首页 > 文献资料
-
肠道病毒EV71相关受体在人二倍体细胞KMB17表面的构成分析
目的 研究人二倍体细胞KMB 17表面与肠道病毒EV71感染相关的受体Toll样受体4(TLR4)、血小板衍生生长因子受体α多肽（pDGFR-αR1）的表达情况,以及细胞周期、细胞代次、EV71感染对这两种受体表达的影响.方法 使用荧光标记的特异抗体；PE-TLR4、FITC-PDGFR-αR1标记不同细胞代次、处于不同细胞周期时段的KMB17细胞,应用流式细胞仪检测表达这两种受体蛋白的阳性细胞率,以及EV71感染前后,阳性细胞率的变化.使用NCBIprimer blast设计TLR4、PDGFR-αR1特异的引物,提取不同细胞代次、细胞周期时段KMB17细胞的RNA,使用real-time PCR检测这些受体蛋白特异mRNA的量.结果 KMB17细胞在使用血清饥饿法进行G0/G1同步化后约22 h进入S期,在36h进入G2期,在48 h左右完成分裂.PDGFR-αR1、TLR4平均阳性细胞的比例分别为4.47％和11.82％;通过流式细胞仪检测,在G0/G1期,PDGFR-αR1、TLR4的平均阳性细胞比例分别为4％和8.9％；在S期,分别为2.6％和9％；在G2/M期,分别为4.4％和13.5％; EV71病毒感染后,PDGFR-αR1阳性的细胞比率由2.6％上升至4,0％,TLR4阳性细胞比率分别为11.6％和12.8％.结论 人二倍体细胞KMB17表面表达肠道病毒相关的受体TLR4和PDGFR-αR1,表达PDGFR-αR1的阳性细胞较TLR4少,不同代次的KMB17细胞这2种受体阳性细胞比例的差异不大,PDGFR-αR1阳性细胞在G0期较多,TLR4阳性细胞在G2/M期较多；EV71病毒感染后,PDGFR-αR1、TLR4阳性细胞的比率变化不大,表明这两种受体分子在KMB17细胞表面表达较稳定,不受EV71感染的影响.
