首页 > 文献资料
-
4-1BB信号对小鼠树突状细胞表面TLR4表达的调节
目的 探讨4-1BB(CD137)激发型单克隆抗体2A对小鼠骨髓来源的树突状细胞(DC)表面TLR4表达的调节.方法 用不同剂量2A、LPS以及2A与LPS联合,或用LPS预刺激后再加入2A,以流式细胞术检测这些处理因素作用下DC表面TLR4表达情况.结果 LPS可下调DC TLR4的表达,下调作用可维持24 h,而2A可使DC TLR4的表达上调,上调作用可维持12 h,并可拮抗LPS对TLR4的下调作用.用LPS预处理DC后再加入2A,也可拮抗LPS的下调作用.结论 4-1BB信号可以上调DC表面TLR4的表达.
-
类风湿关节炎T细胞亚群4-1BB的表达与其分泌TH1/TH2细胞因子的关系
目的 探讨体外培养的类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)T淋巴细胞上共刺激分子4-1BB的表达,及与其分泌TH1/TH2细胞因子的关系.方法 应用流式细胞术检测体外培养的30例RA患者和20例正常对照者T细胞活化前后4-1BB的表达,并且应用ELISA方法检测培养上清液中IFN-γ、IL-4水平.结果 RA患者CD4+T和CD8+T细胞表达的4-1BB明显高于正常对照组(表达百分率分别为18.56%±4.08%和10.33%±2.13%;1.24%±0.12%和0.87%±0.09%,P＜0.01),经抗CD3单抗体外刺激后CD4+T和CD8+T细胞表达的4-1BB均显著高于活化前(表达百分率为33.21%±4.29%和21.35%±8.12%,P＜0.01).RA患者CD4+T/CD8+T比值明显升高,而且与4-1BB+CD4+T细胞数呈正相关关系(r=0.84,P＜0.01),RA患者T淋巴细胞培养液上清中IFN-γ、IL-4均高于正常对照组(P＜0.05),经抗CD3单抗体外刺激后上清液中IFN-γ及IL-4均明显高于活化前,以IFN-γ升高为显著(P＜0.01).而且抗CD3单抗刺激前后4-1BB+CD4+T细胞数与培养上清液中IFN-γ水平均呈正相关关系(r=0.721,r=0.487,P＜0.05).结论 类风湿关节炎患者T细胞表达的4-1BB在类风湿关节炎的发生发展中具有重要意义,4-1BB可能通过对CD4+T细胞活化,促使TH1细胞因子分泌,参与关节炎症和免疫损伤.
-
阻断4-1BB/4-1BBL通路在系统性红斑狼疮患者T淋巴细胞活化中的作用
目的 探讨协同刺激分子4-1BB/4-1BBL在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)T淋巴细胞活化中的作用机制.方法 应用RT-PCR和Western blot方法检测体外培养20例SLE患者和20例正常对照者T淋巴细胞活化前后及应用抗4-1BB单抗阻断后p38 MAPK和NF-kB表达的变化.结果 SLE患者T淋巴细胞NF-kB mRNA和p38 MAPK mRNA表达及其蛋白水平明显高于正常对照组(P均＜0.01),活化后的表达进一步升高(P均＜0.01).阻断4-1BB/4-1BBL通路后SLE患者T淋巴细胞p38 MAPK mRNA及蛋白水平的表达均明显下降(P均＜0.01),但是NF-kB mRNA及蛋白水平的表达无明显变化(P＞0.05).结论 协同刺激分子4-1BB可能通过p38MAPK信号转导通路促使SLE患者T淋巴细胞的活化与增殖.
-
肝癌及癌旁组织中4-1BB分子的表达及意义
目的研究肝癌及癌旁组织中4-1BB分子的表达及意义.方法应用RT-PCR、直接免疫荧光细胞化学法、激光共聚焦显微镜和流式细胞术检测肝癌和癌旁组织以及外周血淋巴细胞中4-1BB分子的表达情况.结果全部肝癌癌旁1 cm组织中可检测到4-1BB mRNA,8例肝癌组织和6例癌旁5cm组织中4-1BB mRNA 呈弱表达.激光共聚焦显微镜检测到13例癌旁1 cm肝组织中浸润淋巴细胞4-1BB+/CD4+或CD8+荧光.两组外周血CD4+和CD8+ T细胞表面几乎均未检测到4-1BB分子的表达.结论肿瘤浸润淋巴细胞可能通过4-1BB共刺激信号途径得以有限活化并发挥局部杀伤效应.
-
4-1BB单克隆抗体对免疫性肝损伤治疗及CD4+CD25+T淋巴细胞影响研究
目的 探讨4-1BB单克隆抗体(4-1BBmAb)对免疫性肝损伤治疗及对CD4+CD25+T淋巴细胞影响.方法 建立小鼠刀豆蛋白A(ConA)肝损伤模型,检测4-1BB表达,ConA注射后2 h给予4-1BBmAb(100μg/只),观察肝功能及病理学变化,流式细胞仪检测CD4+CD25+T淋巴细胞.结果 丙氨酸转氨酶(ALT)模型组(139±22)U/L,对照组(32±12)U/L,天冬氨酸转氨酶(AST)分别(130±16)U/L及(29±11)U/L,两组差异有统计学意义(P<0.01);模型组4-1BB表达(8.1±2.6)比对照组(5.3±2.6)升高(P<0.01).4-1BBmAb治疗后ALT(98±14)U/L,AST(89±11)U/L降低(P<0.01).模型组CD4+CD25+T淋巴细胞(2.9±0.8)低于对照组(3.6±1.2)(P<0.05),4-1BBmAb组(8.3±3.0)高于生理盐水组(3.0±0.8)(P<0.01).结论 4-1BBmAb对免疫性肝损伤有治疗作用,影响CD4+CD25+T淋巴细胞达到治疗肝损伤目的 .
关键词： 肝炎 自身免疫性 4-1BB CD4阳性T淋巴细胞 -
淋巴细胞激活诱导的受体4-1BB在类风湿关节炎T淋巴细胞亚群上的表达
目的 探讨类风湿关节炎(RA)T淋巴细胞上淋巴细胞激活诱导的受体4-1BB的表达及其作用机制.方法 应用流式细胞术检测30例RA患者和20名正常对照者外周血T细胞活化前后4-1BB的表达.结果 RA患者CD4+T和CD8+T细胞表达的4-1BB明显高于正常对照组[表达百分率分别为(18.56±4.08)%,(10.33±2.13)%,(1.24±0.12)%,(0.87±0.09)%,P＜0.01],经抗CD3单抗体外刺激后CD4+T和CD8+T细胞表达的4-1BB均显著高于活化前[表达百分率为(33±4)%和(21±8)%,P＜0.01].RA患者CD4+T/CD8+T比值明显升高,而且与4-1BB+CD4+T细胞数呈正相关关系(r=0.84,P＜0.01),另外4-1BB+CD4+T细胞数与血沉、IgA呈正相关关系(r=0.476,P＜0.05;r=0.659,P＜0.05).结论 RA患者T细胞表达的4-1BB在RA的发生发展中具有重要意义,4-1BB可能通过对CD4+T活化与增殖参与关节炎症和免疫反应.
-
阻断4-1BB/4-1BBL通路对系统性红斑狼疮T淋巴细胞增殖和细胞因子分泌的影响
目的 研究共刺激分子4-1BB/4-1BBL对系统性红斑狼疮(SLE)T淋巴细胞增殖与Th1/Th2细胞因子分泌的影响,探讨其在SLE发病机制中的作用.方法 采用四甲基噻唑蓝(MTT)法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测体外培养的30例SLE患者外周血T淋巴细胞应用抗4-1BB单抗阻断前后T淋巴细胞增殖及干扰素(IFN)-γ和白细胞介素(IL)-4分泌水平,以20名健康志愿者为正常对照.结果 ①SLE患者T淋巴细胞经抗CD3单抗刺激后增殖明显大于活化前(P＜0.01),而应用抗4-1BB单抗阻断后T淋巴细胞的增殖明显受抑N(p＜0.01 .②SLE患者T淋巴细胞培养上清中IFN-γ和IL-4水平明显高于正常对照组(P＜O.01),而且经抗CD3单抗刺激活化后,SLE患者T淋巴细胞分泌的IFN-γ和IL-4水平显著高于活化前(P＜0.01),但是应用抗4-1BB单抗阻断后培养上清中IFN-γ和IL-4水平明显下降(P＜0.05,),以IL-4水平的减少为显著.结论 抗4-1BB单抗可显著抑制SLE T淋巴细胞的异常活化及Th1和Th2细胞因子的分泌,减轻SLE的免疫损伤.
-
4-1BB在慢性肾炎患者外周血淋巴细胞的表达及其意义
目的:观察在慢性肾炎患者外周血中共刺激分子4-1BB的表达特点及其作用.方法:采用流式细胞仪,对35例慢性肾炎患者外周血T淋巴细胞亚群和协同刺激分子4-1BB的表达进行了研究.["H]结果:活动期慢性肾炎患者T淋巴细胞亚群明显失衡,表现为4减少,8增加,4/8比值显著降低.缓解期患者T淋巴细胞亚群失衡得到明显纠正.活动期慢性肾炎患者共刺激分子4-1BB显著高于正常对照组(4-1BB表达量为30.57±8.12,比正常人0.74±0.28,P＜0.001),缓解期患者4-1BB显著降低,而且4-1BB异常表达与4+T细胞呈负相关(r=-0.84,＜0.05).结论:慢性肾炎中,T细胞活化所必需的共刺激分子4-1BB的异常表达可能为慢性肾炎发生和病变进展的免疫因素之一,为深入探讨慢性肾炎的免疫发病机理提供了重要价值.
-
多发性硬化患者外周血CD4+CD25high T细胞上4-1BB和GITR的表达
目的:以往研究表明4-1BB和GITR均可表达于CD4+CD25+调节T细胞(regulatory T cell,Tr),在由该细胞群维持的自身耐受中起着重要作用.另有研究报道人外周血CD4+CD25high T细胞与该Tr的功能活性更为接近,且在多发性硬化(multiple sclerosis,MS)患者中的效应功能明显降低,但目前对其是否与上述两类分子的表达有关尚不清楚,因此我们检测了MS患者外周血CD4+CD25high T细胞上4-1BB、GITR的表达,旨在发现该调节T细胞群是否有上述分子的异常表达.方法:用流式细胞仪检测了未治疗MS、其他神经系统疾病患者、正常对照组外周血CD4+CD25high T细胞表面4-1BB、GITR的表达.结果:与正常对照比较,MS患者CD4+CD25highT细胞4-1BB的表达明显减少(P＜0.05),而在CD4+CD25-T细胞的表达则与正常对照无明显差别(P＞0.05).三组间CD4+CD25high T细胞及其GITR的表达亦无显著差别(P＞0.05).结论:本研究发现MS患者CD4+CD25highT细胞上4-1BB的表达减少,而GITR的表达则较正常对照组则无显著差别,我们的结果提示该细胞群免疫活性的降低可能与其4-1BB的表达下调有关,而GITR则在CD4+CD25high T细胞的免疫调节过程中可能发挥着次要或精细调节的作用.
关键词： GITR 4-1BB 多发性硬化 外周血 CD4+CD25+调节T细胞 -
共刺激分子4-1BB与类风湿性关节炎
共刺激分子4-1BB及其配体4-1BBL属于肿瘤坏死因子超家族成员,为T细胞的活化、增殖提供第二信号,并可促进细胞因子的分泌.类风湿性关节炎(RA)是一种慢性系统性自身免疫性疾病,已证实T细胞功能的偏移及细胞因子表达异常在RA的免疫炎症损伤的发生发展过程中起着重要作用,而4-1BB作为RA发病机制中的关键性因素已成为目前研究的热点,通过干预4-1BB/4-1BBL信号途径对RA进行免疫治疗也已是当前的研究方向.
-
026 一种新的T细胞共刺激分子——4-1BB
4-1BB是一种新发现的T细胞共刺激分子,属于TNFR/NGFR超家族成员,近年来发现它在T淋巴细胞的活化、增殖、分化及凋亡等诸多方面发挥了重要的生物学功能.4-1BB介导的活化信号主要是通过TPKp56lck和TRAF的途径转导入胞内.本文拟就4-1BB的有关问题作一综述.
-
4-1 BB/4-1 BBL在T细胞免疫应答及疾病发生中的作用
共刺激分子4-1BB和4-1BB配体(4-1BBL)属于肿瘤坏死因子/肿瘤坏死因子受体(TNF/TN-FR)超家族的重要成员,分别表达在活化的T细胞及树突状细胞(DC)上.4-1 BB与4-1BBL相互作用产生的其刺激信号能够促进T细胞增殖、分化以及细胞因子的产生.4-1BB/4-1BBL信号途径在自身免疫性疾病、肿瘤、病毒感染等疾病的发生、发展过程中起着重要的免疫调节作用.干预调节4-1BB/4-1 BBL信号途径有望为疾病的免疫治疗提供新的思路.
-
抗人4-1BB功能性单克隆抗体的研制及生物学特性研究
研制鼠抗人4-1BB功能性单克隆抗体及其在T细胞活化、增殖及信号转导中的作用.以小鼠肾肿瘤细胞转染人4-1BB基因的细胞株4-1BB/293T为免疫原,采用B淋巴细胞杂交瘤技术,获取分泌特异性4-1BB 单抗的杂交瘤细胞株.以体内诱生法产生腹水,Protein G亲和层析法进行纯化,快速定性试纸法鉴定单抗的亚类,MTT法检测单抗对T细胞的刺激作用,流式法检测单抗对T细胞凋亡的影响.结果显示:成功获得1株持续分泌特异性抗人4-1BB 单抗的细胞株(命名为5D5),属于IgG2b.该单抗能特异识别人4-1BB分子,介导有效的共刺激信号,体外促进T细胞的增殖,抑制活化诱导的T细胞凋亡.总之,成功获得1株功能性4-1BB单抗,具有重要的研究和潜在应用价值.
-
4-1BB在人外周血γδT细胞活化中的协同刺激作用
采用结核杆菌(Mtb)低分子多肽刺激人外周血单个核细胞,流式细胞术(FCM)检测不同活化时相γδT细胞膜表面4-1BB分子的表达;用阻断型4-1BB配体(4-1BBL)单抗阻断4-1BB /4-1BBL信号,FCM检测γδT细胞的增殖比率和细胞内产生IFN-γ的情况,同时与阻断CD28/B7-1信号相比较.结果显示,静止的γδT细胞膜表面不表达4-1BB分子,Mtb抗原刺激后6 h,4-1BB即有明显表达(29.71%),48 h达到高峰(49.79%);与未阻断组相比,阻断4-1BB/4-1BBL信号,γδT细胞的增殖效应和细胞内IFN-γ的产生均明显下降(P＜0.01),与CD28/B7-1信号阻断组相比,差异无显著性(P＞0.05).提示4-1BB /4-1BBL信号同CD28/B7-1信号一样,可为γδT细胞活化提供协同刺激作用.
-
小鼠髓系树突状细胞4-1BB及4-1BBL表达调节
探讨小鼠髓系树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells,BMDC)共刺激分子4-1BB及其配体4-1BBL表达的变化.将促 DC成熟活化因子CD40L-CHO、TNF-α、LPS和IFN-γ,免疫负性调节因子IL-10以及各成熟活化因子与IL-10联合加入BMDC中,观察BMDC上4-1BB及4-1BBL表达的变化.结果显示,加入成熟活化因子的各组BMDC上4-1BB及4-1BBL表达与对照组相比有显著上调(P＜0.05).而IL-10组与对照组相比两者的表达显著下调(P＜0.05),且各成熟活化因子与IL-10联合应用与单用IL-10组相比,BMDC上4-1BB和4-1BBL表达上调,有显著性差异(P＜0.05).提示成熟活化因子不仅能上调BMDC上4-1BB和 4-1BBL的表达并且能有效拮抗mIL-10对BMDC上4-1BB和 4-1BBL表达的下调作用.
-
4-1BB信号拮抗肿瘤细胞培养上清诱导的树突状细胞凋亡
为研究4-1BB信号拮抗肿瘤细胞培养上清诱导的树突状细胞(DC)凋亡的作用,采用rmGM-CSF联合rmIL-4诱导小鼠骨髓细胞分化为未成熟树突状细胞(imDC),分别经rmTNF-α、4-1BB激发型单克隆抗体(2A)或TNF-α联合2A激发DC成熟.未成熟或成熟DC分别与不同浓度的肿瘤培养上清混合培养.流式细胞仪测定DC表面CD80、CD86的表达,3H-TdR掺入法测定DC激发T细胞活化增殖能力;JAM法测定未成熟或成熟DC与肿瘤上清混合培养后DNA片断形成率.结果显示:经2A或TNF-α刺激后,DC激发T细胞活化的能力显著提高;5%、10%、20%、50%小鼠肿瘤细胞株A20或B16培养上清与未成熟DC共育24 h后,DNA片断形成率分别为16%、29%、41%、51%和20%、27%、37%、58%,且该效应具有时间依赖性;DC经2A或TNF-α激发48 h后,不同浓度肿瘤培养上清诱导DNA片断形成率显著降低.因此,肿瘤细胞可以通过分泌可溶性因子诱导未成熟DC凋亡;4-1BB mAb能促进DC的发育成熟,并能有效地抑制肿瘤细胞培养上清诱导的DC凋亡.
-
慢性肾炎患者外周血T细胞亚群和共刺激分子的表达及其意义
为研究慢性肾炎患者外周血T细胞亚群和共刺激分子的表达特点及其在慢性肾炎免疫病理机制中的作用,本文采用免疫荧光标记和流式细胞仪分析,对35例慢性肾炎患者外周血T淋巴细胞亚群和共刺激分子CD28、4-1BB等的表达进行研究.结果表明:(1)慢性肾炎患者T细胞亚群明显失衡,表现为CD4减少,CD8增加,CD4/CD8比值显著降低;(2)共刺激分子CD28表达显著低于正常对照组(CD28表达百分率分别为45.95±5.67和66.42±4.58,P＜0.001),且CD4+CD28+T细胞和CD8+CD28+T细胞均显著减少.治疗后缓解期患者T细胞亚群失衡明显纠正,CD28+T细胞,尤其是CD4+CD28+T细胞显著增多,而且CD4+CD28+T细胞数与患者的24h尿蛋白定量呈负相关(r=-0.47,P＜0.01);(3)慢性肾炎患者共刺激分子4-1BB在T细胞中的表达显著高于正常对照组(表达百分率分别为30.57±8.12和0.74±0.28,P＜0.001),治疗后的4-1BB表达水平显著降低,而且4-1BB异常高表达与CD8+T细胞数呈正相关(r=0.63,P＜0.05).从而表明慢性肾炎外周血T细胞亚群失衡和T细胞活化所必需的共刺激分子CD28、4-1BB异常表达,可能在慢性肾炎发生和病变进展中起着重要作用.
-
人CD137单抗诱导不同状态T细胞增殖和凋亡的研究
为了研究一种新的T细胞共刺激分子-CDl37对不同状态T细胞增殖和凋亡的双重调节作用.采用3H-TdR掺入法测定T细胞增殖,用流式细胞仪测定细胞凋亡.结果显示:(1)CDl37单抗可与T细胞表面的CDl37抗原结合,明显增强PHA刺激T细胞增殖,使T细胞增殖指数较PHA单独作用高2～3倍,但CDl37单抗单独不能刺激T细胞增殖;(2)对于慢性活化的T细胞,CDl37单抗可协同PHA诱导T细胞凋亡,使T细胞凋亡率从PHA单独作用的19.20%增加到36.31%,CDl37单抗单独并不能诱导慢性活化T细胞凋亡.CDl37单抗一方面可协同PHA刺激静止状态T细胞的增殖,另一方面可协同PHA诱导慢性活化T细胞凋亡,对T细胞起双重调节作用.
-
过敏性紫癜性肾炎患儿共刺激分子4-1BB/4-1BBL变化及其临床意义
目的：探讨共刺激分子4-1 BB/4-1 BBL在过敏性紫癜性肾炎（HSPN）患儿外周血单个核细胞（PBMC）中的表达及其临床意义。方法选取初发过敏性紫癜无肾炎（HSP组）、初发过敏性紫癜性肾炎（HSPN组）患儿各20例（其中15例进行了肾脏病理检查），20例正常儿童为对照组，分离培养PBMC。应用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测并比较三组PBMC中4-1BB mRNA和4-1BBL mRNA的变化，分析4-1BB/4-1BBL mRNA变化与肾脏病理的关系。结果HSPN、HSP患儿PBMC中4-1BB mRNA、4-1BBL mRNA的表达均高于对照组，差异有统计学意义（P均＜0.01）。HSPN患儿的病理积分与4-1BB/4-1BBL mRNA表达呈正相关关系（r =0.570、0.515，P均＜0.05）。PBMC中，加入植物血凝素后， HSPN组、HSP组和对照组4-1BB/4-1BBL mRNA的表达均高于空白对照组，差异有统计学意义（P均＜0.01），其中HSP、HSPN组增高幅度较对照组明显，HSPN组增高幅度较HSP组更为显著，差异有统计学意义（P均＜0.01）；加入地塞米松后， HSPN组、HSP组4-1BB/4-1BBL mRNA的表达均较空白对照组减少，差异有统计学意义（P均＜0.01）。结论 HSPN患儿PBMC中共刺激分子4-1BB/4-1BBL mRNA的表达显著增高，植物血凝素能诱导其高表达，而地塞米松能抑制其表达，提示4-1 BB/4-1 BBL可能参与HSPN的发病。
-
CD137信号对小鼠树突状细胞表面TLR4表达的调节
目的 探讨CD137(4-1BB)激发型单克隆抗体2A对小鼠未成熟树突状细胞株DC2.4表面TLR4表达的调节.方法 以流式细胞术检测不同剂量2A、LPS,或LPS预刺激后再加入2A等因素作用下,DC2.4表面的TLR4表达情况.结果 LPS下调TLR4表达,2A使DC2.4上TLR4表达上调,并拮抗LPS对TLR4的下调作用.LPS预处理后再加入2A,也拮抗LPS的下调作用.结论 CD137信号可以上调DC2.4表面TLR4的表达.
