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横纹肌快速染色法
目前,横纹肌染色多选用Mallory磷钨酸苏木精染色法(PTAH),但该方法存在着配置染液时间长,染色时间长等不足.虽有人加高锰酸钾氧化促其成熟,但还是需要几天时间,且染色效果也不是很满意.我们摸索出一种性能稳定的快速染色法,其试剂配制便捷,染色过程快速,组织色泽艳丽,对比度强,横纹显示清晰.
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浆细胞型Castleman病一例
患者,女性,20岁,发现蛋白尿5?d入院。7年前无意中触及左腹部一包块,无异常不适。平素多汗、刷牙时易出血,18岁月经初潮,余无特殊病史。入院时查体:中度消瘦,重度贫血貌,肝右肋缘下5.3 cm,上界无下移,脾左肋缘下1.8 cm,均质地软、边缘齐、表面光滑、无叩痛,左上腹触及一约6.0?cm×5.0 cm包块,质中、边缘清楚、表面光滑、可移动、无压叩痛、叩诊呈实音。实验室检查:Hb 58 g/L,血细胞比容(HCT)0.217,BPC 363× 109/L,尿蛋白定量(PRO) 5.17?g/24h、尿溶菌酶(LYSO) 15.37 mg/L、尿本-周蛋白和冷球蛋白反复检查均为阴性,凝血酶原时间(PT)30.3 s,血清总蛋白117 g/L,白蛋白29 g/L,球蛋白88?g/L,其中IgG 68?g/L,IgA 6.46 g/L,IgM 2.78 g/L,蛋白电泳示白蛋白0.222,球蛋白α1 0.025,α2 0.083,β 0.100,γ 0.570,未见M带。电解质、肝肾功能均在正常范围。B超及CT示肝脾均质性肿大,无占位病变,左上腹实性占位包块。2次骨髓象示浆细胞系升高(0.056及0.070)。全身放射性核素扫描未见溶骨现象。行肾穿刺活检病理检查,光镜下共见16个肾小球;系膜区细颗粒状蛋白物质沉积,经高锰酸钾氧化刚果红染色阴性,系膜细胞弥漫增生,系膜基质中度增多,毛细血管部分狭窄。经免疫酶标检测发现系膜区IgG颗粒样沉积(+),IgM颗粒样沉积(++),C3颗粒样沉积(+++)。电镜下系膜增生伴电子致密物沉积,系膜区有排列紊乱的8~10 nm大小淀粉样纤维。病理诊断:肾淀粉样变性伴中度弥漫性系膜增生。剖腹探查示:肝脾均匀肿大、表面光滑,空肠起始处近屈氏韧带肠系膜上有一约 7.0 cm×6.0 cm×5.0 cm包块,包膜完整、实性、质地均匀、血供丰富、无粘连,无其他淋巴结肿大。摘除包块行病理检查示:肠系膜血管滤泡性增生性巨淋巴结(Castleman病,浆细胞型)。术后1个月患者血小板计数、PT正常;2个月Hb 116?g/L,HCT 0.383,尿PRO阴性、LYSO正常,血清白蛋白41?g/L,球蛋白32 g/L,骨髓象正常。
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火焰原子吸收法测定水中总铬的影响因素探讨
测定水中总铬的国标方法为高锰酸钾氧化-二苯碳酰二肼分光光度法[1],采用火焰原子吸收法测定报道较少.火焰原子吸收法具有灵敏度高,操作简便、快速、稳定性好和精密度高等优点,但以空气-乙炔火焰原子吸收法测定水中总铬时,共存元素的干扰十分严重,且受火焰状态和燃烧器高度的影响很大.
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甲醛-I-高锰酸钾尿中碘化学发光法测定
碘是人体生命活动中重要的微量元素之一,已有不少有关碘离子测定的报道.本文利用在酸性介质中,甲醛可以大大增强高锰酸钾氧化碘离子产生的化学发光原理,进行尿液中碘离子的测定,探讨酸度、反应物浓度、干扰离子等因素对分析结果的影响,获得了令人满意的结果.该法具有仪器设备简单、操作方便快捷、选择性好、线性范围宽等优点,亦可借鉴于其它样品中碘含量的测定.
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2,4-二氟苯甲酸合成的改进
2,4-二氟苯甲酸(1)是抗真菌药氟康唑的重要中间体,一般以间二硝基苯[1]为原料,经还原、重氮化、氟代、酰化、氧化等5步反应制备.此法反应步骤较长,重氮化反应需低温控制,操作难度大.我们以2,4-二硝基甲苯为原料,经高锰酸钾氧化得2,4-二硝基苯甲酸(2),氟代后制得1(图1).本法操作简便,成本低廉,收率较好(总收率49%),是一条较好的工艺路线.
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胡椒基酸合成新方法
胡椒基酸(1)是抗菌药西洛沙星、米诺沙星,心血管药物奥索利酸以及抗癌药物、强心剂的重要中间体[1~3],还可用于香料、染料、特种纺织品的生产 [4].其经典的合成方法[5,6]是以黄樟素(2)为原料, 经碱性双键转位得异黄樟素,经臭氧或重铬酸钾氧化得胡椒醛,再用高锰酸钾氧化得1.反应条件苛刻,总收率低,成本较高.本文以2为原料,经催化氢化得二氢黄樟素(3)[7],再经高锰酸钾氧化制得1(图1),收率可达90%.本法简化了工艺,降低成本,现尚未见文献报道.
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苯甲酰甲酸及其酯的合成
苯甲酰甲酸(1)又称苯乙酮酸,是防治脑血栓和高血压药物的中间体[1~3]。其甲(乙)酯是治疗胃和十二指肠溃疡药物奥芬溴铵的中间体[4]。1属α-酮酸,容易氧化、脱羧、脱酮基,制取比较困难。文献报道的合成方法有扁桃酸微生物发酵氧化或苯乙炔经二氧化硒氧化[5,6]。也有用乙酸钯催化碘苯双羰基化反应制备的报道[7]。本文参考有关文献[8],应用相转移催化技术,在碱性条件下,用高锰酸钾氧化苯乙烯合成1,产率较好。酯化反应如用硫酸作催化剂,容易造成1的分解,降低产率。本文用TiO2/SO2-4固体超强酸(制法见文献[9])作催化剂合成1的甲酯、乙酯,操作简单,产率好。
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盐中总碘含量测定方法--高锰酸钾氧化滴定法
溴水氧化滴定法是盐中总碘含量测定的经典方法,其测定结果准确可靠,但由于溴水极易挥发,操作须在通风橱内进行,污染环境,危害健康.
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神经纤维快速染色改良法
神经纤维的染色方法很多,技术操作也比较复杂,特别是镀银法,若操作不当,不易成功.本染色法是在镀银法原理的基础上,加以改进而建立的神经纤维快速染色法.此方法快捷简便易行可靠,光镜下的神经纤维分布和形态改变清晰可见.本染色法目前尚无文献报导.1.材料和方法 1.1 材料:大白鼠周围神经、腓神经.主要试剂:硝酸银.由北京化工厂提供.1.2 方法:1)所需试剂①0.5%酸性高锰酸钾水溶液50ml,0.5%硫酸水溶液50ml,临用前等量混合.②2.5%铁明矾水溶液:硫酸铁胺2.5g,蒸馏水 100ml.③胺银溶液:以四张组织切片的用量为例.取浓氨水2滴,滴入洁净的50m l烧杯中,然后逐滴向氨水中滴加10%硝酸银,边滴边摇动烧杯,当胺银混合液微呈乳白色的半透明状态下即可使用,无需滤过.2)染色步骤:①周围神经取材后经10%甲醛固定 3 ~4天,制备石蜡切片(8μm);②切片脱蜡,入流水;③酸化高锰酸钾氧化10min ,流水洗三次;2.5%草酸漂白2min,流水洗三次;④2.5%铁明矾媒染5min ,流水洗,蒸馏水洗二次;⑤用滴管将胺银滴加在组织片上,约5~8sec,弃去染液, 将组织切片立即放入10%甲醛溶液中还原10~15sec,在光镜下见组织切片呈棕色为止,流水洗三次;⑥放入0.2%氯化金液中分化1~2min,流水洗;⑦0.2%亮绿复染,流水洗二次;⑧脱水透明,中性树胶封固.2.结果神经纤维呈黑色,胶原纤维淡绿色,背景绿色.3.讨论神经纤维的嗜银性很强,经高锰酸钾氧化后,再经铁明矾媒染剂促染,使胺银液重大银盐沉积于神经纤维处,经过还原剂作用,将银离子还原为黑色的金属银而显现出来. 用氯化金将神经纤维中的未反应出来的银盐除掉.神经纤维镀银法成败的关键是胺银液的配制是否恰到好处.通常配制方式都是向20%硝酸银液中滴加氢氧化铵,形成沉淀,再加氢氧化铵使之刚溶即停,这对经验不足的操作者如果掌握不准,染色就会失败.本染色法与其它神经纤维的镀银法所不同之处,就是胺银溶液的配制方式加以省略和简化.与之相反的是向浓氨水中加硝酸银,这样更便于掌握和操作.这种染色法的优点是操作简单容易掌握,省药品,省时间,光镜下的神经纤维清晰可见,层次分明,没有多余的银颗粒污染现象.染色效果优于其它的神经纤维染色法.注意事项:所用染色材料必须洁净;当组织再还原中呈棕黄色即可.
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过氧乙酸自然蒸发法与福尔马林氧化熏蒸法消毒有效时限的探讨
利用熏箱对不能蒸煮或浸泡的物品进行消毒,目前多数医院采用福尔马林+高锰酸钾氧化熏蒸法或过氧乙酸自然蒸发法[1].但在实际工作中,用以上两种方法均存在药物剂量的掌握、每日开启消毒容器的次数与消毒效果的问题.为此,我们用不同剂量的过氧乙酸自然蒸发法,与福尔马林氧化熏蒸法的灭菌效果及有效消毒时限进行了研究.