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产黑普氏菌内毒素脂多糖的免疫生物学活性研究
目的 在体外细胞培养系统和小鼠模型中检测产黑普氏菌ATCC25845内毒素脂多糖对内源性细胞因子的介导活性.方法 采用Kramer测定法、软琼脂细胞培养法和胸腺细胞增殖法测定内毒素脂多糖对肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、集落刺激因子(colony stimulating factor,CSF)、白细胞介素1(interleukin1,IL-1)的诱导活性以及局部皮肤斯氏反应(SPD50).结果 产黑普氏菌ATCC25845内毒素可显著地诱导TNF、CSF和IL-1的产生,在一定剂量范围内呈剂量依赖型.并可导致家兔典型的皮肤局部斯氏反应.结论 产黑普氏菌ATCC25845内毒素脂多糖在动物模型中具有显著的炎症性细胞因子诱导活性.
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粪菌移植有效治疗炎症性肠道疾病
奥地利维也纳医科大学内科胃肠病学和肝脏病学的Angelberger S等人在5名患有溃疡性结肠炎的患者应用粪菌移植方法进行治疗,并在移植术后不同时间点比较粪便中细菌的组成,结果证实:具有抗炎并产生短链脂肪酸作用的普拉梭菌、卵形拟杆菌等在患者体内成功定植,这是治疗炎症性肠道疾病成功的标志。疾病的严重程度(以Mayo评分为衡量指标)与肠杆菌科细菌所占比例过高和毛螺旋菌科细菌所占比例偏低有直接关系。
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细菌性阴道病诊治指南(草案)
细菌性阴道病(bacterial vaginosis,BV)是以阴道乳杆菌减少或消失,相关微生物增多为特征的临床症候群.BV与盆腔炎、不孕、不育、流产、妇科和产科手术后感染、早产、胎膜早破、新生儿感染和产褥感染等的发生有关.与BV发病相关的微生物包括阴道加德纳菌、普雷沃菌属、动弯杆菌、拟杆菌、消化链球菌、阴道阿托普菌和人型支原体等.
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灭滴灵制剂及临床应用现状
灭滴灵,又名替硝唑(tinidazole,TNZ),是新一代硝基咪唑类衍生物,对脆弱类杆菌、拟杆菌等致病厌氧菌及滴虫、阿米巴原虫等病原微生物均有强大的抑制杀灭作用[1].近年来替硝唑广泛应用于临床,取得了满意的临床效果.为了提高药物的选择性,增加疗效,减少不良反应,此类药物新制剂的研究进展甚快.本文就替硝唑制剂开发及其临床应用作一简要概述.
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健康婴儿体内的无毒脆弱拟杆菌的分离及鉴定
目的 对分离到的1株无毒脆弱拟杆菌进行鉴定.方法 2012年7月从健康足月新生儿的粪便中分离得到1株脆弱拟杆菌,观察其形态特征、培养特征,并进行生理生化鉴定、药敏试验及16s rRNA序列测定和分析.急慢性毒性试验检测毒性.结果 分离得到的菌株在细菌形态、培养特性、生理生化反应结果与脆弱拟杆菌相似.经BLASTN序列比对,所分离菌株与脆弱拟杆菌标准株NCTC9343同源性达99%.药敏实验提示,新分离菌株对头孢拉定、阿莫西林、庆大霉素、磺胺甲噁唑、甲氧苄啶不敏感,急慢性毒性试验提示无毒性.结论 分离的细菌为1株无毒的脆弱拟杆菌.
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鄱阳湖流域抗生素耐药基因分布特征及其与新型指示菌相关性研究
目的 了解鄱阳湖流域抗生素耐药基因的时空分布规律,探究耐药基因与拟杆菌之间的相关性.方法 选取鄱阳湖流域具有代表性的6个采样点,采集6个月的水样,通过qPCR方法定量检测五大类8种抗生素耐药基因[tetC,tetQ,ermB,sul1,sul2,blaTEM,aadA,aac(6')-1b]和2种拟杆菌(通用型拟杆菌,人特异性拟杆菌)的绝对浓度.结果 8种耐药基因均被检出,tetC,tetQ,ermB,sul1,sul2,blaTEM,aadA,aac(6')-1b的检出率分别为94.4%、66.7%、61.1%、97.2%、97.2%、97.2%、88.9%、94.4%;8种耐药基因的绝对浓度范围为0~2.9×107copies/ml,磺胺类基因检出浓度高,是鄱阳湖流域中主要的抗生素耐药基因.tetQ和sul1基因在枯水期的绝对浓度高于丰水期(P<0.05),8种耐药基因在上游河流的绝对浓度均明显高于湖泊上段和湖泊下段(P<0.05),8种耐药基因与拟杆菌之间均存在较高的相关性(P<0.05).结论 鄱阳湖流域磺胺类耐药基因污染较为严重,上游河流的耐药基因污染程度高于湖体,拟杆菌可能对抗生素耐药基因的污染具有一定的指示作用.
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天津海河流域冬季微生物污染和水质特征研究
目的 了解天津海河流域冬季微生物污染状况及指示菌与致病菌之间的关系.方法 于2013年冬季在天津海河流域上、中、下段的7个采样点采集21个水样,分别对水样中菌落总数、总大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希菌、肠球菌、通用性拟杆菌、沙门菌、弧菌和大肠杆菌O157及浊度、pH值、氨氮和高锰酸盐指数等进行检测和分析.结果 建立了通用性拟杆菌荧光定量PCR标准曲线,检测限达到18 copies.天津海河流域水质理化指标和微生物指标污染程度的检测结果基本呈现下段>中段>上段的趋势.Spearman相关分析结果表明通用性拟杆菌与致病菌呈正相关.结论 天津海河流域从上段至下段水质污染逐渐加重,通用性拟杆菌与致病菌呈现一定的相关性.
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酒精性肝病患者肠道中6种重要菌群的定量分析
目的 对酒精性肝病患者肠道中大肠杆菌、粪球菌、乳杆菌、双歧杆菌、拟杆茵及柔嫩梭茵的含量变化进行定量分析,并就其与肝损伤的相互关系进行初步探讨.方法 全自动生化分析仪检测健康人及酒精性肝病患者血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及谷氨转肽酶(GGT)活力;ELISA实验检测血浆中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素6(IL-6)、D乳酸(DAO)、二氨氧化酶(D-LA)和肠型脂肪酸结合蛋白(FABP2)水平;荧光实时定量PCR技术对粪便中上述6种重要茵群进行定量分析.结果 随着肝功能损害程度的加剧、饮酒史及饮酒量的增加,酒精性肝病患者血清ALT、AST、GGT活力,及血浆TNF-α、IL-6、DAO、D-LA和FABP2水平均较健康人群组及各自对应组有不同程度升高(P<0.05).粪便中双歧杆菌和拟杆菌含量均明显降低(P<0.05),而大肠杆菌、粪球菌、乳杆菌和柔嫩梭茵含量有所改变,但未见显著性差异(P>0.05).结论 肠道微生态失调在酒精性肝病发生发展过程中发挥重要作用,其作用机制可能与酗酒导致肠道中双歧杆菌和拟杆菌等肠道菌群生长受到抑制有关.
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战创伤涂膜剂对厌氧菌体外抗菌实验研究
目的 测定战创伤涂膜剂对产气荚膜梭菌(有芽孢菌)和脆弱拟杆菌(无芽孢菌)标准菌株的低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC).方法 应用培养基将涂膜剂、氯已定甲硝唑乳膏稀释至不同浓度,分别加入产气荚膜梭菌和脆弱拟杆菌悬液,控制菌液浓度为105 cfu/ml,厌氧培养后观察细菌生长情况,确定两药的MIC和MBC并进行比较.结果 涂膜剂体外对脆弱拟杆菌、产气荚膜梭菌MIC均为1 μg/ml,MBC分别为1μg/ml、2μg/ml.氯已定甲硝唑乳膏对脆弱拟杆菌、产气荚膜梭菌MIC分别为4μg/ml、1μg/ml,MBC为8μg/ml、2μg/ml.两药杀菌率均>99%.结论 涂膜剂对有芽孢和无芽孢类厌氧菌有良好的抑菌、杀菌作用.
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替硝唑对厌氧菌体外抗菌活性的观察研究
目的 测定替硝唑对产气荚膜梭菌(有芽孢菌)和脆弱拟杆菌(无芽孢菌)标准菌株的低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC).方法 应用培养基稀释替硝唑至不同浓度,然后分别加入产气荚膜梭菌及脆弱拟杆菌悬液,菌液浓度为105 cfu/ml,厌氧培养后观察细菌生长情况,确定MIC和MBC.结果 替硝唑对脆弱拟杆菌、产气荚膜梭菌的MIC均为1μg/ml,MBC均为2 μg/ml.结论 替硝唑对有芽孢和无芽孢类厌氧菌都有良好的抑菌、杀菌作用.
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替硝唑外用制剂的研究和应用
替硝唑(tinidazole)是一种抗厌氧菌和抗原虫药,对脆弱类杆菌、拟杆菌等致病厌氧菌及滴虫、阿米巴原虫等病原微生物均有强大的抑制杀灭作用[1],目前临床应用以口服和静脉为主,为更好地发挥药效,避免全身给药引起的不良反应,提高生物利用度,增强疗效,国内陆续报道了氟罗沙星外用制剂的研究和临床应用情况,现作综合介绍,以资临床参考.
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复方替硝唑栓的制备与质量控制及临床应用
替硝唑(TNZ)是一种抗厌氧菌和抗原虫的药物,对脆弱类杆菌、拟杆菌等致病厌氧菌及滴虫、阿米巴原虫等病原微生物均有强大的抑制杀灭作用[1].我们自拟复方替硝唑栓处方及制备方法,并进行质量控制观察,经临床应用表明对阴道炎有较好的疗效.现报告如下.
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拟杆菌微生态制剂对仔猪免疫能力的影响
目的 探究拟杆菌微生态制剂对仔猪免疫力的影响.方法 选取断奶仔猪30头,随机分为3组.对照组直接饲喂基础日粮,第1组饲喂拟杆菌微生态制剂,第2组饲喂复合拟杆菌微生态制剂.在实验前对所有实验猪与对照仔猪全部进行猪瘟及蓝耳病免疫,随后进行4周实验,测定各个个体抗体水平.结果 饲喂拟杆菌 微生态制剂实验组的抗体水平比空白对照组提高了15%,而复合拟杆菌微生态制剂的抗体水平比空白对照组提高了91%,且明显提高了猪瘟抗体效价.结论 给仔猪饲喂拟杆菌微生态制剂可以提高仔猪产生免疫抗体的能力,从而增强仔猪抗猪瘟与蓝耳病的能力.
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益生菌及人体肠道菌群对低聚甘露糖的降解
目的 研究益生菌及肠道菌群对低聚甘露糖的降解情况.方法 (1)将5名志愿者粪便样品,13株纯菌以及7种微生态制剂接种到VI-MO液体培养基中,37℃厌氧培养24或72 h,取样并采用TLC(薄层层析)检测降解情况;(2)选取7种微生态制剂中降解能力较强的乐塞益生菌胶囊(LS)中的益生菌作为筛选源,采用VI-MO固体培养基分离纯化低聚甘露糖的单一降解菌;(3)将B.uniformis L8和L.plantarum LS1A同时接种到VI-MO液体培养基中,37℃厌氧培养72 h,取样并采用TLC检测降解情况.结果 (1)不同人体肠道菌群和微生态制剂对低聚甘露糖的利用情况存在较大差异,B.uni formis L8和B.xylanisolvens C5可利用大聚合度低聚甘露糖;(2)从微生态制剂中分离得到的L.plantarum LS1A可利用小聚合度低聚甘露糖;(3)B.uniformis L8利用MO产生的小寡糖能被L.plantarumLS1A利用.结论 低聚甘露糖被拟杆菌降解释放出的小聚合度寡糖可以被乳酸菌利用,作为益生元很有可能改善肠道菌群的结构.
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新生儿肠道微生态学研究现况
在人的肠道中栖息着大约1×1014个、约100多种细菌,构成了所谓肠内菌群,其中肠杆菌、肠球菌等需氧菌仅占菌群的1/1000,绝大多数为厌氧菌,健康情况下它们与宿主之间处于生理的、和谐的、相互依赖、相互制约的状态,维持人体肠道的微生态平衡,对保证人体健康有着重要意义。1 新生儿肠道正常菌群的定植过程 新生儿刚出生时胎粪是无菌的,生后数小时粪便中首先出现肠球菌、链球菌和肠杆菌等需氧或兼性厌氧菌。生后24h大肠杆菌占优势;双歧杆菌于生后第2天出现,增长十分迅速,第4~5天开始占优势,1周后其数量可达细菌总数的98%。与此同时大肠杆菌数量下降,拟杆菌等随着双歧杆菌的出现则有所增加,但在健康母乳儿其数量一直低于双歧杆菌[1]。
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产肠毒素脆弱类杆菌聚合酶链反应检测
背景:产肠毒素脆弱类杆菌(ETBF)能导致家畜、儿童和成人腹泻,已引起广泛关注,但国内尚未见相关报道.目的:通过ETBF聚合酶链反应(PCR)检测,调查不同人群粪便标本中ETBF的阳性率.方法:建立ETBF PCR检测,评估其敏感性和特异性,并检测正常对照组和腹泻组的ETBF阳性率.结果:PCR的敏感性为1×104 CFU/ml,常见肠道正常菌群和致病菌均为阴性.正常对照组(475例)和腹泻组(498例)的ETBF阳性率分别为3.6%和6.4%(f=0.042).其中成人对照组和成人腹泻组的阳性率分别为2.3%和5.7%(P=0.047),儿童对照组和儿童腹泻组的阳性率分别为5.1%和7.3%(P=0.33).结论:ETBF PCR检测具有较好的敏感性和特异性,ETBF可能为腹泻的致病因素之一.
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拟杆菌属细菌的分子生物学鉴定
目的 用聚合酶链反应(PCR)技术鉴定拟杆菌.方法 以该属细菌的标准16S Rrna基因序列为靶基因设计通用引物,对该属标准菌株及不同来源的临床株进行PCR扩增,然后对扩增产物进行基因测序验证引物的特异性和敏感性.结果 设计的引物能扩增13株拟杆菌,而40株肠杆菌科细菌、本实验室分离和保存的其他非拟杆菌不能被扩增;13株拟杆菌所得的PCR产物经基因测序、比对相应标准菌的16S Rrna,同源性在81%~100%.结论 建立的方法可特异的鉴定拟杆菌,敏感性为100个细菌的基因组.
关键词: 拟杆菌 16S rRNA 聚合酶链反应技术(PCR) -
替硝唑的新剂型及临床应用
替硝唑(Tinidalde,TNI)是继甲硝唑后研制的新-代硝基咪唑衍生物,是一种疗效更高,疗程更短,耐受性更好的抗滴虫药,对脆弱类杆菌、拟杆菌、消化链球菌、棱形杆菌等所有厌氧菌以及滴虫、阿米巴原虫、兰伯氏贾弟虫等病原微生物均有较强的抑制杀灭作用[1].常用于口腔厌氧菌感染(牙周炎、根尖周炎、冠周炎等)、阴道毛滴虫和非特异性阴道炎、其它厌氧菌感染性疾病(腹腔炎、脓肿等)以及手术后创伤感染的治疗.市场上常见的剂型有注射液、片剂、胶囊剂等.目前,一些单位为适应临床的需要,根据临床用药的特点,研制了一些适应于各种专科使用的新剂型,满足了临床用药的需要.
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牙周袋内硫化物对慢性牙周炎疗效的影响
牙周袋内硫化物是由细菌(尤其是G-菌)在有菌斑基质、软垢、唾液成分等合适的基质条件下的代谢产物,主要包括硫化氢、甲基硫醇及硫化乙烷等[1].研究表明,一些牙周致病菌(如福赛拟杆菌、牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌)可以产生硫化物,因此有学者认为通过了解牙周袋内硫化物水平(sulcular sulphide level,SUL)的情况,就可间接地了解致病菌的代谢情况从而判断牙周炎的活动情况[2-3].金刚探针牙周诊断仪带有硫化物传感器探针,在进行传统的探诊深度、临床附着水平、探诊出血等检查的同时,还能灵敏地探测到牙周袋内浓度达10-6mol/L的挥发性硫化聚合物[4].
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利用16S rRNA(DNA)基因建立多种PCR法快速检测拟杆菌
拟杆菌是从人源性患者身上分离出来多的一类厌氧菌.可引起严重的牙周炎、败血症以及伤口感染等,须及时进行抗生素治疗.厌氧菌培养法表型鉴定等,步骤繁琐,细菌之间有些生化试验结果相似,甚至只能依赖1个表型特征鉴别.而且,检测人员判定结果带有一定的主观性.因此,迫切需要准确快速灵敏的方法来改变现状[1].