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抗明胶酶单链抗体与力达霉素融合蛋白抗肿瘤作用机制及疗效研究
目的：探讨抗明胶酶单链抗体 Fv 与力达霉素（LDM）融合蛋白的抗肿瘤作用机制及疗效。方法采用三联径向加压 C4柱制备 LDM 发色团 AE，体外分子重建将其装入融合蛋白 Fv-LDP 中，Superdex 75层析获得 Fv-LDP-AE。反相 HPLC 测定纯度或相对含量。流式细胞术测定 DNA 含量；采用 SA-β-gal 染色、Western blot 和细胞伤口愈合实验分别检测药物对细胞衰老、蛋白表达和迁移的影响；通过动物模型评价药物疗效。结果 Fv-LDP-AE 承袭了 LDM 诱导肿瘤细胞周期阻滞、凋亡和裂亡的作用特点，并显示出更强的诱导衰老和抗迁移作用。Fv-LDP-AE 诱导凋亡和抑制迁移依次与 caspases 通路激活和 MMP-2降调节有关。Fv-LDP-AE 可抑制小鼠和裸鼠移植瘤生长，抑制率分别可达到86.6%和82.5%。结论 Fv-LDP-AE 对小鼠和裸鼠移植瘤有效，可能与其对细胞周期阻滞、凋亡、裂亡和衰老的诱导以及迁移的抑制有关。
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MRL/lpr狼疮小鼠肾脏明胶酶表达随增龄变化及意义
目的观察不同周龄MRL/lpr狼疮小鼠肾脏明胶酶的表达及其随增龄而发生的活性变化及意义.方法取8、16与24周龄MRL/lpr狼疮小鼠的肾组织进行常规病理检测,利用含有放射自显影的成像乳胶对冷冻肾组织切片进行原位明胶酶活性的检测;利用免疫组织化学检测肾脏明胶酶A与明胶酶B的蛋白表达变化,十二氨基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)明胶酶谱法检测肾脏明胶酶A、B的活性变化.结果 8周龄狼疮小鼠肾组织中仅在血管处检测到明胶酶的活性;16与24周龄狼疮小鼠肾小球内明胶酶的净活性明显增加,在肾小球以及肾小管间质上也可检测到明胶酶的活性.乙二胺四乙酸(EDTA)能够抑制肾脏明胶酶的活性.免疫组织化学与SDS-PAGE明胶酶谱法结果显示其肾组织中明胶酶A与明胶酶B的蛋白质表达及活性均明显增加.结论明胶酶A、B在自发性狼疮小鼠肾炎中的表达及活化随增龄均明显增加,活化态的明胶酶可能在狼疮性肾炎细胞外基质重塑中发挥重要的作用.
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DQ明胶原位酶谱分析方法在检测乳腺癌组织中明胶酶活性的应用
基质金属蛋白酶家族(MMPs)在肿瘤的侵袭和转移中具有重要的作用,其中重要的是明胶酶类,包括MMP-2和MMP-9.由于能特异性的降解基底膜的主要成分Ⅳ型胶原而发挥作用,因此又称为Ⅳ型胶原酶[1].明胶酶以酶原形式分泌,在细胞外被活化后才能发挥作用,促进肿瘤细胞的侵袭和转移[2].但是以往在明胶酶的检测方法中[3],未能既检测其活性又能对其进行定位,本实验中所采用的DQ明胶原位酶谱分析的方法可以兼顾这两个方面.
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生长抑素受体2转染胰腺癌细胞生物学行为的研究
目的 探讨生长抑素受体2(SSTR2)对胰腺癌恶性行为的影响.方法 利用原先已构建的腺病毒载体Adv-GFP-SST2R将人SSTR2全长cDNA转染导入胰腺癌细胞株PC3中,用RT-PCR检测SSTR2 mRNA表达.通过肿瘤细胞与基膜成分黏附能力测定、运动能力测定、明胶酶谱法观察转染前后细胞的生物学特性的改变.结果 转染Adv-GFP-SST2R的PC3细胞表达SST2R mRNA.SSTR2转染胰腺癌PC3细胞后,胰腺癌细胞与基质的黏附性、运动性下降,明胶酶的分泌能力明显减弱.结论 SSTR2转染可明显减轻胰腺癌的恶性行为.
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全脑血管造影术后患者中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白变化的研究
目的 观察数字减影血管造影术(DSA)后患者血中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的变化,以及与血肌酐、尿微量白蛋白(U MA)的关系.方法 选择行DSA的患者60例,分别于术前、术后6、24和48 h行NGAL、血肌酐和U-MA检测.结果 与术前24 h比较,术后6 h NGAL明显升高,术后48h血肌酐、U-MA明显升高;与术后6h比较,术后24和48h NGAL明显降低,术后48 h血肌酐、U-MA明显升高;与术后24 h比较,术后6 h NGAL明显升高,术后48h血肌酐、U-MA明显升高(P＜0.01).血NGAL与血肌酐(r=0.605,P=0.00)、U-MA(r=0.593,P=0.00)均有相关性.结论 测定血液中NGAL的变化可早期发现DSA后患者肾功能的异常.
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老龄大鼠脑缺血再灌注损伤与明胶酶系基因表达的关系
目的 研究老龄大鼠脑缺血再灌注不同时期微血管基底膜损伤与明胶酶系基因表达的关系.方法 制备SD雄性大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,将56只青年大鼠分为青年假手术组、青年模型组,56只老龄大鼠分为老龄假手术组、老龄模型组,其中青年与老龄模型组又分缺血3 h和再灌注6、12、24 h,3、6天时间点.观察脑微血管结构基底膜病理形态变化和明胶酶系的基因表达变化.结果 老龄假手术组大鼠脑皮质微血管结构基本正常,老龄模型组与同时间点青年模型组比较病理损伤较重.随再灌注时间的延长,基质金属蛋白酶-2(MMP-2) mRNA表达递增,基质金属蛋白酶-9(MMP-9) mRNA和金属蛋白酶组织抑制-1(TIMP-1) mRNA表达呈先增强后降低趋势.与青年模型组相同时间点比较,老龄模型组MMP-2、MMP-9 mRNA表达水平增强;TIMP-1 mRNA仅在再灌注24 h表达水平降低,差异均有显著性.结论 随着增龄,大鼠脑微血管基底膜损伤改变与MMP mRNA、TIMP mRNA的变化有关.老龄大鼠较青年大鼠病理损伤严重.
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中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白在心血管疾病中的应用价值
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated Lipocalin,NGAL),是人脂质运载蛋白家族中的一员.早是由Kjeldsen等在1993年研究中性粒细胞时发现的一种特殊颗粒组分.现已证明,NGAL与心力衰竭、动脉粥样硬化等多种病理过程相关,对早期发现肾脏损害、判断心力衰竭患者预后、预测斑块不稳定性,评价冠心病患者冠状动脉病变程度具有较大的临床意义.
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尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白对脑动脉支架置入术后造影剂肾病严重程度的预测价值
目的 评价老年患者尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)对脑动脉支架置入术后致造影剂肾病(CIN)的早期诊断价值及其严重程度的预测价值.方法 选择CIN患者15例(CIN组),其中CIN Ⅰ期12例,CINⅡ期3例;非CIN患者15例(对照组),连续收集尿标本进行NGAL分析.结果 与对照组比较,CIN组及CIN Ⅰ期、CINⅡ期患者术后3、6、12、24 h和CINⅡ期患者术后48 h尿NGAL明显增高,CIN组及CIN Ⅰ期、CINⅡ期患者尿NGAL术后0～3 h、0～6 h、0～12 h、0～24 h、0～48 h绝对变化值明显增高(P＜0.05).与CIN Ⅰ期比较,CINⅡ期患者尿NGAL术后0～6 h、0～12 h绝对变化值明显增高(P＜0.05).CIN组术后0～6h尿NGAL绝对变化值与术后48 h估算肾小球滤过率呈负相关(r=-0.480,P=0.001).结论 动态监测尿NGAL既可早期诊断CIN,也可对CIN严重程度有一定的预测作用.
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中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白在评价活体供肾切取术后残肾功能中的临床意义
目的 探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)在评价不同年龄、不同术式活体供肾切取术后残肾功能的临床意义.方法 回顾性分析2016年9月至2017年10月在郑州大学第一附属医院成功实行亲属活体肾移植的66例供者临床资料.根据术式、年龄将供者分为4组:青年开放组、青年腔镜组、中老年开放组、中老年腔镜组;记录供者术前及术后1、3和7d血、尿NGAL、血肌酐和胱抑素C等肾功能监测指标.结果 4组的术前血、尿NGAL差异无统计学意义(P>0.05);术后第1天老年开放组尿NGAL均高于其他3组(P<0.05),青年开放组尿NGAL的表达高于青年腔镜组(P<0.05),4组血NGAL比较差异无统计学意义(P>0.05);术后第3天中老年开放组血NGAL高于中老年腔镜组(P<0.05).结论 NGAL可作为活体供肾切取术后残肾功能的评估指标,尤其在评估中老年及开放性供肾的残肾功能时更为敏感,有助于早期发现供者术后急性肾损伤.
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基质金属蛋白酶与皮肤光老化
紫外线(ultraviolet,UV)是导致皮肤老化重要的外源性因素,由UV引起的皮肤老化称之为皮肤光老化.UV照射可诱导有活性的基质金属蛋白酶( matrix metalloproteinases,MMPs)过度表达,继而降解胶原蛋白等真皮细胞外基质成分,导致皮肤光老化.本文综述了MMPs在皮肤光老化中的作用及其相关机制.一、MMPs的生物学特性MMPs是一组含锌蛋白酶家族,由25名成员组成,根据其底物特异性以及其分泌后是可溶性蛋白还是细胞膜结合蛋白将其分为胶原酶类、明胶酶类、基质溶素和膜型MMPs.
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卵巢癌血管内皮生长因子过度表达及肿瘤浸润转移机制的探讨
目的研究血管内皮生长因子(VEGF)过度表达在卵巢癌浸润转移中的作用及可能机制.方法脂质体介导VEGF cDNA转染卵巢癌细胞系CAOV3、COC1,并经逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术、蛋白印迹(Western blot)法检测转染VEGF cDNA前后卵巢癌细胞中VEGF、明胶酶A(MMP-2) mRNA及其蛋白表达水平; Boyden小室体外侵袭实验比较VEGF cDNA转染前后卵巢癌细胞穿透人工重组基底膜能力的变化.结果 VEGF cDNA转染后卵巢癌细胞系CAOV3、COC1细胞中VEGF mRNA表达水平分别为0.98±0.05和0.87±0.06,MMP-2 mRNA表达水平分别为0.95±0.03和0.82±0.02,均较转染前(分别为0.84±0.03和0.62±0.04,0.71±0.02和0.61±0.01)明显增加(P<0.05); VEGF、MMP-2蛋白表达水平也呈相同变化趋势(P<0.05);VEGF cDNA转染后的CAOV3、COC1细胞的穿透人工重组基底膜的能力分别为(42.5±4.1)%,(26.8±2.4)%,较对照组[(24.7±1.9)%, (8.6±1.1)%]明显增加(P<0.05).结论 VEGF促进卵巢癌浸润、转移的机制可能与诱导MMP-2合成及分泌有关.
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羊水中明胶酶、白细胞介素8与胎膜早破关系的研究
目的探讨明胶酶、白细胞介素8 (interleukin-8, IL-8)与胎膜早破(Premature Rupture of Membrane,PROM)发生的关系. 方法 PROM者30例为观察组,正常孕妇30例为对照组.于剖宫产时抽取羊水3 ml备存.羊水消化生物素标记明胶,用ELISA法测定剩余明胶的含量,换算出酶的活性.参照文献进行明胶电泳,酶经电泳分离后,将该处的明胶消化,染色后形成不着色的透明带;IL-8含量的测定:用双抗体夹心ELISA法. 结果 (1)在未临产、潜伏期和活跃期,观察组和对照组羊水总明胶酶的活性分别为:(85±10)μg/L·12 h、(91±7)μg/L·12 h、(104±23)μg/L·12 h和(49±15)μg/L·12 h、(58±15)μg/L·12 h、(102±29)μg/L·12 h,两组中活跃期显著高于未临产(P<0.01).(2)在未临产期和潜伏期,观察组羊水中总明胶酶的活性均显著高于对照组(P<0.05).(3)羊水中较明确的明胶酶带有4条,分子量分别为92、83、72和66 kd.观察组在未临产时羊水中各明胶酶消化的明胶带较对照组宽.(4) 在未临产、潜伏期和活跃期, 观察组和对照组羊水IL-8的含量分别为:(0.195±0.110)μg/L、(0.276±0.128)μg/L、(0.333±0.134)μg/L和(0.102±0.056)μg/L、(0.250±0.110)μg/L、(0.315±0.143)μg/L,活跃期比未临产显著升高(P<0.001),而观察组未临产和潜伏期羊水中IL-8的含量显著高于对照组(P<0.05). 结论羊水中明胶酶活性异常升高是胎膜早破发生的重要基础之一,细胞因子可能在其中起重要的调节作用.
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明胶酶A在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义
目的:探讨明胶酶A在甲状腺乳头状癌中的表达及其与甲状腺乳头状癌侵袭与转移的关系,方法:用原位杂交、免疫组化SP法检测95例甲状腺乳头状癌及59例癌旁组织中明胶酶A mRNA、蛋白的表达水平.结果:明胶酶AmRNA和蛋白在甲状腺乳头状癌中的阳性率分别为74.7%(71/95)、77.9%(74/95),而在癌旁组织中的阳性率分别为10.2%(6/59)、25.4%(15/59),两者差异有统计学意义,P＜0.01.明胶酶A mRNA及其蛋白在甲状腺乳头状癌(微小癌、腺内型、腺外型)的阳性率分别为59.3%(16/27)、80.0%(40/50)、83.3%(15/18);66.7%(18/27)、80.0%(40/50)、88.9%(16/18),癌组织各型间差异无统计学意义,P＞0.05.淋巴结有癌转移组的阳性率分别为91.4%(32/35)、97.1%(34/35),淋巴结无癌转移组的阳性率分别为65.0%(39/60)、66.7%(40/60),两者差异有统计学意义,P＜0.01.结论:明胶酶A在甲状腺乳头状癌中呈高表达,与甲状腺乳头状癌侵袭与转移有密切关系.
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基质金属蛋白酶及其组织抑制剂在大鼠慢性高眼压模型筛板区巩膜组织中的表达
目的 探讨大鼠慢性高眼压模型筛板区巩膜组织中基质金属蛋白酶(MMP)及其抑制剂(TIMP)的表达与青光眼发病机制的关系.方法 实验研究.将43只Wistar大鼠的左眼成功地建立为慢性高眼压模型,对侧右眼为对照组.采用计算机随机数字表法将实验大鼠分为3组,分别应用免疫组织化学法(13只鼠)、免疫印迹法(15只鼠)及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法(15只鼠)检测大鼠筛板区巩膜组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的表达情况.应用SAS统计学软件,对免疫印迹法和RT-PCR法榆测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2表达的4个定量指标,分别采用具有一个重复测量的两因素设计定量资料的方差分析,以P＜0.01作为差异有统计学意义.结果 (1)免疫组织化学检测结果:实验眼筛板区巩膜组织中细胞核和细胞浆巾MMP-2、MMP-9表达明显,对照眼均未见MMP-2、MMP-9表达;实验眼和对照眼筛板区巩膜组织中细胞核和细胞浆中均未见TIMP-1、TIMP-2表达.(2)免疫印迹法检测结果:平均灰度值:实验眼的MMP-2为193.88±8.84,MMP-9为202.65±8.37,TIMP-1为283.63±5.65,TIMP-2为284.75±5.50;对照眼的MMP-2为117.38±10.76,MMP-9为134.13±5.06,TIMP-1为186.88±7.14,TIMP-2为183.0±5.58.(3)RT-PCR法检测结果:平均灰度值:实验眼的MMP-2为200.50±3.25,MMP-9为200.13±2.95,TIMP-1为201.88±3.14,TIMP-2为195.50±3.55;对照眼的MMP-2为181.88±9.36,MMP-9为181.75±5.85,TIMP-1为179.25±9.21,TIMP-2为179.75±7.12.实验眼与对照眼的表达差异有统计学意义(MMP-2:F=405.55,MMP-9:F=436.11,TIMP-1:F=1167.77,TIMP-2:F=4629.64;均P＜0.01).结论大鼠慢性高眼压模型筛板区巩膜组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的表达明显增加.(中华眼科杂志,2009,45:260-265)
关键词： 青光眼 巩膜 明胶酶类 金属蛋白酶类组织抑制剂 -
黏着斑激酶在肿瘤坏死因子α上调人角膜上皮细胞明胶酶活性中的作用
目的 探讨黏着斑激酶(FAK)在肿瘤坏死因子α(TNF-α)上调体外培养人角膜上皮细胞明胶酶活性中的作用.方法 实验研究.体外培养无眼部疾患人角膜上皮细胞,将传至3～4代的细胞暴露于含1 μg/L TNF-α(B组)、10 μg/L TNF-α(C组)、100 μg/L TNF-α(D组)的培养基中,对照组(A组)用含等量磷酸盐缓冲液(PBS)的培养基处理,明胶酶谱分析各组条件培养基中基质金属蛋白酶2和9( MMP-2、MMP-9)的活性,免疫印迹法分析FAK总蛋白表达及磷酸化FAK的表达；运用RNA干扰技术特异性抑制人角膜上皮细胞FAK的表达并重复以上过程.统计学方法使用单因素方差分析,各组间比较采用Tukey HSD检验.结果 明胶酶谱分析:与A相比,B、C、D组MMP-2、MMP-9活性均明显上调,差异有统计学意义(A、B、C、D组MMP-2活性表达分别为:124.06 ±4.06、146.72±5.51、241.18±5.65、389.95±4.44,F=2960.91,P=0.000；MMP-9活性表达分别为:122.78±5.86、165.70±7.90、479.49±6.22、495.88±5.03,F=4937.46,P=0.000),各组间比较差异均有统计学意义(MMP-2各组间比较均为P=0.000；MMP-9各组间比较P=0.000)；免疫印迹分析:C、D组中磷酸化FAK较A组增加,差异有统计学意义(C、D组磷酸化FAK分别为:0.52±0.03、0.61 ±0.06;F=431.03,P=0.000),100 μ.g/L TNF-α组较10 μg/L TNF-α组中磷酸化FAK表达增加(P=0.005)；运用RNA干扰技术特异性抑制人角膜上皮细胞FAK表达后,FAK总蛋白较特异性抑制之前明显下调,B、C、D组MMP-2的活性差异无统计学意义(转染后A、B、C、D组MMP-2分别为:55.13±0.66、55.67±0.43、55.49±0.20、55.91±0.37；F=2.73,P=0.079).10、100μg/L TNF-α干预组中MMP-9少量增加(转染后A、B、C、D组MMP-9分别为:80.48±0.39,81.26±0.62,84.43±0.47,85.56±0.61；F=105.80,P=0.000)但增加幅度较转染前明显减小,D组较C组MMP-9活性增强,差异有统计学意义(P=0.019).仅在100 μg/L TNF-α干预组中检测到FAK磷酸化(0.47±0.05),但表达量较抑制前明显减少(t=5.03,P=0.001).结论 FAK信号在TNF-α上调入角膜上皮细胞明胶酶活性过程中发挥一定作用,针对这一过程干预可能对防治角膜病变有意义.
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凝血酶调控肾小球系膜细胞产生明胶酶A、B的分子机制研究
在体外培养条件下观察了凝血酶对人肾小球系膜细胞表达细胞外基质降解酶--明胶酶A(MMP-2)及明胶酶B(MMP-9)的调节作用.发现在无血清RPMI1640培养12h后,酶谱法显示系膜细胞培养上清液中MMP-2活性极低,未检测出明显的MMP-9酶解活性,但加入凝血酶后,可剂量依赖性地上调其MMP-2、MMP-9活性;RT-PCR结果表明,在无血清RPMI1640培养12h后,系膜细胞仅表达低水平MMP-9 mRNA,加入凝血酶后,MMP-9 mRNA转录水平随刺激浓度的增加而明显上调,但凝血酶对MMP-2 mRNA的转录过程无明显影响;凝血酶的上述作用可被其特异性阻断剂--水蛭素部分性地拮抗.说明凝血酶分别在基因转录和(或)蛋白质修饰水平调节人肾小球系膜细胞表达MMP-2、MMP-9,从而参与肾小球组织重构及炎症性损伤.
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实验性肝纤维化明胶酶B基因表达的研究
明胶酶B(MMP9),又称92kD(91.3ku)Ⅳ型胶原酶/明胶酶;另一种明胶酶A(MMP2)为72 kD(71.4 ku)Ⅳ型胶原酶/明胶酶.它们同属基质金属蛋白酶(MMPs)中的一大类,基质金属蛋白酶是参与细胞外基质降解的主要蛋白分解酶.肝纤维化为细胞外基质蛋白过度蓄积所致,其发生与细胞外基质蛋白的合成代谢及降解代谢有关.目前肝纤维化基质降解的研究多集中于对MMPs中的另一类--间质胶原酶的研究上,而对Ⅳ型胶原酶/明胶酶类的研究报道甚少.我们以四氯化碳(CCl4)中毒性及人血白蛋白免疫损伤性两种大鼠肝纤维化为模型,采用逆转录定量PCR方法,研究了实验性肝纤维化过程中明胶酶B基因表达的动态变化.
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大鼠急性期缺血再灌注血管原性脑水肿MRI表现及与血管内皮细胞明胶酶B表达的关系
目的探讨脑缺血再灌注后血管原性脑水肿(VBE) MRI表现及其与血管内皮细胞明胶酶B表达的相关性.方法线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型,MR连续动态观察缺血区体积与信号变化,免疫组织化学方法观察血管内皮细胞明胶酶B表达.结果缺血后3 h至7 d扫描术侧大脑半球见T2高信号改变,12 h至3 d见不同程度同侧侧脑室受压变窄、中线结构向对侧移位.3 h开始上述征象逐渐明显,1～2 d达到峰值,3～7 d则逐渐减轻.显微镜下见随时间推移而明显的血管内皮细胞肿胀、血管周围间隙增宽与无定形嗜酸物质.不同时间点明胶酶B免疫组织化学染色均可见血管内皮细胞胞质着色,12 h、1 d、2 d、3 d、5 d与7 d染色评分分别为(1.20±0.42)分、 (1.70±0.48)分、(2.20±0.71)分、(2.87±0.58)分、(3.00±0.01)分与(2.50±0.71)分,与MRI上缺血侧大脑半球体积增加、对侧大脑半球压迫、缺血侧T2WI上异常高信号体积增加、缺血侧额顶叶和基底节区T2WI信号强度(SI)增加的相关系数为0.89～0.976.结论缺血再灌注后VBE MRI表现为脑组织体积增大与T2WI信号增高.VBE的MRI征象与脑组织明胶酶B的表达有相关性.
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老龄大鼠肺内基质金属蛋白酶2、9及基质金属蛋白酶组织抑制因子1、2、3表达变化
目的:对比观察老龄大鼠和成年大鼠肺胶原蛋白的改变、转化生长因子β(transforming growth factor β,TGF-β)水平的变化、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPS)MMP2,MMP9以及基质金属蛋白酶组织抑制因子(tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPS)表达调控的变化,寻找肺间质纤维化发病率随年龄增加的可能原因.方法:通过羟脯氨酸定量测定肺组织胶原含量,ELISA方法测定TGF-β1蛋白水平,荧光定量PCR(realtime PCR)技术测定MMP2,MMP9,TIMP1,TIMP2,TIMP3 mRNA表达量的变化.结果:与成年大鼠组相比,老龄大鼠肺细胞外胶原成分增加,TGF-β1蛋白水平升高[(756±160)pg/g vs(1 000±246)pg/g,P＜0.05],MMP2 mRNA(3.15±1.76 vs 0.17±0.13,P＜0.01)表达水平降低,MMP9 mRNA(1.66±0.67 vs 1.74±0.87,P＞0.05)表达水平没有明显变化.老龄大鼠组TIMP1 mRNA(2.00±1.74 vs 0.11±0.06,P＜0.01),TIMP2 mRNA(7.60±2.51 vs 2.69±1.76,P＜0.01),TIMP3 mRNA(1.32±0.46 vs 0.29±0.16,P＜0.01)表达水平均低于成年大鼠组.结论:肺老化后细胞外胶原比例增加,TGF-β1蛋白水平升高,MMP2和MMP9转录水平改变,TIMPS mRNA转录水平降低等多重因素共同构成肺间质纤维化发病率随年龄增加的基础.
关键词： 衰老 肺纤维化 转化生长因子β 明胶酶类 金属蛋白酶类组织抑制剂 -
心脏手术后中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的变化与急性肾损伤
目的 通过对体外循环下接受心脏手术的患者,检测尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL),观察其与急性肾损伤(AKI)的关系.方法 根据AKI的诊断标准,将33例在体外循环下接受心脏手术的患者分为AKI组及非AKI组,分别留取术前及术后不同时间点的血液和尿液标本,测定所有标本中的肌酐水平和尿液标本中NGAL水平.结果 ①33例患者有9例发生AKI,发生率为27%,AKI组血清肌酐(Scr)升高峰值出现在12～48 h内.②与术前相比,非AKI组患者术后2 h尿NGAL水平显著升高(P＜0.001),此后逐渐下降,其余各时间点与术前水平相比差异无统计学意义;AKI组术后2 h及术后4 h尿NGAL水平显著升高(均P＜0.001),术后8 h仍持续较高水平,但与术前水平相比差异无统计学意义.③AKI组术后各时间点的尿NGAL水平都明显高于非AKI组(均P＜0.01).④与术前相比,非AKI组患者术后2 h及4 h尿NGAL/Ucr水平显著升高(均P＜0.05),此后逐渐下降,与术前水平相比差异无统计学意义.AKI组术后2 h及术后4 h尿NGAL/Ucr水平显著升高(均P＜0.01),此后逐渐恢复到术前水平.⑤AKI组术后各时间点的尿NGAL/Ucr水平明显高于非AKI组,差异有统计学意义(均P＜0.01).⑥2 h尿NGAL和尿NGAL/Ucr的cutoff值分别在250 靏/L和250靏/mmol时,体现出较好的敏感性和特异性.⑦AKI组术后12 h Scr水平与术后2 h尿NGAL水平间存在线性相关(R=0.638,P＜0.05).结论 ①体外循环下接受心脏手术的患者AKI发生率较高,可达到27%;②术后2 h尿NGAL和术后2 h尿NGAL/Ucr可作为体外循环下心脏手术后AKI发生的早期诊断指标,其中术后2 h尿NGAL/Ucr更具敏感性;③术后2 h尿NGAL和NGAL/Ucr分别在250 靏/L和250 靏/mmol时,体现出较好的敏感性和特异性.
