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噬菌体生物扩增法快速测定结核分枝杆菌卷曲霉素耐药性的研究
目的 建立快速测定结核分枝杆菌卷曲霉素耐药性的噬菌体生物扩增法,并探讨其在结核分枝杆菌卷曲霉素耐药性测定中的应用价值.方法 应用噬菌体生物扩增法测定112株结核分枝杆菌卷曲霉素耐药性,并与绝对浓度法结果进行比较,对不符合的菌株采用Bactec MGIT 960测定其低抑菌浓度(MIC).以细菌接种量为10-3mg/ml,药物浓度5μg/ml、37℃作用24 h为药敏试验条件.结果 噬菌体法测定112株结核分枝杆菌临床分离株卷曲霉素敏感91株、耐药21株,绝对浓度法敏感92株、耐药20株;两法测定均为敏感89株、均为耐药18株.在5株噬菌体法与绝对浓度法测定结果不符的菌株中,3株噬菌体法与MIC测定结果相符合.如以绝对浓度法药敏结果为判断标准,则噬菌体法测定卷曲霉素耐药性的敏感性为90%(18/20),特异性为96.7%(89/92),阳性预测值为85.7%(18/21),阴性预测值为97.8%(89/91),准确性为95.5%(107/112).结论 噬菌体生物扩增法测定卷曲霉素耐药性简便快速,只需2 d时间,操作不需特殊仪器设备,具有很高的敏感性和特异性,可作为MTB的卷曲霉素耐药性快速筛选方法,建议临床推广应用.
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噬菌体生物扩增法检测结核分枝杆菌阿米卡星耐药性方法的建立及应用评价
目的 建立结核分枝杆菌阿米卡星(Am)耐药性的噬菌体生物扩增法(PhaB)快速检测技术,并探讨其临床应用价值.方法 通过不同菌量及药物浓度的筛选,建立PhaB测定结核分枝杆菌阿米卡星药敏检测方法;用该方法对108株结核分枝杆菌临床分离株进行了阿米卡星药敏检测,同步进行Bactec-MGIT960的Am药敏检测,对2种方法的检测结果进行比较分析.结果不符合的菌株测定其Am的低抑茵浓度(MIC).结果 以细菌接种量10(-3)mg/ml、药物浓度2ug/ml、37℃作用48h为药敏佳检测条件,噬菌体检测108株结核分枝杆菌临床分离株阿米卡星敏感82株、耐药26株,BactecMGIT960检测敏感80株、耐药28株;2法测定均为敏感79株、均为耐药25株.以Bactec MGIT 960测定结果为判断标准,则PhaB的敏感性、特异性、阳性和阴性预测值及符合率分别为89.3%、98.8%、96.2%、96.3%、96.3%.结论 PhaB检测结核分枝杆菌的Am耐药性有较高的敏感性、特异性和准确性,整个检测只需3d,且操作简单、不需特殊仪器设备,可作为M.TB临床分离株Am药敏快速检测备选方法之一.
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结核分枝杆菌活菌检测方法及应用
结核病是古老的传染性疾病,已在人类社会肆虐了数千年.当今,结核病仍然严重威胁着人们的生命健康.结核病发生和蔓延的过程也是人类同结核病做斗争的历程,自1882年Koch发现结核分枝杆菌是结核病的病原菌以来的100余年,特别是分子生物学技术应用后,人类对结核分枝杆菌的生物学特性、致病机制、耐药机制、诊断方法、抗结核药物的研制等方面都取得了具大的成就.结核分枝杆菌死活的鉴别具有临床意义及广泛的应用价值,是结核病的诊断、药物敏感性实验、化疗反应监测、新抗结核药物筛选及结核病预防等研究的基础.随着人们对结核分枝杆菌认识的不断深入,活菌检测的新方法也不断出现,而结核分枝杆菌的药物敏感性试验,特别是化疗疗效的评价对活菌的存在有严格的依赖性,下面我们主要对结核分枝杆菌的活菌检测方法及其在药敏分析、化疗监测方面应用的研究情况作一概述.
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1599例前列腺液标本支原体感染检测及药敏结果分析
目的：回顾本地区男性泌尿生殖道患者感染解脲支原体（UU）、人型支原体（MH）的分布状况，了解支原体对12种抗生素体外药物敏感试验的现状。方法：对1599例男性泌尿生殖道感染患者前列腺液标本进行支原体（Uu、MH）培养及药敏试验。结果：1599例检测标本中，总感染率为23.08％，单纯UU阳性277例（75.07％），UU －Mh 阳性81例（21.95％），单纯 Mh 阳性11例（2.98％）。MH 对强力霉素（DOX）、交沙霉素（JOS）、美满霉素（MIN）全部敏感，UU 对JOS、MIN、DOX、环酯红霉素（ECC）、克拉霉素（CLA）均非常敏感，UU－MH混合感染的耐药率明显高于单纯UU或MH感染。结论：临床治疗支原体感染时应尽量根据药敏结果选择敏感药物，DOX、MIN和JOS可作为本地区临床经验用药的首选药物。
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妇产科医院感染病原菌分布特点及耐药性分析
目的 分析妇产科医院感染病原菌的分布及耐药性,为临床感染性疾病的合理用药提供依据.方法 按<全国临床检验操作规程>培养分离菌种,VITEK-32鉴定仪进行细菌鉴定,纸片扩张法进行药物敏感实验.结果 共检出病原菌3 446株,其中细菌2 667株,真菌779株;产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别为17.5%和4.68%;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)发生率为2.44%,耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)的发生率为5.77%. 结论掌握临床感染常见致病菌的菌群分布及耐药性特点,合理使用抗菌药物,有助于控制医院感染.
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细胞膜渗透性对氟喹诺酮耐药表皮葡萄球菌药物敏感性的影响
目的研究表皮葡萄球菌细胞膜渗透性下降对氟喹诺酮(FQNs)类药物敏感性的影响.方法比较合用杆菌肽(BAC)、EDTA前后,敏感菌及耐药菌分别对环丙沙星(CPLX)、司帕沙星(SPLX)药物敏感性的变化;测定敏感菌、耐药菌细胞内的药物浓度及乙二胺四乙酸(EDTA)对药物浓度的影响.结果杆菌肽与2种FQNs合用对8株突变耐药菌的部分浓度抑菌指数分别为0.59和0.72,表现出协同或相加的抗菌作用.合用EDTA对敏感菌株的MIC影响不大,但可显著增加耐药菌对FQNs的敏感性,合用2.0 mmol*L-1 EDTA后CPLX和SPLX对耐药菌的MIC均下降了90%以上.敏感菌细胞内的FQNs药物浓度明显高于耐药菌,合用2 mmol*L-1 EDTA可使耐药菌细胞内的CPLX浓度从40 ng*10-9 (cells)增加到300 ng*10-9 (cells),SPLX的浓度从120 ng*10-9 (cells)增加到300 ng*10-9 (cells),而敏感菌细胞内的药物浓度上升不超过20%.结论 FQNs耐药的表皮葡萄球菌细胞膜的渗透性显著下降,导致进入细胞内的药物减少而引起细菌耐药.合用BAC,EDTA等可提高细胞膜渗透性的药物或试剂后,细菌对FQNs的耐药性可明显改善.
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2011~2013年院内分离假丝酵母菌分布及耐药性分析[1]
目的：了解院内临床感染标本分离假丝酵母菌种分布及耐药情况，为临床合理使用抗真菌药物提供实验依据。方法收集2011年1月份至2013年12月份院内临床标本中分离出现的假丝酵母菌种分布及耐药情况。假丝酵母菌种鉴定采用沙氏培养基进行真菌分离，ViteK 2 coMPact 全自动鉴定仪进行鉴定，药物敏感试验采用纸片扩散法，使用WHonet 5.6软件进行数据分析。结果从临床标本中共分离到1258株假丝酵母菌。其中白假丝酵母菌分离率高，占67.01%；热带假丝酵母菌占13.99%。高山病科（呼吸内科）检出率为高，占18.52%；其次为传染科占16.85%。临床感染标本中分离率高为痰液标本，占62.08%；其次为大便，占10.50%。体外试验显示5种常用的抗真菌药物中，两性霉素 B 对假丝酵母菌抑制活性好，未检测到耐药株。结论临床真菌感染率有所增长，以白假丝酵母菌和热带假丝酵母菌为主；检出标本以痰液及大便标本为主；假丝酵母菌对两性霉素 B、5-氟胞嘧啶较为敏感。临床应高度重视真菌的检出及药敏试验结果，合理用药，减少耐药真菌的产生。
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新生儿细菌感染的菌群分布特点及药敏分析
目的 探讨新生儿出现细菌感染的菌群分布特点并进行药敏分析.方法 200例感染新生儿,均进行血常规检查、痰培养及眼分泌物细菌学检查,对检出致病菌进行药物敏感性分析及鉴定.观察新生儿感染的病原菌总数,并进行新生儿细菌感染的菌群分布特点分析;统计新生儿感染病原菌的药物敏感性实验结果.结果 200例感染新生儿,检出病原菌268株,以革兰阴性菌为主,占75.37％(202/268);其次为革兰阳性菌,占21.27％(57/268).在药物敏感性实验中,革兰阴性菌对 β-内酰胺类抗生素如亚胺培南、青霉素类抗生素如哌拉西林等有较好的药物敏感性,革兰阳性球菌对青霉素类抗生素如氨苄西林、第三代头孢类抗生素以及青霉素类抗生素苯唑西林等有较好的药物敏感性.结论 在新生儿感染的菌群分布中,以革兰阴性杆菌为主要致病菌,通过对病原菌的药敏实验结果进行分析,可为临床医生对新生儿感染进行合理的预防及治疗性用药提供指导.
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噬菌体硝酸盐还原实验方法的建立与评估
目的 采用噬菌体与硝酸盐还原实验结合的技术,以期建立一种新的快速、简易、廉价的结核杆菌药敏检测方法.方法 对49株结核杆菌的临床分离株以噬菌体硝酸盐还原实验(PhaB-NRA法)与改良罗氏绝对浓度法对结核杆菌进行利福平、异烟肼药物敏感性测定,以绝对浓度法作为参照标准判定PhaB-NRA法的敏感性、特异性、准确性及其可行性.结果 PhaB-NRA法对利福平进行药物敏感性测定的敏感性、特异性、准确性分别为89.1%、91.67%、89.8%;对异烟肼进行药物敏感性测定的敏感性、特异性、准确性分别为86.21%、90.0%、87.8%.它们与绝对浓度法的符合率分别为利福平:0.746;异烟肼:0.750.结论 PhaB-NRA法简化了实验步骤、缩短了药敏检测时间,且无需昂贵的仪器,有望成为快速结核杆菌药物敏感性测定的初筛方法.
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邵阳地区金黄色葡萄球菌临床株的耐药性分析
目的 通过对金黄色葡萄球菌常用抗菌药物的耐药情况的分析,指导临床合理使用抗生素.方法 应用WALKAWAY-40系统分离鉴定出326株金黄色葡萄球菌并检测β-内酰胺酶阳性和耐苯唑西林的菌株.结果 β-内酰胺酶阳性金黄色葡萄球菌的分离率为95.4%,对抗生素的耐药性高于β-内酰胺酶阴性菌;耐苯唑西林的金黄色葡萄球菌分离率为70.2%,除万古霉素外对其他抗生素均为高度耐药,与苯唑西林敏感金黄色葡萄球菌比较,差异具有显著性意义(P＜0.05).结论 326株金黄色葡萄球菌耐药性分析,其耐药性需引起临床医师的高度关注,应根据分离株耐药特点选用不同的治疗方案.
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原代喉癌细胞药敏实验研究
肿瘤对化疗药物的敏感性一直是近年研究的热点,如何客观地选择有效的药物进行治疗,是新辅助化疗亟待解决的问题[1].喉癌是头颈外科高发肿瘤,由于其生长部位及解剖特点,手术很难彻底切除病灶.因此,喉癌术后进行化学药物治疗,提高患者生存率十分必要,故本研究应用手术切除的喉癌组织制备原代喉癌细胞培养,进行抗癌药物敏感性实验,旨在提高疗效,避免抗肿瘤药物对正常组织的损伤,亦可开发新型抗肿瘤药物.
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盆腔炎病原菌分布及药敏情况分析
盆腔炎即盆腔炎症性疾病（pelvicin flammato-ry disease ，PID ）是由女性上生殖道炎症引起的一组疾病，包括子宫内膜炎、输卵管炎、输卵管卵巢脓肿和盆腔腹膜炎。本研究共收集2012年1月至2013年6月来我院门诊就诊的患者114例，取其宫颈分泌物进行一般细菌培养及药物敏感性实验，现报告如下。
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泌尿生殖道支原体PCR检测方法的建立及药物敏感性分析
目的 了解本地区解脲支原体(Uu)和人型支原体(Mh)对泌尿生殖道的感染及耐药状况,指导临床合理用药.方法 别在解脲支原体及人型支原体16SrRNA的种属特异性区域设计引物,优化反应条件,并对阳性样本做药物筛选.结果 检测样本554例,其中阳性为393例,占70.9%;在检测的阳性标本中Uu感染194例,占总标本的35.0%,Mh感染141例,占总标本的25.5%,Uu+Mh感染58占总标本的10.5%.药敏实验结果显示强力霉素、交沙霉素、阿齐霉素、克拉霉素和原始霉素对泌尿系统支原体敏感.结论 PCR法与培养法相比具有灵敏度高、特异、快速、经济等优点.本实验与2003-2005年药敏结果比较,2006-2007年阿奇霉素和克拉霉素的耐药性显著提高,这和人们滥用抗生素有直接关系.强力霉素、交沙霉素的耐药性也上升,但对泌尿生殖道感染仍有较好的疗效.
关键词： 解脲枝原体 人型支原体 多聚酶链式反应(PCR) 药物敏感性实验 临床治疗 -
皮肤癣菌药敏试验接种菌液浓度三种方法比较
影响药敏结果的因素较多,包括菌液浓度、培养基的类型、孵育时间和温度、终点判断标准等,尤其菌液浓度计数更为重要[1.2].皮肤癣菌本身的许多特点如产孢少,产孢条件难以控制,接种量难以精确化等,给药敏试验的标准化带来一定阻碍,也为菌液浓度的计数带来一定困难.美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)于1998年提出了<产孢丰富丝状真菌的液基稀释抗真菌药物敏感性实验参考方案>(M38-P),但未包含皮肤癣菌,我们参考该方案探讨了皮肤癣菌药敏试验菌液浓度测定的方法,为建立标准化条件打下基础.
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白芍总苷和盐酸小蘖碱的抗口腔念珠菌活性研究
目的 检测白芍总苷和盐酸小蘖碱(C20H18CINO4)的抗口腔念珠菌活性. 方法收集口腔念珠菌正常共生菌和致病菌,经YBC Test Kit鉴定念珠菌种类;依据美国临床实验室标准委员会(NCCLS)的M27-A2标准方案测定临床分离株对氟康唑、白芍总苷、盐酸小蘖碱的药物敏感性. 结果白芍总苷和盐酸小蘖碱对口腔念珠菌正常共生菌和致病菌均具有抗念珠菌活性,尤其具有抗光滑念珠菌的活性. 结论白芍总苷和盐酸小蘖碱的抗真菌机制可能和氟康唑不同;白芍总苷和盐酸小蘖碱可用于治疗和预防口腔念珠菌感染.
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鼠伤寒沙门氏菌噬菌体的分型及耐药性分析
目的 探讨吉安市鼠伤寒沙门氏菌(STM)噬菌体的分型和耐药情况.方法 对我市106株STM噬菌体的分型和耐药情况进行回顾性分析.结果 噬菌体以7774型(54株)和4774型(24株)居多,占73.58%.对47株STM噬菌体进行药敏试验,发现耐10种以上抗生素的有13株,耐5～9种抗生素的有26株,耐4种的有8株.结论 噬菌体分型技术可对STM噬菌体进行准确定型.
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Excel在肿瘤药敏实验数据处理中的应用
肿瘤药物敏感性实验目的是在多种化疗药物中筛选出的优药物,实验中会涉及多种药物,每种药物有不同浓度,作用在不同的细胞株上,因此实验数据量往往很大,特别是需要联合用药时数据量更大.数据处理特点是量大、重复、繁琐,用计算器不方便.利用电子表格Excel软件,把所有实验数据统一输入后,利用其强大的数据处理功能,快速准确地进行计算、统计分析、制图和数值计算,大大提高了工作效率.本文结合实际实验数据的处理[1～3],讨论如下.
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耐多药结核菌的药敏分析
<全国结核病防治工作手册>规定,耐多药结核病人(MDR-TB)为经复治方案治疗失败,并至少耐异烟肼和利福平两药以上的病人.我们搜集这种病人的结核菌株进行药物敏感性实验,结果及分析报告如下,希望能够在耐多药结核病人的药物选择与应用方面起到指导作用.
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结核菌多重耐药分析
<全国结核病防治工作手册>规定,耐多药结核患者(MDR-TB)为经复治治疗失败,并至少耐异烟肼和利福平两药以上的病人.我们搜集这种病人的结核菌株进行药物敏感性实验,结果及分析报告如下,希望能够在耐多药结核病人的药物选择与应用方面起到指导作用.
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五白汤组分体外抗白色念珠菌活性筛选
目的:筛选五白汤组分中具有抗白色念珠菌活性的药物.方法:采用白色念珠菌标准菌株(ATCC76615)为研究对象,应用煎煮法及水提醇沉淀法分别对五白汤各组成药物进行制备,参照NCCLS M27-A2推荐的方法测定五白汤各组成药物对白色念珠菌的小抑菌浓度(MIC).结果:白鲜皮水煎剂、苦参水煎剂和苦参醇提液对白色念珠菌的MIC分别为62.5 mg/mL、15.625 mg/mL、62.5 mg/mL.结论:白鲜皮水煎剂、苦参水煎剂以及苦参醇提液具有抗白色念珠菌活性.
