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事件相关电位快速提取方法研究进展
空间飞行条件下,失重可能对航天员脑高级功能产生不可预期的影响,而事件相关电位( event-related potentials,ERPs)是探索这种影响的重要手段.ERPs总是淹没在自发脑电中,信噪比很低.少次甚至单次提取ERPs,可减少刺激次数,同时可观察每次实验ERPs之间的变异性,具有重要意义.本文主要从时域、变换域和空间域来述快速提取ERPs的方法,并对这3种典型方法进行仿真比较.
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RNA快速提取一步法的建立
RNA是分子生物学研究的一个重要组成部分, 不论是cDNA文库的构建、RT-PCR、RNA序列分析、差异显示(mRNA differential display)、代表性差异分析 (representational Difference Analysis, RDA)、抑制性消减杂交(suppression Subtraction Hybridization, SSH)、Northern印迹分析、蛋白质的体外翻译等均依赖于高纯度完整的RNA. 因此, 如何获得高质量的RNA是研究人员关注的问题.1987年Chomczynski等[1]建立了酸-异硫氰酸胍-苯酚-氯仿一步法(acid-guanidine-phenol-chloroform, AGPC).该方法较以往的传统方法操作简单,无需特殊的设备,抽提时间缩短至4 h,因而得到广泛的应用.数家公司据此开发出RNA提取试剂盒[2,3].使用试剂盒简单方便,但价格相对昂贵.为探索操作简便、经济实用、快速有效的RNA提取方法,我们分析了大量相关文献资料,进行了多次实验,成功地研制出一种新型的RNA提取试剂,建立了其操作程序,我们称之为RNA快速提取一步法.其性能达到进口试剂盒的水平,但造价低廉、操作简便,特别适用于国内实验室.
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基于PACS的医学课件自动生成系统的研究
PACS(Picture Archiving and Communication System)影像存储与通信系统是一种利用计算机技术、网络技术、大容量存储技术等现代信息技术将各种数字医学图像安全存档并快速提取的计算机管理信息系统.它将影像设备中的图像通过各种接口接收过来,采用数字化的方式存储管理,以方便图像信息在整个医院多媒体网络中自由传输,从而实现真正意义上的无纸无胶片化.它不仅可以提高医院的管理水平,提高工作效率,而且可以大幅度节约成本.
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新型快速中药材DNA提取方法的探索与应用
目的 建立一种无设备快速30 s提取中药材DNA的方法.方法 使用常规定性滤纸作为核酸吸附的载体,通过裂解液的裂解,释放核酸并吸附在滤纸上,利用洗脱液进行核酸纯化,即可完成不到30 s的整个核酸提取过程,吸附核酸的滤纸可直接放入反应体系进行扩增.结果 此方法可以成功提取不同药用部位的中药材核酸,提取得到的核酸经扩增验证,可获得与传统提取方法相一致的检测结果.结论 此新型快速中药材DNA提取方法简单易行、速度快、成本低,可使核酸提取变得越来越大众化,不再局限于专业人员和实验室环境,为分子生药学的应用和发展提供了新思路.
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超声提取-HPLC法测定冬凌草中冬凌草甲素
冬凌草Rabdosia rubescens Hemsl.为一传统草药,俗称抗癌植物,在我国具有丰富的野生资源.该植物主要生长在我国黄河流域及其以南广大地区.冬凌草中的二萜类成分冬凌草甲素具有很强的抗肿瘤活性[1,2].对于冬凌草甲素的测定方法,传统方法往往采用TLC法[4]及HPLC法[5].由于索氏提取是一种连续热回流提取方法,不仅提取时间较长,而且药液长时间处于被加热状态,有效成分容易受到破坏,测出的冬凌草甲素的质量分数偏低,且提出的药液色重,因此测定前还必须进行脱色除杂,给测定工作带来很多不便.超声提取技术已被用于多种植物的提取,具有提取快速、提取率高、节省溶剂和时间,能避免高温对有效成分的影响等优点.本实验采用超声技术快速提取冬凌草中的冬凌草甲素,并通过HPLC法测定冬凌草甲素,发现采用该法能克服传统提取方法的许多不足,并能保证冬凌草甲素的高提取率.
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模式翻转视觉诱发电位快速提取的可行性再研究
目的把模式翻转视觉诱发电位快速提取法应用于视神经病变的病人,探讨其临床应用价值.方法应用Glileo视觉诱发电位检测系统对30例正常健康人和17例视神经疾病病人分别进行全视野的PRVEP检测,每一结果重复检测3次.所得结果应用少次提取法进行处理而得VEP波形.然后将正常对照组3次重复结果两两间分别进行配对t检验,探讨其可重性,并计算出正常值范围,后参照正常值,分析视神经疾病组的检测结果.结果3次重复结果两两间配对t检验,得P1=0.425>0.05,P2=0.179>0.05,P3=0.110>0.05;参照本研究得出的正常值范围,对病人组的检测结果进行分析,得出这种少次提取法对视神经疾病检测的敏感度90.0%(18/20),特异度92.5%(13/14),准确度91.1%(31/34).结论用这种少次提取法提取PRVEP,可重性好,稳定可靠.很有临床应用价值.
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辣椒中辣椒素快速提取及测定
辣椒素(capsaicin),化学名称为反8-甲基-N-香草基-6-壬烯基酰胺,是辣椒(Capsicum annuum L)中的主要生物活性成分.辣椒素类物质可促进肾上腺分泌儿茶酚胺并有抑制细菌的作用,具有镇痛止痒、抗炎消肿[1]、调节食欲、促进脂肪代谢[2]、催泪催嚏、防治风湿与抗肿瘤[3-5]等作用,医药工业中已得到广泛应用[6].因辣椒素具有纯天然、低毒害、无污染等特点,有多种生物功能在食品工业和饲料工业中作为添加剂广泛使用.高纯度的辣椒素晶体在军事上,是制造催泪弹、催泪枪和防卫武器的主要原料,具有重要的研究价值.研究辣椒素类物质的提取及测定方法对辣椒产品的标准化及其品质评价有现实意义.
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活体脊髓取材吹出法与传统方法的比较
脊髓的神经细胞培养、免疫蛋白印迹、酶联免疫等实验研究都需要提取动物的活体脊髓组织。脊髓的单细胞膜片钳和薄片膜片钳等电生理学研究方法,对脊髓细胞活性的要求较高,快速提取结构完整的脊髓显得更为重要[1]。但脊髓在椎管和硬脊膜的保护下,难以提取。通过改良杜俊英等[2]所介绍的固定脊髓提取方法,应用于大鼠和小鼠的活体脊髓取材,并将其效果与传统方法进行比较。该方法是利用注射器和微量移液器枪头,将活体脊髓从两端离断的椎管中吹出的提取方法。吹出法与传统方法相比,取材时间显著缩短,脊髓灰质中大部分细胞活性很好。
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微波固相吸附法制备临床标本中DNA和RNA
众所周知,PCR技术的应用是当今生物学研究领域的热点.将PCR用于感染性疾病的临床诊断,使医学微生物检验技术产生了新的飞跃.然而,如何保证PCR免受临床样品多样性、复杂性的影响,而获得准确的诊断结果乃是国内外同行正在致力解决的难题.对于临床标本处理好坏的结果是保证PCR质量的前提和基础.采用经典的酚-氯仿方法从临床标本中提取核酸,操作复杂费时,且增加标本间的交叉污染的机会.因此,简化PCR模板制备,探讨一种适用于临床诊断的简便和高效的核酸提取方法具有实际意义.本文根据文献报道建立并改进了微波固相吸附法快速提取核酸(DNA和RNA)的方法.
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脑功能网络研究及其在颅脑肿瘤患者中的应用
人脑是自然界复杂的系统之一,对它的研究极具挑战性[1]。人脑功能具有信息整合和功能分化两大作用,使得大脑能够快速提取并处理信息。脑功能网络是分析空间上分离的脑区时间上的相关性,即脑区间是否存在连接关系以及连接关系的强弱[2],是对大脑结构网络中不同神经元、神经元集群或脑区之间动态活动的相关关系的直观描述。随着脑功能成像技术及相关设备的更新,统计物理学的发展,尤其是基于图论知识的复杂网络理论的发展为进一步研究脑功能网络提供了必要的条件和分析方法。
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质粒DNA的快速提取及其在重组子大量筛选中的应用
[目的]介绍一种质粒DNA的快速提取方法及其在重组子大量筛选中的应用. [方法]利用微量碱变性一步法快速提取质粒DNA. [结果]应用该法能在大量的重组菌株中筛选出所需的重组质粒. [结论]本法便捷、经济,适合于在大量DNA文库中筛选出所需目的基因.
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耳鼻咽喉科听力室的信息化管理
随着科技的发展,信息化管理技术开始普遍运用于医疗行业中[1]。信息化管理不仅有利于数据的保存与管理,还能实现数据的快速提取,提高数据使用效率[2],而资料的无纸化保存也更符合当今的环保理念[3]。临床听力学在近十年间有了突飞猛进的发展,随着接诊人数的增加,听力学资料的有效管理成为临床听力室急需解决的问题之一。因此,为了进一步提高临床诊疗效率,并为科研提供更佳的数据平台,中山大学附属第三医院耳鼻咽喉-头颈外科计划开发了一套基于医院信息系统(hospital in-formation system ,HIS )的耳鼻咽喉科信息管理平台,使内镜室、听力室、睡眠监测室及变态反应室可以实现数据的保存与共享。作为该信息平台的组成部分,听力学信息系统(audiology information sys-tem ,A uIS )需要联接多种仪器,且不同品牌间使用的数据格式不一,因此开发难度较大。自2007年12月以来该数据库已运行了五年,现就其应用的体会总结如下,并以此为基础对 A uIS 进行进一步规划。
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快速提取人周围血细胞线粒体DNA及其纯化方法的研究
目的 探讨并建立快速分离纯化人周围血细胞线粒体DNA(mtDNA)的方法.方法 收集抗凝周围血,首先使用溶血素破碎红细胞,离心收集并裂解白细胞,去除细胞膜和核DNA后获得mtDNA;再经过去除蛋白质和RNA,提纯mtDNA,核酸定量仪定量测定,凝胶电泳检测.结果 本方法能够得到无蛋白质及核DNA污染,纯度较高的mtDNA样品.结论 本研究中建立的快速分离周围血细胞mtDNA的方法,能够快速,可靠地提取较高纯度的mtDNA,可用于线粒体的相关研究中.
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改进SDS-Phenol法快速提取细胞总RNA
关键词: 快速提取 -
脂质体介导血管内皮生长因子基因促进大鼠皮瓣早期断蒂的观察
1材料与方法1.1 重组质粒的制备pcDNA血管内皮生长因子(VEGF)165(华中科技大学同济医学院杨操博士提供)含VEGF165基因片段,位于BamH I和EcoR I 2个酶切位点之间.将其转入大肠杆菌HB101感受态细胞,挑选抗氨苄西林克隆进行小量快速提取,用BamH I和EcoR I双酶切鉴定.同时送北京华大生物公司测序.将保存的大肠杆菌菌种通过碱裂解法提取大量质粒后进一步纯化.质粒经核酸蛋白微量仪(Smart SPECTM型,美国 Bio-Rad公司)检测,定量为12.5μg/μL,以等渗盐水稀释至1μg/μL备用.