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对大肠菌群检验检样稀释度选择的讨论
通过2个实验室对大肠菌群检验时,由于选择检样的稀释度不同而导致终检验结果相反事例的讨论,表明检样稀释度的选择与检测结果的可靠性直接相关,检验者应根据实际选择适当的稀释度,以确保检验结果的准确性.
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介绍一种适应多种免疫组化一抗的阳性组织片
在免疫组化的实验中,一抗原液的稀释度每一批次均需要调整.佳稀释度的测度,其方法及阳性片的选择非常重要.同时在实际工作中,某些低分化肿瘤标本,如考虑上皮、间叶、血管或神经等不同的来源,往往需要阳性对照片验证实验结果的可靠性;而不同的一抗,需要选择不同的阳性对照片,实验过程烦琐,且浪费试剂.为提高工作效率,本文介绍一种适合多种免疫组化一抗的阳性组织片.
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江苏省1996~1999年正常人群白喉血清流行病学监测
为了解江苏省正常人群白喉免疫现状,我们在1996~1999年采用间接血球凝集试验(IHA)方法,对全省9个综合监测点的健康人群开展了白喉抗体水平监测,现将结果报告如下.1 监测对象与检测方法对2~4岁、6~8岁、12~15岁、25~39岁4个年龄组人群进行采样.检测采用IHA方法,参照<白喉诊断标准及处理原则>(GB15997-1995)要求进行.试剂由北京生物制品研究所提供.以为试验终点判定结果,对照为阴性.标准抗毒素终点稀释度所含单位数为0.001*!95IU/ml,白喉抗体滴度≥1:8(即血清抗毒素≥0.01IU/ml)具有免疫保护水平.
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不同血清稀释度对动物莱姆病酶联免疫吸附试验检测结果分析
在当前尚无动物莱姆病诊断试剂和操作技术规程情况下,在引用人莱姆病诊断试剂及方法时,考虑人和动物抗体活性、血清学反应差异等因素,不能完全按人莱姆病检测标准.为选择动物佳血清稀释度,故进行了本项试验.1 材料和方法被检血清(牛、羊)共1 083份,分别采集于陈巴虎旗、鄂温克族自治旗、海拉尔市及我市所属各镇;莱姆病酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断试剂盒、莱姆病抗原包被载玻片和兔抗羊、兔抗马荧光抗体,均由中国疾病预防控制中心传染病预防控制所提供;每份血清样品均以100、200、400倍稀释后分别进行ELISA测试.ELISA、间接免疫荧光法(IFAT)按中国疾病预防控制中心传染病预防控制所暂定的操作规程实施.
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感染性腹泻的研究现状
腹泻是患者消化道内水分和电解质的积聚和排出,临床表现为便次增多及粪便稀释度降低,排便超过每天3次或排便量>200~300 g/d.当腹泻被怀疑或证实继发于病原微生物的感染时,称为感染性腹泻(infectious diarrhea).
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回复严舒俊医师关于结核菌素纯蛋白衍生物的剂量单位问题
早应用于结核病临床诊断的结核菌素为结核杆菌培养滤液浓缩液稀释的旧结核菌素(OT),其剂量单位采用浓缩液的稀释度,由于不同厂家制备的OT效价常不一致,1931年,由英国制备旧结核菌素参考品,1938年建立了以其活性为指标的结核菌素单位(tuberculin unit,TU).
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感染性腹泻的发病机制研究进展及治疗指导
腹泻是消化道内水份和电解质的积聚和排出,表现为便次增多及粪便稀释度降低,以排便超过3次/d或排便量大于200~300g/d为腹泻.当腹泻被疑及或证实继发于病原微生物感染时,称为感染性腹泻(Infectious diarrhea).
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清热解毒药微生物限度检查方法学验证的研究
微生物限度检查法经过近20年的发展,于20世纪90年代中期开始收载于<中国药典>,该方法对控制药品中的微生物数量和特定致病微生物起了很大的作用[1].我国微生物限度检查是根据不同稀释度的活菌菌数变化来判断的[2],2000年版前<中国药典>中未规定对供试品有抑菌成分的检验方法进行验证试验,但在实际检验工作中,由于某些药品的成分具有抗菌活性,抑制了药品中部分微生物的生长,按常规法检验得到的结果不正确.如何判断检查方法的正确性和可行性[3]?为此,我们对24种清热解毒中成药进行方法学验证,以确认其方法的有效性,并判断药品是否含有抑菌活性成分.
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从蛋白质相互作用研究方法的发展看人们认识事物的过程
1 酶联免疫吸附检测法简单的研究两蛋白质相互作用的是,在体外验证两蛋白质的相互作用,如验证所制备的抗体是否特异性地与抗原结合,这里要求方法:一要能检测到结合作用,二要排除非特异性结合,这样人们就建立了酶联免疫吸附检测法(ELISA).原理是,将已知抗原固定在96孔塑料板上,用不同稀释度的抗抗原的第一抗体溶液与其结合,经洗涤去除非特异性结合分子后,加入用辣根过氧化物酶标记的抗第一抗体的第二抗体,洗涤后再加入辣根过氧化物酶的底物,底物被酶作用后就转变为有颜色的物质.这样只有在第一抗体与抗原结合了之后才会有后面的二抗和底物的逐步结合,也才会有颜色的变化.由于这种方法是用酶标二抗和底物呈色,所以有放大效应,灵敏度较高.若抗体的特异性和亲和性非常好,ELISA法就可以用来检测实验样品和临床标本中的抗原水平,例如,临床上乙型肝炎5项指标的检测就是用这种方法.
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抗核抗体滴度检测方案的优化和价值
目的:探讨采用间接免疫荧光法(IIF)检测抗核抗体滴度的方案优化和价值。方法:间接免疫荧光法(IIF)。结果:一种优化方案是我们将标本先做1:100的稀释度,然后再把阳性标本取出加做1:320,1:1000,1:3200,>1:3200的滴度的方案,ANA滴度结果与标准方案的结果一致。另一种优化方案则是只需做1:100,1:1000,1:3200甚至只需做1:100,1:1000的方案,ANA滴度结果与标准方案的结果也一致。结论:我们采用的两种优化方案操作都取得了很好的结果,不但减少了很多繁琐的稀释操作,也减少了观察荧光的时间,大大提高了工作效率。另外,ANA试剂和仪器成本高,这两个方案也可以节省试剂,提高经济效益。
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谈效价及检验报告单的管理
效价亦称为滴度,在免疫学中用来表示抗体的量.在抗原抗体反应中,单位容积抗血清中抗体含量即用效价来表示.通常在连续稀释抗血清后,加入相应抗原,后以出现标准效应的血清高稀释倍数作为血清中该抗体的效价.<丘吉尔医学词典>解释效价为引起反应的高稀释度的倒数.如1:256稀释仍出现标准反应,而1:512未出现,则抗体的效价为256[1].<现代免疫学词典>也如此解释[2].国外影响深远的<微生物学基础>和<基础与临床免疫学>,在论述抗体效价时,均以引起反应的高稀释度的倒数来表示.
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乳酸菌素片菌数测定方法
在检验乳酸菌素片的细菌总数时,采用普通肉汤琼脂培养基经37℃培养48小时后,1∶10、1∶100稀释度的平板内有片状菌和花点样生长,而且药渣干扰,平板内小菌落难以辨别清楚.本文采用了普通肉汤琼脂培养基加入0.001,2、3、5-氯化三苯四氮唑水溶液,使平碟内细菌菌落着色.
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人群中麻疹IgG抗体水平分析
自从麻疹疫苗纳入计划免疫后,麻疹的发病率显著下降.但近年来,麻疹的发病率有所上升,并且具有15岁左右大年龄组和1周岁以下小年龄组两端高发的特征.酶联免疫吸附试验(ELISA)是检测麻疹IgG抗体常用的实验室检测方法,传统的ELISA通过将血清稀释成1∶ 200、1∶ 800、1∶ 3200等不同的稀释度后再进行检测,方法繁琐、工作量大,也只能进行半定量.利用德国维润公司生产的酶免试剂盒,可直接对标本进行IgG定量检测.为了解人群中麻疹IgG抗体水平,降低麻疹发病率,我们于2006年4月-12月对我市的婴幼儿、幼儿园儿童、小学、初中、高中学生各个不同的年龄群体进行麻疹IgG抗体检测,现将结果汇报如下.
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97例肝脏穿刺诊断的肝炎患者血清特异性标志分析
肝炎的临床分型国内均沿用1978年全国肝炎会议诊断标准.近年来,我们曾用肝脏穿刺组织学诊断与之对比.两者符合率有较大的差异.本文对我院经肝穿组织学诊断的97例肝炎患者,进行乙型肝炎血清特异性指标(HBsAg,抗-HBs,抗-HBc)检查并对抗-HBc作系列高稀释度滴定.发现不同类型乙肝患者有其主要的血清型及不同的抗-HBc滴度分布规律,现报告如下.
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超产气注射液的细菌内毒素检测
超产气注射液是用于超声波检查先天性心肌缺损、房缺、室缺及房室分流情况的,使用时与5% NaHCO3等比混合后静脉注射,其主要成分为维生素C及亚硫酸氢钠. 本实验用中和法和稀释法相结合,将样品用 5% NaHCO3、水按不同比例稀释,并同时调整pH值来检测其细菌内毒素,结果证明,超产气注射液可进行细菌内毒素检测.
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河南蜂胶对溶壁微球菌的抑菌作用
目的探讨河南蜂胶对溶壁微球菌的抑菌效果.方法采用琼脂平板扩散法,以溶壁微球菌为实验菌种,设置不同的蜂胶稀释度组,每组3次重复,记录不同稀释度的蜂胶对溶壁微球菌24 h的抑菌效果.结果河南蜂胶原液从31.0%倍比稀释至1:512,9个稀释处理组对溶壁微球菌24 h的抑菌环直径依次分别为:(22.83±3.51)、(17.67±2.08)、(16.33±1.44)、(16.75±1.06)、(12.67±2.89)、(9.67±1.15)、(7.83±1.44)mm、0、0.结论河南蜂胶稀释度降低,抑菌环直径变小,小可观察到抑菌环的稀释度为1:128.
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高稀释度结核菌素纯蛋白衍生物试验对痰涂阴性肺结核的诊断价值
1995年1月到1998年1月,我们对经胸片(或CT)、纤支镜检查明确为肺部炎性病变而痰找抗酸杆菌阴性共386例作高稀释度(1IU)的结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)试验,进一步区分结核与肺炎.
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建德市1999~2000年旅店公用物品卫生监测
建德市为国家级旅游县级市之一,随着旅游人数的不断增加,住宿业发展势头迅猛.为了解我市各旅(宾)馆的卫生现状以便提出更好的管理办法,现将我市1999~2000年各旅(宾)馆顾客公用物品细菌学监测结果报告如下.对象与方法1 监测对象为从事住宿业的建德市各宾馆、私营旅馆等.在正常营业时间内采样.2 监测项目与方法按卫生部颁布的<旅店业卫生标准>(GB9663-1996)进行分析评价.细菌菌落总数测定用涂抹法,选择原液及10-1两个稀释度,每个稀释度做平行二个平皿,每平皿接种量为1ml.大肠菌群测定用发酵法,将测定菌落总数剩余的检样倒入10ml双料乳糖胆盐发酵培养液中36℃24小时.金黄色葡萄球菌用涂抹法.取检样5ml接种7.5%NaCl肉汤增菌后接种Baird-parkcr平皿,按GB7918.5-87检验.被套、枕套、茶具、床单做菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌3项指标,浴缸、座便器只做金黄色葡萄球菌.其中有1项指标不符合即判为不合格.
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杭州市售冷饮制品卫生细菌学调查
冷饮是人们夏季消暑解渴的主要饮品,在夏季市场上颇为热销。食用不洁冷饮制品是夏季肠 道传染病发生的主要途径之一。市场上冷饮制品的品种多、销量大,人们对其卫生质量更为 关注。为此,我们在1997年1月~1999年12月,对杭州市市售冷饮制品进行了卫生细菌学调 查。现将结果报告如下。材料与方法1 样品来源 采自本市销售店及省内外生产厂家自送检样。其中 ,含豆、乳冷饮制品209份,淀粉、果肉类冷饮制品66份,共计275份。2 检验方法2.1 细菌菌落总数测定 按GB4789.2-94,稀释度选 择10-1、10 -2及10-3。每个稀释度作二个平皿,每个平皿接种量1ml。36±1℃,培养48 小时。2.2 大肠菌群数测定 按GB4789.3-94,接种量为3. 33ml,接种方法为1m l×3管、0.1ml×3管、0.01ml×3管。36±1℃,培养24小时。然后根据发酵情 况进一步实验,查大肠菌群(MPN)检索表,报告结果。2.3 金黄色葡萄球菌检验 按GB4789.10-94,样品用 7.5%NaCl肉汤增菌 。用血平板、帕克平板进行分离,36±1℃,培养24小时。后作血浆凝固酶试验确诊。3 判断依据 按GB2759.1-96评价。含豆、乳冷饮制品 菌落总数≥2.5×10 4个/ml、大肠菌群≥450MPN/100ml为超标;淀粉、果肉类冷饮制品菌落总数 ≥3000个/ml、大肠菌群≥450MPN/100ml为超标。
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应用高温高压抗原修复提高第一抗体稀释度
合适的一抗稀释度是获得免疫组织化学染色满意结果的保证.影响一抗稀释度的因素很多,我们在工作中发现,是否进行高温高压抗原修复,也会对抗体稀释度产生一定的影响.1 材料与方法