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猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗诱导仔猪的保护性免疫应答
目的 探讨猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗免疫仔猪后,对猪带绦虫卵攻击感染后的保护性免疫应答.方法 将20头40日龄健康仔猪按体质量(约15 kg)采用随机数字表法分为5组,每组4头.分别为重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗灌胃组、重组Bb-TSO45W-4B疫苗灌胃组、重组Bb-TSOL18疫苗灌胃组、空载体对照组和双歧杆菌液体培养基(MRS)对照组.各疫苗的免疫剂量为1×1011菌落形成单位(CFU),间隔2周免疫1次,共免疫2次.于末次免疫仔猪4周后,各组仔猪用猪带绦虫卵攻击感染,攻击感染后3个月剖杀仔猪,分离猪囊尾蚴,计算减蚴率;前腔静脉取血,分离血清和制备外周血淋巴细胞(PBMC).酶联免疫吸附试验(EHSA法)检测血清免疫球蛋白(Ig)G、IgG1、IgG2a水平和PBMC培养上清液中白细胞介素(IL)-2、干扰素(IFN)-γ、IL-4及IL-10水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测PBMC增殖情况.结果 猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18、重组Bb-TSO45W-4B、重组Bb-TSOL18疫苗灌胃组减蚴率分别为83.09％、71.36％和74.85％.仔猪血清IgG、IgG1和IgG2a水平组间比较差异均有统计学意义(F=132.348、106.336、596.091,P＜0.05).其中重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18、重组Bb-TSO45W-4B、重组Bb-TSOL18疫苗灌胃组IgG、IgG2a水平[(366.81±3.84)、(334.94±11.65)、(333.52±11.09),(87.74±0.95)、(84.48±0.80)、(84.30±1.09)mg/L]均高于MRS对照组[(245.94±8.81)、(62.61±0.84)mg/L,P均＜0.05],IgG1水平[(26.55±1.06)、(33.24±1.92)、(32.60±1.94)mg/L]低于MRS对照组[(42.78±0.87)mg/L,P均＜0.05].仔猪PBMC培养上清原液中IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10水平组间比较差异均有统计学意义(F=139.522、1 053.102、769.097、962.298,P均＜0.05).其中重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18、重组Bb-TSO45W-4B、重组Bb-TSOL18疫苗灌胃组IL-2、IFN-γ水平[(212.24±3.12)、(205.91±3.18)、(205.85±4.35),(28.42±0.28)、(25.56±0.28)、(25.71±0.35)ng/L]均高于MRS对照组[(174.19±2.14)、(17.69±0.28)ng/L,P均＜0.05],IL-4、IL-10水平[(40.45±036)、(41.38±0.70)、(41.52±0.19),(71.45±0.83)、(73.38±0.70)、(74.77±0.41)ng/L]均低于MRS对照组[(52.57±0.29)、(94.82±0.45) ng/L,P均＜0.05].仔猪PBMC增殖水平组间比较差异有统计学意义(F=56.318,P＜0.05).其中重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18、重组Bb-TSO45W-4B、重组Bb-TSOL 18疫苗灌胃组PBMC增殖水平(0.543±0.074、0.481±0.028、0.530±0.053)均高于MRS对照组(0.242±0.053,P均＜0.05).结论 猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B-TSOL 18疫苗能够诱导仔猪产生一定的保护力,其中Th1型免疫应答在其诱导的保护性免疫机制中起重要作用.
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猪带绦虫重组BCG-TSOL18疫苗诱导仔猪的保护性免疫应答
研究猪带绦虫重组BCG-TSOL18疫苗免疫仔猪,猪带绦虫卵攻击后诱导其保护性免疫应答的情况.将12头40 d龄健康仔猪均分为3组:分别为1011CFU重组BCG-TSOL18疫苗灌胃组、BCG对照组和PBS对照组.每2周免疫1次,共免疫2次.于末次免疫4周后用猪带绦虫卵进行攻击感染,3月后剖杀仔猪,分离囊尾蚴,计算减蚴率;取前腔静脉血,分离血清和制备外周血单个核细胞(peripheral blood monouclear cell,PBMC).采用ELISA法检测血清IgG、IgG1及IgG2a水平以及PBMC培养上清液中IL-2、IFN-γ、IL-4及IL-10的水平;MTT比色法检测PBMC增殖水平.重组BCG-TSOL18疫苗免疫组猪带绦虫卵攻击后诱导仔猪获得79.44％的保护力.与BCG和PBS对照组比较,重组BCG-TSOL18疫苗组血清IgG、IgG2a水平显著升高(t=13.026,P=0.000;t=13.253,P=0.000;t=7.284,P=0.000;t=8.453,P=0.000),IgG1水平显著降低(t=-9.118,P=0.000;t=-10.372,P=0.000);抗原刺激下PBMC显著增殖(t=14.929,P=0.000;t=14.665,P=0.000);PBMC培养上清液IL-2、IFN-y水平显著升高(t=9.768,P=0.000;t=10.496,P=0.000;t=22.504,P=0.000;t=23.204,P=0.000),IL-4和IL-10水平显著降低(t=-18.659,P=0.000;t=-19.495,P=0.000;t=-26.258,P=0.000;t=-27.402,P=0.000).猪带绦虫重组BCG-TSOL18疫苗可诱导仔猪产生Th1型的保护性免疫应答,从而抵抗猪带绦虫卵的感染攻击.
关键词： 猪带绦虫 重组BCG-TSOL18疫苗 保护性免疫应答 仔猪
