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肝组织石蜡切片8-OHdG免疫组化方法的研究
目的:探讨肝组织石蜡切片8-OHdG免疫组织化学(免疫组化)染色的实验方法.方法:以皮肤组织作为阳性对照,PBS代替一抗作为阴性对照,采用4种不同实验条件在肝组织石蜡切片中行8-OHdG免疫组化方法染色.结果:实验条件3,即高温高压柠檬酸盐(pH6.0)缓冲液+胃蛋白酶K(10mg/L)的联合修复方法,并采用1%Triton X-100打孔过夜的方法能在肝组织中做出可靠阳性结果.结论:实验条件3为8-OHdG免疫组化染色取得可靠阳性结果的合理的方法.
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用微波技术改进肾穿SP法
SP法是目前常用的免疫组化方法,其价格合适,易被基层医院接受,再则其技术成熟[1],操作简便,供货快捷,一旦试剂有问题可迅速更换.
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S100-A8在乳腺癌表达的病理学研究
目的:分析S100-A8在乳腺癌表达及与乳腺癌临床病理和生存状况的关系.方法:用免疫组织化学方法检测S100-A8蛋白在乳腺良性疾病(n=15)及乳腺癌无淋巴结转移组(n=83)及109例有腋窝淋巴结转移乳腺癌和配对淋巴结转移灶中的表达,进行Kaplan-Meier生存分析和Cox回归分析.结果:S100-A8蛋白在乳腺癌原发灶和淋巴结转移灶之间存在差异表达,原发癌组织和配对的转移性淋巴结之间差异有统计学意义.Kaplan-Meier生存分析和Cox回归模型提示组织学分级和淋巴结状态是乳腺癌的危险因素.结论:S100-A8蛋白与乳腺癌淋巴结转移相关,并与ER表达水平和组织学类型有关.
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微波修复在冰冻切片免疫组化中的应用
微波修复法多用于石蜡切片,我们在长期的研究生免疫组化教学过程中,实行改良,将微波抗原修复法用于冰冻切片,取得了满意的效果,方法如:1.常规固定取脑组织冰冻切片.2.漂洗后3%H2 O2封闭10分钟,蒸馏水洗2分钟3次.3.微波抗原修复:入柠檬酸盐缓冲液(PH6. 0),用微波或电炉加热,循环3次后入1%BSA孵育15分钟.4.入一抗30分钟,转入二抗 20分钟,三抗20分钟,显色.结果讨论:1.与对照切片成比,阳性细胞染色增强,背景变浅,阳性检出率提高.由于常规的冰冻切片免疫组化方法所用的固定剂多含甲醛,醛基与蛋白质中的氨基交联,使抗原决定簇被掩盖,影响了免疫组化染色结果,使背景染色较深,阳性检出率较低.且这种作用随固定时间的增长而加重,用微波修复抗原的方法,可以使抗原决定簇暴露,有利于抗体结合.此外,部分因固定而被损伤的抗原决定簇也得到修复,因此能提高抗原的阳性检出率,增加染色强度,降低背景的非特异性染色.2.染色时间大大缩短.以往为保证染色效果,常规一抗孵育时间较长(12-24小时),而用微波修复后仅需 30分钟.因为微波修复法可使抗原暴露,利于抗原抗体结合,提高了反应速度,节省了时间 .综上所述,在冰冻切片中使用微波抗原修复的方法值得推广.
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用免疫组化方法鉴定转染基因nm-23-H1蛋白表达的实验体会
作者通过转染细胞(ACC-m/nm23-H1)蛋白表达经免疫组化方法分析鉴定获得满意效果这一方法,将该法与蛋白印迹方法加以比较,并进行分析评价,重新认识到该法具有许多优势.
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子宫内膜癌变过程中雌、孕激素受体的变化及与p53的关系
我们用免疫组化方法测定不同状态子宫内膜组织中癌基因p53、增殖细胞核抗原(proliferative cell nuclear antigen, PCNA)、雌激素受体(estrogen receptor,ER)和孕激素受体(progesterone receptor, PR)的表达,分析p53对子宫内膜癌组织ER、PR表达的影响,为临床诊治及预后判断提供参考.
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细胞色素芳香化酶P-450在正常、子宫内膜异位症子宫内膜的表达及意义
目的:探讨细胞色素芳香化酶P-450在子宫内膜异位症(内异症)发病中的作用,检测子宫内膜细胞色素芳香化酶P-450的表达用于诊断内异症的可行性.方法:应用免疫组化方法检测正常子宫内膜和内异症的在位及异位内膜细胞色素芳香化酶P-450的表达.结果:细胞色素芳香化酶P-450在正常子宫内膜无表达,在内异症的在位和异位内膜均有强表达,增殖期与分泌期无差别.检测子宫内膜细胞色素芳香化酶P-450的表达,用于诊断内异症的敏感度为91.5%,特异度为100%,阳性预测值为100%.内异症子宫内膜细胞色素芳香化酶P-450的表达与AFS分期无相关性.结论:子宫内膜细胞色素芳香化酶P-450分泌增加促进内异症的发生;内异症子宫内膜细胞色素芳香化酶P-450的强表达对内异症的诊断有重要意义.
关键词: 细胞色素芳香化酶P-450 子宫内膜异位症 免疫组化方法 诊断 -
金属硫蛋白与膀胱肿瘤的研究进展
金属硫蛋白(metallothioneins,MT)是一类富含硫和金属的低分子量细胞内蛋白质.在哺乳动物中除了乳腺上皮细胞和甲状腺上皮细胞等特殊细胞类型外,利用通常的免疫组化方法在其他种类的细胞中一般检测不到MT的表达[1].哺乳动物的MT分子量一般在6~7Kda之间,并且通常含有67个氨基酸残基,它们被认为是锌结合的细胞内位点,可以被金属强烈的诱导[2].MT中的巯基可以和亲电性金属(如锌、镉、铜、铂等),自由基因以及某些细胞代谢产物结合,从而参与细胞内锌和铜等必须微量元素的储存,金属稳态的维持,有毒金属的解毒以及抗自由基氧化等过程[3].近年来的研究表明,很多肿瘤中有MT的过度表达,并可能和肿瘤的发生、发展、生物学行为和预后有关[4-6].本文就MT与膀胱肿瘤的研究进展综述如下.
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胆囊肉瘤样癌伴腺鳞癌1例临床病理分析
肉瘤样癌(Sarcomatoid carcinoma)又称梭形细胞癌、化生性癌,可发生于肺、食道、膀胱、甲状腺、乳腺、肾、喉、胆囊等器官,以肺、乳腺和食道多见[1],发生于胆囊的肉瘤样癌极其罕见,目前国内外仅见少数散在病例报道[2,4].肉瘤样癌由肉瘤样成分和上皮样癌组成,其中上皮样癌成分多为腺癌,罕见鳞癌、小细胞癌等成分[4],而胆囊肉瘤样癌伴腺鳞癌目前还未见报道.本文报道1例胆囊肉瘤样癌伴腺鳞癌,通过光镜及免疫组化方法,结合文献复习,探讨其临床病理特点、诊断和鉴别诊断.
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乳腺浸润性导管癌中雌激素调节蛋白的表达及临床意义
乳腺癌是我国女性常见恶性肿瘤之一.近年来乳腺癌病人及因乳腺癌死亡的病例均有所增加,即使是早期病例,5年后也有部分病人死于转移或复发.为了降低死亡率和更有针对性地对病人进行有效治疗,人们在寻找乳腺癌预后标记物方面做了大量工作,越来越多地注意到雌激素调节系统对肿瘤治疗和预后和影响[1],我们用免疫组化方法对乳腺癌病人的雌激素调节蛋白(PS2)进行检测,以探讨PS2在乳腺癌预后判断中的作用.
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免疫组化方法辅助诊断中枢神经细胞瘤2例
中枢神经细胞瘤(central neurocytoma)是一类少见肿瘤.本文用免疫组化方法辅助诊断2例中枢神经细胞瘤,现报告如下.
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舌癌术前化疗PCNA、bcl-2基因表达及临床意义
研究表明,增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)是一种细胞周期蛋白,积累在增殖细胞中,而在静止期细胞中缺乏,被认为是评价细胞增殖状态的一个重要指标.bcl-2与bax属同一家族,bcl-2为细胞凋亡抑制基因.本研究用免疫组化方法,分析舌癌术前化疗PCNA和bcl-2蛋白的表达情况,旨在从细胞增殖和细胞凋亡平衡的角度对舌癌的化疗机制进行探讨.
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肺癌的动态CT及相关基础研究
目前关于肿瘤血管生成的研究似乎让人们看到了肿瘤治疗的另一种途径.实验室研究结果显示,抑制肿瘤血管生成可以抑制肿瘤的生长和转移[1],但在临床上类似的研究报道不多.许多作者用动态CT结合免疫组化方法对肺癌的血管生成进行了探索性的研究,得到了一些有意义的研究成果.本文将对这一领域的研究进行回顾和展望.
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小鼠肠道 DC 在 MODS 早期的改变
目的::探讨树突状细胞(DCs)在多器官功能障碍综合征(MODS)早期小肠损伤中的病理过程和作用机制。方法:复制小鼠 MODS 动物模型,采用免疫荧光(I-Ab)、免疫组化(CD11c,CCR7)等方法观察小鼠肠道及其 DCs 在 MODS 早期的动态变化。结果:实验早期(3~6h),CD11c 阳性的 DCs 显著增多,而 I-Ab 和 CCR7阳性的 DCs 变化不明显。结论:MODS 早期可能启动了外周血中DC血液循环向肠道迁移,并参与了 MODS早期的发生。
关键词: 多器官功能障碍综合征 树突状细胞 小肠 免疫组化方法 -
小鼠肠道 CCR7在 MODS 的变化
目的::探讨小肠树突状细胞(DCs)CCR7在多器官功能障碍综合征(MODS)中的迁移变化。方法:复制小鼠 MODS 动物模型,采用免疫组化(CCR7)观察小鼠肠道 DCs 在 MODS 迁移变化。结果:实验12~48小时 CCR7阳性的 DCs 显著增多。结论:外周血中DC 经过血液循环向肠道迁移,并参与了 MODS 的发生。
关键词: 多器官功能障碍综合征 树突状细胞 小肠 免疫组化方法 C族趋化因子受体7