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猪生殖与呼吸综合征病毒的基因组及致病的分子基础
猪生殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)以引起母猪的生殖障碍及仔猪的呼吸道症状为特征.PRRSV 属于尼多病毒目、动脉炎病毒属.PRRSV的基因组为一单股正链RNA分子,由大约15 000个核苷酸组成,含有8个开放性阅读框架(ORFs),其线性排列顺序为5′-NCR-ORF1a/1b-ORF2-GP3-GP4-GP5-M-N-NCR-3′.大量研究表明PRRSV基因组的结构特征、表达模式及与宿主的相互作用构成了PRRSV致病的分子基础,系统了解该方面的研究进展对开展PRRSV致病机理和新型疫苗等方面的研究将有所帮助.
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重组鸡痘病毒对猪体的生物安全性研究
目的 研究重组鸡痘病毒对妊娠母猪及新生仔猪的安全性.方法重组鸡痘病毒以普通剂量和大剂量免疫妊娠母猪及仔猪,通过临床观察和病理组织学检查,评价重组鸡痘病毒对母猪的毒性以及对仔猪生长的影响,PCR检测仔猪病毒DNA残留.结果 观察期间,实验组动物精神状态、饮水、采食、体温等均正常,未出现明显不良反应,大剂量免疫对妊娠母猪及仔猪无危害,妊娠母猪未发生早产、流产、死胎、弱胎,仔猪体内未检测到病毒DNA.结论 构建的重组鸡痘病毒生物安全性好,妊娠母猪及仔猪接种后无不良反应.
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猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗诱导仔猪保护力及其免疫机制研究
目的 构建猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗,研究该疫苗诱导仔猪产生的保护力及其免疫机制. 方法 以猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗1×1011 CFU灌胃免疫40日龄健康仔猪,同时设空载体对照组和双歧杆菌液体培养基(MRS)对照组,每组4头.每两周免疫1次,共免疫2次.于末次免疫后4周,用猪带绦虫卵进行攻击感染,攻击感染后3个月解剖猪体,摘取囊尾蚴,计算减蚴率;前腔静脉取血,分离血清和制备外周血淋巴细胞(PBMC).酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测血清IgG、IgG1、IgG2a水平和PBMC培养上清液中IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测PBMC增殖情况. 结果 猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗免疫仔猪获得71.36％的保护力;与空载体对照组和MRS对照组比较,血清IgG和IgG2a水平显著升高(F=95.055、650.293,P＜0.05),IgG1水平显著降低(F=78.422,P＜0.05);加抗原刺激时,PBMC增殖水平显著升高(F=107.019,P＜0.05);PBMC培养上清液中IL-2和IFN-γ水平显著升高(F=229.668、2251.690,P＜0.05),IL-4和IL-10水平显著降低(F=274.832、1168.768,P＜0.05). 结论 猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗能够诱导仔猪产生一定的保护力,其中Th1型免疫应答在其诱导的保护性免疫机制中起重要作用.
关键词： 猪带绦虫 重组Bb-TSO45W-4B疫苗 保护力 免疫机制 仔猪 -
断奶前后仔猪胃组织中ghrelin基因表达及内源性生长抑素的作用
目的:研究仔猪断奶前后胃组织中ghrelin基因表达和其对胃组织发育性变化的影响,同时对内源性生长抑素的作用也进行了研究.方法:实验选取新生仔猪18窝,随机分为实验组和对照组,自12 d起,对照组饲喂基础乳猪料,实验组在基础日粮中添加120 mg半胱胺,以耗竭内源性生长抑素,两组仔猪均于35 d断奶.分别于28,35,36.5,38,42和45 d随机选取实验组和对照组仔猪各6头,屠宰,称量胃重和体重并采集胃底和胃窦黏膜,用RT-PCR方法,以18S rRNA作内标,定量分析胃底和胃窦组织中ghrelin mRNA的丰度.结果:胃底ghrelin mRNA的丰度明显高于胃窦部;胃底ghrelin mRNA水平在35和36.5 d较低,随后逐渐增加.45 d ghrelin mRNA水平显著高于35,36.5和38 d(P＜0.05);半胱胺能提高胃底ghrelin mRNA表达,其中35,36.5和38 d时试验组ghrelinmRNA表达显著高于对照组(P＜0.05).结论:Ghrelin能直接或间接作用于胃组织,调节胃的生长,表明Ghrelin与胃的形态和功能发育具有密切的关系;内源性生长抑素可抑制胃底ghrelinmRNA的表达.
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纳米氧化物材料在仔猪抗腹泻中的应用
仔猪腹泻是猪场常见的一种肠道疾病,由于其高发病率和死亡率,严重影响仔猪的健康生长和存活,由于抗生素的使用越来越受到限制,新型的饲料添加剂或药物越来越受到重视.本文主要综述纳米氧化锌和蒙脱石在抗仔猪腹泻中的应用,旨在为仔猪健康生长提供参考.
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发霉饲料造成仔猪生殖器官发育异常的病例
在2009年9月30日,吉林省通化市东昌区环通乡一农户在劁猪时发现,13头七十日龄仔猪体重十五至十八公斤母猪发育异常.
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柱前衍生-反相高效液相色谱法测定仔猪结肠内容物生物胺含量
目的 建立高效液相色谱结合紫外检测器(HPLC-VWD)方法测定仔猪结肠内容物中生物胺的含量.方法 以0.4mol/L的高氯酸溶液-20℃过夜处理仔猪结肠内容物,离心后取上清液,用丹磺酰氯衍生,以Zorbax SB-C18柱为分析柱,乙腈和0.02 mol/L的乙酸铵水溶液为流动相,流速1.0 ml/min进行梯度洗脱,结合保留时间和紫外光谱进行定性分析,定量检测波长254 nm,并对样品前处理过程进行优化.结果 色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、1,7-庚二胺、酪胺、亚精胺和精胺分别在0.29～220.00、0.33～250.00、0.20～508.00、0.32～246.00、0.32～240.00、0.28～352.00、0.19～228.00、0.32～396.00、0.25～306.00的浓度(μg/ml)范围内线性关系良好,相关系数均达到0.999,检测限(RSN=3)为0.07～0.19 μg/ml,样品的加样回收率为76.74％～115.31％,相对标准偏差均低于4.8％.结论 该方法简单、快速、结果准确可靠.
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富硒益生菌对仔猪抗氧化和免疫功能的影响
目的:研究富硒益生菌对仔猪抗氧化能力和免疫功能的影响.方法:选用断奶仔猪24头,随机分为3组.C组为对照组,饲粮中添加玉米淀粉,T1、T2组为试验组,饲料中分别添加富硒益生菌和亚硒酸钠,试验期60 d.分别于试验期D30、D60测定血液中GSH-Px与SOD活性、MDA含量、全血硒含量、猪瘟抗体水平以及组织中的硒含量.结果:在60 d时,T1、T2组仔猪血液GSH-Px活性、血清SOD活性、血液及组织中的硒含量及血清中的猪瘟抗体水平均显著高于C组,MDA水平显著低于C组.两个试验组中T1组效果优于T2组.结论:富硒益生菌改善仔猪抗氧化能力的效果优于亚硒酸钠,但在增强免疫功能方面两者差异不显著.
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黄豆苷元对仔猪肠道微生物区系的影响
目的:研究黄豆苷元对仔猪肠道微生物区系的影响.方法:选取江苏某猪场产期相近、胎次相似数目相当的杜/长/大三元杂交仔猪6窝,随机分为2组,每组三窝.一组为对照组,按常规饲养,另一组为处理组,在7、9、11d每头猪强饲大豆黄酮(10mg/L) 1 ml、2 ml、3 ml.两组均于21d断奶.于14、21、24、35d每窝各屠宰一头,无茵采集十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠和直肠食糜.食糜细菌16S rDNA的V6-V8可变区经PCR扩增,扩增产物经变性梯度凝胶电泳(DGGE)电泳后再进行多样性分析,并对特殊条带进一步克隆测序.结果:饲喂大豆黄酮后,处理组仔猪各肠段的DGGE条带数均高于对照组,盲肠、结肠和直肠中细菌的多样性指数增加;与对照组相比,在35d时处理组大肠中出现3条优势条带,经克隆测序后与GenBank登录序列比较,发现它们分别与butyrate-producing bacterium SL7/1,Clostridium butyricum(NCIMB8082),Ruminococcus obeum clone 1-4相似,相似性分别为95%, 95%和96%.结论:黄豆苷元可使仔猪大肠的微生物区系多样性增加,并且可选择性地促进某些菌群的富集.
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Cu2+对离体培养猪腺垂体细胞GH分泌的影响
目的:研究铜离子(Cu2+)对离体培养猪腺垂体细胞生长激素(GH)分泌的影响.方法:试验选取32-35日龄仔猪腺垂体细胞,于10%小牛血清的Dulbecco MEM培养液(DMEM)中离体培养48 h.之后用含不同浓度Cu2+(0 mg/L、0.025 mg/L、0.1 mg/L、0.4 mg/L、1.6 mg/L)的无小牛血清DMEM培养液培养36 h,于12 h、24 h、36 h收集细胞培养液,用Linco公司的试剂盒及放射免疫法测定培养液中GH浓度.结果:铜离子离体培养腺垂体细胞24 h,0.025 mg/L、0.1 mg/L、0.4 mg/L组培养液中GH浓度均高于0 mg/L组,其中0.1 mg/L组与0 mg/L组差异显著(P＜0.05).结论:铜离子可促进离体培养猪腺垂体细胞分泌GH.
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急性冷暴露对仔猪血浆IL-4、IL-10、ACTH和皮质醇的影响
目的:探讨急性冷应激对仔猪免疫系统的影响及机制.方法:将18头仔猪随机分成常温对照组、冷暴露组和冷暴露并阻断糖皮质激素受体组,对各组进行冷暴露试验,检测各血浆样品的IL-4、IL-10、ACTH及皮质醇水平.结果:单纯冷暴露组IL-4和IL-10水平分别在冷暴露6 h和9 h明显升高,ACTH水平在各时间点均明显降低,而皮质醇水平仅在冷暴露3 h明显升高,ACTH与IL-4/IL-10呈弱的负相关;冷暴露并受体阻断组IL-4和IL-10水平分别在1 h和6 h显著升高,ACTH水平在各时间点均显著降低,ACTH与IL-4/IL-10呈较强的负相关.各组皮质醇与IL-4/IL-10均呈弱负相关.结论:急性冷暴露能使IL-4、IL-10以及皮质醇的分泌增强;且阻断搪皮质激素受体会导致IL-4和IL-10之间以及ACTH与IL-4/IL-10之间相关性的改变.
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猪水肿病的一种临床预防技术
猪水肿病是仔猪致死性很高的传染病,是由某些血清型的溶血性大肠杆菌引起的一种急性、散发性疾病.农村广大养猪户往往在仔猪突然死亡或在发病后期才到兽医站就诊.
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母猪乳房炎的防治
我镇近几年来母猪的品种改良速度较快,杂交母猪较多,由于管理等因素的不当,母猪乳房炎经常有发生,母猪一旦发病,食欲改退,乳房红肿、疼痛,初期乳汁稀薄,内混合絮状小块,以后乳汁少而浓,混有白色絮状物,有时带血丝,有臭味,严重的乳房溃疡,因此严重影响仔猪采乳,后成活仔猪较少,而且僵猪较多,严重挫伤了养殖户的积极性.
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垫草引起仔猪霉菌感染的病例报告
张家港市乐余镇养猪场饲养的长大母猪56头,于2000年9月产仔猪200多头,有100多头仔猪因垫草原因引起霉菌感染,现将发病情况报告如下:
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猪肠道乳杆菌的筛选及其生物学特性研究
目的 从健康仔猪肠道中筛选到用于研制微生态制剂的优良乳杆菌株.方法 本研究选用乳杆菌选择培养基LBS、MRS从健康仔猪肠道分离到67株乳杆菌,对其染色镜检、生化试验和耐酸、耐胆汁、耐高温、抑菌活性及动物安全性等生物学特性进行初步研究.结果 从其中筛选到3株嗜酸乳杆菌,均能耐受pH 3.0的酸度、0.8%～1.0%的牛胆盐和60 ℃的高温,其代谢产物对猪肠道致病性大肠埃希菌和猪沙门菌具有抑制作用,且对小白鼠无致病性.结论 3株嗜酸乳杆菌符合益生菌的要求,可作为猪用益生素制剂的候选菌株.
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拟杆菌微生态制剂对仔猪免疫能力的影响
目的 探究拟杆菌微生态制剂对仔猪免疫力的影响.方法 选取断奶仔猪30头,随机分为3组.对照组直接饲喂基础日粮,第1组饲喂拟杆菌微生态制剂,第2组饲喂复合拟杆菌微生态制剂.在实验前对所有实验猪与对照仔猪全部进行猪瘟及蓝耳病免疫,随后进行4周实验,测定各个个体抗体水平.结果 饲喂拟杆菌 微生态制剂实验组的抗体水平比空白对照组提高了15％,而复合拟杆菌微生态制剂的抗体水平比空白对照组提高了91％,且明显提高了猪瘟抗体效价.结论 给仔猪饲喂拟杆菌微生态制剂可以提高仔猪产生免疫抗体的能力,从而增强仔猪抗猪瘟与蓝耳病的能力.
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健康仔猪肠道乳杆菌黑龙江地方株的鉴定与种属分析
为了从健康仔猪肠道中分离筛选用于研制微生态制剂的乳酸杆菌菌株,选择黑龙江省大庆、哈尔滨及宝泉岭地区部分猪场,采集12～60日龄健康仔猪肠道粪样64份.选用MRS乳酸杆菌专用培养基分离培养乳酸杆菌,通过分离株的形态特征和培养特性筛选出革兰阳性,厌氧,无芽胞杆菌48株.再通过生化试验鉴定和PCR种属分析,确定18株为乳酸杆菌.其中,罗伊乳杆菌7株,嗜酸乳杆菌5株,约氏乳杆菌2株,短乳杆菌1株,干酪乳杆菌假植物亚种1株,植物乳杆菌1株,詹氏乳杆菌1株.
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板蓝根多糖对猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫猪T细胞亚群的影响
目的:研究板蓝根多糖对猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫猪T细胞亚群及抗体的影响.方法:以板蓝根多糖作为免疫增强剂联合猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫仔猪,通过流式细胞仪检测猪外周血CD3+、CD4+、CD8+细胞百分数,并用ELISA法检测猪血清中抗猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒抗体水平.结果:板蓝根多糖能显著提高仔猪的CD3+、CD8+淋巴细胞的百分数和特异性抗体滴度.结论:板蓝根多糖能显著增强猪对常规灭活病毒疫苗的免疫应答能力.
关键词： 板蓝根多糖 免疫增强剂 仔猪 猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗 T细胞亚群 -
抗猪EPEC特异性抗体(IgG)的制备及应用
仔猪黄、白痢病是由致病性大肠杆菌引起的仔猪肠道传染病,该病分布广,发病急,死亡率高,危害大,已成为养猪业的重要障碍.致病性大肠杆菌的抗原构造复杂,血清型极多,不同型之间不能交叉保护.因此,至今国内尚没有广为适用的疫苗.又因该菌易产生抗药性,给药物治疗带来了很大困难.
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猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗诱导仔猪的保护性免疫应答
目的 探讨猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗免疫仔猪后,对猪带绦虫卵攻击感染后的保护性免疫应答.方法 将20头40日龄健康仔猪按体质量(约15 kg)采用随机数字表法分为5组,每组4头.分别为重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗灌胃组、重组Bb-TSO45W-4B疫苗灌胃组、重组Bb-TSOL18疫苗灌胃组、空载体对照组和双歧杆菌液体培养基(MRS)对照组.各疫苗的免疫剂量为1×1011菌落形成单位(CFU),间隔2周免疫1次,共免疫2次.于末次免疫仔猪4周后,各组仔猪用猪带绦虫卵攻击感染,攻击感染后3个月剖杀仔猪,分离猪囊尾蚴,计算减蚴率;前腔静脉取血,分离血清和制备外周血淋巴细胞(PBMC).酶联免疫吸附试验(EHSA法)检测血清免疫球蛋白(Ig)G、IgG1、IgG2a水平和PBMC培养上清液中白细胞介素(IL)-2、干扰素(IFN)-γ、IL-4及IL-10水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测PBMC增殖情况.结果 猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18、重组Bb-TSO45W-4B、重组Bb-TSOL18疫苗灌胃组减蚴率分别为83.09％、71.36％和74.85％.仔猪血清IgG、IgG1和IgG2a水平组间比较差异均有统计学意义(F=132.348、106.336、596.091,P＜0.05).其中重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18、重组Bb-TSO45W-4B、重组Bb-TSOL18疫苗灌胃组IgG、IgG2a水平[(366.81±3.84)、(334.94±11.65)、(333.52±11.09),(87.74±0.95)、(84.48±0.80)、(84.30±1.09)mg/L]均高于MRS对照组[(245.94±8.81)、(62.61±0.84)mg/L,P均＜0.05],IgG1水平[(26.55±1.06)、(33.24±1.92)、(32.60±1.94)mg/L]低于MRS对照组[(42.78±0.87)mg/L,P均＜0.05].仔猪PBMC培养上清原液中IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10水平组间比较差异均有统计学意义(F=139.522、1 053.102、769.097、962.298,P均＜0.05).其中重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18、重组Bb-TSO45W-4B、重组Bb-TSOL18疫苗灌胃组IL-2、IFN-γ水平[(212.24±3.12)、(205.91±3.18)、(205.85±4.35),(28.42±0.28)、(25.56±0.28)、(25.71±0.35)ng/L]均高于MRS对照组[(174.19±2.14)、(17.69±0.28)ng/L,P均＜0.05],IL-4、IL-10水平[(40.45±036)、(41.38±0.70)、(41.52±0.19),(71.45±0.83)、(73.38±0.70)、(74.77±0.41)ng/L]均低于MRS对照组[(52.57±0.29)、(94.82±0.45) ng/L,P均＜0.05].仔猪PBMC增殖水平组间比较差异有统计学意义(F=56.318,P＜0.05).其中重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18、重组Bb-TSO45W-4B、重组Bb-TSOL 18疫苗灌胃组PBMC增殖水平(0.543±0.074、0.481±0.028、0.530±0.053)均高于MRS对照组(0.242±0.053,P均＜0.05).结论 猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B-TSOL 18疫苗能够诱导仔猪产生一定的保护力,其中Th1型免疫应答在其诱导的保护性免疫机制中起重要作用.
