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临床样品中不同蚀斑表型单克隆轮状病毒VP8基因序列分析
轮状病毒属于呼肠孤病毒属,为没有包膜的双链 RNA病毒,人畜禽共患,其感染每年引起约50万婴幼儿死亡[1]。宿主细胞表面的寡糖分子是一个重要的因子,它们与轮状病毒和细胞的相互识别及吸附有关,同时还影响了病毒的宿主特异性[2]。研究表明,轮状病毒外壳蛋白 VP4的糖类结合区域位于 VP4的亚基 VP8,其与细胞表面寡糖分子的相互作用使病毒识别并吸附到细胞表面。轮状病毒对细胞的感染是通过 VP8与细胞表面多糖,尤其是与内部唾液酸(N-acetyl- and N-glycolylneuraminic acids,Sia)的结合完成的[3]。人株、猴株以及猪轮状病毒 VP8基因序列在识别细胞表面唾液酸或其衍生物甲基-α二氮乙酰神经氨酸的位点有显著的差异[1],影响病毒在细胞培养上的敏感性和适应性。
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了解乳酸菌
乳酸菌是一群能从可发酵性碳水化合物中产生大量乳酸的革兰氏阳性细菌的通称,广泛存在于人、畜、禽肠道、许多食品、物料及少数临床样品中.乳酸菌不仅可以提高食品的营养价值,改善食品风味,提高食品保藏性和附加值,而且乳酸菌的特殊生理活性和营养功能,正日益引起人们的重视.
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微波固相吸附法制备临床标本中DNA和RNA
众所周知,PCR技术的应用是当今生物学研究领域的热点.将PCR用于感染性疾病的临床诊断,使医学微生物检验技术产生了新的飞跃.然而,如何保证PCR免受临床样品多样性、复杂性的影响,而获得准确的诊断结果乃是国内外同行正在致力解决的难题.对于临床标本处理好坏的结果是保证PCR质量的前提和基础.采用经典的酚-氯仿方法从临床标本中提取核酸,操作复杂费时,且增加标本间的交叉污染的机会.因此,简化PCR模板制备,探讨一种适用于临床诊断的简便和高效的核酸提取方法具有实际意义.本文根据文献报道建立并改进了微波固相吸附法快速提取核酸(DNA和RNA)的方法.
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2014-2017年上海市临床医院送检样品寄生虫检测结果分析
目的 分析2014-2017年上海市临床医院送检样品寄生虫检测结果,为寄生虫病预防和控制提供基线资料. 方法 收集与中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所签约的上海市相关医疗机构(二甲医院7所、三甲医院28所、涉外医院6所)送检的样品包括全血、血清、粪便、痰液、尿液、体液(胸水、腹水)和组织病理切片、虫体等,以及病例相关信息.采用直接涂片法、改良抗酸染色法、ELISA和分子生物学等方法检测送检样品寄生虫感染情况. 结果 2014-2017年共检测送检样品25 549份.其中,病原学检测8 877份,检出寄生虫感染阳性633份,阳性检出率为7.1%,包括了33种寄生虫,其中检出率高的为人芽囊原虫(331/8 877,3.7%),其次为溶组织内阿米巴(120/8 877,1.4%).血清学检测16 672份,血清标本阳性1 881份(占10.9%),其中猪囊尾蚴抗体阳性424份(占23.4%),曼氏裂头蚴抗体阳性388份(占21.4%),日本血吸虫抗体阳性289份(占16.0%)、卫氏并殖吸虫抗体阳性267份(占14.7%),刚地弓形虫抗体阳性260份(占14.4%).原虫感染共371例,主要来源地区为上海(125例);蠕虫感染共87例,主要来源地区为上海(29例). 结论 2014-2017年上海临床医院送检样品中,病原学检测阳性虫种主要是人芽囊原虫和溶组织内阿米巴,血清抗体阳性虫种主要为猪囊尾蚴和曼氏裂头蚴.
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分散液液微萃取技术在临床样品中的前沿应用
分散液液微萃取技术(dispersive liquid-liquid microextraction,DLLME)是一种快速、简便、有机试剂消耗少和有较高的富集作用的样品前处理技术.在医药学、环境、食品等领域具有较广的应用.质谱技术、衍生化试剂、离子液体等的联用,扩大了DLLME的应用范围.本文总结了该技术在临床样品中的应用,为该领域学者提供参考.
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诊断实验仪器的小型化与家庭化
随着生活水平的不断提高和健康意识、时间意识的增强,人们希望临床实验室检查日益快捷、准确,终能实现家庭自检.现有临床诊断实验室的设备尽管自动化程度很高,但是体积大、能耗高,需要专业人员操作,难以满足人们的上述需要.八十年代出现了一些小型化或微型化的临床样品检测仪,如血糖分析仪[1]、便携式血气分析仪[2]以及妊娠早期诊断试纸条[3]等.由于它们具有体积小、操作简单、使用方便、分析时间短和价格相对便宜的优点,已逐渐进入家庭,一定程度上满足了人们的需要,也使人们看到了诊断实验室家庭化的趋势.但是,总体而言,这些仪器功能单一、局限性大、检测项目数量有限.
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063非酶法消除临床样品中的抗坏血酸
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临床生化分析过程之外的质量控制
提到生化质量控制大家自然想到室内质控和室间质评这两个概念,室内质控是用质控品与临床样品一起测定,观察质控品的分析误差,建立一个较精密和敏感的控制程序,可及时发现因技术操作、试剂和仪器性能改变等引起的误差,使各项分析误差控制在允许范围之内;室间质评则是通过对统一发放的质控品进行测定评价实验室测定结果的准确度和可比性.近年来,自动生化分析仪的普遍应用,大大提高了临床生化分析的精密度,使分析的批内和批间变异明显下降,由于方法学的改进和标准品质量的提高,测定的准确度也有了很大提高.在实际工作,我们体会到,许多测定误差往往不是来自分析过程本身,而是来自分析过程之外,对之应该引起重视.下面就平时在工作中对临床生化分析过程之外的各环节进行质量控制的做法作一介绍.