骨髓基质细胞体外诱导分化成神经元和胶质细胞

目的探索骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSC)体外诱导分化为神经元和神经胶质细胞的可行性,为BMSC在神经科学领域内的应用奠定基础.方法以成年犬BMSC为实验对象,利用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)、维甲酸(RA)、脑源性神经营养因子(BDNF)、胶质细胞系来源神经营养因子(GDNF)等作为增殖及分化诱导因子,进行增殖培养、分化诱导;免疫组化法进行细胞性质鉴定.结果加入bFGF、EGF增殖培养72h可见细胞分裂相(成纤维细胞样细胞).加入RA、BDNF、GDNF诱导3d,部分细胞有NSE、GFAP成分表达;第10d可见有神经元、神经胶质形态样细胞形成,经细胞成分(NSE、GFAP)鉴定证实为神经元、神经胶质细胞.结论 BMSC在体外培养条件下,经过bFGF、EGF、RA、BDNF、GDNF等因子的"程序性"作用,可以分化成神经元和神经胶质细胞.

脑损伤后热休克蛋白70及热休克因子Ⅰ基因转录的实验研究

目的为了解脑损伤后应激基因转录的状况.方法采用RT-PCR对伤后脑组织HSP70、HSF1 mRNA的数量进行测定.结果在脑损伤15 min后脑干HSP70、HSF1 mRNA水平显著升高,在损伤后迅速死亡的致死损伤组的鼠脑中HSP70、HSF1 mRNA水平亦显著升高.结论应激基因的转录水平在脑损伤后明显提高,脑应激蛋白合成增强,参与损伤与修复过程.同时由于HSP70、HSF1 mRNA对脑损伤的迅速反应能力,使之成为观察脑损伤的灵敏指标.

垂体腺苷酸环化酶激活肽对动脉粥样硬化形成过程中脂质过氧化的影响

目的探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)对家兔实验性动脉粥样硬化(AS)形成过程中脂质过氧化的影响.方法 80只雄性新西兰家兔,随机分为3组:(1)对照组(C组):喂饲普通颗粒兔饲料;(2)AS模型组:每只兔每日喂饲含胆固醇1.5g的颗粒兔饲料;(3)PACAP组(P组):喂饲与AS组同样的饲料,另从耳缘静脉注射PACAP.分别于实验的0、4、8、12周末记录兔体重,同时从兔耳中央动脉取空腹血,测定丙二醛(MDA)含量:并取若干兔的主动脉标本作苏丹Ⅳ染色,测量斑块面积.结果 (1)AS组及P组血清MDA含量均显著高于C组;而P组显著低于AS组.(2)4周末时P组斑块面积显著小于AS组.结论 PACAP具有抗脂质过氧化作用,可能与抗AS有关.

肝硬化大鼠黑质一氧化氮合酶阳性神经元分布的研究

目的研究肝硬化大鼠黑质一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元及纤维分布的变化.方法 20只Wistar大鼠随机分为肝硬化组与正常组,应用NADPH-d组化法显示肝硬化大鼠黑质NOS阳性神经元胞体的数量及胞体灰度.结果肝硬化大鼠黑质一氧化氮合酶阳性神经元数量明显减少但阳性胞体的灰度增加,正常组大鼠黑质一氧化氮合酶阳性神经元数量增加但胞体的灰度降低.结论肝硬化大鼠体内有毒物质使脑细胞广泛受损,神经递质传递发生障碍,造成肝性脑病的一系列神经系统病症.

颈鼓神经的解剖学观察及临床意义

目的为鼓室神经切除术提供颈鼓神经的解剖学资料.方法在手术显微镜下对151例尸头及100块颞骨颈鼓小管上、下口的位置、颈鼓神经的交通情况进行了观察.结果颈鼓小管下口多起自颈动脉管升部后壁,上口多位于鼓室隐窝前壁及鼓室内的咽鼓管口处.颈鼓神经与咽鼓管下支交通者占65.56%,与鼓室神经干相交通者占29.14%.结论与鼓室神经相交通的颈鼓神经有可能被误认为鼓室神经双干的前干,在行鼓室神经切除术时应予切断.

视网膜色素上皮腺瘤的病理形态学观察

目的探讨视网膜色素上皮腺瘤临床及形态学特征,为其诊断及鉴别提供依据.方法常规石蜡切片HE染色、组织化学PAS和VG染色、透射电镜及用SP法做免疫组化S-100、Cytokeratin和Vimentin检测.结果该瘤细胞呈椭圆形、立方形,部分瘤细胞排列成腺管状,瘤细胞团周围见均匀红染的条状物质;上述条状物质PAS染色阳性,VG染色大部分呈黄色,少量呈红色;透射电镜显示细胞的紧密连接;免疫组化S-100和Cytokeratin阳性、vimentin阴性.结论视网膜色素上皮腺瘤的超微结构及免疫组化特征均同视网膜色素上皮相似,可通过形态学检查确诊.

妊高症患者脐静脉壁中膜平滑肌的形态学改变

目的探讨妊高症患者脐静脉壁中膜平滑肌的形态学改变.方法 37例新鲜脐带,常规石蜡包埋、切片、苏木精和伊红染色法染组织结构,桔黄G染平滑肌, 光镜观察及计算机图像分析.结果妊高症患者中膜厚度、细胞核的数密度和面密度均增大(P＜0.05),平滑肌的含量增多.结论妊高症患者脐静脉管壁中膜平滑肌含量的增多是血管对压力增高的一种适应性代偿反应.

大鼠前庭脊髓束终末与脊髓小脑束起源细胞间的突触联系

目的探讨前庭脊髓束终末与脊髓小脑束起源细胞间的突触联系.方法采用HRP逆行追踪和顺行溃变结合电镜技术,对大鼠的前庭脊髓束终末与脊髓小脑束起源细胞之间的突触联系进行了研究.结果发现溃变的前庭脊髓束轴突终末与HRP标记的脊髓小脑束神经元胞体之间形成的突触数量较少,其中轴-树型突触数量多于轴-体型突触.突触前终末含有丰富的清亮型扁平突触小泡,其次为清亮型圆形小泡.前庭脊髓束轴突溃变终末与脊髓边缘细胞形成的突触数量多于Clarks柱细胞形成的突触,并形成一些以标记树突为中心的突触复合体.结论本研究从形态上证实前庭脊髓束终末直接与脊髓小脑束起源细胞发生突触联系,也表明前庭脊髓束对脊髓小脑束起源细胞向小脑的信息传递具有直接调控使用.

中脑导水管周围灰质微量注射N-硝基左旋精氨酸和硝普钠对大鼠血压的影响

目的研究中脑导水管周围灰质(PAG)内NO对血压的作用.方法采用PAG微量注射N-硝基左旋精氨酸和硝普钠,观察大鼠血压的变化.结果 PAG微量注射N-硝荃左旋精氨酸(L-NNA)后,平均动脉压(MAP)显著升高,此效应可被预先注射L-Arg逆转.PAG微量注射硝普钠(SNP)后,MAP显著降低,此效应可被预先注射荷包丹碱(Bic)递转.结论 PAG内L-Arg-NO通路对动物血压有紧张性抑制作用,可能是通过GABA受体介导.

大鼠局灶性脑缺血后远隔区域脑损伤及药物干预的研究

目的观察大鼠局灶性脑缺血后急性期两侧额叶、丘脑、小脑、下丘脑局部脑血流量(rCBF)和细胞形态学的变化;评估川芎嗪对上述变化的干预作用.方法采用线栓法建立大鼠一侧大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型;用氢清除法测定两侧额叶、丘脑、小脑、下丘脑在MCAO后1、3、6和24h的rCBF;用HE染色和TUNEL法观察两侧额叶、丘脑、小脑MCAO后6h、24h、1周细胞形态学变化.结果正常对照组各相应部位rCBF无显著差异(P＞0.05);一侧MCAO后,两侧额叶皮层、丘脑、下丘脑、对侧小脑半球rCBF下降,MCAO后1h达低水平(P＜0.05或P＜0.01),随时间延长,rCBF逐渐增加,除对侧小脑、下丘脑外,其余部位rCBF至MCAO后24h基本恢复正常;而川芎嗪可明显抑制上述rCBF的下降程度(P＜0.05).同侧额叶、丘脑在MCAO后6h开始出现TUNEL阳性细胞,24h后明显增加,至1周阳性细胞减少(P＜0.05),而川芎嗪可明显抑制上述部位凋亡细胞的产生.结论局灶性脑缺血后可引起远隔区域有关脑组织rCBF下降,并进一步引发细胞凋亡.中药川芎嗪可明显抑制上述变化.

国人胚胎顶骨组织结构的胎龄性变化

目的完善国人胚胎颅顶骨发生及发育的形态学资料.方法取第9～38周人胚胎32例的颅顶骨,用HE、硫堇-苦味酸法染色,光镜观察.结果第9周胚胎顶骨为一片间充质膜.第10～12周胚胎的膜性顶骨内,血管丰富,有针片状骨小梁形成;第13～16周胚胎顶骨内骨小梁增加,呈条索状.第17周以后,顶骨内的骨小梁增粗增长,连接成骨小梁网,并有原始哈氏系统形成;第29周以后,顶骨内的原始哈氏系统不断增加,原始密质骨逐渐形成.结论人胚胎颅顶骨发育过程中有原始哈氏系统形成,胚胎颅骨的发育及结构特点与胚胎脑的不断生长,使其承受的重量不断增加有关.

猫视皮层N-甲基-D-天门冬氨酸受体的基因表达

目的检测5种NMDAR亚基的mRNA在猫视皮层的表达情况,为NMDAR的功能多样性提供分子基础.方法 3月龄猫6只,采用地高辛标记的寡核苷酸探针,对猫视皮层切片进行原位杂交.结果 NR1的mRNA在视皮层的所有层均有强表达,NR2A在Ⅲ、Ⅳ层表达较高,而Ⅱ、Ⅴ层呈中等水平;NR2B的表达信号较弱,主要表达于Ⅰ、Ⅲ和Ⅴ层;NR2C mRNA的信号很弱,表达Ⅲ、Ⅴ和Ⅵ层;NR2D mRNA在视皮层各层呈中等表达,以Ⅴ和Ⅵ层的信号强.结论 NMDAR各亚基在猫视皮层中的基因表达具有多样性,这可能构成了不同NR通道具有功能差异的分子基础.

中国北方汉族人细胞色素P4501A1基因Msp Ⅰ多态性的研究

目的探讨中国北方汉族人细胞色素P(cytochrome P,CYP)4501A1基因Msp Ⅰ多态性.方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,分析了172名北方汉族正常健康成人CYP1A1基因3′端限制性内切酶Msp Ⅰ位点的3种基因型(A、B、C)的分布频率.结果 Msp Ⅰ等位基因m1、m2分别占60.8%、39.2%.Msp Ⅰ基因型A占34.9%,基因型B占51.7%,基因型C占13.4%.结论本研究结果提示中国北方汉族人解毒酶CYP1A1基因存在Msp Ⅰ多态性.

成人心传导系统的超微结构

目的进一步观察成人心传导系统的超微结构.方法对窦房结、房室结采用纵切法,分别于其头、体、尾部切取1mm3组织各两块;房室束分叉部采用横切法切取其分叉部的近、远段组织各两块,用透射电镜观察.结果 (1)窦房结头部或头体交界部见P细胞3～4个环抱成团,团内细胞互相广泛连接,构成一个电传导装置;(2)窦房结和房室结可见有功能下降的明细胞与代偿性功能增强的暗细胞相并列;(3)结细胞退行性变与纤维组织增生并举;(4)窦房结的退行性变化从外侧部、尾部开始.结论推测窦房结的头部和头体交界部可能是窦房结的起搏中心.

MN9202对缺血后大鼠回肠肌间神经丛一氧化氮合酶阳性神经元的影响

目的实验用β-NADPH脱氢酶组织化学研究MN9202对缺血后大鼠回肠肌间神经丛一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元的影响.方法用无创伤动脉夹夹闭大鼠肠系膜上动脉使回肠缺血.1h后松夹复流,分别于缺血前15min和再灌前1min腹腔注射MN9202(1μg/kg).缺血对照组腹腔注射等量生理盐水.动物存活1d后取回肠进行β-NADPH组化反应.结果肠缺血后NOS阳性神经元明显增多(P＜0.05),在缺前后应用MN9202可使肌间神经丛内NOS阳性神经元较缺血对照组显著减少(P＜0.05).结论 MN9202减少大鼠减少大鼠肠缺血后NOS阳性神经元,其NO量相应减少,可能是其对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用机制之一.

边缘系统相关膜蛋白在大鼠脑纹状体边缘区表达的Western blot研究

目的研究边缘区与边缘系统是否存在共同的分子特征.方法用Western blot方法检测边缘区及有关脑区中边缘系统标志分子--边缘系统相关膜蛋白的表达.结果边缘区及边缘系统脑区边缘系统相关膜蛋白有强表达,而非边缘系统脑区甚少或无表达.结论边缘区与边缘系统具有共同的分子特征,边缘区可能是边缘系统的一个组成部分.

星形胶质细胞的可塑性

星形胶质细胞具有可塑性,即指其在内外环境变化刺激下,在整个生命过程中,能改变其自身特性,而在表型上呈现出很大程度的可变性.主要表现为细胞大小、形态及数目的变化,其中以细胞突起变化明显.不同发育阶段,不同区域的星形胶质细胞可塑性不同.星形胶质细胞可塑性的机制,目前认为主要是递质刺激相应的星形胶质细胞受体来实现的.

低强度激光疗法对神经-内分泌-免疫网络的影响及临床新进展

通过对近5年来国内外文献报道的低强度激光照射(ILLI)疗法对神经-内分泌-免疫(NET)网络的影响作概要综述,结合作者近6年来的研究成果,从信息调节的途径探索和研究ILLI的疗效机制,为临床应用该疗法抗衰老及治疗衰老相关疾病等提供理论依据.

皮肤中弹性纤维三种染色方法的比较

弹性纤维广泛分布于纤维结缔组织,尤其集中分布于椎弓间黄韧带、声带、肺泡壁、动脉壁及弹性软骨等处,赋予所在的组织以良好的弹性.弹性纤维可被多种试剂着色,如地衣红、醛复红、苯胺黑、Schiff试剂等染成不同的颜色.下面我们就分别用Gomori醛复红染色法、Schmorl染色法(Weigert间苯二酚-品红染色法)及地衣红染色法3种染色法,对SD大鼠皮肤中的弹性纤维染色效果做一简单比较.

铸型标本自然腐蚀法的改进

保存骨骼的新鲜铸型标本常采用自然腐蚀法--将灌注好的标本放入装入有水的容器内,并使之稍露出水面,适时将标本的朝阳面和向阴面互调,使整个标本各部分腐蚀进程一致,但整个标本腐蚀进程缓慢,在全年高温天气相对较多的南方地区,一件头颈部标本需时约一年半.经常翻动标本对大件标本甚至全身整体铸型标本损害较大,甚至使整个标本铸型"散架"而前功尽弃.为加速标本的腐蚀进程,尽量避免皮下脂肪等皂化,我们采取如下措施,大大缩短了标本的腐蚀时间,通常只需半年左右,效果满意.现报道如下:

国际神经递质及受体学术研讨会

胆固醇是参与还是破坏突触的形成

脑内一个学习记忆新区的发现及其研究

学习记忆是脑的重要功能,脑损伤或疾病常常出现学习记忆功能障碍.但是脑的学习记忆功能在脑内究竟位于脑的什么部位?这是长期困惑神经科学家的奥秘.自从19世纪奥地利神经解剖学家Gall提出脑功能局部定位学说,法国的Broca医生将人类语言的功能定位在左侧大脑的额叶;20世纪40年代Penfield用电刺激病人大脑皮层不同部位观察病人反应的方法,首次将记忆功能定位在脑颞叶;以后发现颞叶的海马在学习记忆中起着重要的作用,并进行了大量的的研究.此外,还发现脑边缘系统的杏仁核、前额叶、Meynert基底核等也都参与脑的学习记忆功能.但以后长期没有发现和学习记忆有关的新脑区.由于学习记忆是个复杂的神经活动,学习记忆功能有不同的种类,很可能不同的脑区具有不同的学习记忆功能.记忆是由大脑的多个部位共同完成的,这些部位之间存在密切的神经网络联系.但这些部位是通过什么神经网络来联系的还不清楚.