首页 > 文献资料
-
类固醇合成急性调节蛋白基因表达的调控元件
类固醇合成急性调节蛋白(StAR)在胆固醇转化为类固醇激素的过程中起重要作用.StAR基因在转录水平受到多种转录因子的调控,它们相互作用,共同影响着StAR的表达及类固醇激素的合成.
关键词: 类固醇合成急性调节蛋白 启动子 调控元件 -
基于内插马尔可夫模型的Gibbs改进算法识别调控元件
不同阶数插值形式的马尔可夫内插模型,可以表示在一个DNA序列中相邻核苷酸之间的前后关系的变化.本研究将内插马尔可夫模型引入Gibbs采样算法,识别基因上游序列中的调控元件.对模拟序列和10组来源于文献的酵母基因序列的测试结果表明,改进后的算法在识别保守性差的调控元件和抗噪声能力方面均优于传统的Gibbs采样算法.
-
Tet基因表达调控系统及其应用
基因治疗中导入基因表达时间和水平的调控极其重要.哺乳动物细胞中用到的诱导型载体主要与启动子有关,如热休克蛋白(Hsp)启动子可在高温下被诱导,还有重金属、糖皮质激素诱导的启动子等,但这些系统均存在着诱导表达不具备特异性、系统处于关闭状态时表达有遗漏以及诱导剂本身具有毒性会对细胞造成损伤等缺陷.如果设置一种导入基因的"开关",能调控基因的表达,则有望大幅度提高基因治疗在临床应用的安全性.1992年,Gossen和Bujard[1]首次成功地利用原核基因调控元件构建了真核细胞基因表达调控系统--四环素基因表达调控系统(Tet系统),该系统能通过在培养基中加入或者去除四环素或其衍生物(如强力霉素)诱导或抑制所感兴趣基因的表达,故被广泛应用于基因表达调控、蛋白质功能和基因功能研究以及基因治疗研究中.本文就近年来Tet系统的研究进展等做一综述.
-
基于生物信息学分析的人ID4基因启动子表达载体的构建及鉴定
目的:基于生物信息学分析构建人ID4基因启动子表达载体,以其作为研究ID4基因启动子表达调控分析的工作基础.方法:在分析人ID4基因启动子结构和调控元件的基础上,据UCSC基因组生物信息学中人ID4基因转录起始点(TSS)上游启动子区-643 bp及5'非翻译区(5'-UTR)+164 bp序列设计并合成引物,进行PCR扩增;以PCR产物作为模板经巢式PCR扩增了TSS上游启动子区-621 bp片段,将PCR产物回收、纯化后再连接到pGEM-T Easy载体上并转化至DH5α感受态大肠杆菌中构建成pGEM-T Easy-人ID4基因启动子重组质粒.转化产物经半巢式PCR及酶切鉴定,对得到的阳性克隆进行测序.结果与结论:成功构建出含有糖皮质激素受体、cAMP结合蛋白及雌激素受体反应调控元件序列的人ID4基因启动子表达载体.该表达载体的构建为进一步研究人ID4基因的启动子活性及表达调控奠定了基础.
-
基因回路调控元件的研究进展
启动子、终止子、核糖开关及核糖体作用相关序列等分别在转录、翻译以及翻译后修饰等不同水平参与基因表达调控,实现目的 基因的精确表达.它们作为基因调控元件广泛用于基因回路的构建,在基因组工程和代谢工程中发挥了重要作用.该文简要概括了基因回路中这些常见调控元件的结构特征、作用机制及其改构方式,阐述了天然及人造基因调控元件在代谢途径优化中的作用,并对未来基因回路的构建及应用进行了展望.
-
肝癌基因治疗研究进展
肝癌是常见且死亡率较高的恶性肿瘤之一,我国为肝癌高发国家,每年新发患者在10万以上,死亡率高,生存期短,严重威胁人民健康.在我国以HBV与肝癌发生的关系为显著.肝癌临床上手术切除率低,对放、化疗敏感性差,转移情况普遍,预后极差,迫切需要新的治疗方法[1].近年来随着人们对肝癌分子病理机理研究的不断深入,为正在兴起的肝癌基因治疗提供了理论依据,促进了人们用分子手段治疗肝癌的探索性研究[2].癌基因和抑癌基因是研究癌变分子机制的中心问题,寻找更具特异性和普遍性的肝癌抗原是解决基因治疗靶向性的关键,根据疾病和患者的具体情况选择合适的基因转运系统和调控元件是未来基因治疗的方向[3].
-
微小RNA与消化系统疾病诊治研究
微小RNA(miRNA)是生物体内源产生的小RNA分子,它介导序列互补mRNA断裂或阻抑其翻译合成蛋白质,调控目的基因表达.越来越多的研究表明,miRNA是重要的转录后基因调控元件,其表达直接影响相关编码蛋白基因功能,参与包括消化系统在内的多个系统生理和病理生理过程¨].miRNA有望成为消化系统疾病基因诊断和治疗的新手段,本文就此作一综述.
-
miRNA能够在细胞周期的调控中上调靶mRNA的翻译
AU-rich element(AU富集元件,ARE)是在快速反应性基因中广泛存在的一类转录后调控元件,对mRNA的稳定及其翻译效率起到重要的调控作用.miRNA是一类长度为19~23 bp的小RNA,研究发现其在生命活动的各个环节都发挥着重要的转录后调控作用,通过种子序列的识别作用介导靶mRNA的降解或翻译的抑制.美国哈佛医学研究所分子生物物理与生物化学研究小组在研究ARE的调控作用中发现了miRNA有活化翻译的作用.
-
c-fos原癌基因表达在脑缺血方面的研究进展
原癌基因是细胞内总体遗传物质的组成部分,人们将这类存在于生物正常细胞基因组中的癌基因称为原癌基因.原癌基因c-fos属于核内转录因子的一种,它可以与靶基因的调控元件结合直接调节转录活性.在脑缺血早期,原癌基因c-fos的异常表达对神经细胞具有重大意义.现就c-fos基因在缺血性脑血管疾病方面的研究进展作一综述.
-
紫草LePS-2基因启动子的克隆及序列分析
目的 克隆紫草LePS-2基因的启动子,分析该启动子的调控元件,为研究LePS-2基因的表达调控机制奠定基础.方法 以紫草愈伤组织基因组DNA为模板,利用Genome walking技术扩增LePS-2基因上游启动子序列,将序列提交至PLACE网站对该启动子进行调控元件预测.结果 获得LePS-2基因启动子区域序列1164bp,PLACE软件分析表明,该启动子中存在根特异性元件、暗诱导性元件、激素应答与调节相关元件以及一些转录因子结合位点等.结论 启动子元件ATATT和YTCANTYY可能分别赋予LePS-2表达的根特异性和暗诱导性;另外在LePS-2基因启动区域还发现MJ应答元件TGACG,表明MJ有可能参与对LePS-2的表达调控.
-
DREAM信号通路调控疼痛敏感化的研究进展
近年来通过对下游调控元件拮抗剂调节子(downstream regulatory elementantagonistic modulator,DREAM)基因剔除小鼠的研究发现,在急性疼痛或慢性病理性疼痛等动物模型中,DREAM对疼痛行为的敏感化具有调控作用.存在于脊髓神经细胞中的DREAM是一种新型的Ca2+结合蛋白,是调控前强啡肽基凶表达的转录抑制物[1-3].通过药理学及生物化学分析可知,由于内源性K阿片系统的激活,导致DREAM基因剔除小鼠对疼痛的反应明显减少,同时DREAM的缺乏也可减少机体对炎症性疼痛的反应[4-5].因此,DREAM及其通路的研究成为治疗慢性疼痛的新亮点.
-
IFN-β基因启动子调控区域的分析及IRF-3报告基因的构建
目的对IRF-3的主要靶基因--小鼠IFN-β基因启动子区域进行分析并构建IRF-3报告基因载体.方法将小鼠IFN-β基因启动子全序列以及不同截短片段克隆到无启动子的pGF3basic/enhancer质粒中,以EGFP为报告基因,转染小鼠Raw264.7巨噬细胞系后观察细胞对LPS刺激的反应.结果IFN-β启动子PRD调控区域上游序列、PRDⅠ区,PRDⅡ区和PRDⅣ区缺失后,LPS同样能诱导EGFP报告基因的表达.只保留PRD区及IFN-β启动子核心区的载体转染Raw264.7细胞后,可以在LPS刺激下诱导EGFP报告基因的高表达.结论构建了能检测IRF-3活性的报告基因载体,为进一步研究LPS激活IRF-3的信号转导通路奠定了基础.
-
hBDNF基因在成纤维细胞中的异位表达
将hBDNF全长编码序列插入人I型胶原基因(Colia1)增强子-启动子调节序列之下,构建了含Colia1-BDNF微基因的重组体pSCEPBFCAT, 并转染人胚肌腱成纤维细胞.成功地利用了Colia1基因调控元件介导BDNF基因在成纤维细胞中异位表达,SDS-PAGE显示表达产物分子量为27 kDa,免疫斑点杂交、Elisa和Western杂交证实该表达产物具有BDNF抗原活性.