DQA1基因位点上共检出14种等位基因.其中昆明白族儿童HLA-DQA1常见的等位基因为*0601(16.67%),高频等位基因为*0103、*0102、*0303;昆明汉族儿童HLA-DQA1常见的等位基因为*0302(26.67%),高频等位基因为*0103、*0601;昆明彝族儿童HLA-DQA1常见的等位基因为*0601(38.57%),除*0601外没有高频等位基因,余基因频率均小余10%,同时在基因排序上3个民族也存在着差异.结果提示,昆明地区3个民族儿童HLA-DQA1基因分布既有共同特点,又有其独特性.
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抗人4-1BB功能性单克隆抗体的研制及生物学特性研究
研制鼠抗人4-1BB功能性单克隆抗体及其在T细胞活化、增殖及信号转导中的作用.以小鼠肾肿瘤细胞转染人4-1BB基因的细胞株4-1BB/293T为免疫原,采用B淋巴细胞杂交瘤技术,获取分泌特异性4-1BB 单抗的杂交瘤细胞株.以体内诱生法产生腹水,Protein G亲和层析法进行纯化,快速定性试纸法鉴定单抗的亚类,MTT法检测单抗对T细胞的刺激作用,流式法检测单抗对T细胞凋亡的影响.结果显示:成功获得1株持续分泌特异性抗人4-1BB 单抗的细胞株(命名为5D5),属于IgG2b.该单抗能特异识别人4-1BB分子,介导有效的共刺激信号,体外促进T细胞的增殖,抑制活化诱导的T细胞凋亡.总之,成功获得1株功能性4-1BB单抗,具有重要的研究和潜在应用价值.
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阻断CD86对自然流产模型孕鼠TGF-β1、MMP-9/TIMP-3和PAI-1的表达及妊娠的影响
探讨阻断CD86协同刺激分子对自然流产模型孕鼠TGF-β1、MMP-9、TIMP-3和 PAI-1的表达及妊娠结局的影响.实验组于妊娠第4.5天腹腔注射大鼠抗小鼠CD86单抗,实验对照组注射大鼠同型IgG2b,而正常妊娠组不作任何处理.于妊娠第13.5天计算胚胎吸收率;用免疫组化测定胎盘蜕膜组织中TGF-β1、MMP-9、TIMP-3和 PAI-1的表达,并进行图像分析检测免疫组化染色灰度值(D).结果:(1)实验组的胚胎吸收率显著低于实验对照组 (x2=7.441,P＜0.05)(2)实验组母胎界面中TGF-β1和 PAI-1的灰度值均显著低于实验对照组(P＜0.05);实验组母胎界面中MMP-9的灰度值明显高于实验对照组(P＜0.05);实验组母胎界面中TIMP-3的灰度值与实验对照组和正常妊娠组比较均无显著差异(P＞0.05).妊娠早期阻断CD86协同刺激分子可使TGF-β1、MMP-9、TIMP-3和 PAI-1分别通过各自不同的途径来发挥免疫耐受作用并且使自然流产模型孕鼠的胚胎吸收率降低至正常妊娠水平.
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CD8+CD28-NRP-1+ T细胞在肾移植手术后患者外周血中的比例变化及意义
用流式细胞仪分别检测不同功能状态下肾移植术后患者体内的CD8+CD28-NRP-1+ Ts细胞和CD8+CD28- Foxp3+ Ts细胞,通过比较两类细胞的阳性表达率初步探讨它们之间的表达关系和意义.选取正常健康人10例,移植肾功能稳定的长期存活者24例,慢性移植物肾病者20例,急性排斥者15例,取受试者外周静脉血,分离单个核细胞,利用流式细胞仪检测CD8+CD28-NRP-1+ Ts细胞和CD8+CD28- Foxp3+ Ts细胞在CD8+CD28-T细胞群中的比例.结果表明组间比较得出,CD8+CD28-NRP-1+ Ts细胞和CD8+CD28-Foxp3+ Ts细胞比例在四组之间均有统计学差异(P＜0.05).其中在长期存活组表达量高,其CD8+CD28-NRP-1+ Ts细胞和CD8+CD28- Foxp3+ Ts的比例分别为16.15%±1.49%和11.90%±2.73%,其次为正常健康人(13.83%±2.38%、9.44%±2.03%),然后为慢性移植物肾病组(8.03%±2.67%、5.26%±0.65%),而急排组低(3.34%±1.73%、2.36%±1.14%),并且四组间这两种细胞呈同一变化趋势且前者的变化幅度大于后者.组内比较显示,CD8+CD28-NRP-1+ Ts细胞比例均高于CD8+CD28- Foxp3+ Ts细胞(P＜0.05).CD8+CD28-NRP-1+ Ts细胞可以从整体水平上反映肾移植术后患者的免疫状态,它比CD8+CD28- Foxp3+ Ts细胞更能全面的反映术后患者的预后情况.
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SLE患者抗载脂蛋白A-I抗体的检测及其对细胞内胆固醇外流的影响
研究系统性红斑狼疮(SLE)患者血中抗载脂蛋白A-I(Apo A-I)抗体的阳性率及其可能的致动脉粥样硬化的机制.采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测175例SLE患者抗Apo A-I抗体,以64例正常人为对照;用抑制试验研究Apo A-I aa74-105肽段能否抑制抗ApoA-I多抗和单抗IS4与Apo A-I的结合;并观察抗Apo A-I多抗和单抗对细胞内胆固醇流出的影响.结果显示,在SLE患者中存在抗Apo A-I抗体,阳性率为16.6%;肽段aa74-105能够抑制抗Apo A-I抗体与Apo A-I的结合;抗Apo A-I抗体在体外能抑制细胞内胆固醇的流出.实验表明,SLE患者的抗Apo A-I抗体可能通过和Apo A-I功能区中的部分氨基酸结合,影响Apo A-I的功能而抑制细胞胆固醇流出,促进SLE患者动脉粥样硬化的发生.
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抗DR5单抗增强顺铂诱导HeLa细胞凋亡作用的研究
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand, TRAIL )主要通过死亡受体5(death receptor, DR5)诱导肿瘤细胞凋亡.本文旨在探讨顺铂对HeLa细胞表面DR5分子表达影响及抗DR5单抗mDRA-6对顺铂诱导HeLa细胞凋亡增强作用.用间接免疫荧光染色结合流式细胞术分析DR5分子表达;MTT法检测HeLa细胞毒作用;用AnnexinV/PI双染试剂盒检测细胞凋亡率;荧光显微镜观察凋亡细胞的形态学改变.结果:正常HeLa细胞表面DR5表达量为30.01%,顺铂不能上调HeLa细胞表面DR5表达;mDRA-6可以明显提高顺铂对HeLa细胞的细胞毒作用,且存在剂量效应关系,IC50值约为12.5 μg/ml.研究结果表明,mDRA-6能够明显增强顺铂对HeLa细胞的细胞毒及细胞凋亡作用.
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乌梢蛇Ⅱ型胶原提取及其诱导大鼠关节炎特性的研究
提取和纯化乌梢蛇Ⅱ型胶原,观察乌梢蛇Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎的特性,为研究乌梢蛇治疗类风湿关节炎的机制提供研究方向.离心提取乌梢蛇Ⅱ型胶原,经DEAE-52纤维素交换柱纯化,斑点免疫渗滤试验和免疫印迹试验进行成分鉴定.乌梢蛇Ⅱ型胶原不完全佐剂免疫大鼠,观察大鼠关节炎发生情况、抗Ⅱ型胶原抗体、CD 4/CD8亚群、血清中TNF-α、IL-10、IL-1β、IL-4 的变化.乌梢蛇Ⅱ型胶原提纯品在SDS-PAGE凝胶电泳上呈一条区带,斑点免疫渗滤试验和免疫印迹试验为阳性反应.诱导大鼠关节炎发生率为86.67%,关节炎大鼠血清中抗Ⅱ型胶原抗体明显增高(P＜0.01),CD4 T细胞亚群和CD4+ /CD8+增高(P＜0.05),TNF-α含量增加(P＜0.01),IL-10含量降低(P＜0.01),血清中IL-1β和IL-4含量无变化.结果显示,乌梢蛇Ⅱ型胶原能通过免疫方法可以诱导大鼠产生多关节炎,并且体内有自身免疫反应的表现.
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抗菌肽的内源性表达调控研究进展
Toll样受体(toll-like-receptor,TLR)是联系固有免疫与适应性免疫的重要桥梁,TLR的激活可以直接引发抗菌肽的分泌并提高杀菌活性.近年来研究证实1,25-(OH)2- D3作为重要的免疫调节剂,与TLR通路介导的固有免疫反应存在着重要的内在联系.本文综述了目前这方面的研究进展.
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CD4+CD25+调节性T细胞参与肿瘤免疫逃逸的研究进展
CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)是机体行使负性免疫调节的重要载体,在生理病理的诸多方面都有重要意义.本文旨就其与肿瘤的关联、介导逃逸的机制、细胞来源以及可能的临床运用作一综述.
关键词： CD4+CD25+调节性T细胞 肿瘤免疫
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| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
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| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
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| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
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