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新生大鼠肌源性干细胞跨胚层分化为胰岛素分泌细胞的研究
目的 探讨新生大鼠肌源性干细胞(MDSCs)在体外跨胚层转分化为胰岛素分泌细胞(IPCs)的可能性.方法 提取新生大鼠MDSCs原代细胞,差速贴壁培养后行Desmin免疫细胞化学鉴定.然后将细胞分为3组:胰腺提取液诱导组、化学方法诱导组、空白对照组,分别诱导并同期观察细胞的生长形态,采用双硫腙(DTZ)染色鉴定胰岛素分泌细胞,RT-FCR方法检测诱导后细胞的基因表达情况.结果 获得高纯度的MDSCs,且Desmin免疫细胞化学鉴定呈阳性.胰腺提取液诱导组诱导后4d,相差显微镜下可见细胞团结构,诱导后6d呈半贴壁状态,诱导后12d形成典犁的胰岛样细胞团,较化学方法诱导组诱导时间缩短3d.RT-FCR检测显示:胰腺提取液诱导组诱导6d后可检测到胰岛前体细胞相关基因Ngn3、nestin、PDX-1的表达;诱导12d后可检测到胰岛素基因的表达,但未检测到Ngn3、nestin、PDX-1的表达.结论 胰腺提取液可模仿胰岛细胞发育的微环境,并诱导大鼠MDSCs跨胚层分化为胰岛素分泌细胞.
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PI3-K的激活在TGF-β1诱导肾小管上皮细胞间质转分化过程中的作用
目的探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)的激活在转化生长因子β1(TGF-β1)体外诱导人肾小管上皮细胞(HKCs)间质转分化(EMT)过程中的作用及意义.方法将HKCs细胞株分为正常对照组(C)、不同浓度TGF-β1组、TGF-β1+PI3-K抑制剂Wortmannin组.选取不同时相,采用免疫印迹法(Western blot)测定总Akt(t-Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏素(E-cadherin)蛋白水平的表达变化;Akt磷酸化水平用磷酸化Akt与总Akt水平的比值表示.结果正常体外培养的HKCs经10ng/ml TGF-β1刺激1h后p-Akt水平显著升高;α-SMA蛋白表达水平在10ng/ml TGF-β1诱导48h后表达显著升高,而E-cadherom蛋白表达水平在TGF-β1诱导48h后表达显著下降.同时加用Wortmannin 10nmol/L组,p-Akt、α-SMA表达明显抑制,E-cadherin表达显著升高.结论PI3-K在TGF-β1诱导的EMT过程中被激活,并且参与TGF-β1诱导的EMT过程,特异性阻断PI3-K的激活可有效抑制TGF-β1介导的HKCs的EMT过程.
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假上皮瘤样增生病变中上皮细胞向间质细胞转化的不稳定性
目的探讨上皮细胞向间质细胞转分化(EMT)与外伤继发假上皮瘤样增生(PEH)损害之间的关系.方法收集11例创伤后继发PEH病变的标本及其边缘正常皮肤(PEH-N),采用组织病理学和间接免疫荧光双标记方法观察Ⅰ/Ⅲ型胶原(ColⅠ/Ⅲ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vim)、结蛋白(Des)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及其受体(TGFRI)、广谱角蛋白(CKp)和Ⅳ型胶原(ColⅣ)在PEH异常分化的上皮细胞中的表达水平和分布特征.结果组织学观察发现,与PEH-N组相比,PEH呈现鳞状上皮不典型增生,上皮基底部细胞顶-基极性紊乱、结构崩溃,细胞向间质迁移,在该部位的表皮基底细胞和部分附件上皮细胞中可检测到ColⅠ/Ⅲ、α-SMA、Vim和Des等间质细胞物,但这些上皮细胞CKp、ColⅣ、TGF-β1和TGFRI表达水平明显减弱甚至消失,并且在深层间质内发现大量游离的CKp阳性上皮细胞.结论 PEH病变存在不稳定性EMT现象,上皮细胞去分化后再分化以及TGF-β1信号通路作用微弱可能赋予了PEH病变肉芽组织化而非形成增生性瘢痕的病理特征.
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法舒地尔对高糖诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响
目的 探讨法舒地尔对高糖诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化的影响及可能的作用机制.方法 HK-2细胞分别加入葡萄糖5.5 mmol·L-1、葡萄糖5.5 mmol·L-1+甘露醇54.5 mmol·L-1、葡萄糖60 mmol·L-1(高糖)以及葡萄糖60 mmol·L-1+法舒地尔5,10和20 μmol·L-1.免疫共沉淀法检测葡萄糖60 mmol·L-1作用0～24 h后磷酸化肌球蛋白磷酸酶目标亚单位1-苏氨酸696(p-MYPT1-Thr 696)和p-MYPT1-Thr 853的表达,以评估Rho相关的卷曲螺旋形成的蛋白激酶(ROCK)的活性;免疫细胞化学法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;Western蛋白质印迹法检测E-钙黏素、波形蛋白和结缔组织生长因子(CTGF)蛋白表达.结果 与未加高糖刺激前比较,高糖培养3h后,细胞p-MYPT1-Thr696表达明显增加,积分吸光度(IA)值由1.08±0.09增加到2.4±0.09(P＜0.01);与未加高糖刺激前比较,高糖培养7h后,细胞p-MYPT1-Thr853表达明显增加,IA值由0.57±0.01增加到1.45±0.14(P＜0.01),表明高糖能导致HK-2细胞ROCK分子活化.与正常对照组相比,葡萄糖60 mmol·L-1组HK-2细胞培养72 h后E-钙黏素表达减少(P＜0.01),α-SMA、波形蛋白和CTGF表达增多(P＜0.01);葡萄糖5.5 mmol·L-1+甘露醇54.5 mmol·L-1组与正常对照组比较无明显变化.与葡萄糖60 mmol·L-1组相比,葡萄糖60 mmol·L-1+法舒地尔5,10和20 μmol·L-1组E-钙黏素表达增多(P＜0.01),α-SMA、波形蛋白和CTGF表达减少(P＜0.01),且法舒地尔20 μmol·L-1组改变更为明显,法舒地尔3个浓度组组间比较差异有显著性(P＜0.05).结论 法舒地尔能抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化,可能部分通过减少CTGF的表达而产生作用.
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细胞转分化在神经系统疾病治疗中的研究进展
转分化是指在特定条件下,一种细胞转变为另一谱系细胞类型的过程.近年来,转分化技术在干细胞和再生医学领域迅速发展,为神经系统疾病的治疗带来曙光.目前,转分化技术在神经系统疾病治疗中的研究已涵盖了神经退行性疾病、创伤性神经系统损伤以及神经精神障碍疾病等多个疾病多种神经元亚型.利用丰富且易于获取的体细胞转分化得到难以再生的功能性神经元是再生医学的新思路.本文着重对目前转分化在神经系统疾病中的研究进行综述.
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从SIRT1探讨白藜芦醇抑制肾小球足细胞表型改变的作用机制
目的 探讨SIRT1在白藜芦醇抑制肾小球足细胞表型改变中的作用,研究白藜芦醇维持足细胞表型的重要机制.方法 体外分化条件下培养小鼠足细胞10天,用TGF-β1诱导作为研究模型,分别用白藜芦醇、SRT1720和EX527以及白藜芦醇与EX527联合干预等.采用RT-PCR和Western blot法等检测足细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle-actin,α-SMA)、snail等分子基因表达;NEPH1、结蛋白Desmin和α-SMA等分子蛋白表达.结果 TGF-β1诱导的足细胞α-SMA、snail基因表达较正常组增高,白藜芦醇、SRT1720干预组则较模型组降低.模型组NEPH1蛋白表达较正常组显著降低,而Desmin和α-SMA蛋白表达水平则显著增高.白藜芦醇组NEPH1蛋白表达较模型组显著上调,Desmin和α-SMA表达显著降低,白藜芦醇与EX527同时干预或EX527单独干预,对足细胞表型分子表达则未表现出显著干预作用.结论 激活SIRT1是白藜芦醇显著抑制TGF-β1诱导的足细胞表型异常的重要机制.
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Lefty-2蛋白对转化生长因子β1诱导的大鼠肾成纤维细胞NRK-49F转分化的逆转作用及其机制
目的 观察Lefty-2蛋白对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的肾成纤维细胞(NRK-49F)转分化的逆转作用,并探讨其机制.方法 对照组:NRK-49F不做处理;刺激组:加入TGF-β1 (10ng/ml);低剂量治疗组:TGF-β1 (10ng/ml)+ Lefty -2(10ng/ml);中剂量治疗组:TGF-β1(10ng/ml)+Lefty-2(20ng/ml);高剂量治疗组:TGF-β1 (10ng/ml)+Lefty-2(50ng/ml).通过细胞免疫荧光法观察各组α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤连蛋白(FN)和波形蛋白(Vimentin)的表达水平,通过Western blot法检测各组α-SMA、FN、Vimentin、p-Smad3蛋白、Smad7蛋白的表达水平.结果 细胞免疫荧光结果显示,刺激组α-SMA、FN、Vimentin表达量均显著增加,治疗组较刺激组表达量均明显减少.Western blot法结果显示,治疗组α-SMA、FN、Vimentin的表达量较刺激组均下降(P＜0.01),而且呈现剂量效应.刺激组p-Smad3蛋白表达上调,治疗组p-Smad3蛋白的表达量较刺激组明显下调(P＜0.01);刺激组Smad7蛋白表达下调,治疗组Smad7蛋白的表达量较刺激组明显上调(P＜0.01).结论 Lefty-2蛋白可逆转TGF-β1诱导的NRK-49F的转分化,可降低α-SMA、FN、Vimentin的表达,可能是通过活化Smad7信号通路,抑制Smad3的磷酸化,从而抑制Smad3信号通路来实现的.
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胰岛细胞转分化及相关转录因子的研究进展
胰岛α和β细胞共同作用于血糖调节.α细胞在低血糖的情况下能释放胰高血糖素来刺激肝脏糖异生.而β细胞在血糖升高时能释放胰岛素来刺激外周血糖的消耗.尽管它们在维持血糖稳态中起相反的作用,但α和β细胞来源于相同的祖细胞且拥有许多共同的感受血糖和促进激素释放的蛋白.近期研究结果表明在特定的实验环境下,α和β细胞之间能相互转化,说明二者之间具有相似性.这个发现揭示了成人胰岛出人意料的可塑性,给糖尿病β细胞的再生提供了新的治疗方法.本文主要论述建立和维持胰腺内分泌细胞特征性的转录因子网和这些转录因子如何促进胰岛细胞的转分化.
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松弛素与肾脏纤维化的研究进展
肾脏纤维化是各种肾脏疾病进展到慢性肾衰竭的共同途径和主要病理基础.而松弛素(RLX)具有抗纤维化功能.细胞外基质的合成与降解平衡失调在肾脏纤维化过程中起着重要作用,RLX可通过介导Smad细胞间信号,如抑制前纤维化因子、成纤维细胞分化和胶原产生,以及增强由基质金属蛋白酶诱导的胶原降解等通路来发挥抗肾脏纤维化作用.RLX还具有改善血流动力学的作用,从而起到肾保护作用.RLX基因治疗肾脏纤维化具有广阔前景,但目前离临床应用还有一定距离.
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细胞转分化检测技术及应用
细胞究竟发生了转分化还是发生了融合,曾经倍受争议.随着检测手段的进步,转分化正逐渐被人们认同.在细胞转分化的研究中,有关转分化的检测技术至关重要.本文就目前其主要检测技术及相关内容作一综述.
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Notch及其相关信号分子在EMT过程中的相互作用
上皮-间充质转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)事件是胚胎器官形态发生及恶性肿瘤侵袭性进展中发生的重要细胞生物学事件之一,其发生是一个有序的、多步骤的、可高度调节的过程；参与EMT启动、维持以及逆转的信号分子非常多,而且这些信号分子之间相互调节、相互作用,构成了一个复杂的信号分子作用调节网络.
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骨形态形成蛋白-7对体外培养肾小管上皮细胞TGF-β1诱导转分化的作用
目的观察骨形态形成蛋白-7(BMP-7)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人类肾小管上皮细胞(HKC)转分化的作用,并探讨其作用机制.方法将体外培养的HKC分为5组:(1)无血清培养基阴性对照组;(2)TGF-β1阳性对照组;(3)BMP-7单独作用组;(4)BMP-7与TGF-β1共同作用组;(5)BMP-7预处理后加入TGF-β1组.间接免疫荧光法测定HKC角蛋白(keratin)的表达;免疫组织化学方法测定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及E-钙粘素(E-cadherin)表达;流式细胞技术测定α-SMA阳性HKC的百分数;半定量反转录PCR(RT-PCR)方法测定HKC细胞α-SMA、TGF-β1及其Ⅱ型受体mRNA的表达.结果TGF-β1与BMP-7共同作用HKC细胞48 h,α-SMA表达较阳性对照组减弱,而E-钙粘素及角蛋白表达较阳性对照组增强,与阴性对照组相比差异无显著性;BMP-7预处理后再加入TGF-β1作用HKC细胞48 h,α-SMA表达较阳性对照组减弱,而E-钙粘素及角蛋白表达较阳性对照组增强,与阴性对照组相比差异无显著性;流式细胞技术测定α-SMA阳性HKC的百分数,在BMP-7与TGF-β1共同作用组明显低于阳性对照组(9.7% vs 19.8%,5.8% vs 19.8%,P＜0.05).BMP-7组预处理组亦明显低于阳性对照组(8.7% vs 19.8%,P＜0.05).RT-PCR显示BMP-7与TGF-β1共同或者预处理HKC细胞,α-SMA mRNA表达分别为阳性对照组的15%和12%,而TGF-β1及其Ⅱ型受体mRNA表达水平分别为阳性对照的28%和19%及47%和36%.结论一定浓度的BMP-7与TGF-β1同时培养或预处理,都能抑制TGF-β1诱导的HKC细胞转分化;BMP-7可以预防和抑制HKC细胞TGF-β1及其Ⅱ型受体mRNA表达,这很可能是BMP-7抑制HKC细胞转分化的重要机制之一.
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细胞重编程:调节关键基因获得需要细胞
细胞重编程是在一定条件下成体细胞的记忆被擦除,重新程序化产生新的表型和功能,导致细胞命运发生改变,主要发生在不涉及基因组DNA序列改变的基因表达水平,即通过改变细胞基因表达程序(时空和差异),对其进行重新编程而改变细胞的分化方向,获得所需要的细胞.对于细胞重编程的深入研究有助于掌握机体细胞的发生发育机制,为解决再生医学种子细胞来源问题提供理论基础.人类未来将从许多分化的细胞获得更多所需要的另外一些分化细胞,这对细胞分化机制和疾病的细胞替代治疗研究具有划时代的意义,本文总结了细胞重编程的分类、影响因素、方法及新进展.
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雷公藤多苷对糖尿病肾病大鼠肾小管间质激活素A表达及转分化的影响
目的 观察雷公藤多苷(TWP)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾小管间质激活素A(Act-A)的表达及转分化的影响.方法 将40只Wistar雄性大鼠用随机数字表法分为对照组、DN模型组、厄贝沙坦治疗组、TWP治疗组,每组10只.利用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立DN大鼠模型,建模后,厄贝沙坦治疗组、TWP治疗组给予相应药物灌胃治疗;第4、8、12、16周末记录大鼠体重、检测24 h尿蛋白定量,第16周末处死大鼠,检测血清肌酐(Scr);取大鼠肾组织行HE、PAS染色,进行病理组织学观察;用免疫组化法检测肾小管间质中Act-A、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅳ型胶原(Co-Ⅳ)及E-钙黏蛋白(E-cad)的表达;采用实时荧光定量PCR技术检测肾组织中Act-A、α-SMA、Co-Ⅳ及E-cad蛋白mRNA的表达.结果 (1)16周后厄贝沙坦治疗组、TWP治疗组的24 h尿蛋白[(67.1±9.6)、(61.8±8.0)比(158.3±13.3)mg]、SCr[(31.7 ±4.1)、(32.6±6.2)比(55.3±8.9)μmol/L]和肾脏肥大指数[(9.14±0.65)、(7.50±0.34)比(11.28 ±0.70) mg/g]均低于DN模型组(均P＜0.05),其中厄贝沙坦治疗组和TWP治疗组间比较差异无统计学意义.(2)与DN模型组比较,厄贝沙坦治疗组、TWP治疗组的大鼠体重增加,病理切片均显示肾小管间质病变程度较轻,厄贝沙坦治疗组和TWP治疗组间比较差异无统计学意义.(3)与DN模型组比较,免疫组化和实时荧光定量PCR均显示,厄贝沙坦治疗组、TWP治疗组肾小管间质Act-A、α-SMA、Co-Ⅳ的表达明显低(均P＜0.01),E-cad的表达明显高(P＜0.01),但厄贝沙坦治疗组和TWP治疗组间比较差异无统计学意义.结论 TWP能下调Act-A的表达,从而阻碍肾小管间质的转分化,延缓肾脏纤维化.
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龟板对脑缺血大鼠骨髓间充质干细胞移植后转分化为神经元的影响
自Prockop[1]于1997年报道了骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)可以分化为神经细胞以来,MSC为中枢神经系统损伤的替代修复提供了诱人前景[2,3].但是,MSC进行在体移植时,其神经元的分化率较低[4,5],为此,从中药中寻找提高神经元分化率的有关药物成为我们的研究目标.Pennisi[6]近报道了龟板可影响神经分化,而本课题组3年前的研究已表明龟板能促进神经干细胞增殖[7,8],为探讨龟板对MSC转分化的影响,提高MSC神经替代修复效率,我们进行了以下工作.
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IgA肾病患者肾组织中丝裂素活化蛋白活化与肾小管上皮细胞转分化的关系
目的检测IgA肾病患者肾小管上皮细胞中丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)不同亚类蛋白质表达及磷酸化水平的变化,初步探讨MAPK各亚类在体内对肾小管上皮细胞转分化的调控作用.方法 36例住院IgA肾病患者的肾活检标本,分为轻度系膜增生组、局灶增生组和增生硬化组.采用普通病理染色和免疫组织化学技术,观察各组肾组织中肾小管和间质的病理改变、肾小管间质损伤指数、增殖细胞核抗原(PCNA)和纤连蛋白(FN)在肾小管、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在肾小管和间质表达的变化,并应用非磷酸化和磷酸化激酶的特异抗体检测肾组织内MAPK(包括ERK、JNK和p38)的表达及活化情况.结果随着肾小球病变程度的加重,肾小管间质损伤指数增加.肾小管上皮细胞的PCNA阳性率逐渐增高;其中增生硬化组的PCNA阳性率是正常对照组的2.38倍(P<0.01),α-SMA表达阳性的肾小管上皮细胞明显增多,局灶增生组和增生硬化组的肾小管α-SMA 表达阳性率均显著增高(P<0.05).FN在肾间质的表达增加,α-SMA表达阳性率与FN表达阳性率和肾间质纤维化程度呈正相关.正常人肾组织中MAPK各亚类均有基础表达,IgA肾病患者肾组织中MAPK各亚类的表达部位与正常人相似,肾小管ERK和JNK活化程度随肾小球病变程度的加重而逐渐增加,以增生硬化组的变化为显著(与对照组相比P<0.01).p38蛋白及其磷酸化形式在IgA肾病各病变组无明显变化.肾小管P-JNK表达阳性率与α-SMA表达及FN表达均呈正相关,P-ERK表达阳性率与α-SMA表达无相关性但与FN表达呈正相关.结论 IgA肾病患者的肾小管上皮细胞(RTEC)可发生表型转化并参与肾间质纤维化病变的进展.在MAPK各亚类中,JNK激活可能是调控RTEC转分化的关键细胞内信号,而ERK活化可能是通过介导RTEC增殖而间接影响FN表达.
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他克莫司对TGF-β1刺激人肾小管上皮细胞表达血管内皮生长因子的影响
目的 研究他克莫司(FKS06)对转化生长因子-β 1(TOF-β 1)刺激人肾小管上皮细胞(HKC)表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响,以探讨其抗肾小管间质纤维化的机制.方法 以体外培养的HKc为研究对象,分为以下4组:①阴性对照组.②TOF-β 1(8ng/m1)阳性对照组,③TOF-β 1(8ng/m1)加FK506(10、30、60ng/m1)组.应用免疫组化方法检测VEOF蛋白的表达,应用RT-PCR方法检测VEOFmRNA、α-SMAmRNA的转录水平.结果 阴性对照组HKC有基础量的VEGF和微量的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达.阳性对照组细胞呈现出长梭形外观,α-SMA与VEGF表达明显上调与阴性对照组有显著差异(P<0.01).FK506以剂量依赖的方式抑制TGF-β 1诱导的β-SMA及VEGF的表达(P<0.0或P
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PI3k/Akt在高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化中的作用
目的 观察P13k/Akt信号通路在高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化中的作用.方法 大鼠肾小管上皮细胞随机分成3组,对照组(C组),高糖组(D组)和PI3K抑制剂组(W组).C组加正常培养液,D组在培养液中加30 mmol/L葡萄糖,W组用PI3K抑制剂预处理1 h后,加30 mmol/L葡萄糖.在处理后6、12、24、48、72 h时用免疫细胞化学和Westernblot检测α-SMA和p-Akt的表达.结果 C、W组各时间段均只有极少数细胞出现α-SMA和P-Akt的阳性表达.D组α-SMA在12 h时出现阳性表达(30.2%),48 h达高峰(80.9%)并持续至72 h.P-Akt在6 h出现阳性表达(21.9),24h达高峰(75.2%),72 h开始下降(56.3%).结论 PI3k/Akt信号转导系统参与了高糖诱导大鼠肾小管上皮细胞转分化.
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Janus激酶抑制剂AG490对高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化的影响
目的 观察Janus激酶(JAK)抑制剂AG490对高糖诱导肾小管上皮细胞转分化以及转化生长因子β1(TCF-β1)表达的影响.方法 体外培养人肾近曲小管上皮细胞株(HKC),分别给予高糖和高糖+AG490干预,Western印迹检测平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙粘素(E-Cadherin)及信号蛋白STATl、STAT3、磷酸化STAT1(phospho-STAT1,p-STAT1)和p-STAT3的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞上清液中TGF-β1和I型胶原的分泌.结果 与低糖组比较,高糖培养的HKC中α-SMA、p-STAT1和p-STAT3表达明显上调;E-Cadherin表达明显下调;TGF-β1mRNA表达增加;细胞培养上清液中TGF-β1、I型胶原分泌增加.AG490明显下调p-STAT1和p-STAT3表达的同时,明显抑制高糖刺激HKC中α-SMA表达的升高,减轻E-Cadherin表达下降程度;降低TGF-β1 mRNA表达及TGF-β1、I型胶原的分泌.结论 JAK参与高糖诱导的HKC转分化,并刺激TGF-β1和细胞外基质的分泌,JAK抑制剂AG490能有效的拮抗其作用.
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甲基-β-环糊精对Ⅱ型肺泡上皮细胞增殖与转分化的影响
目的 观察甲基-β-环糊精(MβCD)破坏脂质微区结构对Ⅱ型肺泡上皮细胞(AEC Ⅱ)增殖、转分化及细胞周期的影响.方法 采用MβCD破坏体外培养的AEC Ⅱ细胞膜脂质微区(MβCD干扰组),以必需基本培养基(DMEM)作为对照.用血细胞计数器计数培养细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期,免疫荧光双标和蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测AEC Ⅱ特异性肺泡表面活性蛋白C(SP-C)及Ⅰ型肺泡上皮细胞(AEC Ⅰ)特异性水通道蛋白5(AQP5)的表达.结果 与对照组比较,MβCD组干扰后24、48、72 h细胞数及增殖能力显著降低[细胞数(×106/rml):2.74±0.56比8.05±0.92,4.45±0.68比10.52±0.81,7.82±0.59比11.39±0.81;MTT结果(A值):0.25±0.20比0.45±0.02,0.35±0.03比0.54±0.28,0.48±0.04比0.59±0.05,均P＜0.01＝;MβCD组干扰后24h G0/G1期细胞比例显著增多,S期细胞比例显著减少[G0/G1期:(60.06±1.65)%比(43.43±3.59)%;S期:(16.20±2.17)%比(34.07±2.63)%,均P＜0.05＝;MβCD组干扰后48 h、72 h SP-C蛋白表达明显增多(0.54±0.04比0.47±0.03,0.19±0.03比0.06±0.02),AQP5蛋白表达明显减少(0.30±0.04比0.43±0.06,0.39±0.04比0.59±0.04,P＜0.05或P＜0.01＝.结论 MβCD破坏体外培养AEC Ⅱ脂质微区结构后,细胞发生G1期阻滞,细胞增殖和转分化受到抑制.
