氨对人表皮角质细胞生长和代谢的影响

目的 了解人表皮角质细胞培养过程中,氨对细胞生长和代谢的影响.方法 收集3～6岁健康幼儿包皮,以Dispase Ⅱ分离、收集原代细胞,角质化细胞专用无血清培养基(Keratinocyte-SFM)培养.待细胞培养至第4代,更换含不同氨浓度的培养基,考察细胞生长和代谢的变化.结果 氨抑制了细胞的生长,当氨的浓度为9.23 mmol/L时,脉冲培养结束时的活细胞密度(0.84×105个/ml)进一步下降,细胞存活率下降至54.5%;氨对细胞生长的抑制作用遵循二级抑制模型,其模型常数Ka为4.46(mmol/L)2,即当氨的浓度为2.11 mmol/L时,细胞的比生长速率下降到大比生长速率的50%.当氨浓度从1.23 mmol/L增加到1.73mmol/L,细胞对葡萄糖的得率系数下降了48.0%,葡萄糖的比消耗速率上升了14.8%;与氨浓度为1.23 mmol/L相比,9.23 mmol/L的氨使乳酸对葡萄糖的得率系数增加了12.0%,乳酸的比生成速率增加了53.3%.氨浓度的增加明显改变了细胞的代谢,促进了细胞对葡萄糖的利用,消耗的葡萄糖更倾向于乳酸的生成.当氨浓度为9.23 mmol/L,谷氨酰胺的比消耗速率和氨的比生成速率分别是氨浓度为1.23 mmol/L的20.2%和6.2%.氨抑制了谷氨酰胺的消耗,谷氨酰胺在生成谷氨酸后经过脱氢途径的流量减少,更多地向转氨途径,即低效率的产能途径偏移.结论 在人表皮角质细胞的培养过程中,应尽量减少氨的积累.

mTOR信号通路与心血管疾病的研究进展

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（ mammalian target of rapamycin ， mTOR）信号通路调节细胞的生长、代谢、增殖等过程，在细胞生长过程中扮演着重要的角色。在分化成熟的血管内皮细胞和心肌细胞中，mTOR在依赖于激活蛋白激酶B（ Akt）引起的氧化应激条件下，调控细胞的凋亡和自噬过程。 mTOR的这些功能通过增强血管再生和限制急性细胞死亡来促进心肌修复和组织再生。然而，在某些情况下，可以阻断mTOR信号通路来限制血管病变和促进微循环血流［1］。本文综述mTOR信号通路及其在心血管疾病中的意义。

miR-148a 抑制胃癌MGC803细胞的生长研究

目的 观察miR-148a 对胃癌MGC803 细胞生长和细胞周期的影响.方法 实时定量PCR 检测miR-148a 在胃癌细胞中的表达.MGC803 细胞转染miR-148a 后,MTT 分析、生长曲线、集落生成实验观察BGC823 细胞的生长情况,同时进行细胞周期测定.结果 miR-148a 在胃癌MGC803 细胞中低表达.MGC803 细胞在转染miR-148a 后,生长明显受到抑制,细胞周期在G1 期发生阻滞,转染miR-148 组G1 期比率(71.52% ±3.43%)较对照组(47.46% ±3.12%)明显升高,P ＜0.01.结论 miR-148a 能够影响细胞周期,从而抑制胃癌MGC803 细胞的生长.

P21活化激酶1小分子干扰RNA对胃癌BGC823细胞生长的影响

目的 观察Pak1 siRNA 对胃癌BGC823 细胞生长和细胞周期的影响.方法 Westernblot 检测Pak1 在胃癌细胞中的表达.BGC823 细胞转染Pak1 siRNA 后,MTT 分析和细胞计数观察BGC823 细胞的生长情况,同时进行细胞周期测定.结果 Pak1 在胃癌BGC823 细胞中高表达,且能被Pak1 siRNA 干扰达72.24%.BGC823 细胞在转染Pak1 siRNA 后,生长明显受到抑制(P ＜0.05),细胞周期在G2/M 期发生阻滞,转染Pak1 siRNA 组G2/M 比率[(20.12 ±1.64 )%] 较对照组[(8.70 ±1.69)%,P ＝0.008]明显升高.结论 Pak1 siRNA 能够影响细胞周期,从而抑制胃癌BGC823 细胞的生长.

高氧对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞生长状况的影响

目的 探讨高氧对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(typeⅡalveolar epithelial cells,AECⅡ)的活力、生长情况、增殖和凋亡的影响. 方法 取孕19d的胎鼠肺组织,利用差速贴壁法进行AECⅡ的原代培养及纯化,将AECⅡ随机分为高氧组及空气组.空气组细胞置于5％CO2孵育箱中培养,高氧组细胞置于5％CO2 ±95％O2的混合气体孵育箱中培养.在培养的2、4、6、8d分别观察细胞的生长情况,检测细胞活力、细胞周期、细胞凋亡情况.时间点与培养组间的交互作用采用析因设计的方差分析.2组资料比较采用独立样本t检验,多组资料比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用Bonferroni方法. 结果 (1)细胞生长状况:高氧组培养2、4、6和8d时细胞数随培养时间延长逐渐减少,分别为(7.29±0.43)×105/ml、(2.68±0.37)×105/ml、(0.23±0.10)×105/ml和(0.00±0.00)×105/ml,低于相应时间点空气组[分别为(10.41±0.24)×l05/ml、(27.90±1.91)×105/ml、(27.12±0.85)×105/ml和(26.29±1.59)×105/ml],差异均有统计学意义(t分别为10.992、38.912、94.166和49.696,P均=0.000).(2)细胞活力:高氧组在2、4、6d时细胞活力逐渐下降,活细胞率分别为(79.00±0.71)％、(52.80±1.14)％和(31.60±1.52)％,均低于相应时间点空气组,分别为(97.00±0.71)％、(97.20±0.84)％和(95.00±0.71)％,差异均有统计学意义(t分别为31.213、70.519和84.722,P均=0.000).(3)细胞周期变化:高氧组G1期和S期细胞百分率在4和6d时与2d时比较均有升高,且高于空气组,差异均有统计学意义(P＜0.05).(4)细胞凋亡变化:高氧组Annexin-V+/PI亚群在4d时所占比例高,为(23.89±0.52)％,高于2d和6d时[(21.32±0.43)％和(1.47±0.61)％]；Annexin-V+/PI+亚群细胞所占比例6d时高,为(53.92±1.64)％,其次是4d时[(45.03±1.01)％],低是2d时[(12.17±0.60)％]；高氧组各时间点Annexin-V+/PI-和Annexin-V+/PI+亚群所占比例与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 高氧对AECⅡ的生长、活力、增殖能力、细胞周期具有明显的抑制作用,对细胞凋亡有促进作用.

表观遗传与神经发育性疾病

表观遗传(epigenetics)是指一组不改变基因型而可决定细胞表现型的遗传机制与现象,其研究的内容是基因序列不发生改变的可遗传变化,这种可遗传改变调控基因表达的变化,是基因表达转录调控的另一种方式.表观遗传的主要机制包括组蛋白修饰、染色质重塑、DNA甲基化、组蛋白变异、ⅱ基因印记及RNA干扰等.表观遗传机制在正常的发育和细胞生长过程中,在基因,环境与疾病的相互作用中都起作用.研究已证实,表观遗传异常与癌症、复杂遗传病、神经精神疾病及衰老的发生有关 [1-2].

雌激素孕激素联合紫杉醇对人卵巢癌细胞生长调控及Drosha表达的影响

目的：探讨雌激素、孕激素和紫杉醇对人卵巢癌细胞生长调控及Drosha表达的影响。方法雌激素、孕激素和紫杉醇体外作用人卵巢癌细胞，四甲基偶氮唑蓝（ MTT）法检测细胞抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期，实时荧光定量PCR和Western blot法检测Drosha mRNA和蛋白的表达。结果对照组、雌激素组、孕激素组、紫杉醇组、雌激素联合紫杉醇组和孕激素联合紫杉醇组的细胞生长抑制率分别为0％、（31．53±8．21）％、（25．22±15．50）％、（46．71±4．25）％、（69．46±3．71）％和（47．35±39．02）％，雌激素组、孕激素组、紫杉醇组、雌激素联合紫杉醇组和孕激素联合紫杉醇组的细胞生长抑制率与对照组比较，差异均有统计学意义（均P＜0．05）。相对于ER（－）的卵巢癌细胞，雌激素组、孕激素组、紫杉醇组、雌激素联合紫杉醇组和孕激素联合紫杉醇组的Drosha mRNA表达水平分别为1．62±0．10、1．60±0．10、1．75±0．16、1．95±0．20和1．53±0．06，与对照组（1．00）差异均有统计学意义（均P＜0．05）；相对于ER（＋）的卵巢癌细胞，雌激素组、孕激素组、紫杉醇组、雌激素联合紫杉醇组和孕激素联合紫杉醇组的Drosha mRNA表达水平分别为1．03±0．14、1．60±0．09、1．75±0．16、1．60±0．10和1．53±0．06，孕激素组、紫杉醇组、雌激素联合紫杉醇组和孕激素联合紫杉醇组的Drosha mRNA表达水平与对照组差异均有统计学意义（均P＜0．05）。相对于ER（－）的卵巢癌细胞，对照组、雌激素组、孕激素组、紫杉醇组、雌激素联合紫杉醇组和孕激素联合紫杉醇组的Drosha蛋白表达水平分别为0．25±0．05、0．87±0．30、0．85±0．38、1．30±0．21、1．75±0．83和1．62±0．82，雌激素组、孕激素组、紫杉醇组、雌激素联合紫杉醇组和孕激素联合紫杉醇组的Drosha蛋白表达水平与对照组比较，差异有统计学意义（ P＜0．05）；相对于ER（＋）的卵巢癌细胞，对照组、雌激素组、孕激素组、紫杉醇组、雌激素联合紫杉醇组和孕激素联合紫杉醇组的Drosha蛋白表达水平分别为0．25±0．05、0．28±0．16、0．85±0．38、1．30±0．21、0．94±0．18和1．62±0．82，孕激素组、紫杉醇组、雌激素联合紫杉醇组和孕激素联合紫杉醇组的Drosha蛋白表达水平与对照组比较，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论雌激素、孕激素联合紫杉醇能够抑制人卵巢癌细胞的生长，且雌激素、孕激素和紫杉醇均能改变细胞的凋亡率，雌激素和紫杉醇能够改变细胞周期。雌激素、孕激素联合紫杉醇通过上调Drosha的表达，起到抑癌或增敏作用，且与雌激素受体的表达相关。

人牙龈结合上皮和口腔龈上皮细胞的附着生长特性比较

目的 比较牙龈结合上皮(junctional epithelium,JE)与口腔龈上皮(oral epithelium,OE)细胞的生长附着特性,观察附着结构的形成过程,为牙周附着的形成提供实验依据.方法 人JE和OE取自正畸或阻生原因拔除的牙周健康牙,采用酶消化法和无血清角质细胞培养液分离培养细胞.将5×108个/L JE细胞1ml接种到放置于24孔板的预处理5mm×3mm×1mm牙骨质片上(每孔3片,共21片),于37℃ 5%CO2培养箱中复合培养,1～14d内取样本,透射电镜下观察附着结构的形成;同法以人OE细胞-牙骨质片复合培养作对照研究.结果 JE细胞形态多样,排列散乱,CKl9表达强阳性;OE细胞呈多边形或角形,"铺路石"状排列,仅少量OE细胞CK19阳性.JE细胞-牙骨质片复合培养1～3d,牙片上附着细胞少,9d时接触牙片的细胞膜局部出现少量电子致密沉积物,11～14d出现复层生长,与牙面接触处可见半桥粒样结构;而OE细胞-牙骨质片复合培养1～3 d牙骨质片上细胞较多,部分已伸展成扁平形,7 d时细胞膜和牙面间出现大量颗粒状电子致密沉积物,9 d时细胞呈复层生长,可见半桥粒样结构.结论 人JE细胞是一种不同于OE细胞的未成熟、低分化细胞,在同样条件下体外培养的JE细胞在牙片上的生长和附着均较OE细胞慢,其对牙面的附着强度值得深入研究.

微小RNA对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖的影响

目的 探讨微小RNA(microRNA,miRNA)对体外培养的人舌鳞状细胞癌TeaS113细胞增殖的影响.方法 用脂质体把miRNA-31和miRNA-139的类似物或抑制物分别导人人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞,分别为实验组,脂质体试剂为对照组,然后用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测细胞增殖情况.结果 对照组吸光度值(A值)在24、48和72 h时分别为(0.125±0.002)、(0.169±0.002)和(0.216 4±0.004);miRNA-31类似物可促进Tca8113细胞增殖,使其A值分别增至(0.136±0.001)(P<0.001)、(0.186±0.004)(P<0.001)和(0.249±0.012)(P<0.01);miRNA-139抑制物也使A值分别增加到(0.148±0.002)(P<0.001)、(0.214±0.002)(P<0.001)和(0.250±0.009)(P<0.01).与此相反,miRNA-31抑制物在48、72 h时抑制Tea8113细胞增殖,其A值分别降至(0.145±0.001)和(0.155±0.011)(P<0.001);mjRNA-139类似物在24、48 h也分别使A值降至(0.135±0.001)和(0.170±0.009)(P<0.001).结论 miRNA-31和miRNA-139在人舌鳞状细胞癌发生过程中起着重要作用,调整其活性有可能成为一种有效治疗口腔癌的新方法.

芦荟大黄素抑制人口腔癌KB细胞增殖和迁移的双重效应及其机制研究

目的 探讨芦荟大黄素抑制人口腔癌细胞生长和迁移的双重效应及其机制.方法 对人口腔上皮癌KB细胞分别用2.5、5、10、20和40 μmol/L的芦荟大黄素处理,对照组为含0.1%二甲基亚砜的培养液,分别用结晶紫实验和划痕损伤愈合迁移实验分析长效抗增殖作用和抗迁移效应,并用Western blotting方法 检测蛋白激酶Ca和c-myc蛋白水平的变化.结果 芦荟大黄素能长时间抑制KB细胞的生长;划痕损伤愈合迁移实验结果 显示,药物处理3 d后进入划痕区域的细胞数为(6.2±0.2)个/mm2,而对照组为(33.5±0.4)个/mm2,差异有统计学意义(P＜0.05);对照组细胞抑制蛋白激酶Ca和c-myc的水平较高,经芦荟大黄素处理后,均以剂量依赖方式下降.结论 芦荟大黄素的抗增殖和抗迁移活性与抑制蛋白激酶C信号传导途径有关.

胃癌相关基因GCRG213小干扰RNA表达载体的构建及其对胃癌细胞生长特性的影响

目的 研究胃癌相关基因GCRG213 siRNA转染对胃癌细胞MKN45的影响.方法 1)设计两对针对GCRG213可转录为小干扰RNA(siRNA)的DNA片段,退火后插入小干扰RNA表达载体IMG-800.2)测序正确的重组子IMG-800-1,IMG-800-2和空载体转染MKN45细胞,采用RT-PCR及Western法比较GCRG213在mRNA和蛋白质水平上的表达差异.3)绘制细胞生长曲线,分析细胞的增殖状态,检测凋亡细胞.结果 1)干扰片段正确插入小干扰RNA表达载体IMG-800.2)重组子和空载体转染MKN45细胞.3)转染siRNA的MKN45细胞中其mRNA的表达下调44.9%和49.5%;其蛋白的表达下调55.3%和64.2%.4)转染siRNA的MKN45细胞生长增殖速度减慢,处于G0-G1期的细胞增加,G2/M期和/或S期的细胞比例减少,细胞凋亡率增加.结论 siRNA转染可抑制肿瘤细胞的生长和增殖,促进肿瘤细胞的凋亡.

识别细胞形成集群新方法

阿德莱德大学的数学家近期寻找到了通过分析细胞群落的影像资料识别细胞如何形成集群的新方法，这一模型可以帮助生物学家和组织工程学家进一步在实验室中生成诸如肝脏之类的组织。研究人员表示，在任何组织和器官的发展中，细胞首先需要将自身组织形成正确的结构，这种自我组织构建过程在再生机制中是非常重要的，科学家在实验中培养组织需要了解再生机制。获得正确的结构式让组织具有活力和功能的关键所在。组织过程的控制非常复杂，目前尚未完全了解，因此科研人员将使用该模型来探索诸如细胞群落形成等机制，同时，该模型对于评估加强细胞生长过程的影响因素也非常重要。研究人员下一步计划将实验数据反馈到模型中来模拟生物学过程，并通过计算机探索不同的影响因素的潜在作用。

在卵母细胞生长过程中影响减数分裂染色体分离因素的实验室证据

TGF-β通过下调MyD88表达抑制LPS诱导的TLR4活化

TGF-β在调节细胞生长过程中起重要作用,近研究发现TGF-β还可影响TLR8诱导的细胞活化,但其分子机制并不清楚.为研究TGF-β是否影响TLR2、TLR4和TLB5诱导的细胞活化及其分子机制,作者用TGF-β预处理RAW264.7细胞,然后检测TLRs诱导的NF-KB活化.结果显示TGF-β预处理能显著抑制LPS、flagellin和Pam3Cys诱导的RAW264.7细胞NF-κB转录活化,但不影响polyI:C诱导的NF-κB活化.由于polyI:C只活化MyD88非依赖信号途径,提示TGF-β通过作用于MyD88依赖信号途径抑制TLRs诱导的NF-κB活化.

香加皮杠柳苷对人食管癌细胞TE-13生长抑制作用

目的:分析中药香加皮醇提物杠柳苷(periplocin from cortex periplocae, CPP)对食管癌细胞株TE-13的生长抑制作用,探讨其诱导细胞周期阻滞的机制.方法:应用MTT法检测CPP对TE-13细胞的抑制作用;Gimsa染色法分析TE-13细胞的形态学变化;FCM法检测细胞周期分布和凋亡率;Western印迹法检测TE-13细胞经药物处理前后细胞周期蛋白依赖性激酶CDK 4、CDK 2蛋白表达的变化.结果:CPP对TE-13细胞增殖具有明显的抑制作用(P＜0.01),并呈时间和浓度依赖性,药物浓度越大,作用时间越长,抑制效应越强,CPP作用48 h时,对TE-13细胞的半数抑制浓度(IC50)为0.61 μg/mL.经2 μg/mL的CPP作用48 h后,TE-13细胞发生明显的凋亡形态学变化;G0/G1期细胞明显增多(P＜0.01),S期细胞明显减少(P＜0.01),G2/M期细胞没有明显变化(P＞0.05).不同浓度CPP作用48 h后能降低TE-13细胞中CDK4蛋白的表达(P＜0.01),对CDK 2蛋白的表达则没有明显影响(P＞0.05).结论:CPP能显著抑制TE-13细胞的增殖,其作用机制可能与CPP诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡有关.

凝集生长毛乳头细胞膜联蛋白A2的表达特性研究

目的 探讨膜联蛋白A2在毛乳头细胞(DPC)凝集生长中的表达特点.方法 反转录PCR和Western印迹方法分别在基因和蛋白水平研究膜联蛋白A2在DPC凝集和非凝集生长状态下的表达特点.结果 在DPC凝集性生长状态下,膜联蛋白A2mRNA表达水平显著高于非凝集生长状态,差异有统计学意义(0.50±0.15比0.35±0.19,t=8.26,P＜0.05).在蛋白质水平,膜联蛋白A2表现为相对分子质量为40 000的膜联蛋白A2异构体和分子质量为36 000的膜联蛋白A2两种形式,前者在凝集与非凝集生长的DPC均高表达,后者在凝集生长的DPC表达,在非凝集生长的DPC则不表达.结论 膜联蛋白A2可能与DPC的凝集生长密切相关.

胰蛋白酶对皮肤鳞状细胞癌A431细胞生长的影响

目的 探讨胰蛋白酶对皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、迁移和黏附能力等生物学行为的影响.方法 用不同浓度的胰蛋白酶处理A431细胞,通过CCK8法检测细胞活性,筛选胰蛋白酶作用的佳浓度;流式细胞仪检测癌细胞增殖周期细胞百分率和增殖率;划痕和Transwell小室实验分别检测癌细胞在二维和三维空间的迁移能力;纤连蛋白粘附试验检测癌细胞的黏附潜能.结果 用不同浓度胰蛋白酶处理A431细胞,通过检测细胞生长活性发现,随着胰蛋白酶浓度升高,A431细胞增殖活性增加;100 nmol/L胰蛋白酶处理A431细胞后,与对照组相比,G1期细胞比例减少,S期细胞比例增高,细胞增殖指数、细胞迁移能力和黏附潜能增加,差异均有统计学意义(均P＜ 0.05).结论 胰蛋白酶能促进A431细胞增殖、迁移和黏附.

快速老化SAMP6小鼠成骨细胞的体外培养鉴定和生长特性

目的:通过体外分离培养SAMP6小鼠成骨细胞,探讨该品系体外培养的成骨细胞生长特性,为进一步研究老年性骨质疏松症机制提供细胞学基础.方法:采用机械分离法分离新生SAMP6小鼠的颅骨,酶消化法培养SAMP6小鼠成骨细胞,经碱性磷酸酶染色和瑞氏-姬姆萨染色观察SAMP6小鼠成骨细胞的形态,茜素红染色出现钙化结节来鉴定SAMP6小鼠成骨细胞.结果:SAPM6小鼠成骨细胞生长曲线显示,1～3 d是SAMP6小鼠成骨细胞潜伏适应期,3～7 d进入对数生长期后转为平台期.体外培养的SAMP6小鼠成骨细胞经瑞氏-姬姆萨染色后镜下观察显示胞浆呈现蓝色颗粒,细胞核被染成紫褐色,平均有1～3个核仁.碱性磷酸酶染色后镜下观察可见胞浆内分布紫红色颗粒,茜素红染色肉眼和镜下均可见被染成橘红色的钙化结节,表明分离培养的SAMP6小鼠细胞是实验需要的成骨细胞.结论:本研究体外分离培养得到的SAMP6新生小鼠成骨细胞经初步鉴定后基本符合成骨细胞的特性,为SAMP6小鼠模拟老年性骨质疏松症的机制研究奠定基础.

盐霉素聚合物颅内局部给药对大鼠胶质细胞瘤的治疗作用

目的探讨盐霉素对大鼠9L 胶质肉瘤细胞系的体内、外生长和增殖的抑制作用。方法将盐霉素加入体外培养的大鼠9L 胶质肉瘤细胞系中检测其对细胞生长、增殖活动的影响。对40只 Fisher 344大鼠行颅内9L 细胞注射，以制备载瘤大鼠模型。将盐霉素与可生物降解的药物基质聚酸酐类聚合物对羧基苯氧丙烷－癸二酸共聚物（pCPP∶SA）溶解并真空干燥后塑性，制成圆形药物聚合物颗粒。对载瘤大鼠行开颅手术，于瘤腔内植入聚合物颗粒，以观察盐霉素聚合物体内抗肿瘤效果，记录大鼠存活时间，进行进一步生存分析。结果盐霉素对9L 细胞具有明显抑制作用，并表现出剂量依赖性特点。盐霉素聚合物颗粒具有良好生物相容性，能够短时间内稳定释放盐霉素进入局部组织。接受盐霉素聚合物治疗的大鼠，其中位生存期较对照组显著增加；采用30％盐霉素比例聚合物能够在延长大鼠生存时间的同时，降低盐霉素的使用剂量。结论盐霉素对9L 胶质肉瘤细胞具有强大的抑制杀伤作用，采用盐霉素聚合物肿瘤局部给药的方式具有重大临床潜在研究和应用价值。

Let-7b和miR-199a对B16F10细胞增殖生长的影响

目的 研究let-7b和miR-199a对黑色素瘤增殖生长的影响.方法 设计靶向let-7b和miR-199a基因的过表达质粒和inhibitor干扰片段,将同一株系B16F10细胞分为七组:空白组、let-7b质粒组、miR-199a质粒组、空质粒组、let-7b inhibitor组、miR-199a inhibitor组、inhibitor对照组,运用基因转染技术将对应组别的外源基因导入B16F10细胞中,从RNA水平、蛋白水平和细胞水平三方面检测let-7b和miR-199a基因对B16F10细胞的影响.结果 let-7b质粒组和miR-199a质粒组B16F10细胞中对应基因的表达为3.8776±0.1372和2.8660±0.2821,明显高于空白组(P＜0.05);let-7b inhibitor组和miR-199a inhibitor组B16F10细胞中对应基因的表达为0.2057±0.0263和0.2656±0.0253,明显低于空白组(P＜0.05);B16F10细胞中cyclinD1的表达let-7b质粒组(2.023±0.315)和let-7b inhibitor组(1.857±0.377)明显高于空白组(0.997±0.041)(P＜0.05),而B16F10细胞中Met的表达中miR-199a质粒组(5.19±0.309)和miR-199a inhibitor组(4.87±0.044)明显高于空白组(2.2±0.198)(P＜0.05);let-7b质粒组和miR-199a质粒组B16F10细胞的生长趋势较空白组缓慢,尤其到转染后第3天,此生长趋势下降至低值(P＜0.05),此后又缓慢趋近正常;此外,let-7b质粒组和miR-199a质粒组B16F10细胞凋亡率分别为(11.8±1.19)%和(11.3±1.59)%,明显高于空白组(5.77±1.74)%(P＜0.05).结论 let-7b和miR-199a可负调控黑色素瘤细胞的增殖生长.