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c-fos转录激活系统的构建
c-fos是转录因子类的原癌基因,分子量为55 ku[1~3].c-fos蛋白是其他许多基因转录调控因子的组成部分,其表达与调控与各种疾病的发生发展有关,如c-fos在细胞生长的静止期基本不表达,在乳腺癌、结肠癌、胃癌、肝癌及癌前病变中,c-fos都过度表达;c-fos在神经元活动时表达活跃,可能与癫痫的发生有关.为进一步了解c-fos在各种疾病中的作用及为药物筛选提供模型,本文将c-fos构建到含GAL4 DNA结合结构域(DNA binding domain,DBD)序列和血凝素(hemagglutinin, HA)标签序列的pGAL-HA载体中,建立了c-fo转录激活系统.
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乙型肝炎病毒E抗原结合蛋白E-19的猴同源基因的克隆化与序列分析
目的:乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)对-HBV的感染和复制都不是必须的,普遍认为他与HBV引起免疫耐受,免疫系统功能障碍有关.应用酵母双杂交技术我们克隆了人肝细胞cDNA文库中与HBeAg相互作用蛋白的基因E-19,应用生物信息学技术克隆猴的E-19同源基因.方法:应用酵母双杂交系统3,将多聚酶链反应(PCR)法扩增的HBeAg基因连接入酵母表达载体pGBKT7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA文库质粒pACT2的酵母细胞Y187进行配合,提取阳性菌落并测序,确定人E-19基因序列,利用生物信息学技术克隆猴的E-19同源基因,并进行编码产物的序列分析.结果:成功克隆出人的HBeAg结合蛋白新基因E-19.应用生物信息学技术,确定克隆了猴E-19同源基因,编码基因全长378 nt,编码产物由125 aa组成.结论:成功克隆出人的HBeAg的肝细胞结合蛋白E-19基因,并发现、确定了猴E-19的同源基因,为研究E-19基因的结构与功能、表达与调控、生物学意义以及在病毒性肝炎发病机制中的作用奠定了基础.
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β-防御素2在呼吸系统的表达与调控
呼吸系统作为机体与外界环境沟通的主要门户,每天至少要吸入15~20 mm3的空气,直接面临自然界中大量病原微生物的侵袭.健康机体的呼吸系统借助完整的免疫防御体系来抵御清除外界各种有害微生物的入侵.防御素作为其中的重要组成部分,以其广谱的抗微生物活性及在先天性与获得性免疫中的重要作用,成为近10年来国内外研究的热点.
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松果体的细胞培养研究
本文就松果体细胞体外培养的研究进展、培养细胞的形态学特征、功能表达与调控等方面的研究作一综述.
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脑基因的表达与调控
脑细胞的染色体中包含有与其它器官的细胞完全相同的基因,但是脑细胞所表达的蛋白质如酶、受体、载体、神经肽等却与其它组织完全不同.关键点就是脑基因的表达与调控.
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基质金属蛋白酶的表达与调节在椎间盘退变过程中的作用
细胞外基质( ECM)成分改变及破坏是导致椎间盘退变( IDD)的重要原因,目前研究认为,基质金属蛋白酶( MMPs)是引起椎间盘细胞外基质降解的主要酶类。作者对关于椎间盘退变过程中MMPs的表达与调控的文献进行了综述,发现MMPs在退变椎间盘中表达增加,其表达及调控受到一系列因素的综合影响,并与其调控因子构成复杂的网络调节机制,一旦这种调节机制失去平衡,可引起椎间盘ECM降解,并终引起IDD。若能对MMPs表达调控进行干预,将使得生物治疗椎间盘退变成为可能。
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血管内皮细胞生长因子的研究进展
目的探讨血管内皮细胞生长因子的生物学作用及机制.方法检索近年国内外相关文献进行分析.结果血管内皮细胞生长因子被认为是具特异性,是直接作用于血管内皮细胞促进血管形成的关键性因子,其主要生物学作用可概括为:(1)增加血管内皮细胞的通透性;(2)促进肿瘤血管生成;(3)促进血管内皮细胞的增殖;(4)破坏血-脑屏障等.结论血管内皮细胞生长因子可作为抗血管生成的靶向,抑制或促进血管的生成,以治疗疾病.
关键词: 血管内皮细胞生长因子 表达与调控 作用机制 -
磷酸化对核受体功能的调控研究进展
核受体是细胞核内一类能同相应的配体结合并调控特定基因表达的转录因子,参与细胞的分化、增殖和凋亡.研究表明,核受体的磷酸化与去磷酸化在多条信号途径中起着重要作用.本文围绕核受体的基本结构和功能、核受体发生磷酸化的部位、磷酸化对核受体转录活性的调节以及核受体磷酸化与癌症等几方面进行综述.
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神经营养因子低亲和力受体--P75NTR
P75NTR为神经营养因子低亲和力受体,在神经系统等许多组织中表达,为肿瘤坏死因子超家族第一个成员,它与NGF等神经营养因子以相似亲和力结合.生物学作用主要包括两个方面,与高亲和力受体(Trk)协同作用,与细胞凋亡有关.而诱导细胞凋亡的信号转导途径与与肿瘤坏死因子家族其它成员不同.
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干细胞因子逆转录病毒表达载体的构建及体外性质研究
目的 通过逆转录病毒介导两种类型人干细胞因子在NIH3T3细胞中稳定表达,并研究它们对白血病细胞的作用.方法 用DNA重组技术构建并鉴定可溶型及膜结合型干细胞因子的重组逆转录病毒表达载体MSCV-PGK-GFP-sSCF、MSCV-PGK-GFP-mSCF,与空载体对照MSCV-PGK-GFP分别转染Phoenix细胞包装病毒,并感染NIH3T3细胞,流式分选术获得3种阳性细胞,CCK8法分别检测与其共培养的K562细胞的增殖情况.结果 成功构建了sSCF、mSCF逆转录病毒表达载体;经Phoenix包装的重组及对照逆转录病毒成功感染NIH3T3细胞,获得了稳定表达细胞株NIH3T3-S、NIH3T3-M和对照细胞株NIH3T3-V.共培养中NIH3T3-S、NIH3T3-M均可促进K562细胞的增殖,且在低血清条件下,NIH3T3-M的作用高于NIH3T3-S.结论 可溶性及膜结合SCF分别通过旁分泌和并置性作用促进白血病细胞的增殖.
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促凋亡线粒体蛋白BNIP3的表达调控与功能
Bcl2家族蛋白是参与调节细胞凋亡的主要家族之一.所有家族成员的蛋白结构中包含至少一个Bcl2同源结构域(BH1~BH4).Bcl2家族蛋白分为两大类:①抗凋亡蛋白亚类,包括Bcl2、Bcl-XL、 Bcl-w、 Bfl-1、MCL-1等蛋白;②促凋亡蛋白亚类,包括含有BH1~BH3结构域的BAX、 Bak与 Bok蛋白和仅包含BH3结构域的Bim、 Bad、 BNIP3、 NIX、 Puma和 NOXA等蛋白[1].其中,BNIP3和NIX是仅有的两个受低氧诱导因子(hypoxic inducible factor 1,HIF1)调控的Bcl2家族蛋白[2,3].本文将对BNIP3(Bcl2/adenovirus E1B 19 kD protein interacting protein 3)的结构、功能、表达与调控和其在恶性肿瘤中的表达与作用研究现状进行较为全面的阐述.
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哺乳动物DNA甲基转移酶家族的研究进展
哺乳动物 DNA 甲基化是基因组DNA的一种主要表观遗传修饰形式,在基因的表达与调控中起重要作用,亦与哺乳动物细胞的生长和发育以及肿瘤的发生与发展密切相关.
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多媒体在医用生物化学教学应用中的利弊
医学生物化学是重要的医学基础课程之一,其发展迅速、应用广泛.医学生物化学教学内容已从传统的物质代谢为中心变为以遗传信息表达与调控为中心的分子生物学模式,并新增大量的现代实验技术.教学内容增多,内容抽象,概念繁多,但是当前医学院校的生物化学学时相对压缩,使得该课程讲授和学习的难度加大[1].因此,在生物化学教学中应用多媒体课件成为一种能较好地适应现代教学的新方法.多媒体教学可以将声音、影像、文字、色彩等多种信号集于一体,将微观、抽象的多种信息直观、生动形象地体现出来,更能激发学生的学习兴趣,引发学生的求知欲[2].
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医学发育生物学教学实践探索
发育生物学是研究有机体发育过程与机理的一门学科,医学发育生物学则是发育生物学在医学领域的一个分支,是研究哺乳动物和人体从胚胎发生、生长发育至衰老死亡的生命过程中所发生的变化和规律的科学,其研究范围主要涉及胚胎发育的遗传物质基础、胚胎细胞与组织的分子结构、生理生化特性、形态表型的演变、以及发育过程中各阶段基因的表达与调控、基因型与表现型的关系等.
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加强发育生物学教学的实践与探索
发育生物学是研究有机体发育过程与机理的一门年轻而又古老的学科,它由实验胚胎学、分子胚胎学、细胞生物学与分子遗传学等学科相互渗透形成,主要研究胚胎发育的遗传物质基础、胚胎细胞与组织的分子结构、生理生化特性、形态表型的演变、特别是发育过程中基因的表达与调控、基因型与表型的关系等;
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孕激素受体磷酸化调控的研究进展
孕激素受体属于类固醇激素受体超家族的核转录因子.孕激素与胞质中的PR结合后进入细胞核,能识别绑定到特定基因上游的顺式作用元件上并对特定基因的转录和翻译的速率进行调控[1].孕激素受体可发生磷酸化修饰.
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医学分子生物学的过去、现在与将来作者简介:
1962年DNA双螺旋结构的阐明是生命科学为辉煌的里程碑.它不仅开辟了分子生物学新的分支学科,更重要的是赋予了分子生物学的科学含义-探讨生命的遗传本质和遗传信息流向,基因的克隆与重组、表达与调控.大分子结构与功能、信号的传递、疾病与重要的生命现象发生了很大的进展.仅获得的诺贝尔奖项就有数十项,这反映了新学科旺盛的生命力.