疫苗重组脊髓灰质炎病毒的循环与致病

2006年1月～2007年8月全球疫苗衍生脊髓灰质炎病毒信息

从2000年开始,越来越多的证据表明,必须制定一项综合策略以减少和管理由疫苗衍生脊髓灰质炎(脊灰)病毒(VDPVs)引起的脊灰病例和脊灰爆发,尤其是在全球阻断了脊灰野病毒(WPV)传播后.

脊髓灰质炎病毒检测方法的研究进展

脊髓灰质炎(脊灰)病毒(Poliovirus,PV)检测的主要目的是用于确定个体PV感染状况及提供急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AFP)病例的实验室诊断依据.PV检测方法主要有病毒分离法、血清中和试验(Neutraliza-tion test,NT)、型内鉴定方法(Intratypic differentiation,ITD)和序列测定分析等.病毒分离法是使用人横纹肌肉瘤(Human rhabdomyosarcoma,RD)细胞和表达人类脊灰病毒受体的小鼠肺细胞系(Mouse cell line expressing the genefor the human cellular receptor for poliovirus,L20B)培养PV并进行分离;NT是用标准抗血清对标本中分离到的病毒株进行中和,从而判断PV的血清型;ITD是用实时荧光定量RT-PCR方法鉴定PV的血清型和基因型;序列测定分析方法是通过软件对PV的测序结果进行分析,了解其基因突变及流行、进化情况.本文分别从各种方法的背景、原理、类型、技术优点、实验条件和主要影响因素、应用前景以及存在的不足等方面进行综述和比较分析.检测方法的研究对脊灰的诊断和防控具有重要意义.

环境监测在消灭脊髓灰质炎过程的作用

随着全球消灭脊髓灰质炎(脊灰)活动进入后阶段,世界各地仍然面临脊灰病毒输入的风险,环境监测将为消灭脊灰监测提供技术支撑.

全国消灭脊髓灰质炎工作总结表彰大会在北京召开

在世界卫生组织西太平洋区宣布为无脊髓灰质炎区一周年之际,2001年10月29日卫生部在人民大会堂隆重召开"全国消灭脊髓灰质炎工作总结表彰大会",对在消灭脊髓灰质炎工作中做出突出贡献的403个先进集体和729名先进个人进行表彰;对为消灭脊髓灰质炎工作而献身的41位卫生工作者授予"忠诚卫士"荣誉称号.国务院副总理李岚清为大会发来贺信,卫生部副部长殷大奎等领导为获奖单位及个人颁发了奖牌、证书.来自国务院有关部(委)、解放军、社会有关团体、各省(自治区、直辖市)、国际组织及友好国家等300多位代表参加了总结表彰大会.李岚清副总理在贺信中高度评价了我国消灭脊髓灰质炎工作所取得的成绩.他指出:实现无脊髓灰质炎目标,为保护我国儿童身体健康,为人类终消灭脊髓灰质炎做出了重要贡献.他希望各级党委、政府,有关部门,以及广大卫生工作者认真总结经验,继续发奋工作,巩固并不断扩大取得的成果,为我国卫生事业和全人类彻底消灭脊髓灰质炎做出新的贡献.脊髓灰质炎曾在我国流行并严重危害儿童健康.本世纪60年代初期,每年报告脊髓灰质炎20*!000～43*!000例,引起大量儿童的残疾.我国政府十分关心儿童健康,1960年我国研制成功口服脊髓灰质炎减毒活疫苗,并逐步在全国推广应用,脊髓灰质炎的发病数和死亡数随之显著下降,70年代的发病数较60年代下降了37%.1988年召开的第41届世界卫生大会通过了2000年在全球消灭脊髓灰质炎的决议.1991年,我国政府向国际社会就中国实现消灭脊髓灰质炎的目标做出承诺.1992年,国务院颁布的<九十年代中国儿童发展规划纲要>,将消灭脊髓灰质炎作为保护儿童健康的一项重要目标,要求各地认真贯彻执行.江泽民、李鹏、朱基等党和国家领导人亲自为儿童喂服脊髓灰质炎疫苗.在党中央、国务院的关怀和正确领导下,通过社会各界的广泛参与,国际组织和友好国家的大力援助,各级卫生行政部门、防疫机构及广大卫生人员辛勤劳动,我国消灭脊髓灰质炎工作进展顺利,自1994年9月发现后1例本土脊髓灰质炎野病毒病例后,已连续7年未发现本土脊髓灰质炎野病毒病例.2000年10月,世界卫生组织西太平洋区证实本土脊髓灰质炎野病毒在中国的传播已被阻断.我国实现了无脊髓灰质炎的目标,为保护我国儿童健康做出了重要的贡献.在实现消灭脊髓灰质炎工作中,我国广大卫生工作者付出了大量艰辛的劳动,他们在条件艰苦、任务繁重的平凡岗位上,克服困难,为了儿童的健康不计得失、任劳任怨,默默奉献,甚至付出宝贵的生命,涌现出许许多多先进集体和先进个人,留下很多感人事迹,在工作中也创造了很多奇迹.1993年12月5日和1994年1月5日,在全国范围开展了首次"消灭脊髓灰质炎强化免疫日"活动,为约8*!000多万4岁以下儿童加服2剂脊髓灰质炎疫苗.这项活动的成功开展,被世界卫生组织誉为人类公共卫生史上一次伟大创举,为其它发展中国家树立了榜样.以后又连续4年在大部分省份开展了局部强化免疫活动,共免疫8亿多人次适龄儿童.然而,无脊髓灰质炎证实并非意味着消灭脊髓灰质炎工作的结束,目前我们仍面临许多挑战.与我国相邻的周边国家还有脊髓灰质炎野病毒的流行,随时存在野病毒输入我国的危险,同时我国还存在一些常规免疫薄弱地区、免疫空白人群,随着社会经济的发展,存在大量流动人口,一旦脊髓灰质炎野病毒输入,就有迅速传播的危险.因此我们消灭脊髓灰质炎的工作不能因为实现无脊髓灰质炎目标而停止,还要继续加强对消灭脊髓灰质炎工作的领导和资金投入,继续实施消灭脊髓灰质炎策略,特别是保持高水平的疫苗常规免疫接种率,建立坚固的人群免疫屏障,阻挡脊髓灰质炎病毒的侵害,直到全球彻底消灭脊髓灰质炎.(刘霞)

脊髓灰质炎病毒灭活疫苗在控制脊髓灰质炎中的作用

口服脊髓灰质炎(脊灰)减毒活疫苗(OralPoliomyelitis Attenuate Live Vaccine,OPV),在控制脊灰进程中发挥了重要作用.全球脊灰发病大幅度下降,目前只有少数几个国家还有脊灰野病毒循环.

从入境的美国废纸中截获的伏蝇

2003年7月15日上海外高桥检验检疫局有关人员在对来自美国新泽西州的集装箱废纸实施检疫查验时,截获蝇类17只(9♂、8♀),经送上海出入境检验检疫局媒介生物鉴定室鉴定为伏蝇(Phormia regina,Meigen, 1826)(图1),这是上海口岸首次从入境的美国集装箱废纸中截获该蝇种.伏蝇隶丽蝇科Calliphoridae伏蝇属Phormia,该属仅为一种 .其幼虫主要孳生于动物尸体,屠宰场废料、垃圾、泔水中也可采获幼虫,亦为羊蛆症病原 ,能引起人外伤性皮蛆症,可携带脊髓灰质炎病毒,因此在流行病学上有着重要的意义.该蝇在我国主要分布于北方,国外分布于蒙古、西伯利亚、朝鲜半岛、日本、欧洲、北美、夏威夷群岛,是重要的喜室外性半住区性种类,可在菜地、动物尸体、树林、粪便、屠宰场、羊毛堆上及室内等处采获.

抗肠道病毒靶点药物研究进展

人类肠道病毒（EVs）是小 RNA 病毒科下的一属病毒，通常在夏秋季节爆发流行。在肠道病毒中，目前只有脊髓灰质炎病毒（PV1-3）、甲型肝炎病毒（HAV）和肠道病毒71型（EV71）有相应的疫苗[1]，仍有超过110种的肠道病毒对人类健康造成巨大威胁。这些病毒常造成的危害是呼吸道和消化道的轻度症状，但同时它们也是造成无菌性脑膜炎和心肌炎的常见元凶。肠道病毒造成的疾病多种多样，且同一种、同一型病毒的感染所造成的危害程度也不尽相同，从轻度症状到严重临床疾病的发展过程也是难以预知的。例如肠道病毒71型以及柯萨奇病毒 A16型（CVA16）引起的手足口病，大多数病例都可康复，但少数患者则会发展为脑干脑炎、肺水肿或其他致命症状[2-3]。

严重急性呼吸综合征患者相关病毒的随访监测及意义

目的随访监测确诊SARS患者,研究SARS-CoV、新型呼肠病毒和脊髓灰质炎病毒在患者体内的存在状况及与SARS的可能相关性.方法采集8例SARS患者痊愈2年后的咽拭子、唾液(或痰液)、尿液、血清及连续3天的粪便标本,用RT-PCR的方法分别扩增SARS-CoV、呼肠病毒和脊髓灰质炎病毒;采用ELISA的方法检测患者血清中的SARS-CoV抗体和脊髓灰质炎病毒IgG抗体.结果8例患者中有4例的粪便中脊髓灰质炎病毒RNA阳性,均为Sabin 1毒株,在5′端非编码区的第480nt及VP1蛋白编码区的第2795nt两个重要的减毒位点上均发生了回复突变;SARS-CoV和新型呼肠病毒均阴性.对照组标本中均未检测到上述三种病毒.3例随访患者血清中SARS-CoV抗体阳性;4例患者血清中脊髓灰质炎IgG抗体阳性.25例健康体检者的血清中SARS-CoV抗体均阴性,其中23例的血清中脊髓灰质炎病毒抗体阳性.结论SARS患者痊愈2年后的血清中特异性脊髓灰质炎病毒抗体与健康人有显著差异,其粪便标本中仍有较高的脊髓灰质炎病毒阳性率,而且病毒核酸在两个重要的减毒位点上均发生了回复突变.

青海省2017年脊髓灰质炎病毒学监测结果分析

目的 评价青海省2017年脊髓灰质炎(脊灰)病毒学监测情况.方法 按照世界卫生组织(world health organization,WHO)第4版《脊灰实验室手册操作规程进行病毒分离,分离到的L20B阳性分离物做型内鉴定(intratypic differentiation,ITD),由中国疾病预防控制中心(chinese center for disease control and prevention,CDC)病毒病预防控制所国家脊灰实验室对脊灰病毒(poliovirus,PV)衣壳蛋白(capsid protein,VP1)编码区进行核苷酸序列测定和分析,对青海省2017年报告的急性弛缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例及健康儿童粪便标本进行脊灰病毒学监测和结果分析.结果 2017年青海CDC脊灰实验室共收到AFP病例及健康儿童粪便标本211份,分离到PV2株,分离率为0.95％;非脊灰肠道病毒(non-polio enterovirus,NPEV)25株,分离率为11.85％;两株PV均为疫苗相关株.结论 2017年青海CDC脊灰实验室在AFP病例及健康儿童粪便标本中未发现脊灰野病毒和疫苗衍生脊灰病毒,青海省继续维持无脊灰状态.

503例残留麻痹急性弛缓性麻痹病例病原流行病学特征分析

目的 分析广东省1994-2007年间残留麻痹病例的病原流行病学特征.方法 对1994-2007年广东省503例残留麻痹病例的粪便标本进行病毒分离、血清型鉴定和脊髓灰质炎(脊灰)病毒型内鉴定,并使用统计学方法,综合分析病原学结果与残留麻痹病例的免疫史、性别、年龄等流行病学资料之间的关系.结果 收检了503例残留麻痹病例的粪便标本,其中150例分离到脊灰病毒(PC),均为疫苗类似株,59例分离到非脊灰肠道病毒(NPEV),PV和NPEV的年度分离率分别在18.92%.47.06%和4.17%～25.00%之间浮动.PV分离率随年龄组的增大而降低,0岁组高,为61.11%;0～2次免疫的病例的PV分离率远高于全程免疫者,差异有统计学意义;残留麻痹病例中的PV和NPEV分离率均高于无残留麻痹的病例.结论 1994-2007年广东省未发现由脊灰野病毒引起的残留麻痹病例,2岁以下年龄组和0～1剂次免疫者中的PV分离率与残留麻痹有相关性.NPEVs也可能是儿童出现残留麻痹病例的病原之一.

脊髓灰质炎Ⅰ型病毒病毒样颗粒的制备及鉴定

目的 利用酿酒酵母系统建立表达脊髓灰质炎Ⅰ型病毒(Poliovirus Ⅰ)病毒样颗粒的技术方法,为研究新型脊髓灰质炎预防性重组疫苗奠定前期基础.方法 合成密码子优化后的Poliovirus Ⅰ型的P1及3CD基因,通过分子克隆技术构建同时表达P1和3CD基因的表达载体,通过化学法转到酿酒酵母胞内,诱导表达并破碎酵母后,利用氯化铯密度梯度离心法提取物进行初步纯化并鉴定.结果 重组酿酒酵母质粒通过酶切及测序鉴定证明P1及3CD片段成功插入到pESC-URA载体中.密码子优化后基因与未优化基因编码的氨基酸序列完全一致.透射电镜分析显示将重组质粒转到酿酒酵母细胞内可以有效表达并组装脊髓灰质炎Ⅰ型病毒的病毒样颗粒.结论 在酿酒酵母细胞内同时表达P1和3CD蛋白可以有效组装脊髓灰质炎Ⅰ型病毒的病毒样颗粒.

脊髓灰质炎病毒疫苗株Sabin Ⅰ全基因序列克隆的构建及鉴定

目的 构建脊髓灰质炎病毒疫苗株Sabin Ⅰ的全基因序列克隆.方法 利用分子生物学技术,通过分段扩增和酶切连接逐步构建插入脊髓灰质炎病毒疫苗株Sabin Ⅰ全基因序列的质粒,采用单引物二次PCR法引入点突变,并通过酶切、测序等方法进行鉴定.结果 在pWSK29载体中成功插入脊髓灰质炎病毒疫苗株Sabin Ⅰ全基因序列,酶切鉴定正确,序列测定显示有9个核苷酸变异.结论 成功构建脊髓灰质炎病毒疫苗株Sabin Ⅰ的全基因序列克隆,为进一步改造并研究其功能特别是3D聚合酶的功能打下了基础.

使命与奉献——祝贺顾方舟教授从医55周年

顾方舟教授是我国著名的老一辈医学科学家、病毒学家、教育家和社会活动家.他专门从事脊髓灰质炎研究40余载.他是中国研究脊髓灰质炎病毒和研发脊灰活疫苗的第一人,成绩卓著,名声斐然.

E V71复制策略研究进展

EV71属人类肠道病毒基因组A组，微小核糖核酸病毒科，是单链正链RNA病毒。其基因组包含约7400个核苷酸，其中开放阅读框包括3个区域：P1编码4个结构蛋白：VP1～4；P2和P3编码7个非结构蛋白：从2A到2C，3A到3D；开放阅读框两侧是复杂的5′UTR和带有polyA尾的3′UTR；且5′UTR与病毒VPg蛋白共价结合。 EV71通过识别宿主细胞上特定的受体（人类P选择性糖蛋白配基1以及清道夫受体B2）进入细胞［1-2］。感染宿主细胞后，其基因组虽缺乏5′帽子结构，但在其5′非转录区（5′UTR ）有内在核糖体进入位点（ internal ribo-some entry site，IRES），其能在不依赖帽子结构的情况下翻译成单个的多聚蛋白质，该蛋白质可被病毒编码的蛋白2Apro及3Cpro加工成外壳结构蛋白和非结构蛋白，参与病毒RNA的复制［3-5］。虽然目前关于EV71复制的具体机制尚不清楚，但几乎所有的肠道病毒均具有相似的病毒基因组结构及复制策略。其中，脊髓灰质炎病毒是已被深入研究的小RNA病毒，其复制的特点可作为研究EV71复制的参考模式。本文将主要描述参与EV71复制的宿主因素、尤其是在病毒RNA合成、依赖IRES翻译中的作用。

黄病毒属病毒的感染性克隆研究进展

黄病毒科包括了一大类人和动物的病毒性病原体,这些病毒均为包膜的单股正链RNA病毒,目前分三个属:经典的黄病毒属、瘟病毒属和丙型肝炎病毒属.每个属中病毒的感染性cDNA遗传学研究都使人们进一步了解病毒复制和致病性原理.对RNA病毒进行反向遗传学研究的历史,可追溯到20多年前,1978年Taniguchi首次从cDNA克隆获得了RNA噬菌体Qβ[1],1981年通过脊髓灰质炎病毒cDNA首次获得动物病毒的感染性克隆[2],从此对正链RNA病毒的反向遗传学研究系统逐步完善起来了.随后,对负链RNA病毒、分节(流感病毒)和不分节(狂犬病毒)的cDNA感染性克隆研究也获得成功.近对双链RNA病毒的反向遗传学研究也有了突破,至此,对RNA病毒的反向遗传学研究已涵括了大部分的RNA病毒.这些研究结果为疫苗开发研制提供了新途径.本文就黄病毒属病毒感染性克隆研究的技术方法和进展作一综述.

更昔洛韦治疗腺病毒感染性心肌炎疗效观察

病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)是指嗜心性病毒感染引起的,以心肌非特异性间质性炎症为主要病变的心肌炎,是一种常见病、多发病.引起VMC 常见的病毒包括B 族柯萨奇病毒(coxsackie virus B,CVB)、腺病毒(adenovirus,ADV)、埃可病毒( enteric cytopathic human orphan virus, ECHO virus)、脊髓灰质炎病毒、流感病毒、乙肝病毒及人类免疫缺陷病毒( human immunodeficiency viruses, HIV)等.

商陆抗病毒蛋白体外抑制乙型肝炎病毒复制的研究

商陆抗病毒蛋白(pokeweed antiviral protein,PAP)是从美洲商陆种子或叶子中提取的一种碱性蛋白,具有抑制流感病毒、脊髓灰质炎病毒、疱疹病毒、巨细胞病毒、HIV等多种病毒复制的作用.我们先前的研究发现:天然PAP种子体外直接作用于HepG2.2.15细胞,显示有较强的抗HBV作用,但在高剂量时对细胞有一定毒性[1].本研究旨在探讨PAP真核表达质粒体外对HBV的抑制作用.

脊髓灰质炎临床治疗与防治

脊髓灰质炎是一种由脊髓灰质炎病毒引起的急性传染病。病毒通过粪便及咽部分泌物传播，主要侵犯脊髓前角，感染后绝大多数无症状，有临床表现者以发热、上呼吸道症状、肢体疼痛为主，部分患者可出现弛缓性肢体麻痹并留下瘫痪后遗症［1］。因多感染5岁以下小儿，故称为“小儿麻痹症”。

抗肠道病毒71型治疗策略的研究进展

肠道病毒71型（enterovirus 71，EV71）目前被认为是引起儿童手足口病的主要病原体之一。该病毒可以引起疱疹性咽峡炎、脑干脑炎、神经源性肺水肿等多种疾病[1]， EV71感染引起的手足口病呈周期性暴发与流行，在亚太地区暴发较为严重[2]。我国自2008年5月，安徽省阜阳市暴发了EV71相关性手足口病以来，在此后5年内中国部分地区逐渐呈现增多趋势。目前，EV71被认为是继脊髓灰质炎病毒被消灭以后重要的嗜神经性病毒，手足口病也被喻为“21世纪的脊髓灰质炎”。针对EV71目前临床上尚无有效的抗病毒药物或已被批准的疫苗应用。因此，研制有效的抗EV71的药物及疫苗是今后的医学科研的重点。现将近年来国内外有关EV71抗病毒药物、疫苗的研究进展综述如下。