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0.35T磁共振系统上心脏成像技术及其应用(下)
2.2临床应用1)瓣膜改变2)陈旧性心肌梗塞3)心肌肥厚图7、图8为同一受试者的2腔室观面和4腔室观面像,该受试者临床听诊二尖瓣区有收缩期杂音,怀疑二尖瓣关闭不全,采用cine_trufi序列分别进行2腔室观面和4腔室观面电影成像,通过从不同角度观察二尖瓣的开合运动,未发现二尖瓣狭窄或关闭不全,但可看到二尖瓣松弛,可能系瓣膜弹性降低所致.
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丙型肝炎病毒西安株2a型包膜蛋白E区部分cDNA的分析
丙型肝炎病毒(HCV)包膜蛋白区(E区)基因是HCV基因组中变异大的部位,不同分离株的核苷酸差异可达40%左右[1]。作者对陕西省HCV地方株的全部E1,部分E2/ NSI区进行了序列测定,并与已发表的多个株做同源性比较。 1.材料和方法:HCV血清取自西京医院丙型肝炎患者,血清经5′非编码区通用引物RT-PCR确认HCV RNA阳性,引物参照HC-J6设计[2]。序列分别为:R1(+)GTGGGTAA-GGTCATCGAT(695~712),R2(+)GCCGACCTCATGGGGTAC-(731~748),R3(-)ACCTAGTGCCAACTGCCATTGGT(1 586~1 603),R4(-)GTTGATGTGCCAACTGCC(1 592~1 609)。 用异硫氢酸胍-冷酚法一步提取HCV RNA,反转录成cDNA,用R1/R4,R2/R3进行套式PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳鉴定,产物纯化、回收,与PGEM-T载体连接,克隆并测序。 2.结果:将所分离毒株的核苷酸序列和推导的氨基酸序列分别与已报道的HC-J6,HC-J1,BEBE1,HC-J8,HCV-H,HCV-HB,HCV-T的相应序列进行比较。从表1可见,在核苷酸水平上分离株E区与HC-J6相应序列的同源性为78.2%,与其他几株的同源性相对要低一些,与中国河北株HCV-HB的同源性低;在氨基酸水平上分离株E区与HC-J6相应序列的同源性为75.7%,与其他株的同源性低,与中国河北株HCV-HB的同源性低。 3.讨论:HCV 核酸存在广泛的异质性,其中E区不断发生变异,可能是使病毒在体内持续存在的原因,其变异亦可能与疾病程度、对干扰与治疗的抵抗、引起慢性化及肝细胞癌等有一定相关,赵小宁等[3]已经用RT-PCR法从1例陕西地区丙型肝炎患者血清中扩增并克隆和测定了5′NCR,C区的基因序列,分析同源性为2a型,本次研究用同一份血清,测定了全部E1区,部分E2/NSI区共878 bp的核苷酸序列,将所得序列与已报道的几株HCV序列比较后发现,我们的分离株同HC-J6的同源性大,同属于2a亚型。我国已有完整克隆的河北株、北京株和台湾株,但都属于HCV-1b型,本次对2a型的实验克隆对全面了解HCV基因组的结构及其变异,对HCV的基础及临床研究都具有重要意义。
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超广谱β-内酰胺酶基因分型的初步研究
按质粒所携带编码基因同源性的不同,将超广谱β-内酰胺酶(Extended spectrum β-lactamases,ESBLs)分为4类,即TEM型、SHV型、TEM/SHV混合型和非TEM/非SHV型(包括PER、TOHO、CTX-M、OXA型等)。本文报告绍兴地区产ESBLs细菌基因分型的初步结果。 临床标本分离、并经纸片扩散法确证为产ESBLs的细菌42株(其中大肠埃希菌26株,肺炎克雷伯菌16株)。用PCR进行酶基因分型。PCR扩增引物,根据TEM-1和SHV-1编码基因序列设计,TEM引物序列分别为:5′-TCGGGGAAATGTGCG-3′和5′-TGCTTAATCAGTGAGGCACC-3′;SHV引物为5′-TCGGCCTTCACTCAAGGATG-3′和5′-TCCCGCAGATAAATCACCA-3′。待测菌株用碱裂解法提取质粒DNA。PCR反应体积为100μl,含1×PCR反应缓冲液,3.5mmol/L Mg2+,200μmol/L dNTPs,500μmol/L引物,1.6U Taq酶(Promega),10~100ng质粒DNA模板。
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幽门螺杆菌毒力基因cagA、vacA与胃十二指肠疾病的关系
国际上已有很多国家对本国幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)分离株的vacA基因进行了研究和分析。Atherton等曾提出Hp vacA基因镶嵌型模型,将信号序列分为三型,中间序列分为两型〔1〕,但来自欧洲和日本的报告显示不同地区Hp分离株具有较高多态性,具有地区、人群相关性特点。然而,目前国内尚未见这方面的研究报告。为了解我国Hp临床分离株vacA基因型特点以及不同vacA基因同胃、十二指肠疾病的关系以及cagA基因同Hp毒力的关系,本实验进行了以下研究。
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G蛋白与原发性高血压关系的研究进展
G蛋白是一组具有GTP结合、水解活性的蛋白质,在细胞膜受体和效应蛋白之间的信息传递过程中起中介作用.G蛋白由三个亚单位组成:Gα、Gβ、Gγ.目前已知G蛋白α亚单位有21种,由17个基因编码,按照氨基酸序列分为4个亚组:Gs、Gi、Gq、G12;β亚单位有5种;γ亚单位有6种.在非活性状态下Gα与GDP联接,Gβ、Gγ构成Gβγ复合体.一旦G蛋白被激活,GDP被GTP取代,Gα则具有GTP酶的活性,并与Gβγ复合体分离.G蛋白各种α亚单位、βγ亚单位复合体可以各自独立或同时、协同或拮抗地影响效应分子的活性,调节细胞内不同酶的活性和细胞膜离子通道的开放与闭合,引发一系列复杂的细胞生物学效应.
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用RT-PCR方法从人胎肝细胞内克隆VEGF基因的研究
血管内皮细胞生长因子具有维持血管正常功能,促进血管内皮细胞增殖,提高血管通透性,改变细胞外基质的等作用,与创伤组织的修复和血管生成密切相关.为此,本研究利用RT-PCR技术钓取VEGF基因的cDNA序列.具体方法是,用常规方法从胎肝组织中提取纯度高RNA后进行甲醛变性凝胶电泳;电泳结束后,在紫外灯下可看见凝胶上有28s和18s两条清晰的电泳带,其亮度之比约为2:1,这显示:获得的RNA较完整,没有降解.取适量胎肝细胞总RNA,遵循PolyATtract(mRNA Isolation System的操作要求分离纯化mRNA后,以Oligo(dT)为引物,遵循cDNASynthesis System操作步骤合成dscDNA.根据文献报道的VEGF基因序列,用Goldkey软件设计的PCR反应体系中的上下游引物,它们分别为:上游引物为:5'-CGGCTAGCGC-CTCCGAAACCA TGAACT-3',下游引物为:5'-GGTAC-CTCACCGCCTCGGCTTGTCACATCT-3',两条引物5'端下画线碱基序列分别为NheI和KpnI的酶切位点.以逆转录反应的产物dscDNA为模板,用保真性强的pfu TaqDNA聚合酶进行扩增,其中设计的上下游引物浓度各为1mM,反应参数为:94℃变性30秒,60℃退火1分钟,72℃延伸1分钟,共25循环,后于72℃继续保温5min,反应产物以1%琼脂糖凝胶电泳鉴定.研究发现:经PCR反应后,获得的DNA片段长度为470bp左右,与预先实验设计相吻合.用干净的刀片切下含DNA片段的凝胶条,以PCR产物纯化试剂盒回收.纯化的DNA片段催化dATP加尾后,插入pGEM-T-Easy克隆载体中,构建的重组体转化DH-5a细菌,筛选出的阳性克隆命名为pT-VEGF.提取的重组质粒DNA,用限制性内切酶NheI和KpnI进行双酶切鉴定,酶切得到470bp大小的DNA片段.这进一步表明:VEGF基因的cDNA序列已克隆成功.pT-VEGF阳性克隆在ABI377全自动测序仪上进行序列分析,结果显示:通过RT-PCR方法克隆出来的DNA序列,与Genebank网站上的人VEGF121的cDNA序列完全一致,由Kozak序列,转录起始密码子ATG,信号序列,编码序列和终止密码子等部分组成.因此,本研究克隆出了表达VEGF的cDNA序列,为下一步构建VEGF基因的表达载体,揭示VEGF作用的分子机制和体外大规模合成VEGF细胞因子奠定基础.
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子宫肌瘤的MR 诊断
子宫肌瘤是女性生殖系统发病率高的良性肿瘤,在35岁以上的妇女中发病率可达到20%,绝经后妇女发病率可增加到30%~50%[1],现将我院资料完整经手术病理证实的47例子宫肌瘤进行分析,旨在探讨MR对子宫肌瘤的诊断价值。1 资料与方法1.1 临床资料本文收集1995年3月-1999年2月我院收治的子宫肌瘤患者47例。年龄34~62岁,平均46岁。以月经量增多,周期紊乱,腹痛,腹部肿块为主要症状。其中月经量增多32例,腹痛27例,盆腔肿块25例,同时出现尿频、排尿困难等压迫症状18例,出现压迫输尿管导致肾孟积水5例,肌瘤压迫直肠导致便秘,里急后重4例。有3例因不孕进行卵巢检查而发现。1.2 MR扫描方法MR扫描采用Vectra0.5T超导磁共振成像,应用SE序列分别进行T1WI(TRTE分别为50、0.15ms)T2WI(TRTE分别为2 500~3 000ms/100ms)全部病例均进行平扫。
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随机对照试验的CONSORT声明修订版:说明与详述(四)
第10条:谁产生分配顺序,谁登记病人,谁分配病人举例由Bradford Hiu教授从各中心按性别分层,生成随机数字和相应的统计序列,并按此序列分配病人,分别接受链霉素治疗+卧床休息(S方案)或仅仅卧床休息(C方案).所有序列均放在一组密封的信封里,信封上只有医院名称和一个号码.病人被试验小组接受后,进入链霉素中心前,在中心办公室打开一个标有号码的信封.信封里的卡片会提示病人是S病例还是C病例,然后才将卡片上的这些信息告知中心的医务人员.
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波形蛋白在细胞内外的不同功能与相关病理
真核细胞骨架是由微管、微丝、中间丝( Intermediate filaments ,IFs)构成的蛋白纤维网状支架系统。 IFs根据基因序列分为六种类型,不同类型中间丝的表达具有明显的组织细胞特异性。波形蛋白( Vimentin,Vim)为Ⅲ型中间丝蛋白,主要表达于中胚层起源的间充质细胞中,如成纤维细胞、内皮细胞、中性粒细胞、巨噬细胞等。 Vim在感染、肿瘤、自身免疫、固有免疫等多方面显现复杂的功能特性。
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前言--重视老年医学影像学的研究
全世界老年人口以每年2.4%的速度增长,目前全球人口60亿,老年人口数已达6亿,至2025年将上升到10亿,意味着21世纪人类全面进入老龄化.而我国老年人口绝对数为世界之冠,占全球老年人口的22%,目前有老年人口约1.3亿,已于2000年迈入老龄化国家.有资料表明,其发病序列分别为:心(包括高血压)、脑血管疾病,以及肿瘤等.而早诊断、早治疗,将减少致残率、死亡率,因此,应充分利用现代化医学影像设备对老年的相关疾病进行医学影像学的研究,以期改善和提高其生活质量.
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报告随机对照试验的CONSORT声明修订版:说明与详述(四)
第10条 谁产生分配顺序,谁登记病人,谁分配病人举例 由Bradford Hiu教授从各中心按性别分层,生成随机数字和相应的统计序列,并按此序列分配病人,分别接受链霉素治疗+卧床休息(S方案)或仅仅卧床休息(C方案).所有序列均放在一组密封的信封里,信封上只有医院名称和一个号码.病人被试验小组接受后,进入链霉素中心前,在中心办公室打开一个标有号码的信封.信封里的卡片会提示病人是S病例还是C病例,然后才将卡片上的这些信息告知中心的医务人员.