现代免疫学杂志
Current Immunology 현대면역학
- 主管单位： 上海市教育委员会
- 主办单位： 上海市免疫学研究所,上海市免疫学会
- 影响因子： 0.40
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1001-2478
- 国内刊号： 31-1899/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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重组信号调节蛋白α(SIRPα)胞外段及其高亲和力突变体的表达、纯化与活性鉴定
制备野生型信号调节蛋白α(SIRPα)胞外段和高亲和力突变体,并进行纯化条件优化与结合活性鉴定.通过全基因合成获得SIRPα-wt和高亲和力突变体SIRPα-cv1的全基因;利用分子克隆技术将其连入表达载体,终通过大肠杆菌BL21(DE3)工程菌株表达TrX-SIRPαwt和Trx-SIRPα-cv1两种融合蛋白.通过肠激酶酶切去除融合标签以及多次层析纯化后,利用质谱技术分析目的蛋白所在组分.经SDS PAGE电泳显示,终获得了纯度高于90％的SIRPα-wt和SIRPmcv1,与CD47结合活性结果表明两种蛋白都能与CD47 Fc融合蛋白结合.据此,本研究成功表达并纯化得到了具有配体结合活性的SIRPα-wt和其高亲和力突变体SIRPα-cv1两种重组蛋白.
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人肌酸激酶同工酶MB(质量法)化学发光免疫分析定量检测方法的建立及性能评价
利用化学发光免疫分析技术,建立一种人肌酸激酶同工酶MB(CK MB)定量检测方法.采用基于化学发光免疫分析的双抗体夹心法(以纳米磁微粒为固相载体包被抗人CK-MB抗体,以另一抗体交联碱性磷酸酶为标记物)研制CK-MB化学发光免疫定量检测试剂盒.并进行一系列性能评估及临床相关性试验.该检测方法的线性范围为(0.1～300) ng/ml;空白限为0.1 ng/ml;批内精密度和批间精密度均小于5％;准确度:添加回收率在(100±5)％以内;在正常人血清中添加100 ng/ml的CK BB及10000 ng/ml的CK-MM,对测定结果没有产生影响;当样本中存在高浓度的甘油三酯、血红蛋白、胆红素以及RF和HAMA时测试偏差在±15％范围以内;试剂在37℃放置72h后,稳定性良好,各性能指标均达到要求;相关性试验结果r＞0.98,一致性结果良好.参考值范围为:(0.42～ 6.34)ng/ml.本研究建立的CK-MB化学发光免疫分析定量检测方法的各项性能指标均达到了临床检测要求,可用于临床血清CK-MB检测.
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PD-1/PD-L1在系统性红斑狼疮患者外周血表达水平及其临床意义
本研究旨在检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD4+T细胞表面PD-1和B细胞表面PD-L1分子的表达并探索其临床意义.采用流式细胞术检测SLE患者及健康对照外周血CD4+T细胞上PD-1分子及B细胞上PD-L1分子的表达,并分析其与SLE临床指标的相关性.结果显示,SLE患者外周CD4+T细胞表面PD-1分子及B细胞上PD-L1分子的表达均明显高于健康对照组(均P＜0.05),且SLE患者CD4+T细胞上PD-1分子的表达水平与血清Anti-dsDNA的含量及SLEDAI评分呈正相关(均P＜0.05),B细胞上PD-L1分子的表达水平与血清dsDNA水平呈正相关(P＜0.05).上述结果表明,SLE患者外周血CD4+T细胞上PD-1分子及B细胞上PD-L1分子均发生上调,并与SLE病程和自身抗体水平呈现正相关,提示分别表达于T细胞和B细胞表面的PD-1/PD-L1分子,通过相互作用参与SLE的致病和发展过程.
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MDC对不可分型流感嗜血杆菌P6重组蛋白免疫原性的影响
观察巨噬细胞源趋化因子(macrophage-derived chemokine,MDC)联合不可分型流感嗜血杆菌重组P6蛋白免疫小鼠的免疫效果,探讨MDC的佐剂效应.将50只BALB/c小鼠随机分为5组:P6重组蛋白+MDC,P6重组蛋白,MDC组,P6重组蛋白+IL-2组及PBS对照组,分别于第0d、14d、28 d经腹腔免疫3次,末次免疫后14 d,取小鼠血、脾标本,ELISA法检测血清中抗体IgG水平,并分析其脾淋巴细胞IL-10和IFN-γ的产生水平.CCK-8法检测各组脾淋巴细胞增殖活性.结果是小鼠血清IgG水平,P6重组蛋白联合MDC组高于PBS对照组、MDC组、P6重组蛋白+IL-2组及P6重组蛋白组(P＜0.05).P6重组蛋白联合MDC组小鼠特异性脾淋巴细胞刺激指数及其所产生的IL-10、IFN-γ水平均高于PBS对照组、MDC组及P6重组蛋白组(P＜0.05).因此MDC联合P6重组蛋白诱导小鼠的免疫应答优于P6重组蛋白单独免疫,MDC可以作为不可分型流感嗜血杆菌P6重组蛋白的佐剂.
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鼠抗人B7-H4单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定
研制鼠抗人B7-H4单克隆抗体,并对其生物学特性进行初步研究.采用稳定高表达B7-H4分子的基因转染细胞株293T/B7-H4为免疫原免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术融合、流式细胞术筛选和克隆化培养后,终获得一株鼠抗人B7-H4单克隆抗体(mAb),建立了稳定的杂交瘤细胞株;采用快速试纸条定性法鉴定其抗体亚型,通过western blot和细胞免疫组化鉴定其识别特异性,并与商品化抗人B7 H4抗体(美国BioLegend,克隆号MIH43)进行位点竞争;T细胞体外增殖抑制实验初步鉴定其生物学特性.成功获得的杂交瘤细胞株命名为2B7;快速试纸条鉴定其Ig亚型为IgG1,K链;western blot和细胞免疫组化结果显示,2B7能特异性识别B7-H4分子;位点竞争实验表明,2B7与商品化抗体MIH43识别不同的抗原表位.生物学功能实验结果显示,2B7能阻断B7-H4对T细胞体外增殖的抑制效应.单克隆抗体2B7的成功研制,为深入研究B7 H4的生物学功能和临床应用提供了有价值的工具.
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NEAT1与系统性红斑狼疮发病的相关研究
本研究探讨长链非编码RNA(IncRNA) NEAT1在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中的表达情况及其意义.收集诊断明确的42例SLE患者和54例正常对照者外周血,采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测NEAT1的表达并分析其与SLE临床特征和干扰素(IFN)积分的相关性.与正常对照相比,NEAT1在SLE患者外周血中异常高表达,并且NEAT1的表达水平与SLE疾病活动指数(SLEDAI)、SLE肾脏损伤活动指数(Renal-SLEDAI)、干扰素积分显著正相关,SLE并蛋白尿患者NEAT1表达量显著高于SLE非蛋白尿患者,SLE并低补体患者NEAT1表达量显著高于SLE并正常补体患者,这就为SLE发病机制的研究提示了新的方向.
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荧光素酶标记的HBV细胞模型的建立
建立萤火虫荧光素酶(Fluc)为报告基因标记的乙型肝炎病毒(HBV)体外感染的细胞模型.利用分子亚克隆技术,以pAAV/1.2HBV质粒为模板,PCR扩增带有反向重复序列(ITR)的1.2倍HBV基因组片段,反向插入真核表达载体pGL3-CP-Fluc中,构建Fluc标记的HBV基因组表达质粒pGL3-CP-Fluc HBV1.2,并将此质粒转染至Huh-7细胞中.全自动免疫分析仪进行HBsAg、HBeAg的定量检测,生物发光检测仪检测Fluc其在细胞的表达水平.成功构建了1.2倍HBV全基因真核表达载体,稳定转染Huh 7细胞后,质粒在细胞中高水平表达Fluc,并可以正常分泌HBsAg、HBeAg.重组质粒pGL3-CP-Fluc-HBV1.2能在Huh-7细胞中表达,其稳定转染的细胞可作为一种新型的HBV体外感染模型,为抗病毒药物研究奠定基础.
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RA患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例及中性粒细胞表面CD200R1的分析
本研究探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞的百分含量和中性粒细胞表面CD200R1的表达情况,并探讨其临床意义.采用流式细胞术分别检测RA患者和健康对照组外周血CD4+ CD25+Foxp3+ Treg细胞的百分含量和中性粒细胞表面CD200R1的阳性表达率.ELISA检测其血清中单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)和CCR2的表达水平.实验结果显示:RA患者外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞占CD4+T细胞的比例明显低于健康对照组,中性粒细胞表面CD200R1的阳性表达率明显高于健康对照组,RA患者血清中MCP-1与CCR2的表达水平明显高于健康对照组.以上结果提示CD200/CD200R1信号异常,CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞数量减少可能为RA的发病机制之一,调控CD200/CD200R1信号和CCR2+ Treg细胞输注可能成为RA治疗的新靶点.
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胃癌组织IL-17RB的表达及意义
分析胃癌组织IL-17RB和IL-17B表达水平,探讨其与胃癌发生发展的关系及其可能机制.留取25例胃癌组织及其配对的癌旁组织,应用普通PCR和实时荧光定量PCR法检测IL-17RB和IL-17B的mRNA,采用Pearson法进行相关性分析;western blot和免疫荧光法检测胃癌组织及其配对的癌旁组织IL-17RB蛋白水平表达差异.结果显示,胃癌组织IL17RB和IL-17B mRNA表达水平均明显高于癌旁组织,两者呈明显正相关;胃癌组织IL-17RB蛋白水平明显高于癌旁组织.在胃癌组织,IL-17B/IL-17RB信号对胃癌的发生发展具有一定作用.
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去唾液酸糖蛋白受体H1亚单位表达及用于自身免疫性肝炎诊断的研究
去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor,ASGPR)是肝细胞膜表面特有的一种内吞性受体,H1是参与内吞功能的主要亚基.自身免疫性肝炎(autoimmune-hepatitis,AIH)患者存在抗-ASGPR的自身抗体.本研究以去唾液酸糖蛋白受体H1亚基在大肠杆菌中诱导表达,用纯化的重组去唾液酸糖蛋白受体H1亚单位rH1作为检测抗原,建立间接法rH1-IgG-ELISA,检测抗去唾液酸糖蛋白受体IgG抗体,观察其阳性和阴性符合率,并对rH1-IgG-ELISA检测的精确度、灵敏度和特异性进行评价.结果显示制备的rH1重组蛋白纯度在90％以上;以该重组抗原建立的rH1-IgG-ELISA的佳检测条件为:重组抗原rH1的包被浓度为6 μg/ml,血清稀释度1 ∶ 100,酶标记的羊抗人IgG 1∶3000稀释;用rH1-IgG-ELISA对混合ASGPR阳性和阴性血清的重复检测表明:IgG阳性血清的检测值的变异系数(CV值)为9.9％,IgG阴性血清的CV值为9.7％;灵敏度检测表明血清稀释度在1∶50～1∶200均可检出阳性;特异性试验的抑制率为63.5％; rH1-IgG-ELISA与总符合率为87.36％,其中阳性和阴性符合率分别为82％(41/50)和93.33％(42/45).故建立的rH1-IgG-ELISA具有较好的灵敏性和特异性,与提供的ASGPR阳性血清有较高的符合率,表明该法具有较好的AIH诊断价值,可进一步推广应用.
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类风湿关节炎中抗环瓜氨酸肽抗体、类风湿因子浓度与白介素17 mRNA表达关系研究
本文研究类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血清抗环瓜氨酸肽抗体(anti-cyclic citrullinated peptide antibody,ACPA)、类风湿因子(rheumatoid factor,RF)浓度和白介素-17(interleukin 17,IL-17)mRNA表达水平的关系.收集40例RA患者血清和外周血,以40例健康对照者血清和外周血作对照.采用酶联免疫吸附法测定血清抗CCP抗体,免疫比浊法检测RF含量.Ficoll分离外周血单个核细胞,实时荧光定量PCR检测IL-17 mRNA表达.结果显示RA患者血清中ACPA和RF含量显著高于健康对照组(P＜0.001);RA患者外周血单个核细胞中IL-17 mRNA表达量也显著高于健康对照组(P＜0.01).相关性分析显示RA患者血清中RF和ACPA含量与IL-17 mRNA表达呈正相关,相关系数分别为(RF,R2=0.753; ACPA,R2=0.2408).提示在RA中,ACPA和RF含量与IL-17 mRNA表达具有正相关性,动态监测ACPA和RF含量及IL-17 mRNA表达,有助于RA的诊断和治疗.
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复发性流产患者蜕膜组织NK细胞受体的表达
为探讨子宫蜕膜组织NK细胞受体的表达与复发性流产发病之间的关系,采用实时荧光定量RT-PCR和免疫组织化学法检测复发性难免流产及正常早孕蜕膜组织的NK细胞受体KIR2DL4、ILT-2、ILT-4 mRNA及其蛋白的表达水平.研究结果显示:难免流产组KIR2DL4、ILT-2、ILT-4 mRNA水平明显低于正常妊娠组,免疫组化的结果也显示难免流产组KIR2DL4、ILT-2的分布密度低于正常妊娠组.该结果提示:NK细胞受体的表达水平与难免流产有一定关联.推测复发性流产患者KIR2DL4表达下调,可能会影响早孕期蜕膜化的关键进程,进而对妊娠结局产生不良影响;而1LT-2、ILT-4表达下调,可能使得免疫细胞活化阈值下降,导致局部效应细胞功能紊乱,终发生流产.
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鉴定慢病毒携带IL-21转导人脐带间充质干细胞及IL-21活性初探
建立慢病毒携带IL-21转导人脐带间充质干细胞方法,并鉴定IL-21活性.以pRSC-IL-21质粒为模板扩增IL-21基因,插入到pHAGE-CMV-MCS-IzsGreen中,构建成慢病毒载体pHAGE-IL-21,将其包装为成熟慢病毒感染HEK 293T细胞.Western blot分析重组慢病毒感染hUCMSC中IL-21的表达,FCM法检测培养上清对脾细胞的增殖作用.结果显示正确构建了携带IL-21基因的慢病毒表达载体,包装的慢病毒感染HEK 293T细胞后可见绿色荧光表达.含IL-21慢病毒感染的hUCMSC中可检测到IL-21表达,分泌在培养上清中的IL-21具有促使脾细胞增殖活性.
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人羊水干细胞系的建立及其生物学特性分析
建立体外稳定生长的人羊水干细胞(AFS)系并对其生物学特性作进一步鉴定.使用贴壁法分离培养羊水干细胞,通过扩增传代,建立体外稳定生长的人羊水干细胞系,采用RT-PCR检测干性基因的表达,流式细胞仪分析细胞表型,混合淋巴细胞培养检测对PBMC体外增殖的免疫调节作用并通过细胞计数研究其体外增殖潜能.成功建立三株体外稳定传代和生长的人羊水干细胞系,AFS表达干细胞特异性基因:Oct4、Sox2、Nanog、Klf-4、c-Myc和Rex-1;同时发现AFS高表达负性共刺激分子B7-H1、B7-H2、B7-H3、B7-H4、BTLA和不表达HLA-DR、CD40、CD80和CD86,AFS可抑制PB-MC的体外增殖,不仅显示其具有低免疫原性,而且具有免疫调节作用.与此同时,AFS具有很高的体外增殖潜能.本研究建立的AFS系具有良好的干细胞生物学特性,可以作为一种来源充足的低免疫原性种子细胞用于组织工程的研究和应用.
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高迁移率族蛋白1与类风湿关节炎发病机制的相关性研究进展
近年来的研究指出,高迁移率族蛋白1与类风湿关节炎的发生和发展相关.其从细胞核转移至核外后,高迁移率族蛋白1可以细胞因子与相关受体结合的形式促进类风湿关节炎的炎症反应、参与血管翳的形成,甚至造成骨及软骨的破坏.本文将近年来对其与类风湿关节炎发病机制的相关性研究进行了整理并作综述.
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共抑制分子TIGIT的研究进展
TIGIT是近年来发现的一个免疫球蛋白超家族成员,它以不同的机制参与调节T细胞、NK细胞和DC细胞等多种免疫细胞的功能.本文旨在对TIGIT的免疫调节功能作一综述.
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Th22细胞在肝脏疾病中的研究进展
Th22细胞是新发现的一类T辅助细胞(T-helper cell),表达CCR6、CCR10和CCR4,以分泌高水平的IL-22为特点,主要参与炎症性免疫疾病的发病,在肝病发病中也具有重要的免疫病理作用.由于IL-22不完全由Th22细胞分泌,目前对Th22与IL-22及其在肝病中的作用还未完全阐明,进一步探究Th22生物学功能及其效应因子与疾病的关系,将为肝脏疾病的治疗开辟新途径.
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TIPE2与免疫相关疾病的研究进展
TIPE2作为TNFAIP8家族成员之一,是重要的负性免疫调控因子,通过调节固有免疫反应及适应免疫反应,维持机体的免疫稳态.目前已发现,TIPE2在一些免疫相关疾病中存在异常表达.对TIPE2的相关研究将为免疫相关疾病的治疗和预防提供新思路.
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IL-33及其受体ST2的研究进展
IL-33是IL-I家族的新成员,是炎症反应和免疫偏倚的重要调节因子之一,主要诱导Th2型免疫.IL-33正常情况下存在于细胞核中,作为转录因子发挥作用,当细胞受到损伤时可分泌IL-33至胞外后与受体ST2结合,从而作为细胞因子发挥作用.这一过程对正常细胞生物学功能的发挥和多种疾病的发生发展都密切相关.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
