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儿童急性呼吸道感染的病原体检测
目的 应用间接免疫荧光法检测医院儿童急性呼吸道感染的病原体,探讨其在临床的实用价值,为临床诊断儿童呼吸道感染提供佳的检测技术.方法 检测502例诊断为急性呼吸道感染儿童的急性期静脉血样本,使用间接免疫荧光技术检测呼吸道主要病原体的IgM抗体.结果 检出病原体总阳性率为67.93%,其中肺炎支原体多见,占40.84%,其他依次为呼吸道合胞病毒、腺病毒、乙型流感病毒、嗜肺军团菌1型、副流感病毒1、2、3型、肺炎衣原体、甲型流感病毒、Q热立克次体阳性检出率分别为11.95%、8.96%、6.37%、2.99%、1.99%、1.59%、1.39%、0.60%;42例首次检测为阴性,重复采血复查后8例阳性,1~3岁年龄组感染阳性率高.结论 间接免疫荧光法检测9项呼吸道感染病原体IgM抗体对于儿科呼吸道感染病原体的早期发现及病原学的流行病学调查具有重要意义.
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间接免疫荧光技术检测尖锐湿疣中的人乳头瘤病毒
目的:间接免疫荧光技术在临床与基础研究中的应用较为广泛,但却极少有人用于尖锐湿疣的检测,我们旨在验证该方法是否可行,并将之与PCR方法相比较,以了解其准确性和敏感性.材料和方法:60例临床确诊的尖锐湿疣疣体标本均取自性病门诊,采取疣体印片,用小鼠抗人的HPV6型作为I抗,FTTC标记的山羊抗鼠IgG作为Ⅱ抗.在荧光显微镜下检查.剩余标本消化后做PCR,证实有无人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)的DNA,并用RFLP方法进行分型.结果:在34例尖锐湿疣标本中检测到特异性荧光,阳性率为56.67%,而用PCR方法共检测到58例阳性,阳性率为96.67%.用X2检验比较二者的阳性率,P<0.01.主要感染类型为6和11型,占98.28%.结论:间接免疫荧光技术针对的是乳头瘤HPV的衣壳蛋白,能检测有完整衣壳的成熟HPV,操作简便,有望用于宫颈涂片的常规检查,以筛查带HPV者,对预防宫颈癌提供帮助.但敏感性不及PCR技术.
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抗核周因子抗体在类风湿性关节炎和自身免疫病中早期诊断监别价值
目的: 旨在研究APF抗原片的制备及对RA的诊断意义.方法: 以健康人口腔颊粘膜细胞为底物,待测血清稀浓度为1:20,用于检测RA病人、其它风湿免疫病及正常人的血清中是否存在 APF抗体.同时检测类风湿冈子IGM-RF,比较两者对RA诊断的敏感性和特异性.结果: 在待测血清1:20稀浓度下APF对RA诊断敏感性为79.9%,特异性为90.3%,均优于IGM-RF,APF可作为RA的诊断指标之一,其抗原片底物细胞较稳定,易于存放便于临床推广应用.
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落射式荧光显微镜在系统性红斑狼疮实验室诊断中的应用
自1957年Friou等首先将间接免疫荧光技术用于检测抗核抗体(ANA)以来[1],ANA检测已成为系统性红斑狼疮(SLE)实验室诊断指标之一.目前,随着抗核基质的改进及荧光显微镜技术的提高,ANA核型分辨率均有所提高,本文就我们应用落射式荧光显微镜对HEp-2、灵长类肝组织切片及绿蝇短膜虫为实验基质对ANA及抗双链DNA(dsDNA)抗体检测结果报告如下.
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系统性红斑狼疮患者ANCA水平检测及临床意义
①目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中抗中性粒细胞抗体(ANCA)的阳性检出率及与病情的相关性.②方法 ANCA和抗双链DNA(抗ds-DNA)均应用间接免疫荧光技术(IIF)及酶联免疫吸附法(ELISA)检测.③结果 103例SLE患者中ANCA阳性40例(38.8%),皆为核周型ANCA.抗ds-DNA抗体在ANCA阳性组及ANCA阴性组两组间比较有统计学差异(P<0.01);40例ANCA阳性组中,狼疮活动患者占28例(70%),63例ANCA阴性组中狼疮活动患者占17例(26.9%),两组阳性率相比,差异有显著性(P<0.01).④结论 ANCA在SLE患者中有一定的阳性检出率,且与疾病的活动呈正相关.
关键词: 系统性红斑狼疮 抗中性粒细胞胞浆抗体 间接免疫荧光技术 -
2015-2016年社区获得性肺炎患者非典型病原菌分析
目的 针对社区获得性肺炎患者的非典型病原菌进行分析,为临床的诊断和及时治疗提供参考.方法 选取医院2015-01 ~2016-12诊断的930例社区获得性肺炎患者,利用间接免疫荧光技术检测九项呼吸道感染病原体IgM抗体,进行病原菌鉴定.结果 930例社区获得性肺炎患者中阳性率为59.35%(552/930).其中,肺炎支原体(MP)所占比例高,所占比例为31.61%(294/930).其次是军团菌(LP)为72例,所占比例为7.74%(72/930例).其他3种病原菌乙型流感病毒(IFB)、呼吸道合胞病毒(RSV)和甲型流感病毒(IFA),所占比例分别为3.22%(30/930),5.16% (48/930)和1.93%(18/930).在单一感染的462病例中,18-40岁所占比例为12.98%(60/462),40-60岁所占比列为28.57%(132/462),60岁以上所占比列为58.44%(270/462).在阳性病例中有部分社区获得性肺炎患者同时感染其中2-3种病原菌.两种病原体合并感染中,MP和LP合并感染多,占总数3.22%(30/930);其次是MP+ RSV和MP+ IFB合并感染比例分别为2.58% (24/930)和1.29% (12/930);3种合并感染者MP+ RSV+ IFB占2.58%(24/930).结论 引起本地区冬季度社区获得性肺炎主要非典型病原菌以肺炎支原体为主,大于60岁患者易存在混合感染的可能性;选用抗生素时,首先覆盖非典型病原菌,同时应在冬季对病毒感染引起足够重视.
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肺炎衣原体慢性感染的特异性抗体检测及其与支气管哮喘的相关性分析
自1965年分离出第1株肺炎衣原体(CPn)以来,有关CPn的研究已日趋深入.新近研究发现,CPn感染在哮喘的发病中可能起一定作用.我们采用间接免疫荧光技术,对41例支气管哮喘患者进行血清CPn特异性抗体检测,并与70人健康献血员相对照,旨在探讨CPn感染与支气管哮喘的关系.现将结果报告如下.
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间接免疫荧光技术检测角膜内皮炎房水及小梁组织中的单纯疱疹病毒
目的:探讨间接免疫荧光技术(IIF)对角膜内皮炎的病原学诊断价值,并以此揭示病因、指导临床治疗.方法:用IIF对角膜内皮炎的房水及小梁中的单纯疱疹病毒(HSV)进行检测,以老年性白内障和青光眼小梁组织作对照.结果:实验组13例角膜内皮炎患者的房水中有4例呈阳性发现,其阳性率为30.77%;而对照组Ⅰ 20例老年性白内障患者的房水中无一呈阳性发现,二者之间存在显著性差异(P<0.05).实验组1例角膜内皮炎患者的小梁组织中呈阳性发现,而对照组Ⅱ10例青光眼患者的小梁组织中无一阳性发现.结论:应用IIF可检测角膜内皮炎患者急性期房水和小梁组织中的HSV,说明角膜内皮炎的发病同HSV感染有关,同时可做出实验室病原学诊断,并进一步用于指导临床治疗.
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多重微球流式荧光免疫技术检测抗核抗体谱的评价与临床应用
目的:分析和评估多重微球流式荧光免疫技术(MBFFI)检测抗核抗体谱的结果和临床应用价值.方法:同时用MBFFI和免疫印迹技术检测333例自身免疫病患者、44例其他疾病患者和59例健康者血清的抗核抗体谱,进行结果的一致性检验,并用间接免疫荧光技术检测抗核抗体,比较3种方法的灵敏度、特异度.结果:MBFFI与免疫印迹技术检测所有标本抗核抗体谱一致率为83.26%,Kappa值=0.655;病例组各项目一致率在79.88%至99.40%之间,Kappa值在0.106至0.958之间.对照组各项目一致率在96.61%至100.00%之间,其他疾病组各项目一致率在95.45%至100.00%之间.间接免疫荧光技术诊断自身免疫病的灵敏度高(P<0.01),MBFFI诊断自身免疫病的特异度高(P<0.05),MBFFI与间接免疫荧光技术联合检测可提高灵敏度(P<0.01).结论:多重微球流式荧光免疫技术检测抗核抗体谱与免疫印迹技术相比,一致性尚可,特异度更高,可以替代免疫印迹技术成为新一代的抗核抗体确认试验检测方法.
关键词: 抗核抗体谱 抗核抗体 多重微球流式荧光免疫技术 免疫印迹技术 间接免疫荧光技术 -
间接免疫荧光技术检测尿沉渣血小板的临床研究
尿沉渣存在血小板(Plt)的临床意义在国内未曾见过报道,采用中国军事医学科学院、鼠抗人血小板糖蛋白Ⅱb/ⅢaCD41单克隆抗体,以间接免疫荧光技术、在尿沉渣中找到了血小板,并对其临床价值加以探讨,结论是尿沉渣血小板的存在与肾小球损伤程度有关.
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常州地区儿童急性呼吸道感染病原体的流行病学研究
目的 探讨常州地区儿童急性呼吸道感染(ARI)的病原体种类和流行病学特征.方法 应用间接免疫荧光技术检测2 259例ARI患儿血清中9种病原微生物IgM型抗体,包括嗜肺军团菌1型(LP-1)、肺炎支原体(MP)、Q热立克次体(QFR)、肺炎衣原体(CP)、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(FluA)、乙型流感病毒(FluB)和副流感病毒(PIV),并进行统计分析.结果 2 259例患儿IgM型抗体阳性例数达856例,检出率为37.9%.单一感染601例,占70.2%(601/856),其中以MP为主,阳性率达43.6%;而FluB、RSV、PIV阳性率分别为11.4%、6.3%和5.3%.混合感染占29.8%(255/856),主要以MP合并FluB感染为主,占8.4%;而MP合并PIV、MP合并RSV、MP合并LP-1、MP合并PIV和RSV感染分别为5.8%、2.9%、2.4%和1.4%.856例阳性病例中,MP在<1岁组、1~4岁组、5~8岁组、>8岁组中所占比例分别为34.4%、64.0%、51.5%和54.6%,1~4岁组高于其他组(x2=18.127,P<0.01).RSV、FluB和PIV阳性构成情况相似(P>0.05).儿童ARI检出率在秋、冬季节高,分别为11.8%和13.6%.结论 常州地区儿童ARI中以MP为主要病原体,并合并病毒感染.1~4岁儿童为易感人群,好发于秋、冬季节,大环内酯类抗菌药物联合病毒唑治疗效果明显.
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过敏性紫癜患者血清抗中性粒细胞胞质抗体检测
过敏性紫癜是一种常见的侵犯皮肤或其他器官的毛细血管和细小动脉的一种血管炎,其表现为皮肤和黏膜出现瘀点、瘀斑,并伴有关节酸痛、腹部症状和肾损害的改变.抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)是一种以中性粒细胞和单核细胞胞质成分为靶抗原的自身抗体,可在多数原发性小血管炎患者血清中检测到,对于了解血管炎的发病机制,诊断和分类具有一定的意义[1].为探讨ANCA在过敏性紫癜患者中的检测意义,我们应用间接免疫荧光技术,对42例过敏性紫癜患者进行血清ANCA的检测,结果如下.
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结节性红斑患者血清抗中性粒细胞胞质抗体检测
结节性红斑的发病机制目前还不完全清楚.抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)是一种以中性粒细胞和单核细胞胞质成分为靶抗原的自身抗体,与微型多血管炎和变应性肉芽肿性血管炎密切相关.为探讨ANCA在结节性红斑发病机制中的意义,我们应用间接免疫荧光技术(IIF),对72例结节性红斑患者进行了血清ANCA的检测,现将结果报道如下.
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猪鼻支原体黏附宿主细胞间接免疫荧光检测方法的建立
目的 猪鼻支原体是临床猪场的常见病菌,可引起猪多发性浆膜炎、肺炎、关节炎、中耳炎等慢性炎症,同时其与多种人类肿瘤有明显相关性,但其致病机理有待深入,其感染细胞机制的研究尚未明确,因此,本研究欲建立一种用间接免疫荧光技术检测猪鼻支原体黏附宿主细胞的方法.方法 以猪鼻支原体和猪肾上皮细胞为研究对象,以兔抗猪鼻支原体纯化抗体为一抗,以FITC标记的羊抗兔IgG为二抗,通过反应条件的优化,建立猪鼻支原体黏附宿主细胞的间接免疫荧光检测方法(IFA).结果 终确定小黏附滴度为1∶107 CCU/mL,猪鼻支原体黏附PK15所需时间为6 h以上,一抗的佳工作浓度为1∶100,二抗的佳工作浓度为1∶1 600.结论表明间接免疫荧光技术可以用来检测猪鼻支原体对宿主细胞的黏附作用.为猪鼻支原体的研究特别是感染细胞机制的体外研究提供基础方法,同时为疾病的诊断及疫苗的研发奠定基础.
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间接免疫荧光技术快速鉴别H5和H9亚型禽流感病毒
利用抗禽流感H5和H9亚型病毒(AIV-H5、AIV-H9)血凝素的特异性单抗建立了免疫荧光鉴别AIV-H9和AIV-H5的方法.研究表明,该方法特异性强,与鸡新城疫病毒、鹅新城疫病毒和鹅腺病毒,鸡传染性支气管炎病毒等不出现交叉反应,仅与AIV-H9或AIV-H5反应;敏感性试验表明,用100TCID50感染成纤维细胞系DF1细胞,在24h内就可以鉴别出AIV-H5和AIV-H9;对人工感染鸡的泄殖腔和病变组织用IFA方法和鸡胚接种同时进行检测比较试验,结果表明:IFA方法在24h可以鉴别出AIV-H5和AIV-H9,检出时间小于鸡胚死亡时间,且IFA检测的结果与鸡胚病毒分离,血凝(HA)和血凝抑制试验(HI)的结果完全一致,同时其灵敏性优于HA和HI试验.这些结果表明该方法对于快速鉴别AIV-H5和AIV-H9具有良好的应用前景.
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结节性血管炎患者血清抗中性粒细胞胞浆抗体及抗血管内皮细胞抗体检测
为探讨抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)及抗血管内皮细胞抗体(AECA)在结节性血管炎患者发病机制中的意义,我们应用间接免疫荧光技术(IIF),对18例结节性血管炎患者进行了血清ANCA及AECA的检测,现将结果报道如下.
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系统性红斑狼疮108例患者抗中性粒细胞胞浆抗体的检测及意义
目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)的阳性检出率及其与病情的相关性.方法 应用间接免疫荧光技术(IIF)检测.结果 108例sIE患者中,ANCA阳性35例(32.5%),皆为核周型ANCA(P-ANCA),而且滴度越高临床病情越重.35例ANCA阳性组中,狼疮活动为28例(80%),73例ANCA阴性组中活动35例(47.9%),两组阳性率相比,差异有显著性(P<0.05).ANCA阳性组伴肺间质病变、肾脏病变明显高于阴性组,均有统计学意义(P<0.05).正常对照20例均为阴性.结论 ANCA在SLE患者中有一定的阳性检出率,且与疾病的活动及肾脏受损、肺间质病变具有相关性.
关键词: 红斑狼疮 系统性 抗中性粒细胞胞浆抗体 间接免疫荧光技术 -
用间接免疫荧光技术诊断柯萨奇B组病毒中枢神经系统感染
[目的]探讨间按免疫荧光技术(IFA)在柯萨奇B组病毒(CBV)中枢神经系统感染中的早期诊断价值.[方法]用IFA法检测189例病毒性脑膜炎和脑炎患者在发病1周内和发病2~3周后的脑脊液和血清标本中CBVs和CVB5特异性IgG、lgM.[结果]脑脊液和血清标本中特异性IgM阳性率在发病1周内分别为13.9%和4.5%,脑脊液特异性IgM的阳性率显著高于血清标本(X2=3.97,P<0.05);发病2~3周后,则分别为14.5%和16.7%,两者阳性率差异无显著性(Fisher精确概率P=0.804);脑脊液中特异性IgG阳性率比IgM高.[结论]用IFA法检测早期脑脊液中特异性IgM可用于早期快速诊断柯萨奇B组病毒中枢神经系统感染.
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新疆石河子地区上半年呼吸道感染病原体的IgM抗体检测结果分析
目的:了解石河子地区常见呼吸道病原体的流行情况,为临床诊疗提供可靠的依据。方法收集2014年1~6月就诊于石河子大学医学院第一附属医院的急性呼吸道感染住院患者血清标本,采用间接免疫荧光技术检测常见的9种呼吸道病原体。结果在检测的810例患者血清中,阳性检出率为32.35%,各病原体检出率由高到低依次是肺炎支原体(M P )占21.48%,Q热立克次体(COX)占8.89%,嗜肺军团菌1型(LP1)占5.18%,肺炎衣原体(CP)占4.2%,乙型流感病毒(INFB)占2.22%,副流感病毒(PIVs)占1.24%,呼吸道荷包病毒(ADV)占0.50%。MP感染以少儿为主,女性检出率高于男性(P<0.05);感染COX以青壮年居多,男性检出率高于女性(P<0.05)。结论新疆石河子地区呼吸道病原体感染人群中,少儿以MP感染为主,而青壮年以COX感染居多。
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喀什地区儿童呼吸道感染病原体的IgM抗体检测结果分析
目的 了解喀什地区常见呼吸道病原体的流行情况,为临床诊疗提供可靠的依据.方法 收集喀什地区第一人民医院的急性呼吸道感染的儿童住院患者血清标本2425例,采用间接免疫荧光技术检测常见的9种呼吸道病原体.结果 阳性检出率为30.02%,9种病原体的检出率为嗜肺军团菌1型4.33%、肺炎衣原体1.11%、肺炎支原体9.65%、甲型流感病毒1.20%、呼吸道合胞病毒0.82%、Q热立克次体2.80%、腺病毒0.74%、乙型流感病毒7.67%、副流感病毒1.69%;混合感染占28.57%,以肺炎支原体并发乙型流感病毒感染为多(14.84%);秋季和冬季感染率比较高(P<0.05),1-6岁儿童的感染率明显高于小于1岁组(P<0.01).结论 喀什地区儿童急性呼吸道感染病原体中肺炎支原体高,且混合感染严重.