首页 > 文献资料
-
扶正培元方对Lewis肺癌小鼠免疫逃逸相关T细胞亚群比例的调控作用
目的 观察扶正培元方对Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫逃逸相关T细胞亚群比例的调控作用.方法 按随机数字表法将30只健康C57BL/6J小鼠分为中药组、中药加化疗组、化疗组、模型组和正常对照组,每组6只.除正常对照组外,其余各组小鼠右侧腋窝皮下接种Lewis肺癌细胞悬液0.2 ml.于接种次日开始给药,中药组灌胃扶正培元方8.17 g/kg;中药加化疗组腹腔注射环磷酰胺60 mg/kg,同时灌胃扶正培元方8.17 g/kg;化疗组腹腔注射环磷酰胺60 mg/kg,灌胃等体积生理盐水;模型组和正常对照组灌胃等体积生理盐水.连续给药后13 d,采用流式细胞仪检测各组荷瘤小鼠脾细胞CD4、Foxp3、CD8、CD28细胞表达.结果 与模型组比较,化疗组及中药加化疗组瘤重[(1.76±0.42)g、(1.40±0.43)g比(4.37±0.59)g]减轻(P<0.01);中药组及中药加化疗组小鼠脾细胞CD4+Foxp3+T细胞[(11.25±1.69)%、(9.30±2.68)%比(14.21±1.50)%]下降(P<0.05或P<0.01).结论 扶正培元方可调节荷瘤小鼠调节性T细胞比例,改善其体内存在的免疫耐受状态.
-
肺康方对小鼠Lewis肺癌血管内皮生长因子表达影响的实验研究
目的 研究肺康方对小鼠Lewis肺癌模型血管内皮生长因子(VEGF)的抑制作用.方法 实验建立小鼠Lewis肺癌模型,研究肺康方与化疗药物单独或联合应用对小鼠Lewis肺癌的抑制作用及其对肺癌组织血管生长因子VEGF表达的影响.结果 肺康方对Lewis肺癌小鼠局部肿瘤生长有显著抑制作用,对环磷酰胺抗肿瘤有协同增效作用(P＜0.001)；肺康方配合化疗能有效抑制肿瘤组织VEGF的表达(P＜0.05).结论 肺康方是一首治疗肺癌的有效方剂,可抑制肿瘤生长、下调肿瘤细胞VEGF的表达,从而起到抑瘤、抗转移的作用.
-
Survivin T34A质粒/脂质体复合物抑制Lewis肺癌实验研究
目的 本研究旨在观察及探讨Survivin基因突变体Survivin T34A对Lewis肺癌的影响和作用机制.方法 构建Survivin T34A质粒/脂质体复合物(Lip-mS)及空载质粒/脂质体复合物(Lip-null);体外分别以Lip-mS及Lip-null转染Lewis肺癌细胞,以空白组(NS)作为对照组,利用流式细胞仪检测各组肿瘤细胞的凋亡率;体内试验使用C57 BL/6小鼠建立Lewis皮下移植瘤动物模型,随机分为Lip-mS治疗组、Lip-null治疗组及NS组,观察各组小鼠肿瘤生长情况,通过对肿瘤组织CD31免疫组化、TUNEL荧光染色探讨Survivin T34A基因的抗瘤机制.结果 流式细胞仪检测体外转染不同质粒后各组肿瘤细胞的凋亡:NS组(8.7±0.5)%、Lip-null组(9.0±1.0)%、Lip-mS组(41.6±1.7)%,Lip-mS组相对于其他各组诱导凋亡作用显著(P<0.01);C57 BL/6小鼠Lewis肺癌模型接受治疗后,计算各组小鼠抑瘤率(TIR),Lip-null组为负值,Lip-mS组为71.1%,分析小鼠肿瘤生长曲线,Lip-mS组较其他各组有显著抑瘤作用(P<0.05);肿瘤组织凋亡染色(TUNEL):Lip-mS组凋亡系数为(40.0±2.3)%,与NS组的(11.8±2.4)%、Lip-null组的(12.8±1.8)%比较有统计学差异(P<0.05);CD31免疫组化染色中肿瘤微血管密度:Lip-mS组为6.3±0.76,明显小于NS组的47.1±1.37和Lip-null组的45.8 ±1.18(P<0.01).结论 Survivin TMA质粒/脂质体复合物对Lewis肺癌治疗有效,能够诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤微血管生成,从而控制肿瘤生长.
-
Lewis肺癌细胞趋化因子受体CXCR4表达的研究
目的:观察趋化因子受体CXCR4在Lewis肺癌细胞和肿瘤组织中的表达,为探讨CXCR4与肿瘤转移的关系提供研究基础.方法:体外培养Lewis肺癌细胞,并建立Lewis肺癌细胞皮下种植瘤模型与自发性转移模型,采用RT-PCR和蛋白质印迹法分析培养细胞和肿瘤组织中CXCR4 mRNA及蛋白质表达水平;应用免疫组化方法分析Lewis肺癌原发瘤和转移瘤中CXCR4表达,并通过迁移实验观察CXCR4特异性配体SDF-1α对Lewis肺癌细胞的趋化作用.结果:培养Lewis肺癌细胞及肿瘤组织中均功能性地表达趋化因子受体CXCR4,且其表达水平与细胞所处氧环境有关;低氧能够促使Lewis肺癌细胞CXCR4蛋白表达增高,与对照组相比差异有统计学意义,t=4.051,P=0.009.12 h细胞趋化运动实验显示,CXCR4特异性配体SDF-1α可剂量依赖性诱导Lewis肺癌细胞的趋化运动,在低氧条件下,同对照组相比SDF-1α质量浓度为25 ng/mL时开始促进细胞迁移.t=3.053,P=0.031;SDF-1α质量浓度为50 ng/mL时可明显提高细胞迁移率,t=4.521,P=0.004.结论:Lewis肺癌细胞功能性表达趋化因子受体CX-CR4,可能与肿瘤细胞迁移和转移有关.
-
热疗合并羟基喜树碱对荷Lewis肺癌小鼠的作用
目的:探讨热疗、羟基喜树碱(HCPT)及热疗合并羟基喜树碱对荷Lewis肺癌C57BL小鼠的抗肿瘤作用.方法:采用肿瘤生长延迟(TGD)分析热疗、化疗对荷Lewis肺癌的C57BL小鼠的疗效.结果:①41℃、42℃、43℃热疗的TGD分别为1.07 d、1.40 d、2.52 d,只有43℃热疗组明显优于对照组(P＜0.002).②HCPT化疗剂量分别为1 mg/kg、2 mg/kg、4 mg/kg的各组TGD分别为1.87 d、4.00 d、4.57 d,均明显优于对照组(P＜0.05、P＜0.001、P＜0.001).③41℃热疗与HCPT(2 mg/kg)化疗、42℃热疗与HCPT(2 mg/kg)化疗、43℃热疗与HCPT(2 mg/kg)化疗组的TGD分别为4.86 d、5.57d、7.14 d,42℃热疗与HCPT(2 mg/kg)化疗、43℃热疗与HCPT(2 mg/kg)化疗组明显优于单独HCPT(2 mg/kg)化疗组(P＜0.05、P＜0.002),43℃热疗与HCPT(2 mg/kg)化疗组明显优于41℃热疗与HCPT(2 mg/kg)化疗、42℃热疗与HCPT(2 mg/kg)化疗组(P＜0.02、P＜0.05).结论:①HCPT对Lewis肺癌的抑制作用随剂量的增加而增高.②热疗对Lewis肺癌的抑制作用随温度的增加而增高.③热疗增加HCPT对Lewis肺癌的抑制作用,其作用随温度的增加而增高.热疗与HCPT之间并无温度阈值.
-
3-(5'羟甲基-2'呋喃基)-1苯甲基吲唑联合放疗治疗Lewis移植瘤小鼠的实验研究
目的 观察3-(5'羟甲基-2'呋喃基)-1苯甲基吲唑(YC-1)联合不同放射治疗方式对Lewis肺癌移植瘤的疗效,并对其机制进行初步探讨.方法 对Lewis肺癌荷瘤C57BL/6小鼠进行随机分组后,Yc-1按照每天10 μg/g连续7 d腹腔注射,放疗采用6 MeV(3.0 Gy/min)电子线连续3 d照射,单次剂量5 Gy,照射总剂量为15 Gy.分别测量各组肿瘤长短径绘制抑瘤曲线,记录各组小鼠的体重变化;免疫组织化学法对低氧诱导因子1 α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达进行半定量分析,TUNEL凋亡试剂盒检测各组的细胞凋亡情况;Kaplan-Meier法比较各远期组的生存时间.结果 YC-1+放疗(R)组和R+YC-1组的肿瘤生长较YC-1组、R组及空白组(NS组和DMSO组)明显延缓.YC-1+R组抑瘤效果较R+YC-1组强,其差异有统计学意义.YC-1和放疗联合后能增强对HIF-1α、VEGF表达的抑制,提高凋亡率,延长荷瘤小鼠的生存时间.结论 YC-1与放疗联合应用能明显增强放疗的抑瘤作用,且先放疗再给予YC-1抑瘤效果更为明显,而单独应用YC-1效果不明显.
-
小鼠Lewis肺癌模型制备方法的比较研究
目的 探讨不同方法制备小鼠Lewis肺癌模型的可行性及相关技术的改良.方法 采用体外培养细胞法、胰酶消化法、胶原酶法和匀浆法制备的不同浓度的细胞悬液皮下注射C57BL/6小鼠,观察不同方法获得的细胞数、成瘤率、成瘤时间、肿瘤体积、离体肿瘤重量、荷瘤鼠的生活习性等,判定改良技术的可行性.结果 体外培养细胞法可以获得所需细胞,成瘤率100%.而胰酶消化法、匀浆法获得的细胞较少,而且成瘤率较低,约80%～90%和60%～75%.胶原酶法则是几种方法中获得细胞数多的,成瘤率100%.结论 改良后的胶原酶法制备小鼠Lewis肺癌模型具有方法简便、成瘤率高、经济实惠的特点,为肿瘤的实验研究奠定了基础.
-
内皮抑素对小鼠Lewis肺癌移植瘤抑瘤作用的分子影像研究
目的利用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记的小鼠Lewis 肺癌(LLC)移植瘤模型,观察内皮抑素对LLC的作用.方法将GFP标记的小鼠LLC细胞种植于15只C57小鼠体内,分为空白对照组、尾静脉注射内皮抑素组、局部注射内皮抑素组.采用活体荧光成像,测定抑瘤率、微血管密度及测定VEGF和Bcl-2水平的方法评价治疗效果.结果试验组抑瘤率分别为21.6%和27.7%,较对照组增高(P<0.05).尾静脉注射组MVD为(13.77±4.41)个/高倍镜视野,局部注射组MVD为(14.13±4.05)个/高倍镜视野,明显低于空白对照组(27.76±8.87)个/高倍镜视野(P<0.01).微血管计数(MVD)密度降低(P<0.05),试验组VEGF和Bcl-2强阳性较对照组少(P<0.01).结论 GFP标记的小鼠LLC模型荧光显像清晰稳定.可在活体观察肿瘤细微的变化过程;内皮抑素对小鼠Lewis肺癌移植瘤有明显的抑制作用.
-
小鼠Lewis肺癌移植瘤模型活体分子成像研究
目的建立能进行光学活体分子成像的lewis肺癌(LLC)移植瘤模型,探讨其在观察研究肿瘤的生长、转移、肿瘤血管生成及治疗效果等方面的价值.方法利用pLEIN- CMV-GFP逆转录病毒载体将绿色荧光蛋白 (green fluorescent protein,GFP)报告基因转入小鼠Lewis肺癌(LLC)肿瘤细胞,体外稳定高效表达后,种植于小鼠双侧腹股沟,在不同时间利用光学活体成像仪成像,观察并用病理学证实.结果所有动物均成功制成荷GFP基因LLC移植瘤模型,GFP基因稳定高效表达,可见随肿瘤生长,绿色荧光团块增大.结论该模型稳定可靠,能够使我们利用光学分子成像的方法,实时、无创、连续地观察肿瘤生长,为研究肿瘤提供了新的思路和方法.
-
内皮抑制素与巴马司他合用提高抗血管新生和抗肿瘤功效
目的研究内皮抑制素与巴马司他合用的抗血管新生和抗肿瘤效果.方法血管样管腔形成实验用来测定体外血管新生程度.通过测定血红蛋白含量检测体内血管新生程度.小鼠接种Lewis肺癌细胞,治疗12 d后测量肿瘤重量.结果内皮抑制素在体外抑制了管腔形成数(抑制率33.5%),在体内减少了血红蛋白含量(抑制率38.8%);然而在这两个实验中,内皮抑制素与巴马司他合用与单用内皮抑制素相比均显著提高了抑制率(P<0.05).接受内皮抑制素的小鼠肿瘤重量减少了46.3%;而接受共同治疗的小鼠肿瘤重量减少了65.7%.结论内皮抑制素与巴马司他合用提高了抗血管新生和抗肿瘤功效.
-
肺肿瘤小鼠MDSC、Treg及传统T细胞变化研究
目的：探讨肺肿瘤小鼠骨髓源性抑制细胞（MDSC）、调节性T细胞（Treg）和传统T细胞的变化及机制。方法采用配对设计将20只C57BL/6小鼠随机均分为Lewis肺癌细胞注射组（LLC组）和正常对照组（NC组），LLC组采用皮下注射LLC细胞100μL（1×106）制备肺肿瘤小鼠模型，对照组注射等量生理盐水。待肿瘤形成后取小鼠脾细胞，采用流式细胞仪检测肺肿瘤小鼠MDSC、Treg及CD4+和CD8+T细胞比例和数量变化，膜联蛋白-V（Annexin-Ⅴ）染色检测CD4+和CD8+T细胞凋亡变化，5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）染色检测CD4+和CD8+T细胞增殖变化。结果与NC组相比，LLC组脾脏MDSC比例和数量明显增加，CD4+Foxp3+Treg所占CD4+T细胞比例和数量明显增加，而CD4+和CD8+T细胞所占脾细胞比例和数量明显降低（均P<0.05）。与NC组相比，LLC组CD4+和CD8+T细胞增殖明显降低，同时CD8+T细胞凋亡明显增加（P<0.05）。结论 MDSC和Treg细胞在肺肿瘤小鼠数量增加，同时， MDSC和Treg抑制CD4+和CD8+T细胞增殖，并促进CD8+T细胞凋亡。
关键词： 肺肿瘤 癌 Lewis肺 T淋巴细胞 调节性 CD4阳性T淋巴细胞 CD8阳性T淋巴细胞 细胞增殖 细胞凋亡 骨髓源性抑制细胞 -
白术内酯对癌性恶病质小鼠血清细胞因子的影响
目的 探讨白术内酯对癌性恶病质小鼠血清细胞因子白细胞介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响.方法 C57BL6小鼠接种小鼠肺腺癌(Lewis)细胞建立癌性恶病质动物模型,随机分为模型对照组、白术水煎剂组(DA)、白术内酯组(AT)、康莱特组(KLT),每组15只.治疗7d后观察白术内酯对癌性恶病质小鼠生理状况(体质量、摄食量等)及血清细胞因子TNF-α、IL-2的影响.结果 各治疗组小鼠生理状况改善,体质量及摄食量增加,TNF-α水平均较模型组显著降低,IL-2水平较模型组显著提高(P＜0.05).但AT组与DA组、KLT组比较差异无统计学意义(P均＞0.05).结论 白术内酯可能通过调节细胞因子改善癌性恶病质小鼠的一般状况.
-
塞来昔布对Lewis肺癌细胞的增殖抑制作用及其机制
目的:观察塞来昔布对Lewis肺癌细胞增殖及其移植瘤生长的抑制作用,并探讨其作用机制.方法:不同剂量(0、50、100和200 μmol·L~(-1))塞来昔布与Lewis肺癌细胞共培养12、24、48和72 h,MTT比色法检测细胞增殖抑制率,RP-HPLC法检测24 h细胞培养上清液花生四稀酸含量,ELISA法检测24 h细胞培养上清液前列腺素E_2含量.20只C57BL/6小鼠进行Lewis肺癌移植瘤实验,小鼠随机分为对照组和200 mg·kg~(-1)剂量给药组,于接种后3 d塞来昔布灌胃给药,连续用药15 d后处死小鼠,计算肿瘤的体积和质量.结果:50、100和200μmol·L~(-1)塞来昔布均可抑制Lewis细胞增殖,其细胞增殖抑制率高于对照组(P<0.05);随着剂量和作用时间的增加,肿瘤细胞增殖抑制率增加,72 h的IC_(50)值为(134.06±2.97)μmol·L~(-1).与对照组比较,50 μmol·L~(-1)塞来昔布组培养上清液中花生四烯酸含量无变化.前列腺素E_2含量降低(P<0.05),100和200μmol·L~(-1)塞来昔布组,随着塞来昔布剂量的增加,培养上清液中花生四烯酸的含量增加(P<0.01),前列腺素E_2的含量降低(P<0.01).塞来昔布给药组小鼠的平均瘤质量均低于对照组(P<0.05),抑瘤率为50%.结论:塞来昔布可在体内及体外抑制Lewis肺癌细胞增殖,其机制可能是通过增加花生四烯酸及降低前列腺素E_2水平发挥其抗肿瘤作用.
-
hCAP-18/LL-37基因转染对Lewis肺癌细胞增殖及凋亡的影响
目的:观察人源抗菌肽hCAP-18/LL-37基因转染对Lewis肺癌细胞增殖的抑制作用,探讨其抗肿瘤的可能机制.方法:将含hCAP-18/LL-37的真核表达质粒瞬时转染Lewis肺癌细胞,同时设正常对照组、转染空载体组和转染重组基因组,MTT比色检测Lewis肺癌细胞转染后48和72 h的增殖活性,流式细胞术和荧光染色检测细胞凋亡.免疫细胞化学染色检测Bax、Bcl-2蛋白表达.结果:转染重组基因组Lewis细胞增殖受到明显抑制,与转染空载体组比较,转染后48和72 h的抑制率分别为3.51%和17.65%;流式细胞术检测转染重组基因组凋亡率为7.4%,正常对照组凋亡率为4.4%,转染空载体组凋亡率为5.2%;免疫细胞化学染色,转染重组基因组Lewis细胞Bax蛋白表达增加,与对照组比较差异有显著性(P<0.05);Bcl-2蛋白表达减少,但与对照组比较差异无显著性(P<0.05).结论:hCAP-18/LL-37基因瞬时转染Lewis肺癌细胞,可抑制肿瘤细胞牛长、调控凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达,诱导肿瘤细胞凋亡.
关键词： hCAP-18/LL-37 瞬时转染 癌 Lewis肺 细胞凋亡 -
拓扑替康对小鼠Lewis肺癌的抑制作用
目的:探讨拓扑替康对小鼠Lewis肺癌的抑制作用及抗血管生成作用.方法:将Lewis肺癌模型小鼠随机分为对照组10只及拓扑替康小、中、大(0.312、0.624 和1.248 mg·kg -1 )剂量组各15只,第21天处死小鼠,观察肿瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线,计算原发瘤抑瘤率,免疫组织化学染色计数肿瘤组织微血管密度(MVD)及检测血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达.结果:拓扑替康各剂量组较对照组小鼠的肿瘤生长缓慢,原发瘤抑瘤率与对照组相比差异有显著性(P<0.05);拓扑替康大、中剂量组MVD与对照组比较差异有显著性(P<0.05);各剂量组VEGF阳性率均较对照组低.结论:拓扑替康明显地抑制小鼠Lewis肺癌原发瘤的生长,并可抑制肿瘤的微血管生成.
关键词： 托泊替坎/药理学 癌 Lewis肺 毛细血管/病理学 内皮生长因子/生物合成 -
腺病毒介导的HSV-tk/GCV系统对肺癌细胞的杀伤作用
目的:用含HSV-tk重组腺病毒载体转染Lewis肺癌细胞,探讨其对肺癌细胞的杀伤作用.方法:利用同源重组技术构建含HSV-tk基因的重组腺病毒载体(AdCMVtk),将含LacZ基因的腺病毒载体(AdCMVLacZ)转染Lewis肺癌细胞,X-gal染色后,测定腺病毒对该细胞的转染率,并观察AdCMVtk/GCV系统对Lewis肺癌细胞存活率的影响.结果:随着AdCMVLacZ的病毒量(MOI)增加,对Lewis细胞转染率也增加,当MOI为500时,转染率可达100%.AdCMVtk/GCV系统可明显杀伤Lewis细胞,且随着AdCMVtk的MOI增加,或GCV浓度的增加,细胞存活率减少,但单独使用AdCMVtk或GCV时,对Lewis细胞无杀伤作用.AdCMVtk/GCV系统对该细胞的杀伤作用具有明显的旁观者效应,20%Lewis细胞被AdCMVtk转染可引起74%细胞死亡.结论:AdCMVtk/GCV系统杀伤肿瘤细胞既有效又安全.
-
肺岩宁对Lewis肺癌荷瘤小鼠瘤组织中核小体构象调控因子H3-K56、Rtt109、Asf1及E2F1表达的影响
目的:恶性肿瘤细胞具有异常的细胞周期.前期体内实验证实肺岩宁具有干预细胞周期G1/S检测点信号通路的作用,本研究进一步探讨肺岩宁对S期核小体构象调控因子表达的影响.方法:将60只小鼠随机分成正常组、模型组、顺铂组和肺岩宁组,每组15只.右腋部皮下注射Lewis细胞构建C57BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤模型.观察各组小鼠的瘤质量和抑瘤率,采用流式细胞术检测细胞周期时相分布和增殖指数,实时聚合酶链反应法及蛋白质印迹法检测各组小鼠肺癌移植瘤细胞的核小体构象调控因子H3-K56、Ty1转座基因调节因子109(regulator of Ty1 transposition 109,Rtt109)、细胞反沉默功能因子1(antisilencing function 1,Asf1)、腺病毒E2启动子结合转录因子1(E2F1)mRNA和蛋白的表达.结果:肺岩宁组和顺铂组的瘤质量显著低于模型组(P＜0.01),抑瘤率分别为27.92％和42.50％.肺岩宁组癌细胞的增殖指数明显低于模型组和顺铂组,S期分布比例少(P＜0.01).肺岩宁组H3-K56、Rtt109、Asf1、E2F1 mRNA和蛋白的表达较模型组显著下调(P＜0.05).结论:肺岩宁可能是通过影响核小体构象调控因子的表达干预异常细胞周期来发挥抗肺癌细胞生长增殖作用.
-
双黄升白颗粒对化疗所致骨髓抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠细胞周期的双重调控作用及其机制
目的:探讨双黄升白颗粒对化疗所致骨髓抑制荷瘤小鼠骨髓和肿瘤细胞周期双重调控的作用机制.方法:本研究采用Lewis肺癌荷瘤小鼠,30只小鼠随机分为空白组、模型组和治疗组.除空白组外,腹腔注射环磷酰胺制作骨髓抑制模型.治疗组用40 g/(kg·d)双黄升白颗粒治疗6 d后,流式细胞仪检测细胞周期情况,并计算增殖指数(proliferation index,PI);蛋白印迹法和免疫组织化学法检测骨髓及肿瘤组织中细胞周期蛋白依赖激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)、细胞周期蛋白依赖激酶6(cyclin-dependent kinase 6,CDK6)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达.结果:模型组骨髓及肿瘤的G0/G1期细胞比例均低于空白组(P＜0.05),PI和CDK4、CDK6、cyclin D1表达高于空白组(P＜0.05).治疗组骨髓G0/G1期细胞比例低于模型组及空白组,PI及CDK4、CDK6、cyclinD1表达均高于模型组及空白组;肿瘤组织G0/G1期细胞比例高于模型组及空白组,PI及CDK4、CDK6、cyclin D1表达均低于模型组及空白组.结论:双黄升白颗粒对骨髓抑制Lewis肺癌荷瘤鼠的细胞周期具有双重调控作用,其机制可能与双重调节cyclin D1、CDK4和CDK6表达有关.
-
不同活化表型的巨噬细胞对小鼠肺癌移植瘤生长、淋巴管生成和淋巴结转移的影响
目的:探讨不同活化表型的巨噬细胞对小鼠Lewis肺癌(Lewis lung carcinoma,LLC)移植瘤生长、淋巴管生成和淋巴结转移的影响.方法:将活化的巨噬细胞与LLC细胞混合后注射至小鼠颈部背侧皮下,建立移植瘤模型,分为4组:空白对照组,经典活化的巨噬细胞(classically activated macrophages,caMphi)组,替代性活化的巨噬细胞(alternatively activated macro-phages,aaMphi)组和RAW264.7巨噬细胞组.每组10只小鼠,观察移植瘤生长情况.d 28时杀死小鼠,HE染色检测淋巴结和远处器官转移情况,免疫组织化学法检测并计数移植瘤淋巴管内皮细胞透明质酸受体-1(lymphatic vessel endothelial hyaluro-nan receptor-1,LYVE-1)阳性淋巴管密度(lymphatic vessel density,LVD).同时另取40只小鼠随机分为上述4组,观察其生存时间并计算生存率.结果:与空白对照组比较,aaMphi组和RAW264.7组移植瘤生长速度较快,淋巴结转移数和双肺转移结节数较多(P<0.01),LVD增高,荷瘤小鼠生存率降低(P<0.05).aaMphi组淋巴结转移数和LVD明显高于RAW264.7组(P<0.05),但移植瘤生长、肺转移结节数和荷瘤小鼠生存率之间差异无统计学意义(P>0.05).结论:aaMphi能够促进LLC移植瘤生长、淋巴管生成、淋巴结和肺转移,并降低荷瘤小鼠生存率.在与LLC一起形成移植瘤的过程中,未经处理的巨噬细胞可以朝着aaMphi的方向极化.
-
塞来昔布对Lewis肺癌组织COX-2、VEGF、MVD、MMP-2表达的影响
目的探讨选择性环氧化酶(COX)-2抑制剂塞来昔布对Lewis肺癌移植瘤的抑制作用及其对肿瘤组织V.EGF、MVD、MMP-2表达的影响.方法将C57BL/6小鼠随机分为药物组和对照组,药物组于接种Lewis肺癌细胞后第二天开始给予含1/1 000塞来昔布的食物,连续24 d,计算抑瘤率.采用免疫组化的方法研究COX-2、VEGF、MVD、MMP-2的表达.并采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术研究VEGF、MMP-2 mRNA的表达.结果含1/1 000塞来昔布食物饲养对Lewis肺癌移植瘤有明显抑制作用,抑瘤率为60.1%.免疫组化结果显示药物组肿瘤组织的COX-2积分平均值低于对照组,但无统计学差异(P＞0.05).药物组与对照组的VEGF积分为2.00±0.82和2.90±0.88(P＜0.05),MVD平均值为16.70±7.77和23.15±4.58(P＜0.05).但药物组与对照组比较,MMP-2的表达无显著性差异.RT-PCR结果表明药物组VEGF mRNA表达较对照组明显下调,而MMP-2 mRNA表达无明显改变.结论塞来昔布对Lewis肺癌移植瘤有明显抑制作用.其作用途径可能是通过抑制COX-2的活性,进而抑制VEGF的表达,减少新生血管形成,抑制肿瘤的生长.抑制肿瘤血管生长可能是塞来昔布肿瘤生长的又一机制.
