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HIV-1感染者CD8+T细胞受体基因多样性特点及其与病毒载量的相关性
目的 研究HIV-1感染者CD8+T细胞受体(TCR)基因的多样性变化特征及其与病毒载量的相关性.方法 应用抗CD8单克隆抗体从9份HIV-1感染者和7份HIV-1阴性对照样本外周血单个核细胞中分离CD8+T细胞,提取总RNA,然后采用一步(one step)及巢式(nested)多聚酶链式反应(PCR)的方法对22个T细胞受体Vβ基因家族的瓦补决定区3(CDR3)进行扩增,利用ABI-3700测序仪对扩增的PCR产物进行扣描,定量分析HIV-1感染者TCR CDR3区多样性变化特征及其与病毒载量的相关性.结果 HIV-1感染者和正常人相比较其CD8+T细胞的TCR基因多样性明显减少,部分TCR Vβ基因家族CDR3区的高斯分布破坏;TCR的紊乱与病毒载量呈正相关(r=0.771,P<0.05);HIV-1感染引起患者TCR多样性的改变不仅表现在不同Vβ基因家族上,而且也表现在CDR3长度上,其中感染者VB2、Vβ4、Vβ5、Vβ17、Vβ20、Vβ21、Vβ23及Vβ24基因家族的变化与正常人存在统计学差异.结论 HIV-1感染能引起CD8+T细胞TCR基因多样性的减少及高斯分布的破坏,TCR CDR3区的紊乱与病毒载量呈正相关.
关键词： CD8阳性T淋巴细胞 HIV-1 受体 抗原 T细胞 -
三阴性乳腺癌间质肿瘤浸润淋巴细胞表达CD8和FOXP3的临床病理分析
目的 探讨三阴性乳腺癌(TNBC)中间质肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)和CD8+、FOXP3+的淋巴细胞亚型与临床病理参数的相关性.方法 收集南京医科大学第一附属医院2012-2014年病理资料完整的女性TNBC标本160例,均为未经化疗和放疗的手术切除或穿刺组织,经常规石蜡包埋制片,判读HE染色切片间质TIL百分比,采用免疫组织化学MaxVision法检测160例TNBC病例中间质CD8+、FOXP3+淋巴细胞浸润密度.结果 乳腺癌间质TIL与Ki-67呈正相关(P=0.002);CD8+细胞毒T细胞(CTL)浸润密度与肿瘤大小呈负相关(P =0.009),与Ki-67呈正相关(P=0.021);FOXP3+调节性T细胞与患者年龄呈负相关(P =0.030),与组织学分级呈正相关(P=0.026);间质TIL与CD8+CTL呈正相关(P=0.014).结论 TNBC中间质TIL百分比、CD8+CTL浸润密度可能与乳腺癌的增殖相关,FOXP3+调节性T细胞浸润密度可能与乳腺癌不良预后相关,间质TIL与CD8+CTL浸润密度呈正相关.间质TIL可能成为TNBC临床病理诊断、辅助治疗的新靶点.
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PD-1受体在HBV-ACLF患者外周血CD8~+T细胞上的表达研究
目的 探讨乙型肝炎病毒所致慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者外周血中CD8+T细胞上PD-1(Programmed death-1)的表达以及对CD8+T细胞的影响.方法 收集60例HBV-ACLF患者外周血;应用流式细胞仪检测外周血中CD8+淋巴细胞上的PD-1、CD95、穿孔素、颗粒酶A、颗粒酶B、CD107a的表达以及CD14细胞上PD-L1的表达;根据不同病情分期和不同预后比较各分子的表达差异;设15名肝硬化患者及15名健康人为对照组.结果 (1)HBV-ACLF患者CD8~+T细胞上PD-1较肝硬化组和健康组表达上调(P＜0.05);好转组PD-1表达率低于无效组(P＜0.05);早、中、晚三期PD-1表达率呈上升趋势(P＜0.05);(2)PD-L1在好转组及病情早期表达相对低;(3)PD-1与CD95在死亡组表达明显升高;穿孔素、颗粒酶及CD107a在死亡组表达升高,但PD-1在这三类细胞上表达率非常低.结论 PD-1在HBV-ACLF患者外周血CD8~+T细胞上表达上调,且与病情严重程度呈正比.其上调表达可能促进总CD8~+T细胞的凋亡,但对于具有杀伤活性的CD8~+T细胞抑制作用相对较弱.
关键词： 肝功能衰竭 程序性死亡分子 CD8阳性T淋巴细胞 -
慢性阻塞性肺疾病患者T 淋巴细胞亚群凋亡与Fas 、FasL 、Bcl-2表达的关系
目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血T 淋巴细胞亚群CD4+、CD8+T 细胞凋亡状态及其细胞表面Fas 、FasL 、Bcl-2 抗原的表达,以探讨T 淋巴细胞亚群凋亡不足/过度与这些抗原表达的关系.方法 选取急性加重期(AE-COPD)及稳定期COPD 患者30 例,另设正常对照组20 例,采用流式细胞仪测定外周血T 淋巴细胞亚群细胞凋亡率及其表面Fas 、FasL 、Bcl-2 抗原表达水平.结果 (1)与正常对照组相比,COPD 急性加重期及稳定期患者CD4+T 凋亡率均增加,CD8+T 凋亡率均降低,P ＜0.05 ;与COPD 稳定期相比,COPD 急性加重期患者CD4+凋亡率增加,CD8+凋亡率降低,P ＜0.05 ;(2)与正常对照组相比,COPD 急性加重期及稳定期患者CD4+Fas 、CD4+FasL 的表达均增加,CD4+Bcl-2 表达降低,P ＜0.01 ;与COPD 稳定期相比,COPD 急性加重期患者CD4+Fas 、CD4+FasL 的表达均增加,CD4+Bcl-2 表达降低,P ＜0.05 ;且COPD 稳定期、急性加重期CD4+凋亡率均与CD4+Fas 、CD4+FasL 正呈相关,与CD4+Bcl-2 负相关;(3)与正常对照组相比,COPD 急性加重期及稳定期患者CD8+Fas 、CD8+FasL 的表达均增加(P ＜0.05 );与COPD 稳定期相比,COPD 急性加重期患者CD8+Fas 、CD8+FasL 的表达增加(P ＜0.05),三组之间CD8+Bcl-2 表达无统计学意义(P ＞0.05 );CD8+凋亡率与CD8+Fas 、CD8+FasL 、CD8+Bcl-2 表达无相关性.结论 (1)COPD 患者CD4+T 凋亡增加,凋亡途径Fas /FasL 及Bcl-2 可能起重要作用;(2) COPD 患者CD8+凋亡与其表达Fas 、FasL 、Bcl-2 无相关性,凋亡途径Fas /FasL 及Bcl-2 可能不起主要作用,其具体机制有待进一步研究.
关键词： 肺疾病 慢性阻塞性 细胞凋亡 CD4阳性T淋巴细胞 CD8阳性T淋巴细胞 抗原 CD95 Fas配体蛋白质 基因 Bcl-2 -
临床回报CD8+T细胞结果与CD8 low T和CD8 high T细胞亚群的相关性研究
目的 探讨临床全自动分析平台回报CD8+T细胞结果与CD8low T、CD8high T细胞亚群结果的关系.方法 采用横断面研究,收集2015年12月至2016年9月中国医科大学附属第一医院临床患者及健康人群淋巴细胞亚群流式检测数据1316例,其中恶性肿瘤患者287例,自身免疫病患者389例,健康人320名,HIV感染者320例,得到全自动分析平台回报的CD8+T细胞结果.流式检测数据同时采用FlowJo软件画门,分析上述患者CD8lowT、CD8highT细胞亚群结果,与临床全自动分析平台回报的CD8+T细胞结果进行比较.结果 不同疾病患者临床回报CD8+T细胞结果与CD8high T细胞的结果趋势一致,与CD8lowT细胞结果不完全一致,差异表现为HIV感染者CD8lowT细胞明显低于健康人(56.2±42.0,68.8±45.9,个/μl,P<0.001),与临床回报CD8+T细胞结果趋势不同.临床回报的CD8+T细胞结果与CD8highT细胞、CD8lowT细胞均具有统计学相关性,其与CD8highT的相关系数明显高于CD8low T细胞.HIV感染者CD8low T细胞与CD4+T细胞绝对计数呈正相关趋势(r=0.204,P<0.001),抗病毒治疗后CD8low T明显高于未治疗组(58.3±43.9,42.9±26.5,个/μl,P<0.001),治疗2年以上患者中,CD4<500个/μl组中CD8low T细胞明显低于CD4>500个/μl组(50.1±47.0,66.3±46.6,个/μl,P<0.001).结论 临床回报CD8+T细胞结果与CD8high T细胞结果趋势一致,与CD8lowT细胞结果存在差异.HIV感染者CD8low T细胞明显减少,抗病毒治疗可有效重建CD8low T细胞.
关键词： CD8阳性T淋巴细胞 T淋巴细胞亚群 流式细胞术 自动分析 -
肾移植患者外周血人巨细胞病毒特异性CD8+T淋巴细胞频率及其γ干扰素分泌功能的初步研究
目的 研究肾移植患者外周血人巨细胞病毒(HCMV)特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)的频率及其γ干扰素(IFN-γ)分泌功能,以期探讨HCMV活化感染的免疫学机制.方法 选取HCMV血清学阳性的HLA-A*0201肾移植患者和健康对照者,将其分为3组:存在HCMV活化感染的肾移植组(9例)、无HCMV活化感染的肾移植组(29例)和健康对照组(54名);运用HLA-A2-NLVPMVATV-五聚体检测外周血中总的HCMV NLVPMVATV特异性CTL,同时以NLVPMVATV体外刺激PBMC,检测IFN-γ分泌性CTL.结果 在健康对照组、元HCMV活化感染的肾移植组和存在HCMV活化感染组中,HCMV特异性CTL频率中位数分别为1.19%(0～19.42%)、1.20%(0～18.40%)和3.2%(0.51%～18.90%),差异无统计学意义(H=5.34,P＞0.05);IFN-γ分泌细胞频率中位数分别为0.72%(0～0.70%),0.47%(0～5.61%)和0.67%(0.07%～4.00%),差异无统计学意义(H=0.58,P＞0.05),但HCMV特异性CTL中IFN-γ分泌细胞的比例分别为(60.18±19.16)%,(39.19±17.22)%和(20.02±13.26)%,组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 肾移植组外周血中HCMV NLVPMVATV特异性CTL频率较健康对照组并无降低,但其分泌IFN-γ的比例降低,出现HCMV活化感染组IFN-γ分泌CTL比例降低更为明显.HCMV特异性CTL的IFN-γ分泌功能受损可能是造成肾移植患者HCMV活化感染的因素之一.
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原发性胆汁性肝硬化患者调节性T细胞及其与肝功能损伤的研究
目的检测原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)患者外周血CD4+CD8+T、CD4+CD25+调节性T细胞亚群,探讨其与肝功能损伤、抗AMA-M2抗体产生的关系.方法采用流式细胞术检测北京协和医院住院和门诊PBC患者(n=27)外周血CD4+CD8+T细胞、CD4+CD25+T细胞群比例,以26例其他肝脏疾病患者作为疾病对照组,30例健康体检者作为正常对照,观察调节性T细胞亚群与患者的肝功能指标及自身抗体如AMA-M2、ANA的关系.结果 PBC患者外周血CD4+CD25+T细胞比例与正常对照组比较结果差异无统计学意义(P>0.05),但显著高于其他肝脏疾病组(P<0.05).CD4+CD8+T细胞群与正常人相比结果差异无统计学意义,其他肝病组明显高于正常对照组(P<0.05).PBC患者外周血NK细胞比例显著低于正常对照组(P<0.05).肝功严重损伤的PBC患者外周血CD4+CD25+T细胞比例明显高于肝功能轻度损伤者(P<0.05).PBC患者外周血CD4+CD25+T细胞数量与肝功能损伤指标ALB呈负相关(r =-0.338,P<0.05),与TBIL、DBIL呈正相关(r分别为0.362,0.386,P<0.05).CD4+CD25+/CD4+比例与GGT呈负相关(r=-0.335,P<0.05),与TBIL、DBIL呈正相关(r分别为0.333,0.339,P<0.05).抗AMA-M2抗体阳性患者外周血CD4+CD25+细胞比例明显高于AMA-M2阴性患者(P<0.01).未发现CD4+CD25+T、CD4+CD8+T细胞比例在ANA+和ANA-PBC患者之间差异有统计学意义.结论 PBC患者外周血CD4+CD25+T细胞群比例与肝功能损害和抗AMA-M2抗体的产生密切相关,因此推测CD4+CD25+T细胞的变化可能是导致病情发展以及肝脏损伤的关键环节之一.
关键词： 肝硬化 胆汁性 CD4阳性T淋巴细胞 CD8阳性T淋巴细胞 血液和免疫系统 -
CD8T淋巴细胞在大鼠缺血再灌注脑组织中表达的变化
目的 观察大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)脑缺血模型再灌注不同时间点的脑组织中CD8T淋巴细胞表达的动态变化,探讨CD8T淋巴细胞与缺血性脑损伤的关系.方法 选择成年雄性SD大鼠35只,随机分为假手术组,缺血再灌注24h、3d、5d、7d、10d和14d组,每组5只.采用Zea Longa线栓法制作大鼠MCAO脑缺血模型,HE染色显示脑缺血再灌注组织病理学形态,SP法免疫组织化学染色显示CD8分子表达的变化,光镜下计数CD8T淋巴细胞数.结果 再灌注7d和10d组,脑组织大量神经元细胞质、胞核界限模糊、核固缩溶解,细胞间出现大小不等的空泡.CD8T淋巴细胞于再灌注24 h组即开始表达,再灌注7、10 d组达到高峰,随后下降.再灌注各时间点组CD8T淋巴细胞数显著高于假手术组(P＜0.01).CD8T淋巴细胞大量表达于缺血再灌注脑组织,且主要分布于脑梗死边缘区.结论 CD8T淋巴细胞参与了脑缺血再灌注损伤.
关键词： 梗死 大脑中动脉 再灌注损伤 CD8阳性T淋巴细胞 脑缺血 -
老年阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者CD8+ T细胞功能的变化
目的 探讨CD8+ T细胞在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)发病中的作用.方法 选取60岁以上的老年人为观察对象,均行多导睡眠监测(PSG),按PSG结果将其分为健康对照组17例、轻度OSAHS组21例、中度OSAHS组20例和重度OSAHS组17例.于患者早晨睡醒后采外周静脉血2 ml,分离单个核细胞.流式细胞仪测定活化CD8+ T细胞的百分比、CD8+ T细胞内肿瘤坏死因子α(TNFα)及穿孔素的表达.部分中、重度OSAHS患者经持续气道正压通气(CPAP)治疗后复查上述指标.结果 (1)健康对照组与轻、中、重度OSAHS患者活化的CD8+ T细胞/CD8+ T细胞的百分比分别为7.5%±0.7%、8.3%±0.8%、12.3%±1.8%和13.4%±2.0%,轻度OSAHS患者与健康对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05),而中、重度OSAHS患者与健康对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);随着OSAHS患者病情的加重,活化的CD8+ T细胞/CD8+ T细胞的百分比则随之升高,各OSAHS组两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).(2)CD8+ T细胞表达TNFα的阳性率,轻度OSAHS患者与健康对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05),而中度及重度OSAHS患者较健康对照组明显增高,差异有统计学意义(P＜0.01);且随病情的加重,CD8+ T细胞表达TNFα的阳性率更高.CD8+ T细胞表达穿孔素3组患者均较健康对照组明显增高,差异有统计学意义(均为P＜0.01),且随病情的加重,CD8+ T细胞表达穿孔素也明显增加.(3)部分中、重度OSAHS患者经CPAP治疗后,CD8+ T细胞胞内表达TNFα及穿孔素明显减少.结论 OSAHS患者活化的CD8+ T细胞数目增多,产生炎症介质及细胞毒物质增加,这些可能在OSAHS的发病过程中起作用.
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肿瘤特异性CD8+T细胞在三阴性乳腺癌免疫治疗中的应用
三阴性乳腺癌(TNBC)是ER、PR、HER-2表达均为阴性的一类乳腺癌,临床上常规的治疗手段包括手术、放射治疗及化疗.肿瘤的免疫治疗是目前的研究热点之一,其中起重要作用的是肿瘤特异性CD8+T细胞.在基础研究方面,CD8+T细胞在TNBC的过继性免疫治疗和肿瘤疫苗领域均有所应用.在临床研究方面,肿瘤浸润CD8+T细胞与TNBC患者的预后相关,并且,目前已开展的程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)/程序性细胞死亡蛋白1配体(PD-L1)抑制剂亦与肿瘤特异性CD8+T细胞的活化调控机制有关.因此,笔者就肿瘤特异性CD8+T细胞在三阴性乳腺癌免疫治疗中的应用进行简要的综述.
关键词： 乳腺肿瘤 CD8阳性T淋巴细胞 免疫疗法 -
成鼠转移因子对幼鼠脑干胶质瘤作用的实验研究
目的 探讨转移因子作为免疫增强剂抑制脑干胶质瘤生长的作用.方法 通过立体定向技术制备成年Wistar大鼠C6脑干胶质瘤模型.提取胶质瘤模型大鼠外周血淋巴细胞,制备转移因子.将20只Wistar幼鼠等分为对照组和实验组,在0h分别予以生理盐水和转移因子溶液灌胃.24h后制备幼鼠C6脑干胶质瘤模型.通过MRI检查鉴定胶质瘤模型并测量两组肿瘤体积,采用流式细胞计数法分别检测24 h和96 h两组外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞比例.记录两组体征及生存期.结果 幼鼠C6脑干胶质瘤模型制备2周时对照组和实验组肿瘤的平均体积分别为(133.6 ±30.7)mm3和(94.6 ±21.3)mm3,二者差异有统计学意义(P＜0.05).24 h对照组和实验组CD4+T细胞比例分别为(10.0±6.5)％和(10.4±5.4)％;CD8+T细胞比例分别为(2.8±1.3)％和(1.9±0.9)％.96 h对照组和实验组CD4+T细胞比例分别为(14.8±1.4)％和(41.3±4.4)％;CD8+T细胞比例分别为(7.5±0.6)％和(24.4±2.8)％.24 h CD4+和CD8+T细胞比例两组差异均无统计学意义(均P＞0.05).96 h实验组CD4+和CD8+T细胞比例均高于对照组(均P＜0.05).实验组96hCD4+和CD8+T细胞比例均高于24 h(均P＜0.05).对照组96 h CD8+T细胞比例高于24 h(P ＜0.05),24h和96 h的CD4+T细胞比例差异无统计学意义(P＞0.05).对照组和实验组平均生存时间分别为(12.8 ±0.6)d和(15.3 ±0.8)d,二者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 成鼠脑干胶质瘤模型的转移因子可以抑制幼鼠模型肿瘤的生长,从而为脑干胶质瘤的免疫治疗提供了一定的理论依据.
关键词： 脑干 神经胶质瘤 转移因子 CD4阳性T淋巴细胞 CD8阳性T淋巴细胞 大鼠 -
共刺激分子CD28、CD137在喉癌患者T淋巴细胞中的表达及其与细胞免疫功能失调的关系
目的 探讨共刺激分子CD28、CD137与喉癌患者细胞免疫功能状况的关系.方法 应用梯度离心法分离并纯化外周血和肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiItrating lymphocyte,TIL),流式细胞术检测喉癌患者外周血T细胞CD8+、CD8+CD28+、CD8+CD28-、CD28+细胞亚群分布和双香豆素(phytohemaggIutinin,PHA)刺激前后患者外周血T细胞及TIL中CD137的表达.结果 喉癌患者CD8+T细胞比率为(32.11±5.07)%,CD8+CD28-T细胞比率为(21.03±5.69)%,均明显高于正常对照组(均P<0.01);CD28+T细胞比率为(45.53±4.51)%,CD8+CD28+T细胞比率为(12.70±3.41)%,均明显低于正常对照组(P均<0.01).CD137+T细胞活化增殖能力与CD28的阳性表达呈明显的正相关,喉癌患者外周血T细胞和TIL在未受PHA刺激时CD137+T细胞比率分别为(1.90±0.71)%和(3.52±1.64)%,明显高于正常对照组(P均<0.01).但经PHA刺激484小时后,外周血和TIL中CD137+-48h/CD137+-Oh值为分11.48±4.03和10.39±3.02,均明显低于正常对照组,P均<0.01.结论 共刺激分子CD28在CD8+T细胞亚群中的表达失调使免疫效应性CD137+T细胞活化增殖能力下降,是引起喉癌患者细胞免疫功能紊乱的重要原因之一.
关键词： 喉肿瘤 CD8阳性T淋巴细胞 抗原 CD28 CD137 -
哮喘模型小鼠脾脏和肺脏CD8~+T细胞的作用机制研究
目的 建立哮喘小鼠模型,探讨CD8~| T细胞在哮喘中的作用.方法 将32只BALB/c小鼠随机均分为对照组和哮喘组,哮喘组小鼠建立哮喘模型.测定两组小鼠的气道反应性,对肺泡灌洗液(BALF)行细胞学分类和计数,观察肺组织的病理变化.用免疫磁珠纯化柱纯化两组小鼠脾、肺组织的CD8~| T细胞,加入卵蛋白(OVA)刺激,用ELISA法检测培养96h后CD8~| T细胞上清中IL-4、IL-10及IFN-γ的水平.结果 哮喘组小鼠存在气道高反应性,证明模型构建成功.哮喘组BALF中的细胞总数和中性粒细胞,嗜酸性粒细胞的比例均较对照组明显增加(P＜0.05),巨噬细胞比例明显降低(P＜0.05).哮喘组肺问质中有大量炎性细胞浸润,气道上皮损伤,杯状细胞肥大增生,有大量黏液分泌,黏膜下胶原纤维沉积.对照组无明显的炎症改变.哮喘组肺CD8~| T细胞分泌的IL4(203.20±16.59pg/ml)较对照组(3.29±1.61pg/ml)明显增加(P＜0.05),IL-4在两组脾CD8~| T细胞培养上清中均未检出.哮喘组脾CD8~| T细胞分泌IFN-γ水平(4997.05±189.07pg/ml)较对照组(4509.73±378.10pg/ml)明显增加(P＜0.05),而肺TFN-γ水平(237.30±36.96pg/ml)较对照组(429.70±19.98pg/ml)明显减少(P＜0.01).哮喘组小鼠肺、脾CD8~| T细胞分泌IL-10的水平(分别为265.24±36.98、22.49±6.70pg/m1)均较对照组(分别为14.42±4.41、5.82±3.24pg/ml)明显增加(P＜0.05).结论 CD8~| T细胞中也有具有调节性作用的细胞群,称为CD81调节性T细胞,在哮喘发病中发挥重要作用.CD8~| T细胞分泌的细胞因子水平在脾、肺中存在差异.
关键词： 哮喘 支气管高反应性 支气管肺泡灌洗液 CD8阳性T淋巴细胞 -
歼击机飞行员外周血淋巴细胞及亚群的分析
目的 分析航空环境对空军歼击机飞行员外周血淋巴细胞及亚群的影响,为积极采取相应的防护措施,调整飞行员淋巴细胞免疫功能提供数据基础. 方法 采集51例入院体检的空军歼击机飞行员(飞行员组)及25例同期健康体检的男性普通军人(对照组)的外周血,用流式细胞术检测外周血CD45+淋巴细胞、CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、初始T淋巴细胞、记忆T淋巴细胞及调节性T淋巴细胞的表面标志.飞行员按飞行时间分为飞行时间＜1 000 h、1 000～2 000 h、＞2 000 h 3组.比较飞行员组与对照组间以及不同飞行时间组间各检测指标的差异. 结果 飞行员组外周血CD45+淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞表面标志均值明显高于对照组(0.365±0.074与0.308±0.084和0.370±0.075与0.320±0.071),差异有统计学意义(t=3.051、2.752,P＜0.01);CD4+/CD8+比值低于对照组(1.34±0.54与2.04±1.54),差异有统计学意义(t=2.928,P＜0.01);其他指标两组间差异无统计学意义.不同飞行时间组间的外周血CD4+/CD8+比值均值、初始CD8+T淋巴细胞、记忆CD8+T淋巴细胞表面标志均值的差异有统计学意义(P＜0.05),而CD45+淋巴细胞、CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、初始CD4+T淋巴细胞、记忆CD4+T淋巴细胞、调节性T淋巴细胞表面标志均值的差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 本组飞行员外周血CD45+淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞表面标志均值及CD4+/CD8+比值与对照组存在差异;不同飞行时间组飞行员外周血CD4+/CD8+比值及初始CD8+T淋巴细胞、记忆CD8+T淋巴细胞表面标志均值存在差异;提示歼击机飞行员的免疫系统有一定变化,可能与飞行环境有关,应积极采取相应的防护措施.
关键词： CD4阳性T淋巴细胞 CD8阳性T淋巴细胞 淋巴细胞亚群 歼击机飞行员 -
CD8+T细胞耗竭的细胞及分子机制研究进展
在慢性炎性反应及肿瘤进展过程中，T细胞持续暴露于炎性因子及抗原中，导致T细胞功能退化，即T细胞耗竭。功能耗竭的T细胞其效应功能受损，表达大量抑制性受体，且转录调控机制也发生显著改变。T细胞耗竭会影响机体对持续感染及肿瘤的有效控制，而逆转耗竭T细胞的功能有助于恢复机体正常的免疫效应。现以CD8+T细胞为代表，总结CD8+T细胞耗竭相关细胞及分子机制研究进展，以及相关抗感染及肿瘤的新的治疗策略。
关键词： CD8阳性T淋巴细胞 感染 肿瘤 综述 -
肝移植受者外周血CTL及Th1细胞占比变化与乙肝疫苗接种成功的相关性
目的 探讨肝移植受者外周血细胞毒性T淋巴细胞(CTL)及Th1细胞占比变化与乙肝疫苗接种成功的相关性.方法 以在解放军总医院第三医学中心肝脏移植科长期随诊的乙肝相关性肝病肝移植受者为研究对象,将受试者随机分为两组进行前瞻性研究:快速组在第0、1、2、3个月各接种1剂40μg乙肝疫苗,第4、5、6个月各接种20 μg;快速加强组在第0、1、2、3个月各接种1剂40μg乙肝疫苗,第4、5、6个月各接种60μg.比较分析两组接种成功率、接种前后外周血乙肝表面抗体(抗-HBs)滴度及CTL细胞占CD8+T细胞比例、Th1细胞占CD4+T细胞比例变化,对CTL细胞及Th1细胞变化幅度与抗-HBs变化幅度进行相关分析.观察疫苗接种的安全性.结果 快速加强组接种成功率、抗-HBs增幅、CTL细胞占比增幅及Th1细胞占比增幅均大于快速组,差异有统计学意义,分别为38.3％(23/60)比21.7％ (13/60) (P=0.046)、91.3(72.5,124.2)比22.1(12.4,31.6) (P=0.001)、1.4(0.8,1.9)比0.4(0.2,1.4) (P=0.001)和7.4±2.6比5.6±3.7(P=0.001).成功组CTL细胞占比增幅和Th1细胞占比增幅均大于非成功组,差异有统计学意义,分别为1.9(1.4,2.5)比0.1(0.0,1.1)(P=0.024)和9.6±3.1比2.4±2.0 (P＜0.001).全组资料抗-HBs增幅(105.5±37.1)与CTL细胞占比增幅1(0,3)无相关性(P=0.099)而与Th1细胞占比增幅7(2,11)呈正相关(P＜0.001).研究期间未发生排斥反应,安全性指标无特殊异常变化.结论 合理增加疫苗剂量可上调Th1细胞表达,进而促进抗-HBs生成.
关键词： 肝移植 疫苗 CD8阳性T淋巴细胞 Th1细胞 -
白细胞介素7对非小细胞肺癌患者CD8+T细胞抗肿瘤活性的影响
目的 观察并分析白细胞介素7(IL-7)对非小细胞肺癌(NSCLC)患者CD8+T细胞抗肿瘤活性的影响.方法 入组2017年1-7月在郑州市中心医院就诊的27例NSCLC患者(肺癌组)和10例健康对照者(对照组).分离肺癌组血浆、外周血单个核细胞(PBMCs)和肿瘤部位和非肿瘤部位的支气管肺泡灌洗液(BALF)及对照组血清和PBMCs,检测IL-7水平和IL-7受体CD127 mRNA相对表达量.使用重组IL-7刺激纯化的CD8+T细胞和原代NSCLC,观察细胞增殖、分泌细胞因子和IL-7信号通路相关蛋白的表达变化.建立CD8+T细胞和原代NSCLC细胞的直接/间接接触共培养系统,观察IL-7刺激对CD8+T细胞的细胞杀伤和非细胞杀伤功能的变化.结果 肺癌组外周血中IL-7水平显著低于对照组[1 731(1 364,2 536)比2 686(1 692,4 786) ng/L,P=0.023],肺癌组肿瘤部位分离的BALF中IL-7水平亦显著低于非肿瘤部位[(1045(562,1 550)比1 599(1 166,2 107) ng/L,P =0.006 9].两组间CD127 mRNA相对表达量差异无统计学意义.IL-7刺激原代NSCLC细胞后对细胞增殖及分泌细胞因子无影响,但IL-7刺激可显著增加CD8+T细胞的增殖及干扰素γ和肿瘤坏死因子α的分泌,CD8+T细胞中信号传导及转录激活因子5的磷酸化和细胞因子信号抑制物3的表达亦明显升高.IL-7刺激还显著提升CD8+T细胞对原代NSCLC细胞的杀伤功能和非细胞杀伤功能.结论 IL-7可增强NSCLC患者CD8+T细胞的抗肿瘤功能.
关键词： 癌 非小细胞肺 白细胞介素7 CD8阳性T淋巴细胞 抗肿瘤 -
CD8+T细胞亚群对免疫抑制重症患者肺部侵袭性真菌感染的早期预测价值
目的 探讨CD8+T细胞及其CD28、CD38、HLA-DR激活亚群对免疫抑制重症(ICCI)患者肺部侵袭性真菌感染(PIFI)的预测价值.方法 前瞻、对照研究,入选ICCI合并肺部感染患者80例,入重症监护病房(ICU)后第1、3、7天(D1、D3、D7)用流式细胞术检测外周血CD8+T细胞亚群计数水平,根据欧洲/美国国家真菌感染治疗研究组( EORTC-MSG) 2008年共识进行PIFI诊断,同期以40例非感染非ICCI患者作为对照.结果 71.3％ (57/80)ICCI患者确诊和临床诊断PIFI,包括霉菌感染22例、念珠菌感染22例、霉菌和念珠菌混合感染13例.监测期间ICCI患者CD8+T细胞、CD28和CD38亚群的细胞计数均低于对照组,HLA-DR亚群细胞计数高于对照组(均P＜0.01)；ICCI组中PIFI患者CD8 +T细胞、CD28和CD38亚群的细胞计数低于非真菌感染患者(均P＜0.01),HLADR亚群细胞计数在两组间差异无统计学意义.受试者工作特征曲线分析显示,CD8+ CD28+亚群细胞计数对PIFI的预测能力较高,曲线下面积分别为D1:0.83(95％ CI:0.74～0.92),D3:0.84(95％CI:0.75 ～0.93),D7:0.87(95％ CI:0.78 ～0.96);以佳界值(D1 ＜64个/mm3,D3 ＜75个/mm3,I7 ＜88个/mm3)为标准,诊断PIFI的敏感度和特异度分别为D1:0.73(95％ CI:0.61 ～0.85),0.90(95％CI:0.77～1.00);D3:0.74(95％ CI:0.62 ～0.85),0.91 (95％ CI:0.78 ～ 1.00);D7:0.71 (95％CI:0.58 ～0.84),0.95(95％ CI:0.85 ～1.00),诊断符合率为D1:77.8％,D3:79.5％,D7:78.5％.以ICU收住时间为起点,以CD8+ CD28+细胞计数阳性为标准诊断PIFI所需时间明显短于以影像学改变或真菌学证据阳性为诊断标准所需时间(P＜0.01).结论 ICCI患者CD8+T细胞及其亚群的表型分布与PIFI密切相关,监测CD8+ CD28+细胞计数对早期预测PIFI具有一定参考价值.
关键词： 真菌病 CD8阳性T淋巴细胞 免疫抑制危重 -
CD40对烟草烟雾暴露肺气肿小鼠肺部CD8+T细胞毒性功能的影响
目的 探讨CD40对烟草烟雾暴露肺气肿小鼠肺部CD8+T细胞毒性功能的影响.方法 40只雄性C57小鼠按随机数字表法随机分为CI40+/+对照组、CD40+/+烟熏组、CD40-/-对照组、CD40-/-烟熏组4组,烟熏组采用烟草烟雾暴露24周建立小鼠肺气肿模型.各组肺组织分别采用HE染色观察肺部病理改变并计算肺泡平均内衬间隔;免疫组织化学法检测CD8+T细胞和穿孔素+、颗粒酶B+细胞百分比;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测穿孔素、颗粒酶B、白细胞介素(IL)-27mRNA表达;酶联免疫吸附(ELISA)法检测IL-27细胞因子水平.结果 CD40+/+烟熏组肺组织明显破坏,可见大量炎症细胞浸润;CD40-/-烟熏组肺组织破坏及炎症细胞浸润程度较CD40+/+烟熏组轻.CD40+/+烟熏组肺泡平均内衬间隔显著高于CD40+/+对照组、CD40-/-对照组和CD40-/-烟熏组[(37.2±3.6)比(24.0±3.4)、(22.5±2.4)、(29.9±1.7) μm](均P＜0.05);CD40-/-烟熏组高于CD40+/+对照组及CD40-/-对照组(均P＜0.05).CD40+/+烟熏组CD8+、穿孔素+、颗粒酶B+细胞百分比[(16.3±2.3)％、(11.4±2.1)％、(10.7±1.9)％]均显著高于CD40+/+对照组[(8.3±1.6)％、(5.1±1.2)％、(4.6±1.0)％]、CD40-/-对照组[(6.4±1.5)％、(4.3±1.0)％、(4.2±1.0)％]、CD40-/-烟熏组[(8.6±1.7)％、(5.6±1.3)％、(5.5±1.3)％](均P＜0.05).CD40+/+烟熏组穿孔素、颗粒酶B、IL-27 mRNA相对表达量[(20.3±7.3)、(18.3±12.3)、(2.2±0.7)]均显著高于CD40+/+对照组[(9.4±4.8)、(10.6±3.8)、(1.3±0.6)]、CD40-/-对照组[(8.1±3.1)、(7.7±3.5)、(1.1±0.5)]、CI40-/-烟熏组[(12.9±6.2)、(10.4±4.6)、(1.5±0.4)](均P＜0.05).CI40+/+烟熏组细胞因子IL-27水平显著高于CID40+/+对照组、CD40-/-对照组、CD40-/-烟熏组[(3 242 ±754)比(1 627 ±710)、(1 600±680)、(1 850±583)ng/L](均P＜0.05).结论 CD40基因敲除可以抑制烟草烟雾暴露肺气肿小鼠肺部CD8+T细胞毒性功能,减轻肺气肿程度.
关键词： TNF受体相关因子3 CD8阳性T淋巴细胞 肺气肿 小鼠 -
进展期胃癌术后长期生存影响因素的研究
目的:探讨影响进展期胃癌术后长期生存的主要因素.方法:收集64例长生存组和65例短生存组的进展期胃癌患者资料.免疫组化检测胃癌局部浸润的CD8+T和FOXP3+T淋巴细胞.结果:CD8+T淋巴细胞主要分布于癌巢的间质中,部分呈巢状分布.FOXP3着色位于淋巴细胞核内.长生存组的CD8+T高表达率高于短生存组,FOXP3+T高表达率低于短生存组,差别有统计学意义(P＜0.05).2组患者的性别、年龄、组织类型、肿瘤直径和清扫范围间的差异无统计学意义(P＞0.05).在肿瘤部位、浸润深度、淋巴结分期及转移率、切除方式方面,2组差异均有统计学意义(P＜ 0.05或P＜0.01).Logistic同归结果显示FOXP3+T细胞阳性表达率、切除方式、浸润深度和淋巴结转移率是影响长期生存的因素.结论:FoxP3+T细胞、切除方式、浸润深度和淋巴结转移率与进展期胃癌术后长生存有关.
关键词： 胃肿瘤 癌 存活率 病理学 临床 Logistic模型 免疫组织化学 CD8阳性T淋巴细胞 FOXP3阳性 T淋巴细胞
