首页 > 文献资料
-
ILT4促进脓毒症炎性反应并介导免疫麻痹
目的 探讨脓毒症外周血单核细胞表达ILT4(免疫球蛋白样转录物4)的生物学行为和效应,以及对预后的影响.方法 选取BALB/c ILT4+/+(WT)、BALB/c ILT4雄性小鼠,CLP复制脓毒症模型.用流式细胞仪定量检测CLP术后24h外周血单核细胞ILT4、MHC-Ⅱ表达水平;用ELISA法检测各组0、6、12、24h血清IL-6、TNF-α浓度;并观察168 h内生存预后.结果 CLP术后24h脓毒症小鼠外周血单核细胞高度表达ILT4分子[(1 292.00±143.70)vs.(193.50±52.54),P＜0.05];较WT组ILT4-/-小鼠外周血单核细胞表达MHC-Ⅱ比率明显增高[(49.38±5.66)％vs.(24.25±6.76)％,P＜0.05].CLP术后24h血清IL-6显著增高[(470.75±88.03)vs.(54.25±20.04),P＜0.05],ILT4敲除后很大程度的抑制这一趋势[(241.25±45.10)vs.(470.75±88.03),P＜0.05];但对TNF-α表达无显著性干扰[(50.88±6.38)vs.(53.13±5.49),P＞0.05].且ILT4-/-小鼠CLP术后生存率较WT明显增加(P＜0.05).结论 脓毒症时外周血单核细胞高表达ILT4,与血清IL-6高水平及单核细胞MHC-Ⅱ低表达率相关,导致病死率增加.
-
糖皮质激素对活化后小胶质细胞株N9中MHC-Ⅱ和OX40L表达的影响
目的研究糖皮质激素对炎症刺激活化后的小胶质细胞株N9表面分子MHC-Ⅱ和OX40L表达的影响.方法脂多糖(LPS)联合小鼠γ-干扰素刺激N9细胞活化,采用RT-PCR、免疫荧光检测N9活化前后OX40L的表达.糖皮质激素及其受体阻断剂RU-486处理活化的N9细胞后,用流式细胞术(FACS)检测MHC-Ⅱ、OX40L的表达变化.结果 N9活化前OX40L mRNA和蛋白均有组成性表达,活化后MHC-Ⅱ和OX40L表达显著上调(P<0.05),糖皮质激素处理后与活化组比较两分子表达下调(P<0.05),加入RU-486又可使两分子表达上调.结论小胶质细胞N9活化后MHC-Ⅱ、OX40L表达显著升高,而糖皮质激素可通过抑制小胶质细胞MHC-Ⅱ和OX40L表达拮抗小胶质细胞的抗原呈递功能,从而降低由T细胞活化介导的损伤效应.
-
脱氢异雄酮对大鼠星形胶质细胞CD80、CD86和MHC-Ⅱ分子表达及其细胞增生影响的研究
目的探讨脱氢异雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)对大鼠星形胶质细胞CD80、CD86和MHC-Ⅱ分子表达及其细胞增生的影响. 方法用2、10、50 μg/mL DHEA处理体外培养的新生Lewis大鼠星形胶质细胞后,应用流式细胞仪检测星形胶质细胞表面CD80、CD86和MHC-Ⅱ分子表达,用液体闪烁计数器测定掺入星形胶质细胞内3H-甲基-胸腺嘧啶核苷. 结果不同浓度的DHEA可降低大鼠星形胶质细胞CD86分子表达,50 μg/mL DHEA可降低星形胶质细胞的增生. 结论 DHEA可能通过降低星形胶质细胞表面CD86共刺激分子的表达抑制中枢神经系统内的免疫反应, 高浓度的DHEA可降低星形胶质细胞的增生.
-
不同运动方式对大鼠骨骼肌急性拉伤修复过程中MHC-Ⅱ,COL-Ⅰ、COL-Ⅲ的影响
目的:了解不同运动方式(离心运动、向心运动)对骨骼肌拉伤愈合过程中肌肉再生和纤维化过程的影响.方法:将120只成年雌性SD大鼠随机分为空白组(BC组,n=8)、即刻组(IM组,n=8)、第1周组(1W组,n=8)、自然愈合组(NC组,n=32)、向心运动组(CE组,n=32)、离心运动组(EE组,n=32).造成腓肠肌急性拉伤模型1周后,对CE组、EE组分别进行为期4周的向心和离心训练.IM组造模即刻、1W组造模后7天、BC组造模后18天取材;其余各组分别在造模后第14天、第21天、第28天、第35天4个时间段,每个时间段随机选择8只大鼠取材,用免疫组化的方法检测大鼠腓肠肌Ⅱ型肌球蛋白重链( MHC-Ⅱ)及I、Ⅲ型胶原(COL-I和COL-Ⅲ)水平.结果:损伤恢复的各个阶段,CE组MHC-Ⅱ水平较NH组和EE组高,并且恢复速度较快,而COL-I和COL-Ⅲ水平较NH组和EE组低；EE组MHC-Ⅱ水平较NH组和CE组低,COL-I水平较NH组低但高于CE组；COL-Ⅲ水平高于CE组和NH组.结论:不同运动方式对骨骼肌急性损伤后的修复过程影响不同,向心运动能有效促进损伤骨骼肌MHC-Ⅱ合成,从而加快骨骼肌再生,离心运动对MHC-Ⅱ合成的影响不明显.运动通过减少COL-I表达和合成来抑制骨骼肌的纤维化,向心运动作用比离心运动更加明显.在损伤修复早期,COL-Ⅲ水平提高,使骨骼肌具备一定的强度和力学稳定性,有利于损伤后功能的快速代偿,而后期COL-Ⅲ水平持续增高可能促进和延长骨骼肌的纤维化过程.
-
脑胶质瘤组织肿瘤浸润性树突状细胞及其分子标志物MHC-Ⅱ与CD54的表达情况及意义
目的 探讨脑胶质瘤组织肿瘤浸润性树突状细胞(tumor infiltrating dendritic cells,TIDC)及其分子标志物MHC-Ⅱ、CD54表达情况及意义.方法 选择宁波市李惠利医院神经外科2013年1月-2017年6月脑胶质瘤组织标本70例作为脑胶质瘤组织组,正常脑组织标本70例作为正常脑组织组,脑胶质瘤组根据WHO病理分级分为低级别脑胶质瘤组(I级+Ⅱ级)19例和高级别脑胶质瘤组(Ⅲ级+Ⅳ级)51例.采用免疫组化法测定脑胶质瘤组织TIDC数量和正常脑组织中树突状细胞(dendritic cells,DC)数量,采用流式细胞仪检测脑胶质瘤组织TIDC和正常脑组织中DC膜表面MHC-Ⅱ、CD54表达.结果 细胞核出现棕褐色颗粒为S-100阳性染色的DC细胞.脑胶质瘤组织中TIDC数量低于正常脑组织中DC数量(P＜0.05);高级别脑胶质瘤组织中TIDC数量低于低级别脑胶质瘤组织中TIDC数量(P＜0.05).脑胶质瘤组织TIDC膜表面MHC-Ⅱ、CD54表达量低于正常脑组织中DC膜表面MHC-Ⅱ、CD54表达(P＜0.05).高级别脑胶质瘤组织TIDC膜表面MHC-Ⅱ、CD54表达量低于低级别脑胶质瘤组织TIDC膜表面MHC-Ⅱ、CD54表达量(P＜0.05).结论 脑胶质瘤组织中TIDC细胞少于正常脑组织中DC细胞,随着脑胶质瘤级别的升高,TIDC细胞浸润数目减少,脑胶质瘤存在抗原提呈功能缺失或降低.
关键词： 脑胶质瘤 肿瘤浸润性树突状细胞 MHC-Ⅱ CD54 -
RNAi抑制大鼠骨髓源树突状细胞MHC-Ⅱ表达的研究
目的:应用RNAi技术探讨靶向主要组织相容性复合物Ⅱ类抗原反式转录激活因子(C Ⅱ TA)的shRNA质粒载体抑制大鼠骨髓源树突状细胞(DC)表面MHC-Ⅱ类抗原表达的可行性.方法:体外培养大鼠骨髓源DC:流式细胞仪检测DC表面抗原MHC-Ⅱ、OX-62表达情况;体外合成针对C Ⅱ TA mRNA序列特异性C Ⅱ TA shRNA并构建质粒,在阳离子脂质体介导下转染DC;流式细胞仪检测细胞表面抗原MHC-Ⅱ表达水平的变化.结果:(1)经体外培养DC可用于后续反应,体外构建质粒成功;(2)流式细胞仪检测显示C Ⅱ TA-shRNA质粒组中DC转染后MHC-Ⅱ的抗原水平均较对照组明显降低.结论:利用C Ⅱ TA shRNA质粒载体沉默C Ⅱ TA基因从而下调MHC-Ⅱ的表达的策略是可行的,为降低移植排斥反应提供了实验依据.
-
一种简便、高效的大鼠树突状细胞的分离方法
目的寻求一种简便、高效的大鼠骨髓树突状细胞(DC)分离与培养的方法.方法处死F344大鼠1只,消毒,取四肢骨,剔除肌肉,剪去骨两端;培养基冲洗骨髓腔,收集细胞悬液,经密度梯度离心得到淋巴单核细胞,加入全RPMI 1640培养基和rrGM-CSF、rrIL-4,培养箱中培养;经倒置显微镜、电镜观察细胞形态,经流式细胞仪鉴定DC纯度,显微镜下细胞计数.结果第4天经倒置显微镜、电镜观察DC出现典型形态;流式细胞仪检测第4天OX62阳性率为8.92%、MHC-Ⅱ为20.9%、CD86为16.98%;第8天OX62阳性率为58.07%、MHC-Ⅱ为60.49%、CD86为62.94%;第15天OX62阳性率为84.68%、MHC-Ⅱ为88.03%、CD86为62.80%.显微镜下细胞计数DC数量为(1.0～2.0)×107.结论应用梯度分离加细胞培养分离纯化大鼠DC,其纯度较高(80%以上),数量大[(1.0～2.0)×107].
-
CⅡTA-PⅣ甲基化参与家族聚集性HBV感染免疫耐受
目的 探讨家族聚集性HBV慢性化感染免疫耐受是否与CⅡTA-PⅣ甲基化有关.方法 收集家族中具有一级血缘关系的免疫激活期HBV慢性感染者和免疫耐受期HBV慢性感染者,提取外周血单个核细胞的DNA,经亚硫酸氢盐处理后,分别用甲基化的和非甲基化的引物扩增,随机选择8份产物克隆测序,测序结果提交公共数据库.结果 共收集来源于20个家系的47个免疫耐受期HBV感染者和23个免疫激活期感染者;耐受组纯合甲基化率显著高于激活组((16/47)34.0％ vs (2/23)8.7％,x2=5.194,P=0.019);耐受组纯合非甲基化率显著低于激活组((9/47) 19.1％VS(10/23)43.5,x2=4.622,P=0.033),杂和甲基化率在两组没有统计学差异.结论 CⅡTA-PⅣ甲基化与HBV慢性化感染免疫耐受有关,HBV可能通过甲基化CⅡTA-PⅣ并下调CⅡTA和MHC-Ⅱ类抗原表达而诱导免疫耐受.
-
以树突状细胞为基础的肿瘤疫苗联合体伽马刀治疗肺癌的展望(文献综述)
树突状细胞(dendritic cell,DC)是目前发现的功能强大的专职抗原递呈细胞,其表面具有高密度的抗原递呈分子(MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ)和共刺激分子(CD40、ICAM-1/CD54、ICAM-3/CD50、IFA-3/CD58、B7-1/CD80)等[1],由于其具有激活初始T细胞能力,促进CTL和Th的生成,启动自身的特异性的杀瘤反应,因此成为肺癌免疫治疗的研究热点.
-
炎症因子和肌源性分化对犬脐血间质干细胞MHC-Ⅱ表达的影响
目的 研究炎症因子IL-1β、TNF-α和INF-γ以及肌源性分化,对犬脐血间质干细胞MHC-Ⅱ表达的影响.方法 取犬脐带血,密度梯度离心法分离出单个核细胞,经贴壁培养扩增间质干细胞.取第4代细胞,在含IL-1β、TNF-α、INF-γ的培养液培养72 h,以及用5-氮杂胞苷诱导分化72 h后,免疫组化法检测MHC-Ⅱ的表达.结果 未分化的犬脐血间质干细胞为MHC-Ⅰ(+)、MHC-Ⅱ(-)细胞,肌源性分化以及炎症因子IL-1β、TNF-α、INF-γ不能诱导其表达MHC-Ⅱ.结论 肌源性分化和炎症因子IL-1β、TNF-α和INF-γ不能诱导犬脐血间质干细胞表达MHC-Ⅱ,提示其具有极低的免疫原性,可能适合进行同种异体细胞移植.
-
深低温冷冻保存降低大鼠气管移植物免疫原性的机制
目的 探讨大鼠气管移植物经深低温冷冻保存后免疫原性降低的机制.方法 Sprgue Dawley大鼠30只,取其气管冷冻保存于-85℃的冰箱.在新鲜和冷冻后1周、1个月、3个月、6个月共5个观察点上,采用苏木精-伊红染色来观察冷冻保存后气管黏膜上皮的形态改变,在透射电镜下观察DCs(dendritic cells,树突状细胞)的形态学改变,用免疫组化的方法分析冷冻保存后各个时间点气管上皮内的MHC-Ⅱ类分子的表达情况.结果 随着冷冻保存时间的延长,大鼠气管黏膜上皮细胞脱落增多,MHC-Ⅱ类分子表达下调,同时黏膜上皮内DCs发生形态和功能方面的改变,表现为突起减少、线粒体基质深染及胞质内出现空泡变性等改变.结论 大鼠气管冷冻后免疫原性降低可能有多种因素的参与,包括随着冷冻保存时间的延长出现的黏膜上皮脱落、MHC-Ⅱ类分子表达下调以及DCs发生形态和功能上的改变.
-
参术胶囊对脾虚胃癌小鼠T细胞活化信号的影响
参术胶囊处方来源于<证治准绳>中治疗脾气虚证之"参术膏".实验研究表明参术胶囊能明显改善瘤细胞的异型性,并能通过调控与代谢、离子通道和运输蛋白等相关基因来发挥治疗脾虚胃癌转移鼠[1-2].机体的免疫功能状态与脾虚胃癌的发生密切相关.因此,本研究以诱发性脾虚胃癌小鼠为模型,观察参术胶囊对脾虚胃癌小鼠T细胞活化信号的影响,进一步明确参术胶囊抗肿瘤作用的分子机制和作用靶点.
-
低温条件下小鼠树突状细胞功能改变及玉屏风散的调节作用
目的 探讨低温条件下小鼠树突状细胞(DC)功能改变及玉屏风散的调节作用.方法 将50只小鼠随机均分为对照组(室温25℃)、模型组(室温10℃)及玉屏风散小、中、大剂量组,给药第4天,将模型组及玉屏风散小、中、大剂量组置于低温容器内,连续低温处理3d,每天6h.采用流式细胞术检测各组DC表面分子MHC-Ⅱ、CCR7、CD86表达,RT-PCR法检测CD86、CCR7 mRNA表达.结果 与对照组比较,模型组体温下降,MHC-Ⅱ、CCR7、CD86表达降低,CCR7、CD86 mRNA表达下降(P均＜0.05);与模型组比较,玉屏风散各组的MHC-Ⅱ、CCR7、CD86表达升高(P均＜0.05).结论 低温可诱使DC下调MHC-Ⅱ、CD86及CCR7表达,玉屏风散可逆转上述分子表达,增强DC的信息传递功能.
-
HLA基因及功能研究进展
HLA抗原系统是迄今发现具有多肽性的抗原系统.位于人类第六条染色体短臂上的HLA基因及其功能是近十几年来遗传学和免疫学家们研究的热点,本文就HLA基因及其在免疫应答和免疫调节中的功能作一简要综述.
-
宫颈癌患者肿瘤浸润性树突状细胞表达水平及其临床意义
目的:探讨肿瘤浸润性树突状细胞在宫颈癌组织中的表达水平及其临床意义.方法:前瞻性收集2015年1月至2017年1月山东青岛市立医院收治的宫颈癌患者84例,检测肿瘤组织及癌旁组织中肿瘤浸润性树突状细胞浸润情况,并分析其与宫颈癌患者临床特征的相关性.结果:与癌旁组织相比,宫颈癌组织中肿瘤浸润性树突状细胞密度、MHC-Ⅱ阳性百分比及CD54阳性百分比均显著降低(均P=0.000).与FIGO分期为Ⅰ期的患者相比,FIGO分期为Ⅱ期的患者宫颈癌组织中肿瘤浸润性树突状细胞密度、MHC-Ⅱ阳性百分比、CD54阳性百分比显著降低(均P=0.000).结论:宫颈癌组织中肿瘤浸润性树突状细胞低表达,且多为不成熟细胞,与预后不良有关.
关键词： 宫颈癌 肿瘤浸润性树突状细胞 MHC-Ⅱ CD54 临床预后 -
脑创伤后大鼠血清作用下小胶质细胞主要组织相容性复合物Ⅱ的表达
目的 观察大鼠脑创伤后,不同时间点的血清刺激体外培养的大鼠小胶质细胞后MHC-Ⅱ分子的表达.方法 采用改良Feeney自由落体法构建大鼠颅脑损伤模型,20只SD大鼠按随机数字表法分为对照组5只、假手术组5只和创伤组10只,创伤组按伤后时间分为2、4、8、16、24 h5个采血点,在伤后不同时间点采用眼眶取血法,取静脉血离心后得血清刺激原代培养的大鼠小胶质细胞,培养24 h后流式细胞仪测定小胶质细胞MHC-Ⅱ的表达.结果 正常大鼠脑内小胶质细胞一般为静息状态,MHC-Ⅱ微量表达；假手术组有较低表达；创伤组各个时间点均有表达,且随着时间的推移,MHC-Ⅱ表达增高.创伤组与对照组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 大鼠脑损伤后的血清可使小胶质细胞MHC-Ⅱ的表达增高.
-
严重胸部创伤对肺泡及间质巨噬细胞MHC-Ⅱ表达的影响
目的观察严重胸部创伤后肺泡(AM)及间质(IM)巨噬细胞两类亚群MHC-Ⅱ表达的不同变化,并探讨其意义.方法建立严重胸部创伤模型,支气管肺泡灌洗,机械结合酶消化法分离、培养肺泡及间质巨噬细胞,动态检测创伤前、创伤后2、4、8、16、24h以及复合LPS攻击后肺泡及间质巨噬细胞MHC-Ⅱ的表达水平.结果利用小型多功能生物撞击机以400 kPa驱动压力对大鼠右侧上胸壁进行致伤,能够建立稳定可靠并符合临床特点的严重胸部创伤模型;IM的MHC-Ⅱ表达强于AM,创伤复合脂多糖(LPS)刺激能抑制它们的MHC-Ⅱ表达,AM在伤后4 h低,伤后24h恢复正常,IM在伤后8 h即恢复正常并持续增高.结论严重胸部创伤对AM、IM的MHC-Ⅱ表达具有不同影响,它们在创伤后机体免疫功能紊乱的过程中具有不同作用,本研究为创伤性急性肺损伤的发病机制提供了一定的实验及理论依据.
-
CIITA调控MHC-Ⅱ类分子表达分子机制的研究进展
MHC-Ⅱ类分子抗原处理、提呈通路在调控CD4+T细胞激活及特异性应答的过程中发挥重要的作用,T细胞的功能在很大程度上取决于MHC-Ⅱ类分子的表达水平.
-
CpG寡核苷酸对人外周血B淋巴细胞免疫刺激作用
目的 观察CpG-ODN2006和CpG-ODN2216对健康人外周血单个核细胞中B淋巴细胞抗原递呈相关分子MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ及共刺激分子CD80、CD86表达的影响,探讨CpG-ODN对B淋巴细胞抗原递呈功能的作用.方法 CpG-ODN2006、CpG-ODN2216与健康人PBMC共培养48 h,用流式细胞技术以CD19-PreCP"设门"其中B淋巴细胞,检测其袁面CD69、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、CD80及CD86的表达状况,并与未加CpG-ODN组进行比较.B淋巴细胞MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ的表达量以几何平均荧光强度表示(MFI);CD80、CD86的表达量以阳性细胞百分率表示.结果 CpD-ODN2006和CpG-ODN2216均显著提高B淋巴细胞CD69、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、CD80及CD86的表达,与未加CpG-ODN组比较有显著性差异(P＜0.05).CpG-ODN2216使B淋巴细胞表面抗原递呈相关分子的增加量更为明显.结论 CpG-ODN能够提高B淋巴细胞表面抗原递呈相关分子和共刺激分子的表达,能增强B淋巴细胞递呈抗原的能力.
