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旋磁场对大鼠脏器超氧化物歧化酶活力和丙二醛含量的影响
磁场对生物体的影响已有许多报道 [1-3].磁场具有增强机体清除自由基、促进代谢及改善微循环等作用 [4].为了研究旋磁场对大鼠脏器超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的影响,我们对20只大鼠的脏器进行了测定.
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检测胆汁糖蛋白糖链结构变化鉴别良性胆道疾病
我们通过检测良恶性胆道疾病患者胆汁中糖蛋白糖链结构的差异和胆道恶性肿瘤组织中糖基转移酶活力的改变,探讨这些变化在良恶性胆道病变中的鉴别诊断价值.
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葱白中粗酶的性质考察
目的:对葱白中粗酶的性质进行研究.方法:采用丙酮酸法测定葱白中粗酶的活力,考察不同温度、pH值和金属离子以及不同灭活方式等条件对粗酶活力的影响.结果:葱白中粗酶酶促反应在4 min内基本完成,反应适温度为35℃;适pH值为6.2;Ca2+对粗酶有较强的激活作用,而Fe3+,Cu2和Zn2+则对粗酶的活力表现出明显的抑制作用;葱白中粗酶溶液经过微波处理和高温处理以及直接用甲醇溶解处理后,基本被灭活.结论:葱白中粗酶的活力需要有适的反应温度、pH值以及离子活性中心,且与大蒜中蒜氨酸酶的性质存在差异.
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六神曲佳发酵周期研究
目的:探讨不同发酵时间六神曲中淀粉酶、糖化酶、蛋白酶活力的动态变化规律,验证六神曲样品对小鼠肠胃运动的影响,为六神曲佳发酵周期的确定提供依据.方法:取8批六神曲每天发酵样品,分别测定其中淀粉酶、糖化酶、蛋白酶的活力,选择佳发酵天数.此后选取佳天数的六神曲进行药效学验证.结果:淀粉酶、糖化酶活力在第4天达到峰值,蛋白酶活力到第5天达到峰值,以第4天样品进行药效学研究发现其对小鼠肠胃运动有显著影响,同时能显著升高食积模型小鼠的胃泌素、胆碱酯酶含量,降低血清NO含量.结论:六神曲发酵第4天,综合酶活力较高,且经验证有较好的消食作用,因此其佳发酵时间为第4天左右.
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绿茶多酚对急性酒精性肝损伤Cyt C水平及酶活力的影响
目的:探讨绿茶多酚对急性酒精性肝损伤的作用机制。方法:酒精灌胃复制小鼠急性酒精性肝损伤模型,酶标光度分析检测肝功能、肝组织ATP酶活力,ELISA检测胞浆及线粒体细胞色素C( Cyt C)。结果:与模型组相比,绿茶多酚高剂量组肝指数、ALT、AST、胞浆及线粒体Cyt C水平降低,Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力明显升高。结论:绿茶多酚改善酒精性肝损伤,可能与抑制Cyt C释放及增强代谢酶活力机制相关。
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实验性癫痫鼠脑组织环核苷酸及ATP酶的测定
已有文献报道环核苷酸包括环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)及ATP酶对电解质离子均有调整作用[1],推测它们在癫痫发病机理中可能有作用,并已表明Na+-K+-ATP酶活力下降具有肯定的致痫作用[2],但对环核苷酸及其它离子ATP酶在癫痫中的作用及它们在癫痫中的相关性少有研究,本文利用癫痫动物模型检测cAMP、cGMP及3种ATP酶的变化来进一步探讨.
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木瓜酶酶活力测定方法在实际生产中的适用性
目的:考察木瓜酶酶活力测定方法在实际生产中的适用性.方法:采用空白颗粒直接压片法生产木瓜酶片;分别采用国家药品标准中木瓜酶及片剂的效价测定方法进行酶活力测定.结果:两种方法测得木瓜酶的酶活力结果(C1、C2)相对误差达1倍左右;按C1值投料,投料结果与理论值的相对误差约为50%;而按C2值投料,投料结果与理论值的相对误差可控制在10%以内.结论:木瓜酶酶活力的效价测定方法用于指导制剂生产,其适用性尚值得探讨.
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急性心肌梗塞患者心电监护及护理体会
急性心肌梗塞(AMI)是内科常见的急症之一,主要是由于冠状动脉急性闭塞,血流中断,导致部分心肌因严重的持久性缺血而发生局部坏死(1).其起病急、进展快、病死率高,临床上有剧烈而较持久的胸骨后疼痛、发热、白细胞增多、红细胞沉降率加快、血清心肌酶活力增高及进行性心电图改变,可发生心律失常、休克或心衰.如果在药疗基础上同时施以心电监护及采取有效的护理措施,可降低其病死率.
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选择适当的延迟时间消除不及时分离血清对转氨酶活力的影响
在日常工作中,我们发现全血标本放置过久会引起ALT、AST测定结果的假性增高,尤其是使用速率法测定ALT、AST时尤甚,其ALT、AST测定结果可相差近8倍[1],有人认为可能是延迟时间太短所致[1].
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海口地区正常人1-12岁年龄组碱性磷酸酶水平调查
近年来,随着对小儿佝偻病防范意识的增强,许多医院都十分重视小儿碱性磷酸酶的检测,由于海南地区处亚热带、地理、环境与内陆差异很大,因此本文对海口地区部分儿童碱性磷酸酶活力进行调查分析,现将调查结果报告如下:1. 调查对象与方法1.1 对象海口地区1-12岁保健体检儿童,男312人,女201人,共513人.
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中药对烫伤大鼠肠粘膜Na+-K+-ATPase、Mg2+-ATPase、Ca2+-ATPase活性的影响
ATP酶是生物膜上的一种蛋白酶,它在物质运输、能量转换、信息传递方面具有重要的作用.当机体在缺氧、衰老及某些疾病的状态下,此酶活力将发生一系列改变[1].有研究表明,烧伤后产生的烧伤毒素、肿瘤坏死因子等对ATP酶活性有抑制作用[2].本研究旨在观察烫伤后大鼠肠粘膜ATP酶活性变化,并探讨四君子汤加味中药煎剂是否有拮抗烫伤后肠粘膜ATP酶活性降低的细胞保护作用.
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肝素抗凝血浆用于检测十项酶活力生化指标的探讨
目的探讨肝素抗凝血浆用于检测十项酶活力生化指标的可行性.方法采用日立7170A全自动生化分析仪,测定30例患者的血清和肝素抗凝血浆十项酶活力生化指标.结果血清和血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(AKP)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、胆碱酯酶(CHE)、α-淀粉酶(AMY)结果无显著性差异(P>0.05),而乳酸脱氢酶(LDH)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)存在极显著性差异(P<0.001),血清LDH浓度(Y1)与血浆GGT浓度(X1)的回归方程为Y1=0.963 7 X1+9.644 3,r1=0.998 2;血清GGT浓度(Y2)与血浆GGT浓度(X2)的回归方程为Y2=0.986 9 X2+9.673 2,r2=0.998 2;α-L岩藻糖苷酶(AFU)存在极显著性差异(P<0.001),血清AFU浓度(Y3)与血浆AFU浓度(X3)的回归方程为Y3=1.800 7X3-21.709 0,r3=0.518 2.结论肝素抗凝血浆适合于检验上述的ALT、AST、AKP、CK、CK-MB、CHE、AMY、LDH及GGT九项酶类生化项目,可快速报告结果,但应注意LDH血浆和血清中存在恒定浓度差(约19U/L),GGT血浆和血清中也存在恒定浓度差(约10U/L),应予以纠正.AFU不能用肝素抗凝血浆作生化检验.
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无痛性心肌梗死心电图及临床分析
心肌梗死(myocardial infarction,MI)是冠状动脉闭塞、血流中断,使得部分心肌因严重的持久性缺血而发生的局部坏死.大多有剧烈而较持久的胸骨后疼痛、发热、白细胞增多、红细胞沉降率加快、血清心肌酶活力增高及进行性心电图变化,可发生心律失常、休克或心力衰竭.临床上有部分患者因无明显胸痛或其他部位疼痛等症状而容易被忽略或误诊,极易产生严重不良后果.我们选择本院2003年1月~2005年12月期间的76例门诊和住院患者无痛性心肌梗死患者的心电图资料做一分析,旨在从中发现有价值的心电图信息,以便更好地提高临床诊治水平和提前防治,减少不良事件发生率.
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12例敌敌畏中毒的抢救
我院自 2001~2003年共收治口服敌敌畏中毒患者 12例,现将治疗体会总结如下.1 临床资料 口服敌敌畏中毒共 12例,男 4例,女 8例,服药时间 10~40分钟,中毒程度为轻、中、重.轻度中毒:表现为头晕、恶心、乏力;中度中毒:表现前述症状外有大汗,呼吸道分泌物增多,出现肌肉震颤,四肢无力;重度中毒:进一步出现意识障碍,呈深昏迷状态.压眶反应迟钝,呼吸浅慢,口唇紫绀.口角有大量白色分泌物,双侧瞳孔缩小,并有呼吸衰竭,脑水肿,肺水肿,胆碱脂酶活力 30%以下.
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家族性帕金森病一家系11例
先证者(Ⅵ10) 女,37岁.1年前出现双下肢发僵、乏力、运动迟缓,常便秘.查体:血压143/68 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),表情呆滞、动作及言语减少,语音尚清晰,智能检查无明显异常,颅神经检查正常.颈软,心、肺、肝、脾、肾无异常发现,四肢无明显震颤,肌张力呈铅管样增高,肌力Ⅴ级,腱反射稍弱、对称.实验室检查:血、尿及大便常规、血沉、血糖、肝功能、电解质检查正常,血清铜蓝蛋白含量0.34 g/L,铜氧化酶活力为0.4吸光度(旧称光密度),脑CT无异常.加用L-Dopa治疗后症状减轻. 家系调查(图1):共5代82人,患者11例,男6例,女5例,存活患者年龄37~79岁,发病年龄26~45岁,平均36岁.所有患者均隐袭起病,进行性加重,均具有震颤、肌张力增高及运动减少症状中致少两项,有的还合并植物神经及多发性周围神经受累的症状.本家系具有以下特点:(1)第1代仅一方患病;(2)男女均有发病,发病男女比例接近1∶1;(3)前4代连续有发病患者,第5代尚未发现患者,可能与未到发病年龄有关;(4)双亲无病时,子女中未发现患者.
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微板赖氏法酶标仪定量测定ALT酶活力
丙氨酸氨基转移酶(ALT)的测定,是对献血者不可缺少的筛查项目之一。方法上有速率法和赖氏法等。目前全国各采供血机构发展很不平衡,大多没有价格昂贵的大型自动化设备,不能使用FICC推荐方法(速率法),还是采用赖氏试管法,费工、费时,不但从方法上得不到统一,而且不利于计算机对原始数据的网络化管理。为此笔者建立了微板酶标仪定量(U/L),利用酶标仪与计算机接口,联接血站局域网络,同其他酶法检测项目一样,实现了实验室原始数据的计算机管理,现介绍如下。
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人重组烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶2的表达、纯化及酶活力测定
目的:通过大肠杆菌体系诱导表达烟酰胺单核苷酸腺苷酰转移酶2(NMNAT2),并测定纯化的重组NMNAT2酶蛋白催化烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)生物合成的酶比活力.方法:在大肠杆菌BL21(DE3)体系优化条件下诱导表达NMNAT2重组蛋白,利用Ni-NTA Superflow Kit进行目的蛋白的纯化,Western blot法进行鉴定,并通过酶联荧光法测定其催化产物NAD,测定其酶活性.结果:人重组质粒NMNAT2-pET-24a可以在大肠杆菌BL21(DE3)体系中诱导表达.诱导条件为:LB培养液(卡那霉素,15 μg/mL)中37 ℃,IPTG(1.0 mM)诱导表达4 h.纯化获得的NMNAT2重组蛋白具有较高的酶活性.结论:NMNAT2-pET-24a可在大肠杆菌BL21(DE3)体系中稳定表达,优化条件下可获得较高活性的纯化NMNAT2重组蛋白,可用于神经保护功能及酶蛋白的活性调控研究.
关键词: 烟酰胺单核苷酸腺苷酰转移酶-2 纯化 酶活力 轴突退变 神经保护 -
双波长测定法中次波长毫摩尔消光系数的计算
目前,有很多生化分析仪采用了双波长测量法进行酶活力浓度的测定.如果在样品的测量过程中全程用双波长读取吸光度,由于呈色物质在次波长上也有吸光度,所以在计算F(计算因子)时要用呈色物质在主波长上毫摩尔消光系数减去其在次波长上的毫摩尔消光系数[1].
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MD-100型半自动生化分析仪K值的影响因素
半自动生化分析仪在中、小型医院检验科已普遍使用,但在酶活性与体内代谢产物测定时由于不采用标准品绘制标准曲线,而通常应用酶动力学反应线性期中每分钟吸光度的变化值(A/min)乘以计算因数K值(即理论K值)的方法,求酶活性反应浓度或体内物质含量,因此常常存在理论K值的可靠性问题,通常情况下,酶活力的计算因子K值主要由郎伯-比尔定律推导(即A=E·C·L),而实际应用中仪器性能不同和操作人员加样是否手法一致准确等因素均可导致结果误差.本研究针对该现象,对仪器的K值进行了检查与较正,同时探讨了不同操作人员间加样对K值的影响,现报道如下.
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超氧化物歧化酶霜的制备及活力测定
改进提取工艺(以磷酸盐缓冲液替代水溶解、透析),从猪血红细胞中提取超氧化物歧化酶(SOD);制成SOD霜,并对其酶活力稳定性进行了初步研究.结果表明,改进工艺可减少SOD活力的丢失,SOD霜在低温(4℃)和室温(25℃)酶活力较稳定.