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急性和慢性EB病毒感染儿童外周血CD8+T细胞活化差异比较
Epstein-Barr(EB)病毒属人疱疹病毒,EB病毒感染与许多恶性增殖性疾病密切相关,是儿科较为常见的病毒感染性疾病[1].CD8+T细胞对EB病毒感染的控制起重要作用[2].本研究旨在探讨不同类型EB病毒感染所引起的机体不同的免疫病理机制,为EB病毒感染研究及治疗提供依据.
关键词： 爱泼斯坦巴尔病毒感染 急性病 慢性病 CD8阳性T淋巴细胞 流式细胞术 聚合酶链反应 儿童 -
肺肿瘤小鼠MDSC、Treg及传统T细胞变化研究
目的：探讨肺肿瘤小鼠骨髓源性抑制细胞（MDSC）、调节性T细胞（Treg）和传统T细胞的变化及机制。方法采用配对设计将20只C57BL/6小鼠随机均分为Lewis肺癌细胞注射组（LLC组）和正常对照组（NC组），LLC组采用皮下注射LLC细胞100μL（1×106）制备肺肿瘤小鼠模型，对照组注射等量生理盐水。待肿瘤形成后取小鼠脾细胞，采用流式细胞仪检测肺肿瘤小鼠MDSC、Treg及CD4+和CD8+T细胞比例和数量变化，膜联蛋白-V（Annexin-Ⅴ）染色检测CD4+和CD8+T细胞凋亡变化，5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）染色检测CD4+和CD8+T细胞增殖变化。结果与NC组相比，LLC组脾脏MDSC比例和数量明显增加，CD4+Foxp3+Treg所占CD4+T细胞比例和数量明显增加，而CD4+和CD8+T细胞所占脾细胞比例和数量明显降低（均P<0.05）。与NC组相比，LLC组CD4+和CD8+T细胞增殖明显降低，同时CD8+T细胞凋亡明显增加（P<0.05）。结论 MDSC和Treg细胞在肺肿瘤小鼠数量增加，同时， MDSC和Treg抑制CD4+和CD8+T细胞增殖，并促进CD8+T细胞凋亡。
关键词： 肺肿瘤 癌 Lewis肺 T淋巴细胞 调节性 CD4阳性T淋巴细胞 CD8阳性T淋巴细胞 细胞增殖 细胞凋亡 骨髓源性抑制细胞 -
WT1特异性CD8+T细胞治疗乳腺癌的实验研究
目的：通过检测Wilms’肿瘤基因1（WT1）特异性CD8+T细胞对乳腺癌细胞的杀伤活性，探讨正常外周血中提取的WT1特异性CD8+T细胞用于治疗乳腺癌的可行性。方法运用流式细胞仪检测20例人白细胞抗原（HLA）-A2血清阳性健康志愿者外周血中WT1特异性CD8+T细胞的浓度，通过WT1/主要组织相容性复合体（MHC）连锁状多聚体磁珠分选WT1特异性CD8+T细胞并进行培养，细胞毒性实验检测WT1特异性CD8+T细胞的功能。结果20例HLA-A2血清阳性健康志愿者外周血中均可检测到WT1特异性CD8+T细胞，12例健康外周血中WT1特异性CD8+T细胞的浓度＞0.5%，其中4例＞1%。WT1/MHC连锁状多聚体磁珠分选后，其浓度明显增加至80%左右。WT1特异性CD8+T细胞可特异性杀伤WT1多肽负载的乳腺癌细胞株。结论健康志愿者外周血中可检测到WT1特异性CD8+T细胞，该细胞可能对乳腺癌细胞具有特异性杀伤作用，提示WT1特异性CD8+T细胞用于乳腺癌过继性免疫治疗的可能性。
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调节性T细胞和CD8+T细胞在恶性黑色素瘤中的表达及其与预后的关系
目的：探讨调节性T细胞（Tregs）和CD8+T细胞在黏膜恶性黑色素瘤和肢端恶性黑色素瘤局部免疫微环境中表达情况的差异，及其与患者预后的关系。方法采用免疫组织化学染色法对58例恶性黑色素瘤组织进行染色，检测Foxp3+Tregs和CD8+T细胞的浸润情况，分析两者与临床病理指标及预后的相关性。结果 Foxp3与CD8+T细胞阳性表达无相关关系。黏膜恶性黑色素瘤组织中Foxp3+Tregs数量明显高于肢端恶性黑色素瘤（t=2.648，P=0.011）；肿瘤直径≥3 cm、有淋巴结转移、有远处转移的恶黑患者Foxp3highTregs相对较高（P＜0.05）。存在溃疡的恶性黑色素瘤患者中，CD8high组所占比例明显高于无溃疡者（33.3%vs 5.9%，P＜0.05）。Foxp3high组的中位无进展生存期（PFS）是12个月，明显低于Foxp3low组（31个月）；CD8high组的中位PFS是25个月，明显高于CD8low组（中位PFS 12个月）；亚组分析显示Foxp3high CD8low组患者中位PFS是7个月，明显低于Foxp3highCD8high组（25个月）、Foxp3lowCD8low组（18个月）以及Foxp3low CD8high组（59个月）。不同肿瘤位置、Foxp3+Treg数量、CD8+T细胞数量、有无远处转移的恶性黑色素瘤患者中位PFS不同。结论 Tregs的数量与恶性黑色素瘤的进展密切相关，黏膜恶性黑色素瘤预后欠佳可能与Tregs浸润有关。
关键词： 黑色素瘤 T淋巴细胞 CD8阳性T淋巴细胞 肿瘤逃逸 预后 -
硬膜外阻滞对妊高征大鼠子宫、胎盘组织CD4+及CD8+T淋巴细胞的影响
目的 观察硬膜外阻滞对妊高征(PIH)大鼠子宫、胎盘组织CD4+、CD8+T淋巴细胞的影响.方法 健康雌性Wistar大鼠,鼠龄3～4 个月,体重230～300 g,40只孕鼠于孕14d时随机分为4组(n=10):对照组(A组)、PIH组(B组)、假手术组(C组)、治疗组(D组).B组、C组、D组采用皮下注射甲基L-精氨酸甲酯的方法制备PIH模型,25mg/次,2次/d,连续7 d;A组相同时点给予等容量生理盐水0.25 ml;C组行硬膜外导管置入术;D组行硬膜外导管置入术,每天由导管注入0.125%布比卡因50 μl,连续7 d.孕22 d时处死大鼠,测定子宫、胎盘组织CD4+、CD8+及CD4+mRNA、CD8+mRNA的表达水平.结果 各组CD4+表达和CD4+mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05);与A组比较,B组、C组CD8+表达降低(P＜0.05);与B组和C组比较,D组CD8+表达和CD8+mRNA表达升高(P＜0.05).结论 硬膜外阻滞可增加PIH大鼠子宫、胎盘组织CD8+T淋巴细胞.
关键词： 麻醉 硬膜外 高血压 妊娠性 CD4阳性T淋巴细胞 CD8阳性T淋巴细胞 -
人类免疫缺陷病毒1感染者外周血CD8+T淋巴细胞表面CD38和人类白细胞抗原DR表达的研究
目的 探索人类免疫缺陷病毒(HIV)-1感染者外周血CD8+T淋巴细胞表面CD38(CD38+/CD8+)、人类白细胞抗原DR (HLA-DR) (HLA-DR+/CD8+)表达水平的变化及其与疾病进展的关系.方法 选取2012年5-8月河南省淮阳县中医院、西平县中医院、驻马店驿城区中医院、泌阳县中医院、博爱县中医院收治的经河南省疾病预防控制中心确诊的HIV-1感染者409例为HIV-1感染组,河南中医学院第一附属医院体检健康者28例为对照组.采用流式细胞仪检测外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞计数和百分比,计算CD4+/CD8+,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测血浆病毒载量,应用全血染色、流式细胞术检测HIV-1感染者CD38+/CD8+、HLA-DR+/CD8+.根据CD4+T淋巴细胞计数分为4组:＜200 cells/μl组87例、200 ～＜ 350 cells/μl组119例、350 ～＜ 500 cells/μl组99例、≥500 cells/μl组104例,比较不同CD4+T淋巴细胞计数者间CD38 +/CD8+、HLA-DR+/CD8+.结果 HIV-1感染组CD4+T淋巴细胞计数、百分比低于对照组,CD8+T淋巴细胞计数、百分比高于对照组(P ＜0.001);HIV-1感染组CD4+/CD8+低于对照组(P＜0.001).HIV-1感染者血浆病毒载量为(38 415±1 067) copies/ml.Pearson相关分析表明,HIV-1感染者CD4+T淋巴细胞计数与血浆病毒载量呈负相关(r=-0.246,P＜0.001);CD38+/CD8+与CD4+T淋巴细胞计数呈负相关(r=-0.260,P＜0.001);CD38 +/CD8+与血浆病毒载量呈正相关(r=0.409,P＜0.001);HLA-DR+/CD8+与CD4+T淋巴细胞计数呈负相关(r=-0.225,P＜0.001);HLA-DR +/CD8+与血浆病毒载量呈正相关(r =0.378,P＜0.001).200 ～＜350 cells/μl组、350～＜500 cells/μl组、≥500 cells/μl组CD38+/CD8+、HLA-DR +/CD8+低于＜200 cells/μl组(P＜0.05).结论 HIV-1感染者CD4+T淋巴细胞计数、百分比降低,CD8+T淋巴细胞计数、百分比升高,CD38 +/CD8+、HLA-DR+/CD8+与血浆病毒载量呈正相关.CD4+T淋巴细胞计数、CD8+T淋巴细胞计数结合CD8+T淋巴细胞的活化水平可以更全面地反映HIV-1感染者免疫功能受损的程度,HIV-1感染后CD38 +/CD8+、HLA-DR +/CD8+的变化可作为评价疾病进展的新指标.
关键词： HIV CD4阳性T淋巴细胞 CD8阳性T淋巴细胞 HLA抗原 -
浙江省丽水市强直性脊柱炎患者外周血CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞程序性死亡因子1的表达及意义研究
目的：检测浙江省丽水市强直性脊柱炎（AS）患者外周血 CD4+ T 淋巴细胞、CD8+ T 淋巴细胞程序性死亡因子1（PD-1）阳性率，分析其与疾病活动性临床指标的关系，初步探讨其在 AS 发生发展中的作用。方法收集2013年12月—2014年4月浙江省丽水市中心医院收治的 AS 患者35例，根据 Bath 强直性脊柱炎活动指数（BASDAI）分为活动组（BASDAI >4）21例和稳定组（BASDAI≤4）14例，另选取同时期本院体检健康者20例为对照组。应用流式细胞术检测外周血 CD4+ T 淋巴细胞、CD8+ T 淋巴细胞 PD-1阳性率，分析 AS 患者外周血 CD4+ T 淋巴细胞、CD8+T 淋巴细胞 PD-1阳性率与疾病活动性临床指标的相关性。结果活动组 CD4+ T 淋巴细胞 PD-1阳性率高于对照组和稳定组（P <0.05）；稳定组和活动组 CD8+ T 淋巴细胞 PD-1阳性率高于对照组（P <0.05）。AS 患者外周血 CD4+ T 淋巴细胞 PD-1阳性率与 CD4+ T 淋巴细胞百分比、CD4+/ CD8+呈负相关（P <0.05），与 CD8+ T 淋巴细胞百分比、BASDAI、红细胞沉降率（ESR）呈正相关（P <0.05），与 C 反应蛋白（CRP）无直线相关关系（ P >0.05）。AS 患者外周血CD8+ T 淋巴细胞 PD-1阳性率与 CD4+ T 淋巴细胞百分比、CD8+ T 淋巴细胞百分比、CD4+/ CD8+、BASDAI、ESR、CRP无直线相关关系（P >0.05）。结论浙江省丽水市 AS 患者外周血 CD4+ T 淋巴细胞、CD8+ T 淋巴细胞 PD-1表达增加， CD4+ T 淋巴细胞 PD-1阳性率在 AS 活动期明显增加，与疾病的炎性反应指标相关，可能在 AS 的免疫病理中起重要作用。
关键词： 脊柱炎 强直性 CD4阳性T淋巴细胞 CD8阳性T淋巴细胞 程序性死亡因子1 -
反应性关节炎患者关节液T细胞克隆研究
目的比较来自反应性关节炎(ReA)患者的关节液的CD8+T细胞克隆、CD4+T细胞克隆和γδ+T细胞克隆的细胞因子表达谱,探讨ReA的免疫机制.方法用含56种细胞因子基因的cDNA微阵列筛选来自3个ReA患者的关节液的3个CD8+T细胞克隆、3个CD4+T细胞克隆和3个γδ+T细胞克隆的差异表达基因.结果微阵列研究显示,CD8+和CD4+T细胞克隆中有编码干扰素(IFN)-γ和肿瘤坏死因子(TNF)-α转录物的表达.15个微阵列试验中有14个可以用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术证实有这些细胞因子的表达.CD4+细胞持续表达淋巴毒素-α(LT-α)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF).但是γδ+T细胞主要表达转化生长因子(TGF)-β2和GM-CSF.结论CD8+和CD4+T细胞克隆的细胞因子表达谱主要为Th1,而γδ+T细胞较少表达促炎症细胞因子,似为Th3模式.ReA患者关节液的T淋巴细胞克隆显示了不同的细胞因子表达谱,它反映了不同的T细胞在发病机制中有不同的作用.
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Notch信号通路对慢性丙型肝炎患者CD8+T淋巴细胞功能的影响
目的 观察Notch信号通路对慢性丙型肝炎患者CD8+T淋巴细胞功能的影响,初步阐释Notch信号通路在慢性丙型肝炎发病中的作用.方法 收集2016年1月-8月在陕西省人民医院就诊的慢性丙型肝炎初治患者38例和健康志愿者17例,分选CD8+T淋巴细胞,应用实时定量PCR法检测CD8+T淋巴细胞中Notch1和Notch2 mRNA的表达水平.分别应用直接接触培养系统和间接接触培养系统将从HLA-A2限制性丙型肝炎患者分选的CD8+T淋巴细胞与HCV感染的Huh7.5细胞共培养,加入Notch信号通路抑制剂DAPT,通过检测乳酸脱氢酶和细胞因子水平分析CD8+T淋巴细胞的细胞毒性和非细胞毒性功能的变化.2组间计量资料的比较采用t检验.结果 Notch1和Notch2 mRNA在慢性丙型肝炎患者CD8+T淋巴细胞中的表达水平较健康志愿者均显著升高,分别升高约10倍和4倍,差异均有统计学意义(t值分别为6.63、18.88,P值分别为0.003、＜0.001).抑制Notch信号通路可增加直接接触培养系统中细胞死亡的比例[(26.41±4.76)％vs (13.65±4.65)％,t=3.32,P=0.029];但抑制Notch信号通路对间接接触培养细胞中CD8+T淋巴细胞毒性无明显影响.抑制Notch信号通路后,IFNγ的表达在直接接触培养系统[(52.19±12.38)pg/ml vs(18.62±5.66)pg/ml,t =4.27,P=0.013]和间接接触培养系统[(18.86±3.09) pg/ml vs(5.52±2.52) pg/ml,t =5.79,P=0.004]中均显著升高.TNF α的表达在抑制Notch信号通路后仅在直接接触培养系统中显著升高[(1296.0±293.3) pg/ml vs(585.3±32.62) pg/ml,t=4.17,P=0.014],而在间接接触培养系统中无明显变化[(297.3±175.4) pg/ml vs(273.7±105.9)pg/ml,t =0.20,P=0.851].结论 抑制Notch信号通路可增强慢性丙型肝炎患者中CD8+T淋巴细胞的细胞杀伤和非细胞杀伤功能,Notch信号通路在慢性HCV感染中可能通过抑制CD8+T淋巴细胞功能发挥诱导免疫耐受的作用.
关键词： 肝炎 丙型 慢性 CD8阳性T淋巴细胞 信号传导 -
Y链细胞因子对慢性乙型肝炎患者CD8+T细胞上TIM-3表达的调节
目的 通过检测T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子(TIM-3)在慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(PBMC)CD8+T细胞上的表达,探讨共用γ链细胞因子对CHB患者CD8+T细胞上TIM-3表达的影响.方法 选取2014年1-5月在第四军医大学唐都医院传染科就诊的CHB初治患者15例,以及健康体检者8例.抽取两组全血,利用Ficoll密度梯度离心法分离出PBMC.分别给予γ链细胞因子白细胞介素(IL)2、IL-7、IL-15、IL-21和人抗CD3/CD28刺激,未刺激孔作为阴性对照.培养4d后,用单克隆抗体染色,采用流式细胞仪检测CD8+T细胞上TIM-3的表达情况.计量资料比较采用成组t检验.结果 与未刺激组相比,TIM-3在CD8+T细胞上表达如下:人抗CD3/CD28和IL-2、IL-15、IL-7刺激组显著升高,分别为(9.629 ±9.916)％,P=0.000 1;(3.817 ±2.694)％,P=0.000 6;(5.772±4.732)％,P=0.005 4;(3.560 ±2.045)％,P=0.030 2.IL-21刺激组表达虽有所增加,为(2.503 ±2.117)％,但差异无统计学意义,P=0.934 l.结论 人抗CD3/CD28、γ链细胞因子中的IL-2、IL-7和IL-15都能够有效上调TIM-3在CHB患者CD8+T细胞上的表达,提示通过抑制它们不仅可以下调TIM-3的表达,而且可能会增强CHB患者体内CD8+T细胞的杀伤作用.
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细胞免疫指标与溃疡性结肠炎严重程度的关系
背景:CD4、CD8阳性T淋巴细胞和可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)作为细胞免疫的主要指标被认为与溃疡性结肠炎(UC)的严重程度有关,但其相关关系各学者意见不一.目的:观察外周血CD4、CD8阳性T淋巴细胞和SIL-2R水平与UC严重程度的关系及其在疾病缓解后的变化情况,以评估上述指标在UC临床诊治中的价值.方法:测定24例活动期UC患者的外周血CD4、CD8阳性T淋巴细胞和SIL-2R水平,其中10例患者的SIL-2R水平作治疗前后比较.结果:活动期UC患者的SIL-2R水平显著高于健康对照组(P＜0.05),且与疾病严重程度有关;CD4、CD8阳性T淋巴细胞水平则与健康对照组无显著差异,与疾病严重程度亦无关.经类固醇激素治疗症状缓解后,患者的SIL-2R水平显著下降(P＜0.05).结论:外周血SIL-2R水平与UC的严重程度和缓解密切相关,CD4、CD8阳性T淋巴细胞水平则无参考价值.
关键词： CD4阳性T淋巴细胞 CD8阳性T淋巴细胞 受体 白细胞介素2 结肠炎 溃疡性 -
炎症性肠病患者T淋巴细胞亚群的改变及临床意义
目的:探讨炎症性肠病(IBD)患者外周血T淋巴细胞亚群的变化特点及临床意义.方法:对临床确诊的18例溃疡性结肠炎(UC)和9例Crohn病(CD)患者,于疾病的不同时期用荧光单克隆抗体标记-流式细胞仪技术检测其外周血T淋巴细胞亚群的变化,并结合临床和病理资料进行综合分析.结果:UC患者缓解期时的CD3+、CD8+和自然杀伤(NK)细胞与对照组比较无显著差异;但活动期时,其CD8+和NK细胞数明显下降(CD8+:活动期:23.1%±1.0%,对照组:31.3%±1.2%,P＜0.05;NK:活动期:9.8%±1.0%,对照组:15.1%±1.1%,P＜0.01),CD4+/CDs+比值上升(活动期:1.8±0.1,对照组:1.4±0.02,P＜0.05);活动期CD患者的CD8+细胞和CD4+/CD8+比值(43.0%±4 4%和0.6±0.1)变化却与UC组活动期呈相反趋势(P＜0.01).结论:T淋巴细胞亚群改变在IBD的发病机制中可能起重要作用;UC和CD的细胞免疫机制不同;外周血CD4+、CD8+、NK细胞和CD4+/CD8+比值可作为检测UC病情变化和疗效考核的敏感指标.
关键词： 结肠炎 溃疡性 T淋巴细胞亚群 CD4阳性T淋巴细胞 CD8阳性T淋巴细胞 -
程序性死亡分子-1及其配体在肺结核患者外周血淋巴细胞表面的表达
目的 了解肺结核患者外周血淋巴细胞表面程序性死亡分子-1(PD-1)及其配体(PD-L1)表达的特性.方法 以肺结核患者27例,肺结核合并细菌或真菌感染41例,肺结核合并糖尿病患者9例,健康对照者29名作为研究对象.应用流式细胞术检测研究对象外周血淋巴细胞和单核细胞表面PD-1/PDL1的表达水平,两样本均数比较采用t检验.结果 肺结核、肺结核合并感染及肺结核合并糖尿病患者外周血中CD4+ CD25+T淋巴细胞、CD4+CD25highT淋巴细胞均明显高于健康对照者(t值分别为4.892、4.635、4.974,5.407、4.660和5.279;均P＜0.01);且CD8+ T淋巴细胞表面均高表达PD-1,与健康对照者相比,差异有统计学意义(t值分别为6.392、8.249和7.072,均P＜0.01).肺结核、肺结核合并感染及肺结核合并糖尿病患者外周血单核细胞表面PD-L1的表达量分别为(42.51±7.54)％、(49.42±6.29)％和(48.46±14.58)％,与健康对照者(17.91±3.03)％相比,差异有统计学意义(t值分别为5.168、6.854和5.665,均P＜0.01);外周血B淋巴细胞表面PD-L1的表达量分别为(51.51±7.32)％、(50.85±7.09)％和(55.66±14.29)％,与健康对照者(40.11±4.25)％相比,差异有统计学意义(t值分别为2.562、2.046和2.766,均P＜0.05).结论 PD-1/PD-L1抑制途径可能与肺结核及其合并症的发生密切相关,参与调节减弱抗结核与抗感染免疫反应过程.
关键词： 结核 肺 配体 CD8阳性T淋巴细胞 细胞凋亡 CD4阳性T淋巴细胞 -
乙型肝炎病毒特异性CD8+T淋巴细胞表达T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3和程序性死亡受体-1的水平及其与肝脏炎症活动度的相关性
目的 评价慢性HBV感染者外周血单个核细胞(PBMC)和HBV特异性CD8+T淋巴细胞表达T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子(Tim)-3和程序性死亡受体(PD)-1的水平及其与肝脏炎症活动度的相关性.方法 中山大学附属第三医院感染科住院和门诊就诊的160例慢性HBV感染者,包括慢性肝炎轻中度63例,重度31例,慢加急性肝功能衰竭(ACLF) 55例,非活动性HBsAg携带者11例.另选取20名健康体检者作为对照组.实时定量PCR检测HBV DNA水平；HBV血清学标志物采用ELISA法检测；流式细胞仪检测人白细胞抗原(HLA)-A2、外周血中Tim-3和PD-1阳性的PBMC和HBV特异性CD8+T淋巴细胞数量.比较不同临床类型患者Tim-3和PD-1阳性和共阳性的PBMC和HBV特异性CD8+T淋巴细胞数量的差异及其与常用评估炎症活动度指标的相关性.正态分布的计量资料的组间比较采用方差分析,非正态分布的计量资料采用Kruskal-Wallis检验；Spearman相关分析用于评估Tim-3/PD-1表达水平与炎症活动度指标的相关性.结果 160例患者外周血PBMC中Tim-3/PD-1阳性比例在ACLF组(0.25％)、慢性肝炎重度(0.24％)和轻中度组(0.13％),明显高于健康对照组(0.03％,P值分别为0.0049,0.0025和0.0006),Tim-3/PD-1阴性比例则低于健康对照组(P=0.0000),而非活动性HBsAg携带者组(0.10％)与健康对照组(0.03％)间差异无统计学意义(P=0.28).160例患者中有78例为HLA-A2阳性,HBV特异性CD8+T淋巴细胞Tim-3/PD-1阳性比例在ACLF组和慢性肝炎重度组分别为68.72％±17.21％和59.66％±19.25％,明显高于非活动性HBsAg携带者组的33.93％±10.80％(P值分别为0.0000和0.0054)；Tim-3/PD-1阴性比例ACLF组为2.80％,低于非活动性HBsAg携带者组的27.24％(P=0.0004).HBV特异性CD8+T淋巴细胞的Tim-3/PD-1阳性比例与ALT(r=0.26,P=0.022)、AST (r=0.28,P=0.012)及TBil(r=0.36,P=0.001)呈正相关.HBV特异性CD8+T淋巴细胞的Tim-3/PD-1阳性比例与Alb呈负相关(r=-0.35,P=0.002),在ACLF患者中与凝血酶原国际标准化比率(INR,r=0.34,P=0.045)及终末期肝病模型(MELD)分值(r=0.43,P=0.027)呈正相关.结论 慢性乙型肝炎患者外周血PBMC和HBV特异性CD8+T淋巴细胞Tim-3和PD-1共表达水平明显上调,且共表达水平与肝脏炎症活动度有一定的相关性,提示Tim-3和PD-1可能参与慢性乙型肝炎活动和肝功能衰竭的发生机制.
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人类免疫缺陷病毒-1单纯及合并丙型肝炎病毒感染中人类免疫缺陷病毒-1特异性T淋巴细胞免疫应答
目的 了解单纯感染HIV-1及合并感染HCV时HIV-1特异性T淋巴细胞免疫应答的特点.方法 单纯HIV-1感染者26例和HIV-1/HCV合并感染者23例,采用免疫磁珠分选技术从外周血单个核细胞(PBMC)中分选出CD4+T淋巴细胞及CD8+T淋巴细胞,采用酶联免疫斑点测定(ELISPOT),以HIV-1 P24编码区的氨基酸序列人工合成12个重叠肽段组成的肽段库作为特异性抗原表位,测定CD4-T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞及PBMC的IFN-γ分泌细胞频数；实时荧光定量PCR检测HIV-1 RNA.组间比较采用单因素方差分析及Mann-WhitneyU检验,Spearman 评价组间相关性.结果 单纯HIV-1感染者的HIV-1抗原特异性CD4+T淋巴细胞中位数为25斑点形成细胞(SFC)/106细胞,显著低于CD8+T淋巴细胞的38 SFC/106细胞(F=4.592,P-0.037)及PBMC的53 SFC/106细胞(F=5.436,P=0.025).HIV-1/HCV合并感染者的HIV-1抗原特异性CD4+T淋巴细胞(中位数为5 SFC/106细胞,Z=-2.432,P=0.015)、CD8+T淋巴细胞(中位数为5 SFC/106细胞,Z=-1.996,P—0.046)及PBMC(中位数为10 SFC/106细胞,Z=-2.306,P-0.021)的应答频数显著低于单纯HIV-1感染者.结论 在HIV-1感染中,CD4+T淋巴细胞能对HIV-1产生一定的特异性免疫应答,但是其强度弱于CD8+T淋巴细胞；合并HCV感染可能使HIV-1感染者的HIV-1特异性T淋巴细胞应答强度下调.
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结核性胸膜炎患者结核特异性T淋巴细胞的免疫应答及其迁徙作用
目的 比较结核性胸膜炎患者外周血和胸腔积液中结核特异性T淋巴细胞的免疫反应.方法 收集2012年10月至2013年4月在无锡市第五人民医院住院的结核性胸膜炎初治患者12例.同时采集其外周血和胸腔积液,细胞内细胞因子染色和流式细胞术检测外周血和胸腔积液中CD4+ IFN-γ+T淋巴细胞和CD8+ IFN-γ+T淋巴细胞的比例.数据分析采用非参数MannWhitney检验和配对秩和检验.结果 入选患者外周血分泌IFN-γ的CD4+T淋巴细胞占CD4+T淋巴细胞总数的中位数为0.91％,而胸腔积液中则达3.63％,显著高于外周血,差异有统计学意义(U=17.00,P=0.0017).进一步的配对秩和检验分析亦显示,胸腔积液中分泌IFN-γ的CD4+T淋巴细胞比例与外周血相比有显著的升高趋势(P=0.0015);而CD8+T淋巴细胞则无此变化趋势(P=0.9219).结论 在结核性胸膜炎的发病过程中,结核特异性CD4+T淋巴细胞从外周血迁徙至胸腔,在病变局部发挥抗结核免疫作用.
关键词： 结核 胸膜 胸腔积液 干扰素Ⅱ型 CD4阳性T淋巴细胞 CD8阳性T淋巴细胞 -
新疆甲型H1N1流行性感冒住院患者临床特征及并发心肌损害分析
目的 探讨新疆甲型H1N1流行性感冒(流感)流行期间住院患者临床特征及心肌损害的特点.方法 回顾性收集2009年8月至2010年1月新疆医科大学第一附属医院和新疆各地收治的确诊为甲型H1N1流感病例的资料.计量资料采用t检验,计数资料用卡方检验.结果 258例甲型H1N1流感患者中,普通型164例.重症型94例,其临床特点以发热、咳嗽、咳痰、全身肌肉关节酸痛、咽痛等为主.94例重症型表现为高热、呼吸困难、紫绀、低氧血症、双侧肺炎等,死亡22例,病死率为23.4%;主要死因为呼吸衰竭并多器官功能衰竭或心功能衰竭.76%患者伴有各种慢性疾病,15例妊娠者中有12例发展为重症型.与普通型比较,有基础疾病的患者病情重,重症型患者心电图、血WBC、血糖、AST、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶MB、α羟丁酸脱氢酶和乳酸脱氢酶等异常比例高,重症患者CD4+/CD8+T淋巴细胞比值更低(1.23±0.56比0.99±0.53,t=3.543,P=0.039).结论 新疆甲型H1N1流感重症型患者原有慢性疾病、妊娠、心肌酶与心电图同时异常和CD4+/CD8+T淋巴细胞比值降低者所占比例更多.
关键词： 流感 人 流感病毒A型 H1N1亚型 慢性病 妊娠 肌酸激酶 心电描记术 CD4阳性T淋巴细胞 CD8阳性T淋巴细胞 -
人类免疫缺陷病毒感染者恒定型自然杀伤性T淋巴细胞的表达意义
目的 探讨HIV感染者外周血恒定型自然杀伤性T细胞(invariant nature killer T,iNKT)表达水平的变化.方法 选择2016年6月至2017年7月就诊的HIV感染者101例作为研究对象,其中无症状期52例,艾滋病期49例.采用流式细胞仪检测外周血iNKT、CD4+T淋巴细胞 、CD8+T淋巴细胞,并分析与HIV RNA间的关系.以健康人群12名作为健康对照组.统计学处理采用t检验或方差分析 、秩和检验 、χ2检验或Fisher确切概率法.结果 HIV感染无症状期 、艾滋病期 、健康人群外周血iNKT分别为0.135％(0.066％,0.228％)、0.058％(0.034％,0.100％)和0.385％(0.205％,0.600％),差异有统计学意义(Z=40.113,P<0.01);CD4+T淋巴细胞分别为(340.82±119.26)、(72.73±61.84)和(555.17±229.43)个/μL,差异有统计学意义(t=113.79,P<0.01);CD8+T淋巴细胞分别为(842.29±423.68)、(540.43±257.85)和(875.92±516.45)个/μL,差异有统计学意义(t=9.423,P<0.01);CD4+/CD8+分别为0.490(0.240,0.695)、0.120(0.030,0.210)和0.600(0.475,0.895),差异有统计学意义(Z=53.603,P<0.01).iNKT在是否合并HBV、肺孢子菌肺炎 、口腔真菌感染 、梅毒螺旋体 、潜伏性结核 、EB病毒感染患者之间差异无统计学意义(Z值分别为0.244、2.325、2.393、0.168、1.183和0.454,均P>0.05).HIV感染者外周血iNKT与CD4+T淋巴细胞和CD4+/CD8+有相关性(r值分别为0.513和0.261,均P<0.01);与CD8+T淋巴细胞无相关性(r=0.155,P=0.126);无症状期 、艾滋病期患者iNKT与HIV RNA无相关性(r值分别为-0.113和-0.111,均P>0.05).结论 HIV感染者外周血iNKT表达水平随着疾病的进展而下降,可在一定程度上反映免疫损伤的严重程度.
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急性及亚急性期布鲁菌病患者γδT等淋巴细胞的表达及其意义
目的 观察急性及亚急性期布鲁菌病患者治疗前、后γδT细胞、CD4+T淋巴细胞及CD8+T淋巴细胞水平的变化及其意义.方法 2009年9月至2014年8月天津市第二人民医院收治布鲁菌病患者159例,其中急性期患者122例,亚急性期患者37例.应用流式细胞仪检测所有患者治疗前、后外周血γδT、CD4+及CD8+T淋巴细胞计数.并检测30名健康者作为对照组.计量资料采用￡检验及非参数Kruskal-Wallis检验.结果 布鲁菌病急性期组患者治疗前γδT细胞、CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞中位数分别为84.0/μL、780.5/μL和774.0/μL,亚急性期组分别为76.0/μL、887.0/μL和890.0/μL,健康对照组分别为49.0/μL、772.5/μL和592.5/μL.急性期组γδT细胞(U=114.5,P=0.001)和CD8+T淋巴细胞计数(U=1 185.5,P=0.003)显著高于健康对照组,亚急性期组γδT细胞(U=359.0,P=0.013)、CD4+T淋巴细胞(U=325.5,P=0.004)和CD8+T淋巴细胞计数(U=316.5,P=0.003)较健康对照组显著升高,亚急性期组CD4+T淋巴细胞显著高于急性期组(U=1 619.0,P=0.009).完成6周治疗的急性期患者31例,亚急性期患者30例.治疗前、后急性期组γδT细胞[(120.7±104.9)/μL比(82.2±85.3)/μL;t=3.568,P=0.001]、CD4+T淋巴细胞[(802.1±300.6)/μL比(663.0±280.6)/μL;t=2.904,P=0.007]和CD8+T淋巴细胞[(908.1±422.7)/μL比(651.1±241.7)/μL;t=3.885,P=0.001]差异有统计学意义.治疗后亚急性期组γδT细胞[(67.1±38.4)/μL比(48.4±32.1)/μL;t=2.695,P=0.012)、CD4+T淋巴细胞[(817.1±147.4)/μL比(650.8±196.5)/μL;t=5.301,P＜0.01)和CD8-T淋巴细胞[(703.7±191.5)/μL比(537.4±186.0)/μL;t=5.152,P＜0.01],较治疗前显著降低.结论 急性期和亚急性期布鲁菌病患者γδT细胞、CD4+T淋巴细胞及CD8+T淋巴细胞均发生免疫激活,激活程度与疾病进展高度相关,这有助于了解急性及亚急性期布鲁菌病患者的免疫状况.
关键词： 布鲁杆菌病 γδT细胞 CD4阳性T淋巴细胞 CD8阳性T淋巴细胞 流式细胞术 -
人类免疫缺陷病毒1型特异性CD8+T细胞应答中人类白细胞抗原Ⅰ的限制位点
目的 了解HIV-1特异性CD8+T细胞应答及其相关的人类白细胞抗原Ⅰ型(HLA-Ⅰ)的限制位点.方法 以位于HIV-1 Gag、Vif、Nef区域的合成肽作为刺激表位,选择来自4例健康者的外周血单个核细胞(PBMC)建立4株EB病毒转化的B淋巴细胞样细胞系(BLCL),以此作为抗原递呈细胞(APC),对1例临床上长期不进展的HIV-1感染者CD8+T细胞的IFN-γ分泌细胞频率进行体外酶联免疫斑点技术(ELISPOT)测定和HLA-Ⅰ限制位点比对分析.结果 在特异性CD8+T细胞应答中HLA-Ⅰ分子能限制性递呈HIV-1表位,且呈现出高特异性;HLA-Ⅰ位点A03、A26、C04和C08限制性递呈HIV-1 Gag区域表位,A03和C08还限制性递呈Nef区域表位.结论 HIV-1 Gag区域表位的HLA-Ⅰ限制位点可能包括A03、A26、C04和C08,Nef区域表位的限制位点可能包括A03和C08.
