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子宫内膜细胞色素P450芳香化酶的表达研究进展
细胞色素P450芳香化酶(aromatase cytochrome P450, P450 arom)能催化C19雄激素转化为雌激素,是雌激素合成的关键酶之一。P450 arom位于细胞内质网,在体内多种雌激素合成部位表达,如卵巢颗粒细胞、脂肪组织、胎盘合体滋养层细胞、脑细胞等。近年的研究发现P450 arom在子宫内膜上也有表达,能促进子宫内膜局部雌激素的转化,现对其在子宫内膜的研究进展综述如下。细胞色素P450芳香化酶的结构特征 P450 arom与其它细胞色素P450异构体的结构类似。C端为血红素结合区,该区含有保守的半胱氨酸残基,可作为含铁血红素的第5个配位配基。该区上游有2个保守区,一个由20个以上氨基酸构成,一个为高度保守的部分I螺旋。N端由疏水氨基酸组成,但在有些情况下,连接N端的是糖基序列[1]。 P450 arom是CYP 19基因的产物,是细胞色素P450产物中唯一由单基因编码的酶。CYP 19是细胞色素P450基因超家族成员之一。随着分子生物学技术的发展,对CYP 19基因的结构及调节有了较深入的了解。人CYP 19基因位于染色体15 q 21.1,该基因的开放阅读框包含9个外显子,II~X,其中翻译起始位点位于外显子II。基因至少长75 kb,在第一个编码外显子II上游有4个未翻译外显子,I.1~4,在后一个编码外显子X上有血红素结合区(heme-binding region,HBR),同时,该外显子还有两个选择性多聚腺苷酸位点,可产生两种长度不等的转录产物,分别为3.4和2.9 kb(图1)。 CYP 19基因的主要特点是其具有组织特异性表达。用聚合酶链反应(PCR)和快速扩增互补DNA末端(rapid amplification cDNA end,RACE)检测发现,CYP 19基因在不同组织的转录产物5’末端不相同[3-4]。在胎盘组织,转录产物5’末端主要为未翻译外显子I.1,I.2<1%;在卵巢,5’末端为外显子II;而在脂肪细胞,不同条件下,有3种不同的5’末端,I.4、I.3和II。这种组织特异性在于该基因的组织特异性启动子调节。在胎盘,转录运用远端启动子I.1;在卵巢为近端启动子II;脂肪组织为启动子I.4、I.3及II。CYP 19基因这种运用选择性启动子调节组织特异性表达的特点,对人体不同部位雌激素的合成调节具有重要意义。
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子痫前期患者胎盘组织妊娠相关血浆蛋白-A基因的表达
子痢前期(preeclampsia,PE)为妊娠期特有的疾病,发病机制至今尚未阐明.PE的临床特点为胎盘娩出后,临床症状和体征自然消失,其特点及相关基础研究提示,胎盘在该疾病的发生发展中有重要作用~([1]).妊娠相关血浆蛋白-A(pregnancy-associated plasma protein-A,PAPP-A)是一种与妊娠密切相关的大分子糖蛋白,主要由胎盘合体滋养层细胞、蜕膜细胞合成并分泌进入血循环.近年来,PAPP-A在妊娠相关疾病的辅助诊断、预测等方面的研究取得了进展,也成为该领域的研究热点~([2-4]).本研究利用荧光定量聚合酶链反应(quantitative fluorescent-PCR,QF-PCR)技术测定PE患者胎盘组织中PAPP-A mRNA的表达水平,旨在探讨其在子痢前期发病过程中的作用.
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重度子痫前期母血胎儿有核红细胞水平与红细胞免疫黏附功能的关系
子痫前期(preeclampsia)是妊娠期特有的严重并发症,是影响孕产妇和围产儿发病率和死亡率的主要原因之一.研究发现,子痫前期的发生与胎儿细胞、滋养层细胞、炎性合体滋养层细胞穿透胎盘,向母体输送与释放增加有关[1-3],尤其是目前用于无创性产前诊断的胎儿有核红细胞(fetal nucleated red blood cells,FNRBC)的穿透渗漏成为研究热点,报道认为子痫前期孕妇血循环中FNRBC数量增加[4-6].人体内部起免疫功能的细胞主要有红细胞和白细胞,而红细胞清除免疫复合物的作用比普遍认为具有免疫和防御功能的白细胞高.研究认为子痫前期的发生与孕妇自身免疫系统病理损伤和紊乱有关[7-9],目前国内尚未检索到有关该类孕妇母血FNRBC数量变化及其与红细胞免疫黏附功能相关性分析的报道.本研究对此进行了探讨,期望为阐明重度子痫前期发病的可能机制提供依据,现将结果报告如下.
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绒毛膜癌
中枢神经系统生殖细胞肿瘤可发生于任何年龄,好发年龄<25岁,而绒毛膜癌(绒癌)发病年龄则早10年.绒癌是颅内少见的生殖细胞肿瘤,主要有两种细胞组成:合体滋养层细胞和细胞滋养层成分,这两种成分的双层排列是绒癌的重要诊断特点.
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妊娠中晚期妇女血清hCG水平的临床研究
hCG(绒毛膜促性腺激素)由胎盘绒毛的合体滋养层细胞合成分泌,在妊娠8~10周时达高峰,1~2周后迅速下降,中晚期妊娠时稳定于一定浓度.妊娠早期血清hCG异常升高与葡萄胎、双胎有关,而中、晚期hCG升高的临床意义尚不十分清楚;许多妊娠并发症可能涉及到胎盘的功能状态,而hCG又是反映胎盘分泌状态的一个重要生化指标.本研究通过放免测定( RIA)妊娠中、晚期血清hCG水平,观察妊娠中期hCG升高者晚期是否仍高,以及整个妊娠过程中持续的hCG升高与妊高征、早产、胎儿宫内生长迟缓(IUGR)等妊娠并发症的关系.
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吲哚胺2,3-双加氧酶对免疫系统双向调节作用的研究进展
吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)是一种含铁血红素单体蛋白,是肝脏外唯一可以催化色氨酸(Tryptophan,TRP)中的吲哚环氧化裂解,并沿犬尿氨酸(L-kynurenine,KYN)途径代谢的限速酶.目前的研究认为,IDO不仅可以介导色氨酸的代谢,而且还具有免疫调控作用.这种调控早发现于妊娠时的胎盘合体滋养层细胞,通过抑制母体T淋巴细胞的反应[1],提高母胎免疫耐受,有利于妊娠维持.
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比对两台 VITROS3600全自动免疫分析仪检测血清孕酮及β-HCG 结果的一致性分析
孕酮(Prog)在妊娠早期由卵巢黄体和滋养层细胞分泌,孕12周后主要由胎盘分泌,当异位妊娠时,滋养层细胞未能发育完全,分泌的 HCG 和其他几种激素的量不足,导致血清 Prog 水平下降[1]。人类绒毛膜促性腺激素(HCG)是受孕后胎盘合体滋养层细胞合成分泌的一种糖蛋白,其β亚基(β-HCG)具有高特异性[2]。临床上,医生对患者血清β-HCG和 Prog 的连续监测,来判断早孕,异位妊娠,葡萄胎及绒毛膜癌等疾病的疗效和预后。研究显示,血清β-HCG 及孕酮的联合检测可显著提高异位妊娠早期诊断的检出率[3]。为了比较两台强生VITROS3600全自动免疫分析仪对同一检测项目测量结果的一致性,作者对两台强生 VITROS3600全自动免疫分析仪进行了β-HCG 和 Prog 的对比实验分析,以确保同一实验室两台相同仪器检测结果的可靠性。
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GATAD1在子痫前期中的表达及其意义
目的:研究GATAD1在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其意义.方法:29例由美国Mayo Clinic妇产科临床医师收集的胎盘组织,其中早孕正常胎盘8例(分娩孕周为7~12周,平均为10.2周),晚孕正常胎盘14例(分娩孕周为35~41周,平均为39.5周),晚孕子痫前期胎盘7例(分娩孕周为31~41周,平均为34.6周).采用RT-PCR技术、蛋白印迹(Western blot)法和免疫组化检测3组孕妇胎盘组织中GATAD1的mRNA与蛋白表达水平差异.结果:晚孕正常胎盘组织中GATAD1的mRNA与蛋白表达水平均显著高于早孕正常胎盘组织.子痫前期组患者胎盘组织中GATAD1的mRNA与蛋白表达水平均显著低于相应孕周正常妊娠组.结论:GATAD1表达的下降与子痫前期的发病相关.
关键词: 子痫前期 Syncytin-1 GATAD1 合体滋养层细胞 -
丙型肝炎病毒持续感染对体外培养人胎盘合体滋养层细胞生物学性状的影响
目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)持续感染对体外培养人胎盘合体滋养层细胞生物学性状的影响.方法:分别采用Matrigel人工重建基膜侵袭实验、MTT法细胞黏附实验、细胞移动实验,研究HCV RNA阳性患者血清感染体外培养的人胎盘滋养层细胞侵袭力以及与侵袭力相关的黏附、移动能力的改变;检测培养上清中人绒毛膜促性腺激素(HCG)浓度以评估感染对细胞激素合成、分泌功能的影响.结果:感染组细胞侵袭、黏附、移动以及激素合成分泌功能较对照组均有显著下降(P<0.05).结论:HCV持续感染可抑制体外培养人胎盘合体滋养层细胞包括侵袭力和激素合成、分泌功能在内的多种生物学功能.
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浅谈早早孕试纸条用于血β-HCG定性、半定量分析
人绒毛膜促性腺激素(human chorioni gonadotropin,HCG)是成熟女性受精卵移行到子宫着床后形成胚胎,在发育成长为胎儿过程中,由胎盘合体滋养层细胞产生,也可经过血液循环排泄到尿液中.
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HCV感染实验探讨人胎盘滋养层细胞分子生物性及侵袭力
目的 探讨持续感染丙型肝炎病毒(HCV)对体外培养人胎盘合体滋养层细胞分子生物学性状及其金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9合成及分泌的影响.方法 分别采用Matrigel人工重建基底膜侵袭实验、MTT法细胞黏附实验、细胞移动实验.研究HCV RNA阳性患者血清感染的体外培养人胎盘滋养层细胞(感染组)侵袭能力以及侵袭相关的黏附、移动能力的改变;检测培养上清中人绒毛膜促性腺激素(HCG)浓度以评估感染对细胞激素合成、分泌能力的影响.用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清MMP-2和MMP-9水平,分析感染组和对照组(健康体检者血清培养)数据间的差异,并用明胶酶谱进一步验证ELISA结果.应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法分析感染对细胞proMMP-2和proMMP-9 mRNA表达的影响.结果感染组细胞侵袭、黏附、移动以及激素合成、分泌能力较对照组细胞均显著下降(P<0.05).感染组细胞分泌MMP-2和MMP-9能力明显下降(与对照组比较,MMP-2:t=4.186,P<0.05;MMP-9:t=2.325,P<0.05);RT-PCR结果显示感染组细胞proMMP-2和proMMP-9 mRNA表达弱于对照组,但差异无显著性(proMMP-2:t=1.196,P>0.05;proMMP-9:t=1.417,P>0.05).结论 持续HCV感染的体外培养人胎盘合体滋养层细胞MMP-2和MMP-9合成、分泌能力下降.持续感染HCV可抑制体外培养人胎盘合体滋养层细胞包括侵袭能力和激素合成、分泌能力在内的多种生物学功能.
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胎盘组织中3种细胞金属硫蛋白表达的免疫组化研究
目的 探讨胎盘组织中蜕膜细胞、合体滋养层细胞及 Hofbauer细胞金属硫蛋白(metallothionein,MT)表达的意义及其相关性.方法 采用免疫组织化学法检测178例足月胎盘组织中MT的表达情况.结果 胎盘组织蜕膜细胞、合体滋养层细胞及Hofbauer细胞MT表达的阳性率分别为49.69%(80/161)、53.37%(95/178)、33.15%(59/178);胎盘组织3种类型细胞MT的表达强度有等级相关性(P<0.000 1);胎盘组织3种类型细胞之间MT的表达差异有统计学意义(P<0.0001).结论 胎盘组织蜕膜细胞、合体滋养层细胞及Hofbauer细胞可有MT的表达,提示MT在胎盘的屏障作用及物质转运中可能起着很重要的作用.
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丙型肝炎病毒持续感染对体外培养人胎盘合体滋养层细胞MMP-2和MMP-9合成分泌的影响
目的:探讨丙型肝炎病毒持续感染对体外培养人胎盘合体滋养层细胞MMP-2和MMP-9合成分泌的影响. 方法:应用ELISA方法检测细胞培养上清MMP-2和MMP-9水平,分析感染组和对照组数据间的差异,并用明胶酶谱进一步验证ELISA结果,随后应用RT-PCR法分析感染对细胞proMMP-2和proMMP-9 mRNA表达的影响. 结果:感染组细胞分泌MMP-2和MMP-9能力明显下降(MMP-2:t=4.186,P<0.05; MMP-9:t=2.325,P<0.05);RT-PCR结果显示感染组细胞proMMP-2和proMMP-9 mRNA表达弱于对照组,但差异不明显(proMMP-2:t=1.196,P>0.05;proMMP-9:t=1.417,P>0.05). 结论:丙型肝炎病毒持续感染时体外培养人胎盘合体滋养层细胞MMP-2和MMP-9合成分泌能力下降,为非特异性.
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绒毛及合体滋养层细胞吲哚胺2,3-二氧化酶表达与流产的关系
目的:探讨人早孕绒毛组织吲哚胺2,3-二氧化酶(IDO)的表达与流产的关系.方法:RT-PCR测正常妊娠和难免流产绒毛组织及JAR细胞株IDO mRNA表达;免疫组化分析两组绒毛组织IDO蛋白质表达;Westernblot检测体外培养的合体滋养层细胞IDO蛋白质表达;高效液相色谱法检测细胞培养上清液中有无犬尿氨酸.结果:难免流产组绒毛组织IDO mRNA及蛋白质表达均低于正常组;JAR细胞株不表达IDO mRNA;合体滋养层细胞表达IDO蛋白质;合体滋养层细胞培养上清中有犬尿氨酸.结论:绒毛组织IDO正常表达是维持妊娠所必需;体外培养的人早孕绒毛合体滋养层细胞表达的IDO具有活性.
关键词: 吲哚胺2 3-二氧化酶(IDO) 合体滋养层细胞 绒毛组织 流产