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蚌埠地区CTX-M型超广谱β内酰胺酶的检测
由质粒介导的超广谱β内酰胺酶(ESBLs)自1983年在德国首次报道以来,全世界许多地方不断有新的ESBLs检出,迄今为止已有200多种ESBLs,主要包括TEM型、SHV型、CTX-M型、OXA型及其他型别的ESBLs [1].1990年德国的Bauemfeind首先报道了一种对头孢噻肟有高度水解活性、高等电点的ESBLs(CTX-M-1).
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G蛋白与原发性高血压关系的研究进展
G蛋白是一组具有GTP结合、水解活性的蛋白质,在细胞膜受体和效应蛋白之间的信息传递过程中起中介作用.G蛋白由三个亚单位组成:Gα、Gβ、Gγ.目前已知G蛋白α亚单位有21种,由17个基因编码,按照氨基酸序列分为4个亚组:Gs、Gi、Gq、G12;β亚单位有5种;γ亚单位有6种.在非活性状态下Gα与GDP联接,Gβ、Gγ构成Gβγ复合体.一旦G蛋白被激活,GDP被GTP取代,Gα则具有GTP酶的活性,并与Gβγ复合体分离.G蛋白各种α亚单位、βγ亚单位复合体可以各自独立或同时、协同或拮抗地影响效应分子的活性,调节细胞内不同酶的活性和细胞膜离子通道的开放与闭合,引发一系列复杂的细胞生物学效应.
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基质金属蛋白酶及其抑制剂与骨肉瘤
骨肉瘤是儿童和青少年中常见的恶性骨肿瘤,因生长较快和早期发生远处转移尤其是肺转移而预后不良.多种实体肿瘤中基质金属蛋白酶(MMPs)表达增强,MMPs/TIMPs平衡紊乱有助于加强蛋白水解活性,在骨肉瘤中起重要作用.
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白及、蒲公英治疗反流性胃-食管炎的临床观察
反流性胃-食管炎是由于食管下端括约肌功能失调,胃内容物中的胃酸、胃蛋白酶在pH<4时具有水解活性,损伤胃、食管黏膜引起的充血、水肿、糜烂等炎性改变的疾病.属中医吞酸、呕酸的范畴.其病因为脾胃运化失职,胃失和降而出现喜打呃、烧心痛、胸骨后痛,呕吐酸苦水,甚呕出咖啡样物.几年来笔者采用白及、蒲公英治疗反流性胃-食管炎125例,疗效佳,现报道如下.
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自制HYD液对大鼠肝脏低温保存后生化功能影响的研究
目的研究自制HYD液对大鼠肝脏低温保存后生化功能的影响。方法采用大鼠肝脏非循环离体灌注模型,比较HYD液、UW液和乳酸林格液(LR液)对大鼠肝脏6、12、24、30、36h保存后生化功能的影响。结果保存12h的肝脏,其各项生化功能HYD组明显优于LR组(P<0.05)。三磷酸腺苷(ATP)、磷酸腺苷(TAN)含量及Atkinson能荷(AEC),HYD组略高于UW组,且保存36h差异有显著性(P<0.05)。线粒体H+-ATP酶水解活性及肝脏分泌胆汁量,HYD组略高于UW组(P<0.05),但差异无显著性(P>0.05)。保存30、36h后保存液pH值,HYD组明显高于UW组。流出液酶学含量,HYD组与UW组差异无显著性(P>0.05)。结论 HYD液保存鼠肝12h效果明显优于LR液,保存36h与UW液相当,在改善低温保存及再灌注肝脏能量代谢、预防细胞内酶中毒、分泌胆汁量及肝脏原位灌洗等方面,HYD液略优于UW液。
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溶组织内阿米巴半胱氨酸蛋白酶的纯化及其活性的初步研究
目的探索溶组织内阿米巴通过基底膜进入固有膜的机制,了解其半胱氨酸蛋白酶(cysteine pro-teinase, CP)与胞外基质的相互作用.方法阿米巴裂解液通过laminin-Sepharose亲和层析和分离纯化,经分子量测定、测序及抑制剂实验,证明为CP,以凝胶电泳测定其水解活性.结果纯化的CP与1aminin有较强亲和力,其分子量为27 kDa,被EC-64所抑制,并具水解活性.结论溶组织内阿米巴半胱氨酸蛋白酶与胞外基质laminin特异性结合,起水解作用,可能是入侵肠粘膜细胞基底膜的关键.
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梅毒螺旋体金属蛋白酶水解纤维蛋白原的活性研究
目的:研究梅毒螺旋体金属蛋白酶Tp0751对细胞外基质纤维蛋白原的水解能力,为深入研究TP的致病机制提供实验依据。方法采用两点法构建H198A突变型及H202A突变型Tp0751基因,分别构建野生型和突变型Tp0751原核载体进行诱导表达;体外实验检测Tp0751野生型Tp0751蛋白、H198A Tp0751突变型蛋白、H202ATp0751突变型蛋白对纤维蛋白原的降解活性。结果成功表达并纯化了野生型Tp0751蛋白、H198A Tp0751突变体蛋白、H202A Tp0751突变体蛋白,各蛋白相对分子量大小约为26kD;纤维蛋白原在与野生型Tp0751蛋白作用约24h后被完全水解;与 H198A Tp0751突变体蛋白作用约24 h 后部分水解,尚有部分未被降解;与H202A Tp0751突变体蛋白作用约24h后几乎不被水解。结论野生型Tp0751蛋白具有水解纤维蛋白原的作用;Tp0751蛋白水解纤维蛋白原的活性可能与金属蛋白酶HEXXH域相关,影响Tp0751蛋白对纤维蛋白原的降解的活性位点可能是202位的H而不是198位的H。
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虫源性蛋白酶在寄生虫感染与免疫作用的研究进展
蛋白酶是一类广泛分布于微生物、植物和动物中具催化蛋白质肽键水解活性的酶的总称.近年来,随着寄生虫基因组和后基因组研究的深入,发现了一批在寄生虫感染与免疫中发挥重要作用的虫源性分子,寄生虫蛋白酶就是其中的典型代表.
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产SHV型超广谱β内酰胺酶不动杆菌的检测及其耐药表型和基因型研究
目的:研究临床分离的产SHV型超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum βlactamases,ESBLs)不动杆菌对常用抗生素的耐药性及其基因类型.方法:采用NCCLS推荐的酶抑制剂联合三代头孢菌素低抑菌浓度(MIC)法、NCCLS推荐的ESBLs表型确证法、双纸片协同法、酶抑制剂增强纸片扩散法及E-test检测ESBLs,并进行比较;采用紫外分光光度计测定7株ESBLs标准产酶株对第三代头孢类抗生素的水解活性;采用纸片扩散法测定产ESBLs不动杆菌对临床常用18种抗生素的耐药性;使用聚合酶链反应(PCR)技术扩增20株产ESBLs不动杆菌bla shv基因,测定并分析它们的核苷酸和氨基酸序列.结果 60株不动杆菌中32株产ESBLs菌株,占53.3%(32/60),五种鉴定方法的结果无显著性差异,但实际操作中各有利弊,双纸片协同法受涂布菌液浓度和纸片间距的影响较明显.
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角蛋白酶研究进展
皮肤真菌与角蛋白有着特殊的亲合关系,往往侵犯皮肤的角质层、甲、毛发等部位.20世纪40年代,科学家们相继发现许多微生物能分泌一类具有角蛋白水解活性的酶,称为角蛋白酶,并进行了有关研究,但进展缓慢.近十年来,随着分子生物学技术的发展,角蛋白酶再次成为研究的热点,并取得了明显的进展,本文就角蛋白酶的生物学特征、研究进展及其在皮肤科和美容领域的可能应用进行综述.