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焦三仙口服液治疗小儿消化不良的临床观察
焦三仙口服液由山楂(炭)、六神曲、麦芽(炒)组成,具有健脾开胃,行气消食的功效.本文对临床应用焦三仙口服液治疗小儿消化不良症观察如下:……
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六神曲的质量调查与评价研究
目的 调查六神曲的质量现状,完善其质量评价方法.方法 对六神曲的文献研究、市场调研及对各地六神曲样品的外观性状、显微特征及酶活力进行比较分析.结果 各地药品标准中六神曲的制作工艺要求不一,差异主要体现在原料配比与生产条件上;市场六神曲的产品来源有4种,少数源自正规厂家,多数来自小作坊,其发酵制作缺乏规范,生产加工的随意性较大;不同产地的六神曲外观性状差别主要体现在颜色、质地、表面和断面特征上;各地六神曲粉末显微特征鉴别大多含有麦麸的单细胞非腺毛与种皮珠心残余细胞,多数缺乏苦杏仁的石细胞,部分缺乏赤小豆的栅状细胞及脐点裂隙状淀粉粒;淀粉酶活力有显著差异.结论 六神曲市场待规范,其质量评价体系待完善.
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NIR结合LS-SVM用于六神曲发酵过程质量监测的适用性研究
目的:考察近红外光谱分析(NIR)技术结合小二乘支持向量机(LS-SVM)用于六神曲发酵过程质量监测的适用性.方法:利用近红外光谱仪获取67个发酵过程六神曲样品在400-2 500 nm范围内的光谱数据,并用Folin-酚法与DNS法分别测定了六神曲样品的蛋白酶与淀粉酶活力,运用LS-SVM建立蛋白酶与淀粉酶活力的预测模型.结果:蛋白酶近红外模型的Rc与Rp值分别为0.975,0.938;RMSEC与RMSEP分别为5.297,9.795;淀粉酶近红外模型的Rc与Rp值分别为0.987,0.973;RMSEC与RMSEP分别为7.215,6.864.结论:此模型可用于六神曲发酵过程中蛋白酶与淀粉酶活力的定量分析,为六神曲发酵过程质量参数的在线检测奠定了基础.
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六神曲的发酵菌种分离及纯种发酵考察
目的:筛选优势菌种,探索纯种发酵对六神曲发酵炮制品质量的影响.方法:采用微生物菌种分离方法,从实验室自制和同仁堂购买的六神曲中筛选菌种,采用部分霉菌进行六神曲纯种发酵后淀粉酶及蛋白酶活力测定.淀粉酶活力测定依据碘-淀粉比色法,蛋白酶活力测定采用Folin试剂法.结果:筛选出12株霉菌,黄曲霉能显著提高六神曲淀粉酶和蛋白酶的活力,自制六神曲中分离的杂色曲霉产蛋白酶活力高,其次为同仁堂分离的肉色曲霉和伞枝犁头霉,其余各组产蛋白酶活力明显低于传统自然发酵组.结论:六神曲原材料中不含淀粉酶、蛋白酶,纯种发酵能稳定提高六神曲发酵炮制品的质量.
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鲜干品组方及不同制法六神曲中消化酶活力的动态检测及分析
目的:探讨青蒿等鲜干品组方及不同制法对六神曲中脂肪酶、淀粉酶活力的影响及其动态变化规律,为六神曲发酵工艺优化及青蒿等鲜干品可能的入药机制分析提供依据.方法:通过拆方研究,制备6组六神曲样品,第1组为基本组(面粉、赤小豆、苦杏仁),第2～3组为鲜品组(基本组+鲜品榨汁、煎汁),第4～6组为干品组(基本组+干品1/3量煎汁,全量煎汁,1/3量粉碎拌料).各组分别在28,33℃条件下自然发酵,保持湿度70％ ～ 80％,发酵时间10 d,逐日动态取样,置于40℃下干燥后待测.动态测定不同温度下各组发酵样品中脂肪酶和淀粉酶的活力.结果:六神曲样品在28℃条件下发酵并不充分;在33℃条件下发酵,脂肪酶、淀粉酶活力在第3～4天达到峰值,基本组与2个鲜品组消化酶活力均明显高于干品组,差异具有显著性,基本组与鲜品组之间差异无显著性.结论:以脂肪酶、淀粉酶活力为检测指标,六神曲33℃发酵优于28℃发酵,青蒿等鲜品入药优于干品入药,鲜品煎汁组优于鲜品榨汁组;六神曲发酵时间以3～5d为宜.
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鲜干品组方六神曲发酵前后指标成分的LC-MS测定及指纹图谱分析
目的:建立六神曲的指纹图谱质控方法,比较鲜干品各组样品发酵前后槲皮苷、槲皮素、木犀草素等成分的变化状况.方法:经拆方研究,按前期优选的工艺制备六神曲基本组及鲜干品各组,分别为基本组、鲜品煎汁组、干品1/3量煎汁组及干品全量煎汁组,并于发酵前后取样检测.采用LC-MS检测,Ulitimate XB-C18色谱柱(4.6 mm× 250 mm,5μm),流动相甲醇-0.2％甲酸水溶液梯度洗脱,检测波长254 nm,电喷雾离子源(ESI),正离子模式检测.结果:确定鲜干品组方六神曲指纹图谱共有峰15个,其中10,13,15号峰分别为槲皮苷、木犀草素、槲皮素.基本组仅含木犀草素,发酵前后质量分数分别为18.5,21.3 μg·g-1,明显低于其他3组.在发酵前,鲜品煎汁组样品的3种成分含量均显著高于其他3组,与发酵前相比,发酵后木犀草素、槲皮素质量分数分别增长54.84％,4.53％;槲皮苷质量分数降低了0.76％.干品全量煎汁组发酵后3种成分含量较发酵前显著增加,其中槲皮苷、木犀草素、槲皮素质量分数分别增加了59.9％,161.7％,75.5％.结论:该质控检测方法精密、准确、重复性好,适用于六神曲的量化质量评价.发酵法可促进六神曲部分药效成分的溶出度增加及其生物转化反应的发生,初步揭示了六神曲发酵前后药效物质变化状况及鲜品入药优于干品的药效物质基础.
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六神曲中真菌的分离与鉴定
目的:对传统工艺发酵六神曲中真菌进行分离与鉴定研究.方法:采用平板划线法和菌丝顶端纯化法从传统发酵六神曲分离真菌,使用生物显微镜进行显微形态学鉴定,DNA测序进行分子生物学鉴定.结果:从传统发酵六神曲分离并确定3株真菌分别为曲霉属真菌黄曲霉菌,青霉属真菌产黄青霉菌以及枝孢属真菌枝孢霉菌.黄曲霉菌和产黄青霉菌发酵六神曲气味纯香,表面遍布白衣略有黄衣出现与传统发酵相似;枝孢霉菌发酵六神曲产生霉腐气味,曲块表面暗灰褐色与传统发酵差别大,推测枝孢霉菌为六神曲发酵中产生的杂菌.结论:从传统方法发酵的六神曲分离得到3株真菌,经形态学鉴定及分子生物学鉴定,确定3株真菌分别为曲霉属真菌黄曲霉菌,青霉属真菌产黄青霉菌以及枝孢属真菌枝孢霉菌,为六神曲有效菌群的筛选提供了重要的物质基础研究.
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近红外漫反射光谱法直接测定小儿消食片中总有机酸的含量
小儿消食片由鸡内金(炒)、六神曲(炒)、山楂等6味药组成,具有消食化滞,健脾和胃的功效,临床用于脾胃不和,消化不良,食欲不振等.其主要代表成分为有机酸,部颁标准2000年版采用酸碱滴定法测定其中总有机酸含量,其操作过程烦琐,耗时较长,效率低,而且难以满足即时控制的要求.
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高效液相色谱法测定肝络欣丸中芍药苷含量
肝络欣丸是山西旭州制药有限公司研制的三类中药新药,由黄芪、蚂蚁、赤芍、丹参、当归、蒲公英、焦山楂、青皮、枸杞子、人参、黄精、白术、地黄、虎杖、秦艽、苍术、猪苓、陈皮、六神曲、麦芽20味中药组成,剂型为水蜜丸,本品具有益气补肾,活血养肝,行滞化湿之功效,临床研究证明对治疗乙型慢性肝炎具良好效果.本文报道采用高效液相色谱法测定其处方中主要药味赤芍所含主成分芍药苷的含量,作为该品质量控制的主要方法之一.关于中药复方制剂中芍药苷的测定报告较多,目前多采用高效液相色谱法,本文主要参照文献[1,2]建立肝络欣丸的含量测定方法,经方法学验证,该法准确、可靠,可用于控制制剂质量.
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HPLC测定保和丸中橙皮苷的含量
保和丸是由山楂、六神曲、陈皮、连翘等8味中药制成的水丸和大蜜丸,具有消食,导滞,和胃之功效.用于食积停滞,脘腹胀满,嗳腐吞酸,不思饮食.<中国药典>2000年版一部未收载其含量测定方法[1].参考文献中橙皮苷含量测定方法[2],建立保和丸中陈皮所含主要成分橙皮苷的高效液相含量测定方法,以控制该产品的内在质量.
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分离培养方法结合PCR-SSCP技术分析六神曲中的真菌类群
目的:采用传统分离培养方法结合PCR-SSCP技术对六神曲中的真菌类群进行分析,为全面了解六神曲中的功能菌群奠定基础.方法:采用直接分离法获得六神曲中的可培养真菌,根据形态学及DNA序列特征对得到的真菌进行鉴定;同时提取六神曲中真菌的总DNA,采用基于β-tubulin基因片段的聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术分析其中所包含的真菌种类.结果:采用传统分离培养的方法,从生神曲中只得到黄曲霉Aspergillus flavus和米根霉Rhizopus oryzae;从焦神曲中得到黄曲霉A.flavus和黑曲霉A.niger.PCR-SSCP分析结果显示生神曲中含有3属5种真菌,其中A.ambiguus 以及A.ivoriensis占优势,相对多度分别为57％,35％,与培养方法共有的种类为A.flaw,相对多度仅为4％;但未从焦神曲中获得阳性克隆.结论:在六神曲中的真菌多样性分析中,通过PCR-SSCP分析技术能从DNA水平上发现传统分离培养方法无法获得的真菌种类,结合2种方法可以更全面地解析参与六神曲发酵的功能真菌.
关键词： 六神曲 可培养真菌 β-tubulin基因 PCR-SSCP技术 真菌类群 -
六神曲中酵母菌的鉴定
目的:对从市售六神曲样品中分离出的酵母菌进行鉴定.方法:结合形态特征鉴定,生理生化鉴定,以及26SrDNA基因序列分析进行综合鉴定.结果:所鉴定的酵母菌分别为酿酒酵母,浅白隐球酵母,库德里阿兹威毕赤酵母,扣囊拟内孢酵母.结论:经过发酵炮制后的六神曲样品中含有多种酵母菌,酵母菌是六神曲发酵炮制过程中的主要作用菌.
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六神曲不同的制备工艺对其淀粉酶活力的影响
目的:优化六神曲的制备工艺.方法:采用单因素试验,以六神曲的淀粉酶活力为评价指标,考察发酵时间及原料药的拌曲工艺等因素对六神曲淀粉酶活力的影响；同时将优制备工艺所制六神曲与市售六神曲的优品和劣品从淀粉酶活力、可溶性淀粉量、可溶性多糖量3个方面进行对比.结果:佳发酵时间为7d;赤小豆的佳处理方法为煮烂拌曲；青蒿、辣蓼、苍耳草的佳添加方式为以鲜品水煎液混合均匀后拌曲,发酵后六神曲的酶活力可达49.372 mg·min-1·g-1,可溶性淀粉含量可达7.967％,可溶性多糖含量可达16.65％,明显高于市售的2种六神曲.结论:六神曲的优制备工艺为将赤小豆粉碎后,加入面粉、苦杏仁粉末混合均匀,陆续加入青蒿、辣蓼、苍耳草的鲜品水煎液混合均匀后拌曲,发酵时间为7d.
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对《中国药典》2005年版一部有关问题的探讨
通过对2005年版<中国药典>成方制剂之[处方]名称、有效期等相关问题的整理和分析,发现有些品种的名称书写与<中国药典>中药材的名称不一致亦欠科学.作者认为,[处方]应具体反映出所用辅料和炮炙方法,应明确区分系加工品或炮制品;含六神曲等发酵制剂的成方制剂所用的中药材原料应采用限定的检测方法进行检定;中药材的采收期应附注其生长年限、成方制剂的有效期应在中药材的有效期有所保证的条件下制订.笔者的目的在于使[处方]名称的书写更为科学、严谨,为<中国药典>今后的修订再版提供参考.
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道地"六神曲"的工艺与混乱品的鉴别
六神曲是常用中药,应用于临床有很好的疗效.六神曲的功效是"健脾和胃,消食调中",是由六种药物经加工后发酵而成的饮片.但是目前六神曲的制法各地不一,所用的药物配比也不统一.
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六神曲的炮制工艺与混乱品的探讨
六神曲始载于《药性论》和《本草纲目》.北京人卫中药饮片厂按《北京市中药炮制规范》的标准生产六神曲已有20多年,在炮制工艺过程、饮片鉴别中积累了丰富的经验,笔者希望在本文中就六神曲炮制相关问题与同行及相关业内人进行深入探讨和交流.
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祛风利湿的辣蓼
在制作传统中药六神曲时要用到辣蓼.辣蓼为蓼科蓼属多种植物的全草,在北京地区,蓼属植物辣蓼、水蓼的全草均作辣蓼入药.辣蓼的原植物为一年生草本植物,生于近水草地、流水沟中或阴湿处.高0.5~2.5m,有辣味,茎直立,多分枝,表面有多数紫红色小斑点,节稍膨大.
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几种常用易混中药材的性状鉴别
目的：区别使用一些形状相似的常用中药材，因其主治功效有别，易引起临床使用混淆，延误临床疗效，造成医疗事故。方法经去全国各地培训学习，聆听国内医药大家的讲解，又查阅文献资料，系统地整理出一些常用中药材的来源以及采用性状鉴定的方法来鉴别药材，需要经验的不断积累和对中药知识的不断充实，才能认药准确。结果通过性状鉴定的方法可以区别一些常用中药材。结论性状鉴定的方法简单有效。
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近红外光谱技术无损快速鉴别半夏曲和六神曲
目的 建立一种快速鉴别半夏曲和六神曲的方法.方法 利用近红外漫反射光谱快速、无损鉴别了半夏曲和六神曲,并以它们的近红外图谱作为聚类分析对象,对其进行了快速分类.结果半夏曲和六神曲均有自己的近红外特征谱.结论 该法简便、快速、可靠,可以作为中药材质控的一个方法.
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治小儿疳积验方一则
取中药炙干蟾皮、五谷虫(焙)、炒六神曲、白茯苓、炒鸡内金各160克,胡黄连45克,人工牛黄10克,陈皮60克,共研细末,装瓶备用.
